五味子醇提液对半乳糖致衰小鼠脑神经细胞保护作用的研究

目的:探讨内源性自由基(FR)对衰老小鼠脑神经细胞凋亡、DNA损伤和bcl-2基因表达的影响;五味子醇提液对衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制.方法:以D-半乳糖致衰小鼠为研究对象,观察五味子及其醇提液对小鼠脑组织SOD(超氧化物歧化酶)活性、MDA(丙二醛)含量;神经细胞凋亡及DNA损伤,凋亡相关基因bcl-2的表达情况.结果:衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加(P<0.01),SOD活性及bcl-2基因表达明显降低(P<0.05,P<0.01).灌服五味子醇提取液可提高SOD活性,降低MDA含量,增强神经元DNA损伤的修复能力,减少凋亡细胞数,增强bcl-2基因表达.且五味子醇提液疗效优于水溶液.结论:五味子醇提液对半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用.     

远志皂苷调控RAGE和LRP1的抗Aβ诱导的氧化应激作用研究

目的 探讨远志皂苷(TEN)对转运蛋白RAGE和LRP1的调控作用,以及对Aβ诱导的PC12细胞氧化应激的保护作用.方法 建立Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型,MTT法测定细胞活力,Western blot 检测RAGE和LRP1蛋白表达水平变化,分光光度法检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性变化.结果 TEN能明显下调RAGE的表达,上调LRP1的表达,并且抑制Aβ25-35诱导引起的ROS、MDA浓度增加,提升Aβ25-35诱导引起的SOD、GSH-Px活性降低.结论 TEN可能通过调控Aβ转运清除蛋白RAGE和LRP1的表达,抑制Aβ诱导的氧化应激效应,发挥抗Aβ神经毒性和神经保护作用.     

白桦脂醇对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的影响

目的探讨白桦脂醇对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的影响。方法以40μmol/L Aβ_(25-35)作用于PC12细胞,实验随机分对照组、Aβ_(25-35)组、N-乙酰半胱氨酸组(NAC组)和白桦脂醇5、10、20μmol/L组,采用MTT法检测细胞的存活率,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡情况,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,LDH、MDA、SOD试剂盒分别检测LDH、MDA和SOD水平,比色法检测caspase3、caspase8、caspase9和Cyt c的酶活性,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl2、Bax、caspase3、caspase8、caspase9和Cyt c的活性和表达。结果与Aβ_(25-35)组比较,白桦脂醇和NAC均对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞可提高细胞存活率和SOD活性(P0. 01),并降低LDH释放率和凋亡率(P 0. 01),抑制caspase3、caspase8、caspase9和Cyt c酶活性(P 0. 01),同时下调Bax、caspase3、caspase8、caspase9和Cyt c表达水平(P0. 01),并上调Bcl2的活性和表达(P0. 01)。结论通过预防给予有效剂量的白桦脂醇能够抑制Aβ_(25-35)诱导产生的细胞凋亡,其机制可能与减少ROS生成从而降低氧化应激水平,继而抑制细胞凋亡途径有关。     

松蘑提取液对D-半乳糖致衰老小鼠功能的影响

目的 观察松蘑提取液对D-半乳糖致衰老小鼠功能的影响.方法 50只小鼠随机分成对照组、模型组和松蘑提取液低、中、高剂量组(100 mg/mL、150 mg/mL、200 mg/mL).采用D-半乳糖复制衰老模型,检测小鼠脏器指数,学习记忆功能,测定大脑皮层和海马组织SOD、GSH-Px活性及MDA含量.结果 模型组小鼠空间学习记忆功能下降,逃避潜伏期延长;皮层和海马组织SOD、GSH-PX活性降低,MDA含量增高.松蘑提取液治疗组能明显改善衰老小鼠的空间学习记忆能力,显著提高皮层和海马中SOD、GSH-PX活性,降低MDA水平,呈剂量依赖性.结论 松蘑提取液减轻了衰老小鼠的学习记忆障碍,其机制可能与其抗氧化作用有关.     

