泛素-蛋白酶体途径在烧伤脓毒症大鼠肝脏NF-κB活化中的作用研究

目的　研究泛素 蛋白酶体途径对烧伤脓毒症大鼠肝脏NF κB的活性和IκB α含量以及肝脏TNF α表达的影响。方法　采用 30 %TBSAⅢ度烫伤加内毒素攻击大鼠为模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 0只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 蛋白酶体抑制剂ALLN处理组、烧伤脓毒症 NF κB抑制剂PDTC处理组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法 (EMSA)分析肝脏NF κB活性 ,采用免疫印迹方法检测肝脏IκB α表达 ,采用酶联免疫吸附试验检测肝脏TNF α的变化。结果　NF κB于伤后 1h明显活化并达到高峰 (P <0 0 5 ) ,IκB α表达先减少后逐渐恢复 ,应用泛素系统抑制剂可以抑制IκB α在肝脏中的降解 ,而采用蛋白酶体抑制剂和NF κB抑制剂均可降低肝脏NF κB的活性和减少TNF α的释放。结论　表明烫伤脓毒症大鼠肝脏NF κB活性明显增强 ,而干预泛素 蛋白酶体途径可通过抑制IκB α降解实现对肝脏中NF κB活性的调控。     

NF-κB在烧伤脓毒症大鼠肝损伤中的作用

目的　研究NF κB在烧伤脓毒症大鼠急性肝损害中的作用。方法　采用 30 %Ⅲ度烫伤加内毒素攻击大鼠模型模拟临床烧伤脓毒症 ,6 3只Wistar大鼠随机分为正常对照组、烧伤脓毒症组、烧伤脓毒症 +NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)组、单纯PDTC处理组 ,采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)分析肝脏NF κB活性 ,免疫印迹 (Westernblotting)法检测肝脏IκB α表达 ,酶联免疫吸附试验检测肝脏TNF α含量的变化。结果　NF κB于伤后 1h明显活化并达到高峰 (P <0 0 5 ) ;IκB α表达先减少 (P <0 0 5 )后逐渐恢复 ;NF κB抑制剂PDTC可以降低NF κB的活性和减少TNF α的释放 ,同时明显降低血清ALT、AST含量。结论　抑制NF κB活性有助于减轻烧伤脓毒症时肝脏的急性损害。     

全身放射损伤对伤口早期局部组织核转录因子NF-κB活性的影响

炎症反应在创伤修复过程中最早发生 ,对启动整个修复过程至为重要。以往研究观察到 ,大剂量60 Ｃｏγ射线一次性照射后 ,伤口局部炎症细胞明显减少 ,中性粒细胞凋亡增加 ,巨噬细胞膜受体和ＴＧＦ β、ＰＤＧＦ等细胞因子分泌减少 ,成纤维细胞增殖受抑制 ,愈合过程显著延迟[1 3 ] ,提示大剂量电离辐射后 ,在修复过程的早期启动阶段即发生了障碍 ,但对于伤后这种修复启动延迟的分子机理尚缺乏深入研究。ＮＦ κＢ是调节多种即早基因的转录因子 ,对多种炎症因子如ＴＮＦ α、ＩＬ 1、ＩＬ 6等起重要调控作用 ,同时还调节与细胞增殖、运动和凋…     

NF-κB在放射性损伤中的表达改变及作用机制的研究进展

随着肿瘤发病率的升高,需要接受放射治疗的人数也越来越多;而且由于放射治疗技术的不断发展,患者的长期生存期也在不断延长。因此,在长期生存的患者中防止放射性损伤的发生就尤为重要。NF-κB在各种基因转录的过程中承担着重要作用,并与放射性损伤的发生有着密切关系。笔者就NF-κB的结构、激活、功能作一介绍,并对放射性脑损伤及放射性肺损伤中NF-κB的表达变化、调节机制,以及NF-κB抑制剂的研究进展作一综述。     

