硫化氢对肠缺血再灌注损伤大鼠回肠上皮细胞凋亡的影响

 目的: 探讨硫化氢(H₂S)对大鼠缺血再灌注(I/R)损伤回肠上皮细胞线粒体形态和功能及凋亡的影响。方法: 24只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组和I/R+NaHS组。建立大鼠肠I/R损伤模型。在灌注前10 min时经I/R+NaHS组大鼠尾静脉注入100 μmol/kg NaHS后按1 mg·kg^-1·h^-1输注直到再灌注2 h,实验结束后取回肠标本测定回肠上皮细胞形态和呼吸功能指标。敏感硫电极法测定血浆H₂S含量。RT-PCR检测回肠组织Bcl-2和Bax mRNA表达,Western blot 检测总caspase-3、活化型caspase-3、细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果: I/R组线粒体的面积、体积密度、最大直径、最小直径、等效直径以及活化型caspase-3、Cyt C和Bax表达均显著大于I/R+NaHS和sham组(P<0.01)。I/R组线粒体数量、周长、比表面、面积密度和粒子数密度、血浆H₂S、R₃、R₄、RCR、P/O和Bcl-2表达均显著小于I/R+NaHS和sham组(P<0.01)。结论: 硫化氢下调活化型caspase-3、Cyt C和Bax的蛋白水平,上调Bcl-2表达,对I/R损伤大鼠回肠上皮细胞线粒体形态和功能均有保护作用。     

肠缺血后处理抑制大鼠肠缺血再灌注所致的急性肺损伤

目的： 研究肠缺血后处理对大鼠肠缺血再灌注（I/R）所致急性肺损伤的影响及机制。 方法： 40只SD大鼠随机分为5组（n=8）：假手术组（对照组）,仅分离而不阻断肠系膜上动脉（SMA）;肠I/R损伤组,阻断SMA 1 h后再灌注1 h;缺血预处理（IPC）组,在长时间阻断SMA前预先阻断SMA 10 min然后开放 10 min;缺血后处理（IPo）组,在阻断SMA 1 h后连续进行3个循环的开放 SMA 30 s /阻断SMA 30 s (总时间为3 min),然后开放1 h;延迟后处理（delay）组,在再灌注3 min （IPo的总时间）后行3个循环的 30 s 缺血/ 30 s再灌注的缺血后处理,余同IPo组。监测平均动脉压（MAP）,于再灌注1 h 后取肺组织光镜下观察肺形态学的变化,检测血清及支气管肺泡灌洗液蛋白含量并计算肺通透性指数,称肺湿重及干重并计算肺含水率,检测肺组织丙二醛（MDA）的含量,超氧化物歧化酶（SOD）及髓过氧化物酶（MPO）的活性,检测血清TNF-α及IL-6的浓度。结果： 缺血后处理与预处理都能显著改善肺损伤,显著降低肺通透性指数及肺含水率,同时降低血浆TNF-α与IL-6的浓度、肺组织MDA含量及MPO活性,升高SOD活性。后处理被延迟3min后,其肺保护作用消失,且不能显著改变上述指标。 结论： 缺血后处理与预处理都具有抗肠I/R后肺损伤的作用,可能与其清除氧自由基、抑制中性粒细胞的肺内聚集及炎症细胞因子的释放有关;而且,再灌注早期后处理对肺的保护作用最关键。     

肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺纤维化

肺泡Ⅱ型上皮细胞（ＡＴⅡ）是肺内重要结构细胞，与肺纤维化的发生、发展有联系。肺纤维化过程既有ＡＴⅡ的增生、肥大，亦可见其受损、破坏，ＡＴⅡ参与肺纤维化的机理主要有：（１）ＡＴⅡ与肺成纤维细胞及ＥＣＭ的相互作用；（２）ＡＴⅡ受损导致肺泡结构改变；（３）调节炎症反应；（４）表达生长因子。     

亚甲蓝可用于防治肠缺血再灌注后肺损伤

目的：研究氧自由基抑制剂亚甲蓝是否能预防组织缺血再灌注性肺损伤。材料与方法：腹腔注射氯胺酮（６０ｍｇ／ｋｇ）、安定（２．５ｍｇ／ｋｇ）将１２０只成年韦斯达（Ｗｉｓｔａｒ）鼠麻醉后进腹并均分为甲、乙、丙三组。夹闭肠系膜上动脉１ｈ，将甲、乙两组制成缺血再灌注模型后分别注入１％亚甲蓝２ｍｌ（５０ｍｇ／ｋｇ）、灭菌生理盐水２ｍｌ。丙组分丙甲、丙乙两亚组，除不作动脉夹闭外，余操作分别同甲、乙。再灌注４ｈ后将动物处死，以２５ｃｍＨ２Ｏ压向肺内注入１０％甲醛固定后切片，ＨＥ染色，镜检评估其病理损伤程度（由轻至…     

牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤时细胞凋亡的影响

目的:从细胞凋亡的角度探讨肢体缺血再灌注(LIR)后急性肺损伤(ALI)的发病机制及牛磺酸的影响。方法:复制大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤动物模型,采用TUNEL法、电泳法、半定量逆转录聚合酶链反应(SqRT-PCR)及免疫组织化学等技术观察LIR后肺损伤发生过程中,肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡变化以及Fas/FasL系统蛋白质和mRNA表达的改变。结果:大鼠LIR后,肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加;肺组织Fas/FasLmRNA和蛋白质表达明显上调,DNA断链率、组织钙含量和活性氧(ROS)升高,且与肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡的增加相一致。结论:肺泡上皮及血管内皮细胞凋亡以及Fas/FasL系统表达明显上调可能参与LIR后ALI的发生;牛磺酸可减少肺组织细胞凋亡,但并非通过影响Fas/FasL基因表达而实现其保护效应。     

大鼠肠缺血再灌注早期肝细胞凋亡及其调控

大鼠肠缺血再灌注早期肝细胞凋亡及其调控第一军医大学病理生理教研室（广州５１０５１５）程尉新金丽娟目的：探讨大鼠肠缺血再灌注后肝细胞凋亡发生规律及可能机理。方法：成年清洁级Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，夹闭肠系膜上动脉造成肠缺血，在缺血各时间点及缺血１２０ｍ...     

细胞凋亡与缺血再灌注损伤

细胞凋亡是有核细胞在一定条件下通过启动其自身内部机制，主要是通过内源性ＤＮＡ内切酶的激活而发生的自然死亡过程，它不仅在多细胞动物的发育和稳态维持中居主要地位，而且其受抑或亢进与许多疾病的发生关系密切。脑、肾和心脏缺血再灌流损伤中可使细胞发生凋亡     

小鼠肠缺血再灌注时肝组织一氧化氮的变化

目的：观察小鼠肠缺血再灌注时肝组织一氧化氮含量的变化,探讨一氧化氮在肠缺血再灌注时的作用。方法：动物分对照组,缺血60 min、再灌注30 min、再灌注60 min组。检测肝组织匀浆一氧化氮代谢产物NO₂^-的变化。结果：肝组织匀浆一氧化氮水平在缺血60 min时明显高于对照组,再灌注30min、再灌注60 min组与对照组相比无显著差异。结论：小鼠肠缺血时肝组织一氧化氮水平升高,提示一氧化氮可能参与小鼠肠缺血再灌注时肝组织损伤过程,对肠缺血再灌注损伤时的肝脏可能有保护作用。     

肝脏缺血再灌注损伤与细胞凋亡

Hepatic ischemia/reperfusion injury (HIRI) exists in lots of process of clinical pathology and operation. Apoptosis is an active process controlled by some gene and factors such as Fas/FasL, Caspases and Bcl -2 families. More and more studies suggest that HIRI is associated with apoptosis. This article summarized the mechanisms and gene modulation of apoptosis during HIRI and the significance of suppressing auoutosis in preventing HIRI.     

细胞凋亡与肝移植缺血再灌注损伤

背景：肝脏缺血再灌注损伤是影响肝脏移植效果的重要因素,细胞凋亡是移植肝缺血再灌注损伤的重要机制之一。 目的：就近年来细胞凋亡与移植肝缺血再灌注损伤的研究做一综述,为抗细胞凋亡在减轻器官缺血再灌注损伤的临床应用提供参考依据。 方法：由第一作者检索1990/2010 PubMed数据库及中国期刊全文数据库有关细胞凋亡及器官移植缺血再灌注损伤的关系的文献,检索词为“apoptosis,organ transplantation,ischemia-reperfusion injury”。排除重复性研究。计算机初检得到339篇文献,最终纳入39篇文献进行下一步分析。 结果与结论：文章从肝脏移植缺血再灌注损伤中的细胞凋亡,移植肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡发生的机制,移植肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡的基因表达变化,抗凋亡治疗与防治肝移植缺血再灌注损伤几方面进行了叙述。细胞凋亡与移植肝缺血再灌注损伤有着密切的关系。而抑制细胞凋亡可以有效的减轻移植肝的缺血再灌注损伤,对提高移植物的存活率有着重要的意义。     