藁本内酯预处理对Aβ25-35诱导人脑神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞毒性的保护作用

目的探讨藁本内酯(Z-ligustilide,LIG)对β淀粉样蛋白(Aβ)25-35引起的人脑神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞毒性的保护作用。方法 0.1、1.0、2.5、5.0μg/mL LIG作用于SH-SY5Y细胞,24h后以50μmol/LAβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立阿尔茨海默病体外模型,MTT法检测细胞活性,Western blot法检测细胞中凋亡蛋白含量。结果经Aβ25-35处理后,细胞存活率下降,细胞内凋亡相关蛋白——Bax、cleaved caspase3、细胞色素C、caspase8表达上调,但Bcl-2蛋白表达下降(P均<0.05)。细胞经过LIG一定浓度预处理,细胞存活率提高,凋亡相关蛋白——Bax、cleaved caspase3、细胞色素C、caspase8蛋白表达下降,Bcl-2表达上升(P均<0.05)。结论 LIG具有对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞毒性的保护作用,其机制可能是抑制Aβ诱导的细胞凋亡。     

山茶花提取物对脑缺血再灌注小鼠学习记忆损伤的改善作用

目的 探讨山茶花提取物对脑缺血再灌注诱导小鼠学习记忆损伤的保护机制.方法 双侧颈总动脉结扎法建立重复前脑缺血再灌注模型.小鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物对照组(EGB,35 mg·kg-1,ip)和山茶花提取物治疗组(ECJ,50,15,5 mg·kg-1,ip).用水迷宫检测小鼠学习记忆能力;用紫外分光光度计检测脑组织SOD活性和MDA含量;用RT-PCR技术检测凋亡蛋白抑制剂XIAPmRNA在小鼠CA1区的表达.结果 前脑重复缺血再灌注使小鼠的学习记忆能力显著下降(P＜0.01),同时伴随脑内SOD活性降低和MDA含量升高以及XIAPmRNA表达显著下调 (P＜0.01).5 mg·kg-1,15 mg·kg-1和50 mg·kg-1山茶花提取物及银杏提取物能显著提高缺血小鼠学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01),并提高脑组织SOD活性,并抑制XIAPmRNA表达的下调(模型组XIAPmRNA表达下调63.2%,P＜0.01;低、中、高剂量的山茶花提取物和银杏叶提取物分别使XIAPmRNA表达上调55.7%、58.9%、61.2%和57.4% ,P＜0.05或P＜0.01).结论 山茶花提取物能减轻缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠学习记忆能力,该作用可能与其提高脑组织抗氧化和抗细胞凋亡能力有关.     

美金刚对β淀粉样蛋白25～35神经毒性的拮抗作用

目的 研究兴奋性氨基酸受体拮抗剂美金刚(MEM)对β淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)神经毒性的影响及其可能机制.方法 用系列浓度的Aβ25～35和(或)MEM作用PC12细胞,MTT检测其对细胞活力的影响;倒置显微镜下观察细胞形态的变化;Western blotting检测半胱氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)和磷酸化的蛋白激酶C(P-PKC)的表达;检测MEM对Aβ25～35诱导的一氧化氮(NO)产生和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果 Aβ25～35能剂量依赖性地降低PC12细胞活力,MEM可以部分拮抗Aβ25～35的此种作用,并在细胞形态学观察中得到证明.MEM可以拮抗Aβ25～35诱导的easpase 3的活化,也可以部分抑制Aβ25～35诱导的P-PKC表达降低.Aβ25～35使NO含量升高,SOD活性下降,预先加入MEM可使NO含量和SOD的活性得到部分恢复.结论 MEM可以拮抗Aβ25～35的神经毒性作用,这可能是其治疗中重度阿尔茨海默病的机制之一.     

Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型

目的:用β-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导PC-12细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC-12细胞,以不同浓度Aβ_(25-35)诱导并于不同时间收获细胞,应用MTT法观察细胞活力,Fura-2/AM荧光分析法检测细胞内游离Ca~(2+)浓度,Hoech-st33258及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果:Aβ_(25-35)作用于PC-12细胞后,细胞活力逐渐下降,并呈时间和剂量依赖性;同时细胞内Ca~(2+)浓度显著上升;不同浓度Aβ_(25-35)作用后,PC-12细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征,该时间比Ca~(2+)浓度上升约晚6-12 h。结论:Aβ_(25-35)诱导PC-12细胞活力下降、细胞内Ca~(2+)浓度上升及细胞凋亡,可作为较理想的阿尔茨海默病细胞模型。     

当归芍药散对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察当归芍药散(Danggui Shaoyao San，DSS)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PCI2细胞损伤的保护作用。方法：制备含DSS脑脊液(CSF-DSS)与含DSS人工脑脊液(ACSF-DSS)，应用Aβ25-35诱导PC12细胞损伤，MTT法测定细胞活力和比色法测定细胞内过氧化氢酶(CAT)活性。结果：10μmol／L Aβ25-35可显著降低PC12细胞活力及CAT活性：5mg／L ACSF-DSS和0．93g／kg-0．5％、1．86g／kg-1．0％CSF-DSS均可显著提高细胞活力与CAT活性。结论：DSS可能通过提高CAT活性而对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤起到保护作用。     

山茶花提取物对脑缺血再灌注小鼠学习记忆损伤的改善作用

目的探讨山茶花提取物对脑缺血再灌注诱导小鼠学习记忆损伤的保护机制。方法双侧颈总动脉结扎法建立重复前脑缺血再灌注模型。小鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶提取物对照组(EGB,35mg·kg-1,ip)和山茶花提取物治疗组(ECJ,50,15,5mg·kg-1,ip)。用水迷宫检测小鼠学习记忆能力;用紫外分光光度计检测脑组织SOD活性和MDA含量;用RT-PCR技术检测凋亡蛋白抑制剂XIAP mRNA在小鼠CA1区的表达。结果前脑重复缺血再灌注使小鼠的学习记忆能力显著下降(P<0.01),同时伴随脑内SOD活性降低和MDA含量升高以及XIAP mRNA表达显著下调(P<0.01)。5mg·kg-1,15mg·kg-1和50mg·kg-1山茶花提取物及银杏提取物能显著提高缺血小鼠学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),并提高脑组织SOD活性,并抑制XIAP mRNA表达的下调(模型组XIAP mRNA表达下调63.2%,P<0.01;低、中、高剂量的山茶花提取物和银杏叶提取物分别使XIAP mRNA表达上调55.7%、58.9%、61.2%和57.4%,P<0.05或P<0.01)。结论山茶花提取物能减轻缺血再灌注引起的脑损伤,改善小鼠学习记忆能力,该作用可能与其提高脑组织抗氧化和抗细胞凋亡能力有关。     

芹菜素改善D-半乳糖衰老模型小鼠衰老指征的研究

目的:观察芹菜素对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的影响.方法:建立D-半乳糖致小鼠衰老模型,以Y型电迷宫检测其学习记忆能力,分别采用黄嘌呤氧化酶法、TBA比色法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察小鼠服用不同剂量芹菜素后上述指标的变化.结果:芹菜素低、中、高剂量均可显著提高衰老模型小鼠的学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01),显著增加D-半乳糖所致衰老模型小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01).结论:芹菜素能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的多项体征.     

美金刚对β淀粉样蛋白25～35神经毒性的拮抗作用

目的研究兴奋性氨基酸受体拮抗剂美金刚(MEM)对β淀粉样蛋白25~35(Aβ25~35)神经毒性的影响及其可能机制。方法用系列浓度的Aβ25~35和(或)MEM作用PC12细胞,MTT检测其对细胞活力的影响;倒置显微镜下观察细胞形态的变化;Western blotting检测半胱氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)和磷酸化的蛋白激酶C(P-PKC)的表达;检测MEM对Aβ25~35诱导的一氧化氮(NO)产生和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果Aβ25~35能剂量依赖性地降低PC12细胞活力,MEM可以部分拮抗Aβ25~35的此种作用,并在细胞形态学观察中得到证明。MEM可以拮抗Aβ25~35诱导的caspase 3的活化,也可以部分抑制Aβ25~35诱导的P-PKC表达降低。Aβ25~35使NO含量升高,SOD活性下降,预先加入MEM可使NO含量和SOD的活性得到部分恢复。结论MEM可以拮抗Aβ25~35的神经毒性作用,这可能是其治疗中重度阿尔茨海默病的机制之一。     