细胞间粘附分子—1，肿瘤坏死因子—α在胃粘膜损伤中的作用

胃粘膜是最易受损伤和修复能力最强的组织之一。尽管在生理状态下 ,其防御和修复能力足以抵抗各种内源性和外源性损伤而维持其结构和功能的完整性 ,但在许多病理情况下 ,胃粘膜往往会发生浅表糜烂 ,甚至严重溃疡。关于胃粘膜损伤的机制尚未完全阐明 ,作者综述细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1)、肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)在胃粘膜损伤机制中的作用和研究进展。1　ＩＣＡＭ 1的生物学特性细胞粘附分子是一类能介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质相互粘附的糖蛋白。细胞粘附分子按其结构特点主要分为 5个家族 ,其中与胃粘膜损伤关系密切的粘附…     

肝脏缺血再灌注合并内毒素血症损伤中NF-κB的作用

目的 :探讨NF -κB在肝脏缺血再灌注并内毒素血症 (HIRE)损伤中的作用。方法 :Wister大鼠随机分为 :正常对照组 ;HIRE组 ;PDTC保护组 (HIRE +PDTC)。HIRE组肝左叶及中叶之入肝血流阻断 6 0min后再灌注 ,同时静脉注射LPS2 .5mg·kg-1;HIRE +PDTC组先静脉注射PDTC12 0 (mg·kg-1)后立即致伤 ;正常对照组仅显露肝脏左叶及中叶之肝动脉和门静脉 ,不阻断。分别采用EMSA法及赖氏法检测再灌注后 1,3,6 ,12hNF -κB活性及血浆中ALT含量。结果 :损伤后NF -κB结合活性明显升高 ,并于再灌注后 3h达到高峰 ,同时血浆中ALT含量亦明显升高 ,PDTC保护组NF -κB活性减弱 ,ALT水平降低。结论 :后NF -κB的结合活性与HIRE时肝脏损伤程度有直接关系。     

内毒素诱导肺泡巨噬细胞NF-κB信号通路的变化

目的　观察内毒素(LPS)体外刺激诱发肺泡巨噬细胞(PAM)中NF κB信号通路的变化 ,探讨急性肺损伤 (ALI)的分子病理机制。方法　用原位杂交、EMSA及ELISA方法 ,检测LPS刺激后 0、1/ 4、1/ 2、1、2、4h各时相点PAM中Iκ B激酶 (IKK β)mRNA表达、NF κB核移位以及IκB α降解和TNF α分泌的变化。结果　IKK βmRNA表达在LPS刺激后 1/ 4h开始升高 ,1/ 2h达高峰 ,1h后逐渐下降 ;IκB α水平恰好与IKK βmRNA对应点变化幅度相反 ;NF κB的活性于 1/ 4h开始升高 ,1h达峰值 ,2h后逐渐下降 ;TNF α的含量 1/ 2h开始升高 ,1h达峰值 ,2～ 4h逐渐恢复至刺激前水平。结论　IKK β激活 /IκB α降解 /NF κB活化 /TNF α合成的转导通路在LPS介导ALI的病理机制中发挥了重要作用     

氯胺酮对体外循环诱导外周血单核细胞NF-κB及TNF-α表达的影响

目的：观察氯胺酮对体外循环（CPB）诱导外周血单核细胞（PBMCs）中核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子（TNF-α）表达的影响。方法：选择先天性室间隔缺损心脏病需行体外循环心脏直视手术患儿20例，随机双盲分为对照组和氯胺酮组，每组10例。氯胺酮组在CPB开始时立即给予1mg／kg氯胺酮。采用Western blot和RT-PCR测定CPB前（T0）、CPB 30min（T1）、停CPB后1h（T2）、停CPB后4h（T3），PBMCs中NF-κB P65及TNF-α mRNA的表达。结果：两组PBMCs NF-κB P65和TNF-α mRNA表达水平在T2、T3时均有不同程度升高，但在T2、T3时氯胺酮组的表达水平显著低于对照组。结论：氯胺酮对CPB诱导的PBMCs NF-κB和TNF-α表达具有一定的抑制作用。     

