分子生物学实验室有毒物质的危害及管理

目前，分子生物学飞速发展，分子生物学相关的理论和技术已深入到生命科学的各个领域，一些常用的技术，如基因组DNA的分离纯化，质粒DNA的抽提及纯化，RNA的提取，PCR扩增．Southern blot等成为分子生物学研究的强有力工具，为分子生物学的发展起了巨大的推动作用，然后，这些实验操作技术都涉及到氯仿、DEPC、同位素等有毒有害或具放射性的物质，对环境和人身安全也造成巨大的威胁。因此，弄清这些有害有毒物质的作用，加强实验室安全管理，建立良好的制度和处理．保证分子生物学实验室成为真正的科研阵地。     

人外周血DNA提取方法比较

分子生物学技术已经广泛应用于生物学、基础医学、临床医学和预防医学等多个学科领域,人外周血DNA的提取是分子生物学的一项基础研究技术,从全血中提取高浓度、高纯度和高质量的DNA在实验研究中尤为重要[1～3].张宁等[4]提出的酚抽提法、甲酰胺裂解法以及异丙醇沉淀法是提取DNA最为经典的实验方法,但其操作繁琐,耗时较长,且所用试剂具有一定的毒性.目前,很多学者针对不同实验样品的传统DNA提取方法都提出了改良方法[5-7],应用试剂盒提取人外周血DNA被广泛应用于现在的实验研究,本文针对试剂盒提取人外周血DNA方法的操作过程以及其注意事项等展开讨论,以期为其他研究者提供参考.     

DNA的故事

什么是DNA DNA(脱氧核糖核酸)是核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。 DNA分子极为庞大(分子量一般至少在百万以上),主要组成成分是腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸和胸腺嘧啶脱氧核苷酸。DNA存在于细胞核、线粒体、叶绿体中,也可以以游离状态存在于某些细胞的细胞质中。大多数已知噬菌体、部分动物病毒和少数植物病毒中也含有DNA。     

植物基因组DNA提取方法学评析与验证

分子生物学实验多以提取研究对象的基因组DNA作为研究的起点,由于材料的来源、部位、形态等外在性质的不同,以及化学成分、组织结构等内在特点的差异,常会需要在提取基因组DNA时选择不同的方法,或作一些特殊的处理,如有的植物组织含有较多的多糖及酚、酯、萜等次生代谢产物,从而会影响到所提DNA的纯度及随后的实验分析。因而选择一种简单、快速而高效提取基因组DNA的方法常常成为实验中关键的一步。近几年来已有不少关于通用提取方法的报道,另外一些专属性的方法也有了较大进展。本文拟对这些方法加以总结、比较,以期对它们各自的特点作一剖析,并加以实验改进验证,以期能够在今后的实验中更好地应用。     

DNA提取方法进展

DNA的提取是分子生物学研究的基础技术，提取的DNA的纯度及结构完整性是进行基因工程各项研究所必需的条件。近年来一些新的或改进的DNA提取纯化方法不断出现，本文对从陆生动物、植物、微生物以及海洋生物提取DNA的方法进行综述。     

基因组信息学及有关的分子生物学数据库

分子生物学是现代生物医学科学中最深刻和最重要的基础之一，发展极为迅猛。计算分子生物学（ＣｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ）是近年来发展起来的一门由分子生物学和数学、计算机信息处理技术相结合的交叉学科，它涉及分子生物学的定量建模、理论计算等各方面，也包括生物信息学（ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ）的内容，即发展相关的软件工具和数据库用于有效地进行信息的获取、存储和分析等。随着当前国际生命科学领域内最重要的基因组计划研究项目的发展，基因组信息学（ｇｅｎｏｍｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｃ…     

分子诊断的策略

分子诊断是以DNA、RNA或蛋白质分子为诊断材料,通过检查人体内源基因或外源(病原体)基因的存在、缺陷或表达异常,对人体状态或疾病作出特异性诊断的方法和过程.本文从9个方面阐述了分子诊断的策略.把握分子诊断的策略有利于巩固目前分子诊断学的研究成果,也有利于进一步发挥分子诊断在临床医学中的作用,更有利于明确分子诊断学的发展方向.     

食管癌分子生物学的研究进展

近年来,世界食管癌(esophageal cancer,EC)患者以每年30万例的速度剧增,这引起国内外的普遍关注。由于食管癌的发病在分子水平上涉及多类基因及蛋白质的作用,故分子生物学研究对其早期诊断、治疗及预防等有重要意义。本文拟就近年食管癌的分子生物学研究进展做简要的综述。     

DNA分子标记技术在甘草属植物鉴定中的应用研究进展

近年来,利用DNA分子标记技术对甘草属植物进行遗传标记,以探讨该属植物分子层面差异性的相关研究取得了较为丰富的成果。但对于这方面的总结并不多见。本文以甘草属植物在遗传多样性、变异种质的鉴定和系统发育构建等方面研究的应用现状为线索,总结了甘草属植物研究中常用的DNA分子标记技术——随机扩增多态性DNA、扩增片段长度多态性、简单重复序列、间简单重复序列区间、目标起始密码子多态性和DNA条形码及其衍生技术的应用现状,以期为甘草属植物后期的研究提供一定的参考。     

DNA分子标记技术在中药鉴定学中的应用

DNA分子标记技术是近年来发展起来的一种新的分子生物学技术.本文介绍了几种DNA分子标记技术的基本原理和特点,概述了近年来该技术在药用植物鉴别中的应用进展,并展望了其应用前景.     

