人泪腺腺样囊性癌细胞的原代培养及其形态学特征

目的 探讨人泪腺腺样囊性癌细胞的原代培养方法.方法 实验研究.取2011年5月16日至6月1日在天津医科大学眼科医院接受手术治疗的1位泪腺腺样囊性癌患者的术中标本,采用组织块培养法获得原代细胞.运用连续传代、机械刮除、反复贴壁和消化排除等方法去除杂细胞.通过相差显微镜、扫描电镜、透射电镜等观察细胞形态.免疫细胞化学法检测细胞波形蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)、S-100蛋白、细胞角蛋白(cytokeratin,pan)、CD34等蛋白的表达情况.免疫组织化学法检测肿瘤组织vimentin、desmin、S-100蛋白、cytokeratin(pan)等蛋白的表达情况.消化法绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间.结果 组织块原代培养第5天见周围开始有细胞爬出,此后细胞缓慢增殖,至第32天进行首次传代,第69天发现典型的上皮样细胞克隆.运用多种方法去除杂细胞后,至第8代细胞基本纯化.纯化后细胞现已稳定传至100代以上.相差显微镜下观察第25代细胞呈典型的上皮样细胞形态,可出现接触抑制消失.扫描电镜和透射电镜下第25代细胞呈现低分化恶性肿瘤细胞的典型特点,细胞间信号沟通丰富.细胞免疫化学法检测第25代癌细胞vimentin、cytokeratin (pan)和S-100蛋白呈阳性,desmin、CD34蛋白呈阴性,与源肿瘤组织染色结果一致.细胞生长曲线类似“S”形,细胞倍增时间37.1 h.结论 采用组织块培养法可以获得基本纯化的人泪腺腺样囊性癌细胞,有可能通过此法获得稳定的人泪腺腺样囊性癌细胞系.     

泪腺腺样囊性癌CT表现的研究

目的 分析泪腺腺样囊性癌常见的CT图像特征,从而探讨CT(computed tomography)影像对于泪腺腺样囊性癌的诊断价值.方法 病历来源为天津医科大学眼科中心及天津医科大学第二医院,经病理确诊的眼眶腺样囊腺癌39例.其中原发肿瘤20例,复发肿瘤19例,均为单眼发病,所有患者均行眼眶CT检查,获取水平及冠状扫描图像.结果 泪腺腺样囊性癌中原发肿瘤形状多为厚扁平状,贴附于眶壁增长,在体层像上呈锥形者10例、不规则形5例;复发肿瘤形状为不规则型8例、厚扁平状,贴附于眶外上壁向后增长者8例.原发与复发泪腺腺样囊腺癌的好发位置位于眶外上方分别为18例与11例.结论 CT可清晰显示肿瘤的位置,形状,范围、眶骨壁改变,对于泪腺腺样囊性癌的诊断和制定治疗方案具有重要指导意义.     

E-cadherin和β-catenin在泪腺多形性腺瘤和腺样囊性癌中的表达

目的研究E-cadherin及β-catenin在泪腺多形性腺瘤和腺样囊性癌中的表达。方法选取经病理检查确诊为泪腺多形性腺瘤的患者11例11眼和腺样囊性癌的患者6例6眼,分别行E-cadherin和β-catenin免疫组织化学染色。选取泪腺脱垂患者的泪腺组织6例作为正常对照组。结果正常泪腺组织中E-cadherin呈强阳性表达,主要位于细胞膜;而在泪腺多形性腺瘤中E-cadherin呈弱阳性表达,主要位于细胞质。E-cadherin在腺样囊性癌中未见表达。3组中E-cadherin阳性表达的样本数差异有统计学意义（H=16.492,P=0.000）;正常泪腺组E-cadherin阳性表达的样本数明显高于多形性腺瘤组和腺样囊性癌组,差异均有统计学意义（U=-3.561,P=0.000;U=-3.108,P=0.002）,多形性腺瘤组中E-cadherin阳性表达的样本数明显高于腺样囊性癌组,差异有统计学意义（U=-2.147,P=0.032）。正常泪腺β-catenin细胞膜呈中度或强阳性表达,多形性腺瘤和腺样囊性癌中β-catenin的表达较正常泪腺组织表达阳性程度差异无统计学意义（P〉0.05）,腺样囊性癌组中β-catenin细胞核阳性的比例（33.3%,2/6）较多形性腺瘤组（72.7%,7/11）低。结论 E-cadherin表达的下降是参与泪腺上皮性肿瘤发生及癌变的重要因素,而E-cadherin的进一步下降甚至缺失,以及β-catenin的核转位可能是参与泪腺多形性腺瘤恶性转化的因素之一。     