NF-κB配体受体激动因子在脊髓损伤后骨髓间充质干细胞移植中的作用

目的探讨NF-κB配体受体激动因子(receptor activator of NF-kappa B ligand,RANKL)在脊髓损伤后人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)移植中对神经功能恢复的影响。方法Wistar大鼠60只,体重250～350 g,雌雄不限,随机分为3组:(1)hBMSCs组,脊髓半横切后行hBMSCs移植;(2)RANKL hBMSCs组,脊髓半横切后hBMSCs和RANKL协同移植;(3)PBS组,脊髓半横切,移植物以PBS代替。移植后1,7,14,21,28 d采用行为学指标观察大鼠神经功能恢复情况,应用免疫组化和免疫荧光技术检测移植的BrdU标记hBMSCs在宿主脊髓内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达情况。结果大鼠脊髓半横切损伤后,hBMSCs组和RANKL hBMSCs组均较PBS对照组有明显的神经功能恢复;而移植7,14 d时,RANKL hBMSCs组动物较hBMSCs组神经功能恢复明显。RANKL hBMSCs组中hBMSCs-Ne- uN和hBMSCs-GFAP双标阳性率高于hBMSCs组。结论RANKL和hBMSCs协同移植可提高脊髓损伤后神经病学预后,提高hBMSCs在宿主体内向神经细胞的分化。     

内毒素对心肌组织核因子-κB活化的影响及其意义

目的 通过观察内毒素(LPS)攻击大鼠心肌组织核因子-κB(NF-κB)的活化情况,探讨心肌损伤的可能信号机制.方法 大鼠腹腔注射5mg/kg LPS制作脓毒症模型,采用凝胶阻滞迁移分析法(EMSA)检测心肌组织NF-κB活化情况,RT-PCR法检测TNF-α基因表达情况.结果 LPS攻击后1h,NF-κB活化及TNF-α基因表达开始升高,2h达高峰,6h后逐渐下降.相关分析表明,心肌组织NF-κB活化与TNF-α基因表达呈显著正相关(r=0.992 2,P＜0.05).结论 LPS可增强心肌组织NF-κB的活化并诱导TNF-α基因表达.NF-κB活化导致的TNF-α合成增加在LPS介导心肌损害的分子机制中可能具有重要作用.     

NF-κB在脑损伤后脑损害和脑保护中的双重作用

核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在炎性及免疫反应中起着重要的作用,创伤性脑损伤后NF-κ表达已在实验动物及临床观察中得到肯定,但对伤后NF-κB的作用仍存在不同的争议.NF-κB活化的机制目前仍不十分清楚.笔者就近年来创伤性脑损伤后NF-κB的研究进行如下综述,着重阐明脑损伤后NF-κB活化的变化机制及其双重作用性.     

药物性胃粘膜损伤大鼠ICAM—1及TNF—α表达的研究

为了争胃粘膜损伤时胃粘膜细胞有无细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及肿瘤坏死因子（TNF-α）的表达,采用SD大鼠灌服阿司匹林的方法建立胃粘膜损伤模型,用免疫组化法动态观察用阿司匹林致胃粘膜损伤后大鼠胃粘膜ICAM-1、TNF-α的表达。结果显示,ICAM-1在用阿司匹林后30min时开始表达,1h达高峰,高峰持续到6h,12h公有少量表达;TNF-α在用阿司匹林后15min开始表达,3h达高峰,持续到6h,12h开始下降,24h表达仍较明显,对照组及用药前胃粘膜细胞仅有少量ICAM-1及TNF-α表达,提示ICAM-1及TNF-α的表达在胃粘膜损伤的发病机制中有重要意义。     

