间充质干细胞对兔自身免疫性干眼模型病理改变及细胞因子表达的影响

目的 建立兔自身免疫性干眼模型,观察间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)治疗后兔自身免疫性干眼的组织病理学变化及泪腺组织中细胞因子表达的变化.方法 取健康成年雌性新西兰白兔24只24眼,采用随机数学表法将兔分为正常对照组、干眼模型组和MSCs治疗组,每组各8只8眼.MSCs治疗6周后,观察兔眼组织病理学改变,实时荧光定量PCR检测泪腺组织中Th1、Th17细胞分化相关细胞因子mRNA相对表达量.流式细胞仪检测干眼模型组和MSCs治疗组兔泪腺组织和脾脏组织中调节性T细胞(CD4+ Foxp3+细胞)占淋巴细胞的比例.结果 MSCs治疗6周后,取各组兔泪腺并行HE染色显示:正常对照组未见或仅见少量淋巴细胞浸润;干眼模型组泪腺内部分腺体细胞出现萎缩,腺管周围和小血管周围可见散在分布的淋巴细胞汇集区;与干眼模型组相比,MSCs治疗组泪腺内淋巴细胞浸润减轻,腺泡细胞形态较好.与干眼模型组比较,MSCs治疗组结膜组织中淋巴细胞浸润聚集显著减轻,上皮结构完整,变性和萎缩细胞较少见.MSCs治疗组泪腺组织中Th1特征性细胞因子IFN-γ以及转录因子T-bet mRNA表达水平较干眼模型组明显下降,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);Th17细胞分化相关细胞因子IL-17表达水平有下降趋势,但两组差异无统计学意义(P＞0.05);其转录因子RORa mRNA的表达水平较干眼模型组显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).MSCs治疗组泪腺组织中炎症因子TNF-α表达较干眼模型组显著降低,而抑炎因子TGF-β的表达较干眼模型组显著升高,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).泪腺组织中干眼模型组调节性T细胞(CD4+ Foxp3+细胞)占淋巴细胞的比例为10.0％,而MSCs治疗组中调节性T细胞占淋巴细胞的比例为27.8％,MSCs治疗组调节性T细胞较干眼模型组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MSCs可以减轻自身免疫性干眼的组织病理学改变,对自身免疫性干眼具有一定的免疫调节及治疗作用,其免疫调控作用可能与调节抑炎因子和促炎因子平衡有关.     

间充质干细胞在视网膜疾病研究中的应用

间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)是一类存在于间质组织具有多向分化潜能的干细胞,被广泛应用于组织或细胞的修复或替代的研究中。利用MSCs分化成为视网膜细胞的研究可为一些视网膜不可逆性病变的治疗带来希望。此外,已有研究表明MSCs分泌的一些细胞因子,有助于提高病理状态下的神经细胞存活能力,利用MSCs的这一功能可为病变视网膜提供保护作用。因此,MSCs的神经保护功能也逐渐被应用于视网膜疾病研究中,成为关注的另一焦点。我们着重介绍了MSCs特征及其在视网膜疾病研究中的一些现状。     

骨髓间充质干细胞应用于角膜疾病的研究进展

随着干细胞科学的飞速发展,近年间充质干细胞(MSCs)的研究已成为热点。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是来源于骨髓中的MSCs,具有免疫原性低、有多向分化潜能、促进损伤修复、性能稳定等生物学优点。研究发现,BMSCs是医学领域中极具前景的一种特殊细胞,几乎在各系统疾病的治疗方面都有广泛应用。眼科学者的研究也发现,BMSCs已经成为角膜疾病中一种兼具科研价值和临床价值的种子细胞,为角膜盲患者的康复带来了一线希望。本文就BMSCs对角膜损伤与角膜移植排斥反应治疗方面的研究做一综述。     