常见泪腺上皮性肿瘤中EGFL7的表达及其与血管生成和细胞增殖活性的相关性研究

目的：检测常见泪腺上皮性肿瘤中类表皮生长因子结构域 7(EGFL7)、微血管密度(MVD)、Ki67的表达,探究EGFL7与MVD、Ki67之间的相互关系。

方法：应用免疫组化法,对10例正常泪腺组织(取自因炎性假瘤、Mikulicz病等良性泪腺肿瘤切除后,标本中的部分正常泪腺组织)、20例泪腺多形性腺瘤、12例多形性腺癌、14例腺样囊性癌组织中的EGFL7蛋白、Ki67进行检测,并应用CD34标记计数MVD。

结果：EGFL7主要在泪腺多形性腺癌、腺样囊性癌的肿瘤细胞的细胞浆中表达,免疫组化染色结果显示,在正常泪腺组织中EGFL7无阳性表达,泪腺多形性腺瘤组织中EGFL7的阳性率为5%(1/20),泪腺多形性腺癌中EGFL7的阳性表达率83%(10/12),泪腺腺样囊性癌中EGFL7的阳性表达率为86%(12/14),两种恶性肿瘤中的表达率明显高于多形性腺瘤和正常泪腺组织(P<0.001)。CD34可使肿瘤微血管染色呈棕黄色的单个或成簇细胞群。在泪腺多形性腺癌(32.58±14.46)及腺样囊性癌(43.43±4.60)中CD34的表达明显高于多形性腺瘤(4.20±1.19)(P<0.001); Ki67在具有增殖活性的细胞核呈棕褐色着色,在泪腺多形性腺癌(44.83±13.68)及腺样囊性癌(26.29±8.44)中Ki67的表达明显高于多形性腺瘤(2.80±3.14)及正常组织(0.40±0.70)(P<0.001)。在两种恶性肿瘤中EGFL7的表达分别与MVD、Ki67呈明显正相关(r_s=0.897,P<0.001; r_s=0.837,P<0.001)。

结论：EGFL7在泪腺上皮性肿瘤中的表达与MVD、Ki67呈正相关性,提示EGFL7不仅在泪腺上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,而且参与泪腺上皮性肿瘤的增殖。     

泪腺上皮性肿瘤中CUL-1蛋白和Ki-67蛋白表达的意义

目的 研究 cullin-1（CUL-1）蛋白和Ki-67蛋白在泪腺上皮性肿瘤中的表达及其临床意义.方法 选取手术切取的泪腺上皮性肿瘤31例（多形性腺瘤11例、腺样囊性癌12例和腺癌8例）,其中男19例,女12例,年龄34～68岁,平均（42.5±4.7）岁,单眼发病.另取5例正常泪腺组织作为对照.采用免疫组化SP法检测CUL-1蛋白和Ki-67蛋白在泪腺正常组织及良、恶性上皮性肿瘤中的表达.在200倍视野下,辨别阳性细胞和阴性细胞并计数,计算出CUL-1蛋白和Ki-67蛋白在不同组织的阳性表达率.对各组的阳性表达率作卡方检验.结果 ①CUL-1蛋白的阳性细胞经免疫组化染色后呈棕黄色,分布于细胞核和细胞质,在3种肿瘤中均呈高表达.在多形性腺瘤、腺样囊性癌和腺癌中,CUL-1蛋白的阳性表达率分别为43.10%、46.63%和43.88%;在正常组织呈低表达,阳性表达率为1.43%.经卡方检验,CUL-1蛋白在多形性腺瘤、腺样囊性癌和腺癌组织中的阳性表达率明显高于正常组织（x2=492.821、550.069、504.907,P均＜0.01）,而在良、恶性肿瘤组织中的表达差异则无统计学意义（P＞0.05）.②Ki-67蛋白的阳性细胞经免疫组化染色后呈棕黄色,分布于细胞核.在腺样囊性癌和腺癌中呈高表达,阳性表达率高达48.59%和53.88%;在多形性腺瘤和正常组织中呈低表达,阳性表达率分别为6.06%和4.32%.经卡方检验,Ki-67蛋白在腺样囊性癌和腺癌中的表达明显高于多形性腺瘤（x2=454.522、544.010,P均＜0.01）.结论 CUL-1蛋白在泪腺上皮性肿瘤中表达增高,是导致泪腺上皮细胞异常增生的分子机制之一.Ki-67蛋白在泪腺恶性上皮肿瘤中呈高表达,可作为判断泪腺上皮性肿瘤生物学行为及预后的指标.     