肝脏移植再灌注损伤早期NF-κB活性的影响及意义

目的观察肝脏移植后再灌注早期血液核转录因子-κB(NF-κB)活性、TNF-α、肝酶学指标的关系,探讨再灌注早期再灌注损伤的机制。方法对20例肝硬化晚期病人(实验组)接受肝移植术前1h,供肝恢复血供后1、2、4及6h抽取患者外周血进行肝酶学检查,用Westernblot技术检测外周血中NF-κBP65表达,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定外周血中TNF-α表达水平,同时与10例健康成人(对照组)外周血肝酶学指标、NF-кBP65和TNF-α水平对比。结果肝移植术后早期外周血肝酶学指标在4h达到高峰,4h后呈现下降趋势,NF-κBP65和TNF-α的表达水平在2h达到峰值,且均高于移植术前和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NF-кBP65及TNF-α在肝移植术后早期高表达,同时伴有肝脏损伤酶学指标反应性上调,表示肝移植术后肝脏炎症通路活跃,可能和缺血后再灌注有关。     

核因子-κB活化对肿瘤坏死因子表达的调控

为观察脂多糖（ＬＰＳ）处理单核细胞（Ｍ）后对核因子－κＢ抑制蛋白（ＩκＢα）降解,ＮＦ－κＢ活化及α肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）表达的影响,分离、培养Ｍ,分为正常对照组和ＬＰＳ刺激组（ＬＰＳ１０μｇ／ｍ ｌ）;分别在刺激前（０）、刺激后１５、３０ｍ ｉｎ 和１、２、４ｈ,留取Ｍ 和细胞培养上清。检测Ｍ ＩκＢ水平和核提取物中ＮＦ－κＢ的活性和细胞培养上清中ＴＮＦα的含量。结果发现,ＬＰＳ刺激组ＩκＢ水平１５ｍ ｉｎ 开始降低,３０ｍ ｉｎ 降到最低值;ＮＦ－κＢ活性在３０ｍ ｉｎ～４ｈ 显著增高,峰值在刺激后１～２ｈ;ＬＰＳ刺激后１～２ｈ,ＴＮＦα显著升高（Ｐ＜ ０．０１）,峰值在刺激后１ｈ。ＮＦ－κＢ活性与ＴＮＦα含量在刺激后１ｈ 峰值呈显著正相关（ｒ＝ ０．９０１,Ｐ＜ ０．０１）。结果提示, ＬＰＳ可诱导Ｍ 的ＩκＢ降解和ＮＦ－κＢ激活。ＮＦ－κＢ活化后可导致ＴＮＦα的基因转录和表达增加。     

核因子—κB在内毒素刺激大鼠肺泡巨噬细胞中的动态变化及其在肿瘤坏死因子—α表达中的作用

目的 观察内毒素(LPS)刺激对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages，AM)中核因子—κB(NF—κB)活性的影响，探讨NF—κB在LPS刺激大鼠AM表达肿瘤坏死因子—α(刀NF—α)中的作用。方法体外观察LPS刺激大鼠AM中NF—κB活性的动态变化，应用圈套策略观察NF—κB在LPS刺激大鼠AM表达刀NF—α中的作用。结果LPS刺激可使大鼠AM内NF—κB明显活化，并与LPS剂量正相关；抗体超迁移率实验结果显示p50、p65参与了NF—κB的活化；NF—κB的圈套硫代寡核苷酸(S—ODN)能明显抑制LPS刺激大鼠AM表达TNF—α，但不能完全阻断LPS诱导的TNF—α表达。结论 NF—κB(p50／p65)在LPS介导的炎症反应中发挥重要作用，LPS刺激大鼠AM表达TNF—α受NF—κB调控，但其他核转录因子可能也在TNF—α的表达中发挥重要作用。     

尼莫同对大鼠创伤性脑损伤后脑组织NF-κB表达和活化的影响

目的 观察尼莫同对大鼠创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后NF-κB表达和活化的影响. 方法制作SD大鼠落体撞击脑损伤模型,分别给予地塞米松和尼莫同干预,检测脑组织NF-κB P65和IκBα的表达. 结果 TBI后脑组织NF-κB P65的表达明显增加,伤后24 h最低,持续到96 h仍有明显表达;IκBα表达明显减弱,伤后24 h达到低峰.尼莫同与地塞米松可以显著降低TBI后NF-κB P65的表达和增加IκBα的表达(P<0.01),尼莫同作用优于地塞米松(P<0.05). 结论尼莫同可以抑制TBI后NF-κB表达和活化,从而调节脑损伤后的炎症反应.     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM-1和NF-κB表达的影响