肺缺血再灌注时细胞凋亡及基因调控研究进展

缺血再灌注（Ischaemia—reperfusion，IR）导致的肺损伤是心肺手术，尤其是肺移植术中的一大临床难题，而随着心肺旁路的应用，术后肺功能障碍更是常见，甚至于患者术后由此而导致生命危险。早期研究多关注于肺组织细胞坏死所造成的损伤，直至最近肺缺血再灌注损伤（LungIschaemia—reperfusion Injury，LIRI）引起的细胞凋亡机制才逐渐被人们揭开了神秘的面纱。凋亡过程是多基因严格控制的过程，如Bcl一2家族、Caspase家族、癌基因如C—myc、抑癌基因P53等。     

四逆汤对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞超微结构的影响

目的: 观察四逆汤(SND)对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞超微结构的影响。方法: 32只SD大鼠随机分为4组(n=8):对照组(仅作假手术处理)、模型组(阻断肠系膜上动脉1 h后再灌注3 h)、SND1组(SND 0.6 g/200 g大鼠灌胃3 d后手术)及SND 2组(SND 1.2 g/200 g大鼠灌胃3 d后手术)。实验时取回肠末端组织行电镜检查,并测量上皮细胞线粒体二维平面形态计量学参数和三维平面形态计量学参数。结果: 电镜下可见对照组上皮细胞柱状排列紧密,微绒毛细长、整齐、无水肿,线粒体丰富,无肿胀;模型组细胞间隙增宽,可见大量凋亡细胞,微绒毛脱落明显,线粒体严重肿胀,嵴断裂,内质网扩张。SND1组与SND2组均可见微绒毛及上皮细胞排列基本整齐,有少量上皮细胞脱落,线粒体轻度肿胀,嵴清。线粒体体视学参数提示模型组上皮细胞单位胞浆内线粒体少,肿胀;而SND1及SND2组线粒体丰富,肿胀轻微。电镜及体视学参数均提示SND对小肠上皮细胞超微结构的影响无明显量效关系。结论: 四逆汤预处理对大鼠肠缺血再灌注后小肠上皮细胞有保护作用。     

左心室缺血再灌注肺损伤模型的建立

目的: 探讨建立左心室缺血再灌注肺损伤模型的方法。方法: 40只家兔随机分为模型组和对照组,模型组建立左心室缺血再灌注肺损伤模型,对照组不做模型。对比2组动物心电图、膈肌放电曲线、心肌和肺组织HE染色组织病理情况、肺组织透射电镜超微结构变化情况。结果: 模型组心肌出现缺血再灌注损伤表现,肺组织出现急性损伤表现,二者之间的变化呈相关性。结论: 此种左心室缺血再灌注肺损伤模型是一种可行可靠的动物模型。     

具有CCCH锌指结构域的蛋白12D在大鼠肠缺血再灌注肺损伤时表达下调

目的通过建立大鼠肠缺血再灌注肺损伤(IIRI)模型,观察急性肺损伤(ALI)时大鼠肺组织中具有CCCH锌指结构域的蛋白12D(Zc3h12d)表达水平的变化。方法健康成年的雄性SD大鼠40只,随机分成对照组(contro1)、缺血再灌注30 min组(IR30 min)、缺血再灌注60 min组(IR60 min)和缺血再灌注120 min组(IR120 min),每组10只。对照组(contro1)行假手术,4个缺血再灌注组缺血60 min后分别再灌注30、60、120 min,在相应时间点处死大鼠,获取血清及肺组织。术后各样本行肺湿干质量比(W/D)检测、HE染色观察肺组织病变,ELISA检测血清及肺匀浆中TNF-α及IL-1β含量,实时定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织Zc3h12d mRNA的表达,免疫组化、Western blot法检测肺组织Zc3h12d蛋白的表达。结果与对照组比较,再灌注损伤组病理切片可见肺泡壁增宽,肺泡腔内出血,肺湿干质量比值(W/D)显著增大(P0.05),qRT-PCR、免疫组化和Western blot法显示再灌注损伤组肺组织Zc3h12d的mRNA和蛋白表达水平在再灌注120 min时明显降低(P0.05)。结论小肠缺血再灌注肺损伤时肺组织中Zc3h12d基因表达下调,提示在肺损伤时Zc3h12d蛋白可能起保护作用。     

肠缺血—再灌流损伤时自由基对肺损伤作用的探讨

动态观测了家兔肠缺血—再灌流时入肺血和出肺血超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)以及脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量。正常时出肺血SOD的含量高于入肺血,P<0.05;入肺血的MDA含量高于出肺血,P<0.05。再灌流初期入肺血SOD含量增加,而出肺血SOD变化不明显。后期入肺血SOD含量高于出肺血,P<0.05;肺组织的SOD含量比正常时的减少,P<0.05;入肺血及出肺血的MDA含量均明显升高。结果提示正常时肺组织的SOD活性较高对清除氧自由基有重要的生理意义;肠缺血—再灌流损伤初期肺对SOD相关的代谢具有一定的调整作用,后期自由基的增多可致肺组织的损伤。     