K252a预处理对Aβ25～35诱导小鼠学习记忆障碍的保护作用

目的 探讨混合性的谱系激酶抑制剂K252a预处理对β淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)诱导的小鼠学习记忆障碍的保护作用及其可能机制.方法 56只小鼠平均分4组:K252a预处理组小鼠侧脑室内先后分别注入K252a和凝聚态Aβ25～35 4.5 μL;对照组全程注射生理盐水;模型组先后分别注射生理盐水和凝聚态Aβ25～35;DMSO预处理组先后分别注射DMSO和凝聚态Aβ25～35给药结束11 d后对各组小鼠进行Morris水迷宫实验,并检测小鼠皮层和海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性.结果 定位航行实验发现模型组小鼠的上台潜伏期和游泳距离明显高于对照组(P<0.01)和K252a预处理组(P<0.05).空间搜索实验发现模型组小鼠在平台所在象限中游泳的时间百分比和游泳的距离百分比明显低于对照组(P<0.05),K252a预处理组的游泳时间百分比与模型组有统计学差异(P<0.05).模型组与对照组相比,AChE的活性升高(P<0.05),ChAT的活性降低(P<0.05);K252a预处理组与模型组相比,AChE的活性降低(P<0.05),ChAT的活性升高(P<0.05).结论 K252a预处理能够改善Aβ25～35诱导小鼠的学习记忆功能障碍,该作用与其抑制AChE活性和增强ChAT活性有关.     

脑欣方对D-半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用

目的探讨脑欣方对D-半乳糖诱导的脑功能衰退小鼠的保护作用.方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(46 d,120 mg/kg),采用水迷宫测试仪测定模型小鼠的学习记忆能力,同时检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量.结果灌服脑欣方 100、200、400 mg/kg 46 d可以不同程度地改善模型小鼠的学习记忆能力;明显增强模型小鼠脑组织SOD活力,增加GSH含量,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01).结论抑制脑组织脂质过氧化反应,提高脑组织的抗脂质过氧化能力,可能是脑欣方改善行为学异常,防治老年期痴呆的作用机制之一.     

去氢吴茱萸碱对D-半乳糖大鼠学习记忆障碍的预防作用及其机制

目的探讨去氢吴茱萸碱(dehydroevodiamine,DHED)对D-半乳糖大鼠学习记忆障碍的预防作用及其机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组、D-半乳糖组、DHED低剂量组和DHED高剂量组。Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆,生化方法检测血浆和脑组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,ELISA测定皮质和海马β淀粉样肽(Aβ)的变化。结果经8周D-半乳糖注射后,与对照组比较,D-半乳糖组大鼠的学习和记忆、血浆和脑组织中SOD的活性显著降低(P<0.01),血浆和脑组织中MDA的含量、脑皮质和海马中Aβ的含量显著升高(P<0.05);DHED高剂量组大鼠的学习和记忆能力增强,血浆和脑组织SOD增加、MDA的含量降低,脑组织中Aβ的含量降低,与D-半乳糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05),DHED低剂量组与D-半乳糖组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DHED可能通过减少脑组织Aβ的产生和增强机体的抗氧化作用来预防D-半乳糖对大鼠学习记忆的损伤。     

远志皂苷调节细胞自噬抗Aβ25-35诱导的SH-5Y5 Y细胞凋亡的研究

目的 从细胞自噬角度探讨远志皂苷(tenuifolin,Ten)抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的作用及分子机制.方法 建立Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬小泡的变化,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平的变化.结果 Ten抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞活力降低及凋亡率增加,减少Aβ25-35诱导的自噬体增加,显著降低自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平.结论 Ten通过调节Aβ25-35诱导的细胞自噬,从而抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥神经保护作用.     