间充质干细胞源性外泌体治疗干眼的研究进展

外泌体是一种细胞外囊泡,通过生物分子传递改变受体细胞的生化特性,并在细胞通讯中发挥作用。其中,间充质干细胞源性外泌体(MSC-Exos)是由间充质干细胞分泌的双层脂质囊泡,具有与间充质干细胞(MSCs)相似的功能,并携带蛋白质、脂质和核酸等生物活性物质,可作为细胞间通讯的媒介参与免疫调节、组织损伤修复和促进血管生成等多种重要生理过程,近年来在治疗免疫炎性疾病、缺血性疾病等相关领域成为研究的热点。本文从MSC-Exos的生物学功能出发,针对干眼不同发病机制如炎症反应、神经及组织修复等,阐述其治疗干眼的可能机制,以期为MSC-Exos在干眼治疗中的应用奠定基础,并为未来的临床应用提供参考依据。     

间充质干细胞对自身免疫性干眼的免疫调控作用研究进展

间充质干细胞(mesonchymal stem cells,MSCs)具有良好的免疫调节功能,可以抑制多种免疫细胞群增殖,直接作用抑制T淋巴细胞的活化增殖,上调Treg细胞或通过分泌可溶性因子调节Th1/Th2反应平衡而发挥免疫调节作用,通过抗炎、调控各类性细胞因子的表达等方面抑制炎性因子的分泌同时促进抑炎因子分泌,降低基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9等可能促进泪腺组织损害因子的表达水平,进而发挥其免疫调节作用,MSCs能减轻自身免疫性干眼的临床指标,恢复部分泪腺组织的分泌功能,本文就MSCs对自身免疫性干眼免疫调控的研究进展进行综述.     

骨髓间充质干细胞神经保护作用在视网膜疾病治疗中的研究进展

骨髓间充质干细胞（ MSCs）是来源于骨髓的具有多种神经营养因子分泌功能的多能干细胞,被广泛应用于组织、细胞的修复或替代研究中。有研究表明MSCs分泌的多种神经营养因子,有助于提高病理状态下神经细胞的存活能力。因此,MSCs的神经保护功能也逐渐被应用于视网膜疾病的研究中。视网膜细胞对损伤非常敏感且自我修复能力较差,利用MSCs的这一功能可为病变视网膜的治疗带来新的希望。本文就MSCs的神经营养因子分泌功能及其对视网膜细胞产生的神经保护作用和在不同视网膜疾病中的研究应用进展等方面进行综述,并展望其在视网膜疾病治疗中的应用前景。     

间充质干细胞源性外泌体治疗角膜及眼表疾病的研究进展

间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体可通过携带的蛋白或核酸等物质调节局部炎症反应、血管生成及免疫应答,从而为角膜外伤、干眼及免疫性眼病等的治疗提供了新思路。外泌体非细胞的特性避免了干细胞治疗中细胞存活、肿瘤发生及移植物排斥等问题,并且有成为治疗药物的生物载体的潜力。本文拟介绍近年来间充质干细胞源外泌体在角膜及眼表疾病治...     

间充质干细胞联合他汀类药物在糖尿病视网膜病变中的应用研究进展

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病患者常见的眼部并发症,也是成人盲的主要原因之一.DR现有的治疗方法包括手术和激光治疗等不能从根本上治疗DR.近年研究发现应用间充质干细胞(MSCs)对DR进行细胞治疗具有广泛的应用前景.MSCs具有再生潜能并在视网膜的修复中起作用,但移植后MSCs的生存能力及归巢能力差,降低了其治疗效率.他汀类药物除具有调脂作用外,还能促进MSCs的增生并抑制MSCs凋亡.本文就MSCs联合他汀类药物在DR治疗中的应用及机制进行综述.     