肢体缺血再灌注致肺损伤时出入肺血CO的变化

目的 :继ＮＯ之后 ,另一种可弥散性气体分子ＣＯ ,逐渐引起人们的重视。已发现ＣＯ与ＮＯ相似 ,在机体多种生理和病理状态中发挥信使作用。体内的ＣＯ由血红素氧合酶 (ＨＯ)催化血红素分解产生后进入血液 ,与血红蛋白 (Ｈｂ)结合形成碳氧血红蛋白 (ＣＯＨｂ)并由肺排出。研究证明 ,非特异性炎症刺激及氧化性损伤可诱导肺组织诱导型血红素氧化酶 (ＨＯ - 1 )的表达。但ＨＯ/ＨＯ - 1及其产物ＣＯ在再灌注性肺损伤中的变化及意义尚不明了。方法 :本实验采用夹闭ＳＤ大鼠腹主动脉末段造成双后肢缺血及再灌注性肺损伤模型 ,观察了假手术组 ,缺血…     

外周血白细胞凋亡障碍与大鼠肠缺血-再灌注损伤的关系

目的： 探讨外周血白细胞和中性粒细胞凋亡障碍在肠缺血-再灌注（IR）损伤中的作用。方法：20只雄性SD大鼠随机分为肠IR组和假手术对照组,每组10只。肠IR组夹闭肠系膜上动脉（SMA）30 min后再灌注60 min;对照组只分离而不夹闭SMA。观察肠黏膜形态学变化;检测肠黏膜上皮细胞凋亡指数（TUNEL法）和caspase-3活性;Annexin-V/PI法检测外周血白细胞和中性粒细胞（PMN）凋亡比例;检测夹闭前、夹闭30 min、再灌注30 min、再灌注60 min外周血白细胞数量。结果：(1)光镜下,对照组未见肠黏膜损伤,而IR组肠黏膜损伤严重;（2）IR组肠黏膜上皮细胞凋亡指数和caspase-3活性比对照组明显增高（P<0.05）;（3）IR组外周血白细胞和PMN凋亡比例比对照组明显降低（P<0.05）;IR组外周血白细胞数量在缺血30min时明显增高,再灌注后进一步增高,与缺血前和对照组比都有显著差异（P<0.05）。(4)肠黏膜caspase-3活性与外周血白细胞凋亡比例有显著的负相关（r=-0.764, P<0.01）,与PMN凋亡比例也有显著的负相关（r=-0.845,P<0.01）;肠黏膜上皮细胞凋亡指数与PMN凋亡比例也有显著的负相关（r=-0.638, P<0.05）。结论：外周血白细胞数量增加及凋亡障碍与缺血-再灌注引起的肠黏膜细胞损伤密切相关。     

肠上皮细胞凋亡与缺血／再灌注损伤

本文依椐细胞凋亡的特点 ,分别从正常肠上皮细胞凋亡的规律及意义 ,肠道冷、热缺血再灌注损伤时肠上皮细胞凋亡的规律及其机制 ,综述了肠上皮细胞凋亡与缺血再灌注损伤方面的研究进展 ,并提出了存在的问题。     

肢体缺血再灌注后的肺损伤和细胞凋亡及NO的效应

目的：探讨肢体缺血再灌注（LIR）后肺的损伤性变化以及细胞凋亡在肺损伤发生中的作用；探讨一氧化氮（NO）对LIR后肺组织细胞凋亡的影响。 方法：采用本室常规方法复制大鼠LIR模型，给予外源性一氧化氮合酶底物（L-Arg）和一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)处理，采用原位末端标记法（TUNEL）检测缺血4 h再灌注4 h时各组动物肺组织细胞凋亡情况；采用放免法检测凋亡相关细胞因子TNF-α在肺组织的表达，结合计算机分析系统对结果进行定量分析；采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、TNF-α蛋白表达情况，结合自动图像分析系统对其结果进行定量分析；在光镜下观察肺组织的形态学改变。结果：大鼠LIR后4 h，肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺血管内皮细胞呈凋亡改变,肺组织TNF-α、caspase-3、Bax明显上调,Bcl-2表达下调。L-Arg处理组，凋亡细胞数明显减少，肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显减弱，Bcl-2表达明显增强；L-NAME处理组动物肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显增强，Bcl-2表达明显减弱。结论：细胞凋亡参与了大鼠LIR后急性肺损伤的发生，且与TNF-α有关；NO可通过减弱细胞凋亡相关因子TNF-α的表达，减轻LIR后肺组织的细胞凋亡。