Protective effect of astragalosides on myocardial damage in diabetic mice

目的 探讨黄芪总苷(AST)对链脲霉素(STZ)诱导实验性糖尿病(DM)小鼠心肌的保护作用以及其可能作用机制.方法 STZ(100 mg/kg)一次性腹腔注射建立DM小鼠模型,随机分为正常组,模型组,AST(30、60、120 mg/kg)组及四甲基哌啶(90 mg/kg)组.6周后检测各组小鼠体重、心脏指数、血糖浓度、血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的变化,HE染色观察心肌组织病理形态学变化,TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化法、RT-PCR法观察心肌组织中转化生长因子(TGF-β1)的表达情况.结果 与正常组比较,模型组小鼠血糖、心脏指数明显升高,血清SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高,心肌纤维紊乱,心肌细胞凋亡增加,心肌组织中TGF-β1和TGF-β1 mRNA表达增加.与模型组比较,AST(30、60、120 mg/kg)组明显降低DM小鼠血糖、心脏指数;提高DM小鼠血清SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量;改善心肌纤维、心肌细胞异常;降低心肌组织中TGF-β1的表达.结论 AST能抑制DM小鼠心肌纤维化病变以及心肌细胞凋亡,对DM小鼠心肌起保护作用,其作用机制可能与其提高血清抗氧化能力、降低心肌组织中TGF-β1的表达水平有关.     

虫草多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用

目的观察虫草多糖(CP)对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用.方法分别采用四氯化碳(CCl4)和D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)诱导小鼠急性化学性肝损伤,比色法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量、肝匀浆中超氧歧化酶(SOD)活力以及丙二醛(MDA)浓度,并作肝组织切片病理观察.结果虫草多糖(125、250、500 mg/kg)ig 给药明显降低CCl4和D-GaLN诱导的化学性肝损伤后小鼠血清中升高的ALT和AST水平,抑制肝匀浆中上升的MDA水平和升高过低的SOD活性.病理检查结果显示有明显的保肝作用.结论虫草多糖对小鼠急性化学性肝损伤有一定的保护作用.     

红景天素对实验性老年性痴呆大鼠防治作用的研究

目的观察中药红景天素(Rhodosin)对实验性AD大鼠的防治作用.方法连续6周腹腔内注射D-半乳糖,双侧海马内注射Aβ1-40造成AD大鼠模型.以Y-型迷宫、一次性被动回避实验检测大鼠的学习记忆行为,测定大脑皮层脂褐素含量以及海马线粒体膜流动性、SOD活性、MDA含量,电镜观察海马超微结构.结果红景天素可显著改善痴呆大鼠的学习记忆障碍,明显降低痴呆组大鼠海马SOD活性、MDA含量及皮层脂褐素的含量,阻抑海马神经元的变性及凋亡.结论红景天素可能通过影响自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用.     

阿托伐他汀对Aβ损伤的神经元细胞的保护作用

目的:探讨阿托伐他汀(Ato)对β样淀粉蛋白25~35(Aβ25~35)诱导的神经元细胞活力改变、氧化指标的影响。方法:选用SD大鼠脑皮层组织建立不同浓度的Ato干预的AD细胞模型。通过MTS法测定神经元细胞活力,通过硫代巴比妥法和WST-1法分别测定神经元细胞培养基的丙二醛(MDA)含量和SOD活力。结果:与空白对照组比较,不同浓度Ato组各项指标差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组和不同浓度Ato组比较,Aβ组、Aβ+不同浓度Ato组细胞活力降低,MDA含量升高,SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+不同浓度Ato组神经元细胞活力上升,MDA含量下降,SOD活性上升,差异有统计学意义(P<0.05);Aβ+1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L Ato 3组间比较,Aβ+10μmol/L Ato组神经元细胞活力最高,MDA含量最低,SOD活性最高,Aβ+5μmol/L Ato组次之,Aβ+1μmol/L Ato组最低。结论:阿托伐他汀可以减轻Aβ25~35造成的细胞氧化损伤,保护神经元细胞。