人间充质干细胞横向诱导分化为角膜上皮细胞及角膜缘干细胞的体外研究

目的 探讨人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外向角膜上皮细胞及角膜缘干细胞横向分化的可能性.方法 从成人骨髓中分离培养出具有MSCs特性的细胞,经过5次传代培养纯化后使用以下5种培养基对MSCs进行诱导分化:1组:DMEM/F12、体积分数10?S;2组:DMEM/F12、体积分数10?S、5 μg·L-1 表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF);3组:DMEM/F12、体积分数10?S、10 μg·L-1 EGF;4组:DMEM/F12、体积分数10?S、15 μg·L-1 EGF;5组:DMEM/F12、体积分数10?S、体积分数50%条件培养基、10 μg·L-1 EGF.其中第1组为对照组,使用的培养基为培养MSCs的培养基.各组细胞培养30 d后,取出细胞爬片进行AE1、AE5和P63的免疫组化染色.结果 从成人骨髓中分离培养出的细胞绝大部分具有MSCs的特性.各诱导分化组的细胞经过AE1染色后计算的细胞诱导转化率分别为:0、(5.28±0.90)%、(15.65±1.65)%、(27.35±2.36)%、(15.53±1.61)%,第2、3、4组着色细胞的数量和着色深度递增,第5诱导分化组的染色情况和第3组相近,对照组染色为阴性.各组AE5染色均为均匀淡染.各组P63染色均为阴性.结论 5～15 μg·L-1 EGF能诱导MSCs横向分化为角膜上皮细胞,而且在此浓度范围内EGF的诱导作用随浓度升高逐渐增强.用成人角膜缘干细胞的培养液制成的体积分数50%条件培养基对诱导MSCs横向分化为角膜上皮细胞无明显促进作用,本实验方法不能将MSCs诱导分化为角膜缘干细胞.     

间充质干细胞在眼表疾病治疗中的应用

间充质干细胞由于其独特的自我更新和多向分化能力,成为了一种替代无效的常规治疗的新兴治疗方法.间充质干细胞通过免疫调节、促修复、抗新生血管机制和细胞替代作用在眼表疾病中发挥作用,而不同来源的间充质干细胞其作用机制也不完全相同.迄今为止,已有8项注册的间充质干细胞治疗的临床试验应用于干眼、角膜烧伤、圆锥角膜等眼表疾病.     

干燥综合征相关型干眼症的临床诊疗进展

干燥综合征(SS)是一种系统性自身免疫类疾病,其主要特征是免疫细胞浸润并破坏各外分泌腺体,影响机体其他各器官的系统功能。当该类疾病累及眼部时,极易引发干眼症,出现眼干、畏光等眼部不适的症状。目前,SS相关型干眼症的发病机制尚不明确,也无统一的诊断及治疗标准,至今仍未找到能够彻底根治此类疾病的治疗办法。此类疾病的治疗目标主要是控制病情、缓解症状及减少并发症的发生。近年来,随着免疫系统疾病和干眼症治疗等相关研究的不断深入,SS相关型干眼症的治疗也有了很大进展。本文中笔者重点回顾目前能够应用于SS相关型干眼症的临床诊疗方法,整理近年来有关此类疾病诊断及治疗取得的研究进展,以期为SS相关型干眼症的临床诊疗提供参考。     

干眼的免疫机制研究进展

干眼是一种由多因素所致,发病机制众多的常见眼表疾病。随着我国干眼发病率逐年升高,干眼逐渐引起人们的重视。干眼的发病机制较为复杂,其中炎症、角结膜上皮细胞改变、泪膜成分改变、角膜神经改变、睑板腺功能异常改变等均为重要因素。泪膜高渗导致眼表上皮细胞高渗,刺激炎症发生级联反应,眼表炎症反应为干眼发病机制中最为关键的环节。该过程中有多种炎症介质和免疫细胞参与,越来越多的人认为干眼是一种抗原特异性自身免疫性炎症疾病且二者存在联系。临床治疗中,各类抗炎药物及促进泪液分泌药物在一定程度上标志着干眼药物治疗的快速发展,但干眼治疗并非仅仅为了改善症状,而要根据具体病因展开治疗。近年关于干眼免疫机制的研究日益增多,据此本文就干眼的免疫机制研究进展进行综述,希望系统性了解免疫在干眼发生发展过程中的作用及临床意义。     

Trends in using mesenchymal stromal/stem cells (MSCs) in treating corneal diseases