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠颅脑损伤后细胞问黏附因子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其脑保护机制.方法 90只Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)、颅脑创伤组(n=42)及颅脑创伤NAC干预组(n=42).采用自由落体法建立大鼠颅脑创伤模型,应用免疫组织化学法检测NF-κB和ICAM-1表达的变化.结果 与假手术组相比,脑损伤组NF-κB和ICAM-1表达水平明显升高,NAC可降低NF-κB和ICAM-1表达,减轻炎症反应.结论 NAC可能通过抑制NF-κB和ICAM-1的表达,减轻炎症反应,发挥脑保护作用.     

核因子-κB在兔急性肺损伤中的作用

 目的 探讨核因子-κB(NF-κB)在失血性休克复合内毒素打击致急性肺损伤(ALI)兔发病中的作用.方法 失血性休克复合内毒素打击法复制ALI兔模型.制模成功后1 h、4 h、8 h、24 h、48 h检测动脉血氧分压(PaO2)、肺干重/湿重比值(D/W),双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,免疫组织化学的方法结合图像分析观察肺组织内NF-κB的变化情况,行肺组织病理学检查.结果 与对照组相比,失血性休克复合内毒素打击使动物PaO2及D/W值进行性下降,于48 h降至最低(P<0.01);血清TNF-α含量及肺组织NF-κBp65的含量升高,并均于4 h达到最高峰(P<0.01);相关分析显示1 h、4 h、8 h、24 h、48 h NF-κB活性与TNF-α含量之间的变化存在显著相关性(P<0.01).肺组织病理显示肺泡壁增厚、炎性细胞浸润、局灶出血、部分肺泡萎陷.结论 NF-κB的活化,介导TNF-α等炎症介质的大量表达,在失血性休克复合内毒素打击导致ALI的病理机制中发挥重要作用.     

肝缺血再灌注损伤中重组人促红细胞生成素对核因子-κB活化的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对核因子(NF)-κB活化的影响在肝缺血再灌注(I/R)损伤中的作用。方法制作大鼠部分肝I/R模型,分为:假手术组(A组),肝缺血90 min组(B组),肝缺血90 min,再灌注120 min组(C组),肝缺血90 min,再灌注120min,加重组人促红细胞生成素(建模前1、3 d及5 d给予rhEPO100 U/kg)组(D组)。光镜观察肝脏组织学改变,测定血清肝酶学水平,用Western blot技术检测肝组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65表达,用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果A组肝细胞索排列有序,肝细胞形态正常;B组肝小叶结构紊乱,肝血窦和中央静脉有轻度淤血,内皮细胞和肝细胞水肿变性;C组肝细胞坏死较明显,D组上述改变明显减轻。和C组相比,D组血清肝酶学指标、NF-κB p65和TNF-α的表达水平明显下降,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 重组人促红细胞生成素能抑制肝脏NF-κB的活化,对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

PDTC对创伤复合内毒素所致大鼠ALI的保护作用

为观察（PDTC）对创伤复合内毒素所致大鼠急性肺损伤的保护作用并探讨其作用机制，用多功能小型生物撞击机对大鼠右上有胸壁撞击并经尾静脉注射内毒素5mg/kg进行致伤，致伤前经尾静脉注射PDTC120mg/kg，观察伤后48h死亡率、肺组织MPO、NF－κB活性变化，同时检测TNFα、IL-8 mRNA的表达及蛋白含量。结果发现，PDTC预处理能够显著降低复合损伤48h大鼠的死亡率，其MPO、NF－κB活性与TNFα、IL-8 mRNA表达被显著抑制。说明PDTC能够通过抑制NF－κB的活化，减少致炎细胞因子基因表达与合成释放，减轻炎细胞浸润，从而对复合损伤大鼠起到保护的作用。