泪腺腺样囊性癌不同病理组织学分型和分级间骨质破坏、 神经侵犯和预后的差异

目的:研究泪腺腺样囊性癌不同病理组织学分型和分级间骨质破坏、神经侵犯和预后的差异.方法:回顾性分析2010年4月至2019年4月首都医科大学附属北京同仁医院眼肿瘤科收治并经病理组织学检测确诊的30例泪腺腺样囊性癌患者的完整病历资料.分析患者的一般病历资料、医学影像学资料、病理组织学检查结果以及预后情况等,并系统研究泪腺...     

关注泪腺腺样囊性癌诊断和治疗中需要注意的问题

泪腺腺样囊性癌是泪腺最为常见的恶性肿瘤之一,具有较高的复发率和死亡率.此病发病机制不明,预后较差.目前,泪腺腺样囊性癌尚无标准化的诊疗方案,在临床诊疗过程中也存在着一些问题.为了提高有关泪腺腺样囊性癌的诊疗质量,本文将从泪腺腺样囊性癌的流行病学、临床表现、影像学检查方法 的选择、诊断与鉴别诊断、病理组织学改变和免疫组织化学指标、治疗方案的选择及预后等方面加以述评,以期有助于临床医师加强对该病的认识,提高早期诊断率,减少误诊率.     

泪腺腺体囊性癌p53表达的研究

应用免疫组化的方法检测正常泪腺及泪腺腺体囊性癌ｐ５３蛋白的表达，结果正常泪腺均染色阴性，而６例泪腺腺体囊性癌中４例染色阳性，染色位于细胞核，细胞浆不染色，表明在肿瘤中有ｐ５３蛋白的增强表达，提示在泪腺腺性囊性癌有ｐ５３基因的异常。     

神经细丝酸性蛋白在泪腺腺样囊性癌中的表达及意义

目的研究雪旺细胞标记物神经细丝酸性蛋白（GFAP）在腺样囊性癌有嗜神经性侵袭组与无嗜神经性侵袭组中的表达的差异，旨在进一步探明泪腺腺样囊性癌嗜神经性侵袭性生长的机制。方法应用免疫组化S—P法检测GFAP在28例腺样囊性癌中的表达情况。结果有嗜神经侵袭性生长组中的GFAP阳性表达率较无嗜神经侵袭性生长组呈升高趋势（P〈0．05）。结论泪腺腺样囊性癌的嗜神经性侵袭特性可能与肿瘤细胞中存在着雪旺细胞分化有关。     

常见原发性泪腺上皮性肿瘤的组织病理学特征与复发的关系

目的分析原发性泪腺上皮性肿瘤的组织病理学特征与复发的关系,为临床诊治提供参考。方法收集128例病理诊断为原发性泪腺上皮性肿瘤患者的石蜡标本,其中最常见的三种依次为良性混合瘤74例（57．8％）,腺样囊性癌22例（17．2％）,恶性混合瘤18例（14．1％）,分析其组织病理学特征与复发的关系。结果良性混合瘤、腺样囊性癌和恶性混合瘤的复发率分别为23．0％、18．2％和27．8％,其中良性混合瘤的病理类型和包膜完整性在肿瘤的复发中具有统计学意义。结论三种常见原发性泪腺上皮性肿瘤复发率高,了解其病理表现对肿瘤的诊断、治疗方式的选择和随访时间的确定具有参考意义。