Since their inception in the 1960s–70s, mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) have gained interest because of their differentiation potential, anti-inflammatory effects, and immune-modulating properties. Both cell-based and cell-free MSC treatments show healing capacity in injured tissues. Cell-based treatment comprises MSCs and all secreted products, whereas cell-free treatments include only the secreted products. MSCs are therapeutically administered to many damaged organs owing to their efficacy. Specifically, the eye is a unique organ system to study the effects of MSCs, as treatment is easily applied and measured owing to its external location. The eye holds an immune-privileged status, wherein inflammation and immune responses are innately down-regulated. As excessive inflammation in the cornea often leads to fibrosis and irreversible corneal hazing, many studies have investigated the anti-inflammatory and immune-modulating capacities of MSCs. Decades of research suggest that MSCs modulate the immune response by secreting cytokines, growth factors, and extracellular matrix proteins that inhibit the infiltration of inflammatory cells following injury and promote a healing phenotype via M2 macrophage polarization. MSCs have also shown trans-differentiation potential into cornea-specific cell types during the wound healing process, such as corneal epithelial, stromal, or endothelial cells. This review discusses recent investigations of MSC treatment in the cornea, focusing on therapeutic efficacy, mechanisms, and future directions.     

Mesenchymal stromal cells for the treatment of ocular autoimmune diseases

Mesenchymal stromal cells, commonly referred to as MSCs, have emerged as a promising cell-based therapy for a range of autoimmune diseases thanks to several therapeutic advantages. Key among these are: 1) the ability to modulate innate and adaptive immune responses and to promote tissue regeneration, 2) the ease of their isolation from readily accessible tissues and expansion at scale in culture, 3) their low immunogenicity enabling use as an allogeneic “off-the-shelf” product, and 4) MSC therapy's safety and feasibility in humans, as demonstrated in more than one thousand clinical trials. Evidence from preclinical studies and early clinical trials indicate the therapeutic potential of MSCs and their derivatives for efficacy in ocular autoimmune diseases such as autoimmune uveoretinitis and Sjögren's syndrome-related dry eye disease. In this review, we provide an overview of the current understanding of the therapeutic mechanisms of MSCs, and summarize the results from preclinical and clinical studies that have used MSCs or their derivatives for the treatment of ocular autoimmune diseases. We also discuss the challenges to the successful clinical application of MSC therapy, and suggest strategies for overcoming them.     

间充质干细胞外泌体对眼部疾病的治疗作用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种来源于多种组织,具有多向细胞分化潜能和自我细胞更新的多能干细胞,可对多种眼部疾病发挥治疗作用。研究表明,MSCs的生物学功能与其分泌的外泌体(MSC-Exo)有密切联系。相较而言,MSC-Exo的生物性能更加稳定,且不具有成瘤性,因此有望成为MSCs生物学功能的有效替代物。本文对MSC-Exo在眼部疾病中的应用进展讨论,以期为MSC-Exo在眼部疾病的治疗提供思路和借鉴。     

Wakayama symposium: interface between innate and adaptive immunity in dry eye disease

Although the mechanism of dry eye disease is not clearly understood, it is certain that inflammation and the immune response play a major role in determining the health of the ocular surface in dry eye patients. Accurate ocular surface characterization during the early stages of dry eye disease is critical for successful treatment, because there exists no single standard, objective test to diagnose the early phase of dry eye disease. The treatment target should be direct to prevent the perpetuation of chronic inflammation and immune responses. Numerous studies have categorized dry eye disease as an autoimmune-related inflammatory disease. However, relatively little is known about how innate immune mechanisms act following a local insult, why some patients are particularly vulnerable, and why local inflammation fails to resolve in these patients. Within this review, particular attention will be given to the very early events and corresponding defense mechanism in dry eye disease. The transition from innate to adaptive immunity will also be discussed.     

活体共聚焦显微镜在干眼患者眼表形态观察中的应用

干眼症是最常见的眼部疾患之一。尽管在过去的几年中,与其相关的基础与临床研究获得了不少进展,但其病理生理机制仍不十分明确。活体共聚焦显微镜是一种非侵入性的眼部成像技术,它使得人们在细胞水平对眼表上皮细胞、免疫及炎症细胞、角膜神经、角膜基质细胞以及睑板腺结构进行观察成为可能。因此,它可以帮助人们更好地理解干眼症的发病机制以及病理生理,从而协助该病的诊断和治疗。使用共聚焦显微镜可对干眼相关的眼表结构作出评估,并对其改变进行量化,这样使得疾病在早期就能得到识别,可对患者进行分层治疗。此外,动态地观察眼表共聚焦图像的变化还可以对干眼症的临床治疗效果进行监测,利于及时调整治疗方案,并较为准确地评估预后。