贝母属药用贝母总DNA提取方法的比较研究

目的 比较筛选最适于贝母属药用贝母的总DNA提取方法。方法 利用试剂盒法、改良的CTAB法、改良的SDS法提取贝母属药用贝母的总DNA;通过核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳方法检测其浓度和纯度;进行ISSR-PCR扩增检测所得总DNA质量。结果 3种方法均可提取出产量较高的基因组DNA,但试剂盒法相较提取的总DNA纯度最高,质量最好,并且均能扩增出丰富清晰的条带,稳定性高,操作简单耗时短。改良的CTAB法、SDS法提取的总DNA纯度、质量均次于试剂盒法,操作复杂耗时长,不适用于下游的分子生物学实验。结论 试剂盒法为贝母属药用贝母总DNA提取的最佳方法,其所得样品适用于PCR及其他分子生物学研究。     

药学分子生物学教学改革初探

分子生物学是在分子水平上研究生命现象和生命本质的科学,是现代生命科学的"共同语言".他的核心内容是通过对生物的物质基础如核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用来阐明生命的分子基础,而探索生命的奥秘.     

分子生物学技术在伤寒流行病学研究中的应用

伤寒和副伤寒 (以下统称为伤寒 )是发展中国家常见的肠道传染病 ,这些地区基础卫生设施落后 ,人们的卫生保健意识 ,卫生习惯较差 ,伤寒已成为严重公共卫生问题。传统的伤寒流行病学研究方法 ,主要通过对伤寒病原菌的形态学、血清学和生化反应特性等表型特征进行研究 ,在病原菌分型上主要有血清学分型、噬菌体分型、耐药谱分型等 ,通过这些特征结合流行病学资料综合分析 ,这种研究方式有很大的局限性[1 ] 。近年 ,随着分子生物学技术在流行病研究中的广泛应用 ,伤寒的分子流行病学研究也得到迅猛发展 ,主要是对伤寒沙门氏菌进行分子和基因水…     

改进的碱裂解法大规模提取质粒DNA

对质粒的碱裂解小量提取法进行了改进,改进的方法克服了以往质粒提取方法的RNA等杂质污染、操作烦琐费时、一般条件下不能大规模提取等问题,该方法操作简单、经济、实用且大规模提取,提取的质粒DNA得率稳定、质量好,符合大多数分子生物学常规实验的要求。     

分化型甲状腺癌分子生物学的研究进展

分化型甲状腺癌是最常见的内分泌系统肿瘤,近年来,分子生物学技术在甲状腺癌诊断、治疗方面取得了较大的进展,其中研究最多的就是BRAF、RET/PTC及P21-RAS等基因,本文就以上分子标志物的作用机制进行综述.     

发菜基因组DNA提取方法比较与分子鉴定研究

目的 以发菜为研究对象比较不同的提取DNA方法,筛选出了一种适合快速提取发菜DNA的方法。方法 分别利用自主研发的硅珠DNA纯化技术、细菌试DNA提取试剂盒和植物DNA提取试剂盒提取发菜基因组DNA。结果 本实验室开发的硅珠DNA提取纯化技术具有快速、无毒以及获得的发菜DNA纯度高等优势。通过PCR扩增和测序得到16S rRNA基因,利用Blast软件进行序列比对,与发菜同源性为99%。结论 本研究研制的发菜基因组DNA提取方法可用于发菜源性的分子鉴定。     

RAPD法构建黑水缬草基因组DNA指纹图谱

目的采用RAPD技术对黑水缬草、缬草、毛节缬草及黄花败酱等4种药用植物进行分子水平的鉴定,并获得清晰可靠的DNA指纹图谱。方法采用植物基因组DNA快速提取试剂盒提取4种供试材料基因组DNA,以随机引物进行随机扩增。结果 4种供试材料DNA指纹图谱具有共同的位点,但又有各自的特征性位点。结论 RAPD法能有效的将4种药用植物区分开。     

植物类药材基因组DNA提取与纯化的方法学研究

本文探讨了菊科9种植物和地胆草的4种对口商品药材基因组DNA提取与纯化的原理、方法，通过对3种常用植物基因组DNA提取方法（CsC1梯度超速离心法、CTAB／CsC1梯度超速离心法和DTAB微量提取法）的条件摸索，在DNA产率、纯度以及提取纯化过程中影响PCR扩增因子方面进行比较，认为CTAB微量提取法是植物类药材基因组DNA一种比较省时、有效、经济的提取方法。     

心房颤动分子机制的研究现状

心房颤动（atrial fibrillation，AF，简称房颤）是最常见的心律失常。在美国约有230万房颤患者，每年因房颤住院的患者约40万。中国房颤患病率0．77％，标准化率为0．61％。年龄分组显示患病率有随年龄增加的趋势，据此估计全国房颤患者在1000万以上。房颤主要是发生在有心血管疾病的老年人。房颤的最重要也是危害最大的并发症之一是脑卒中，因此对房颤的研究显得尤为重要。随着研究的深入，对与房颤有关的分子生物学机理的探索也逐步展开．从而可以从更深层次来把握其发生、发展和变化规律。现就近年对房颤分子机制方面的进展做一综述。     

以DNA为作用靶追踪分离天然植物药活性成分

目的:从天然植物药中分离活性成分。方法:综述DNA与其靶向分子的作用方式以及DNA为作用靶的生物活性筛选系统跟踪分离天然植物药活性成分的情况。结果:应用DNA为作用靶的生物活性筛选系统跟踪分离天然植物药成分可快速有效地得到活性化合物。结论:DNA与其靶向分子相互作用的研究对阐述抗肿瘤、抗病毒药物及致癌物的作用机理和筛选新的药物活性成分具有重要的意义