RGD肽的固相合成

早在80年代,人们就发现在许多蛋白质中均含有高度保守的氨基酸序列-RGD(精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸),并证实RGD序列肽与许多生物活动密切相关.     

Fmoc固相合成生长激素释放肽-2

生长激素释放肽(GHRP)于20世纪70年代末、80年代初依据蛋氨酸-亮氨酸脑啡肽的结构首次合成[1],之后又合成了数种类型的GHRP[2]。研究发现,结构改造后的GHRP-2(又名KP-102,药品名为Pralmorelin,氨基酸序列为D-Ala-(D-β-naphthyl)-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2)具有更强的刺激生长激素释放和改善儿童生长激素缺乏症的作用[3-4]。2004年,Pralmorelin用于治疗身材矮小症的Ⅱ期临床试验已在日本开始进行[5]。GHRP造价低廉,给药简便,在下丘脑生长激素释放激素无效时仍可产生作用,不影响或少影响生长素的内源节律性释放,具有明显的药物发展前景[2,5]。     

阿基瑞林的固相合成

Argireline（阿基瑞林）,又名乙酰六胜肽-3,经现代生化机制科学合理设计,是模仿SNAP-25蛋白N端合成的由6个氨基酸组成的寡肽[1-2]。阿基瑞林具有抗皱活性,且经过临床试验,安全性可以保证,功效可与A型肉毒毒素媲美,但避免了肉毒毒素必须采用注射应用方式和使用成本高昂的缺点。阿基瑞林现已成为风靡世界的抗皱化妆品原料,许多高端化妆品均应用了阿基瑞林成分用于抗皱[3-4]。     

人心房肽Ⅲ的固相合成及生物活性测定

本文报告以氯甲基聚苯乙烯树脂作为固相载体、按顺序用逐步合成法固相合成了人心房肽Ⅲ。产物经高压纸电泳、分子量测定和酸水解后氨基酸组成分析,证明为化学均一的单体分子。成品经生物活性测定,显示有很强的利钠、利尿以及降低动脉压的作用。     

微波促进固相合成胰高血糖素样肽-1类似物及其降血糖活性

目的:提高胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对二肽激肽酶(DPPⅣ)的稳定性。方法:以Rink Amide-MBHA树脂为载体,采用Fmoc/t-Bu正交保护固相合成策略,运用微波照射促进合成GLP-1类似物,最后经过反相制备高效液相色谱纯化得到目标多肽纯品。结果:所合成的GLP-1及其类似物的相对分子质量和纯度均经过电喷雾质谱和高效液相色谱确证。降血糖活性研究结果显示,改造后的GLP-1类似物有很好的降血糖活性且作用时间较长。结论:修饰后的GLP-1类似物在保留降糖活性的同时延长了作用时间,这为开发新型抗糖尿病药物提供了基础。     

Fmoc固相合成神经降压素

神经降压素是由13个氨基酸残基组成的生物活性多肽。实验以Fmoc氨基酸原料，采用固相合成方法，经N，N＇-二环己基碳二亚胺／1-羟基苯并三唑缩合，三氟乙酸／二氯甲烷脱保护，并从Wang树脂上切割下来，粗肽得率为61．8％，经RP-HPLC纯化，获得纯度在98％以上的目标肽，其ESI—MS和氨基酸组分分析结果与理论值相符。     

精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸肽类似物的固相合成

[目的]含有Arg-Gly-Asp(精氨酰甘氨酰天冬氨酸,RGD)片段的多肽可以识别整合素受体家族,但是这些含RGD小肽在体内很容易被蛋白酶降解.本研究设计并合成RGD肽类似物,通过结构改造克服这一缺点,以期开发新的高效的抗肿瘤药物.[方法]分子设计采用N取代甘氨酸(NSG)残基替代法,即用NSG残基Ida代替Asp、用酰甲胺或酰乙胺代替C末端的羧基,生成N取代类肽型的产物;化学合成采用Boc保护策略,在Merrifield树脂上逐步固相合成N取代类肽型的产物.[结果]全部RGD肽类似物结构均经LC-MS分析证明,总收率在85％以上,纯度＞95.1％.[结论]通过本合成工作,为建立经济、可行的类肽合成提供了一种有效途径.     

2套多肽固相合成装置的设计与应用

根据多肽固相合成的基本原理,设计了２套手工合成装置,介绍了每套装置的操作方法,并阐明了各种装置的优缺点和应用范围。     

棕榈酰五肽-3的固相合成

皮肤真皮中胶原蛋白减少被认为是人体衰老形成皱纹的主要原因,因此,如果能够促进皮肤合成更多的胶原蛋白,那么将会有效逆转衰老从而减少皱纹。小分子多肽类用于抗皱产品已经有很多年[1-2]。每年都有大量多肽类抗皱的产品上市,从早期的乙酰基五胜肽到棕榈酰寡肽。棕榈酰五肽-3(Matrixyl)是棕榈酰寡肽系列抗皱多肽小分子的一种。     

野花椒中一个新的单萜苷

目的对野花椒Zanthoxylum simulans根的化学成分进行研究。方法用柱色谱技术对化合物进行分离纯化,并用光谱技术和理化性质鉴定化合物的结构。结果从野花椒根乙醇提取物分离得到1个新的单萜苷和4个已知化合物,分别鉴定为(1R,2R,4S)-2-羟基-1,8-桉树脑-2-O-α-D-芹菜糖基(1→6)-β-D-葡萄糖苷[(1R,2R,4S)-2-hydroxy-1,8-cineole-2-O-α-D-apiofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside,Ⅰ]、淫羊藿苷E5(icarisideE5,Ⅱ)、巨盘木碱(flindersine,Ⅲ)、N-甲基-巨盘木碱(N-methylflindersine,Ⅳ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅴ)。结论化合物Ⅰ为新化合物,命名为野花椒苷A(zansiumloside A)。化合物为首次从该属植物中分离得到。     

PP—g—MAZn离聚物的固相法合成与表征

以ＤＣＰＯ为引发剂，将ＰＰ粉末通过固相法与马为酸锌发生接枝反应，合成不同接枝率的ＰＰ－ｇ－ＭＡＺｎ离聚物。考察反应温度，引发剂浓度，单体的用量对接枝率的影响，研究表明，（１）ＰＰ－ｇ－ＭＡＺｎ离聚物的ＦＴＩＲ图中，１５４０ｃｍ＾－１－１６４３ｃｍ＾－１之间出现宽的峰，说明ＭＡＺｎ与ＰＰ发生了接枝反应；（２）ＰＰ－ｇ－ＭＡＺｎ的ＷＡＸＤ谱中在２θ＝１０．６°，３１．２°，３３．２°，处有衍射峰，表明     

两面针中的两个新生物碱

研究两面针Zanthoxylum nitidum的化学成分。方法 采用正反相硅胶柱色谱法进行分离纯化,利用MS、UV、IR、NMR等波谱数据及理化性质鉴定化合物的结构。结果 分离得到2个新苯并啡啶类生物碱,分别鉴定为1,3-二(8-双氢两面针碱)丙酮［1,3-bis(8-dihydronitidinyl)-acetone,1］和8-丙酮基双氢崖椒定碱(8-acetonyldihydrofagaridine,2)。结论 化合物1和2均为未见报道的新化合物,分别命名为两面针酮A(nitidumtone A,1)和两面针酮B(nitidumtone B,2)。     

多肽合成方法研究进展

过去几十年中,多肽研究经历了长足的发展。大量科学数据反映了有关这一重要天然产物学科的进步。多肽的化学合成是在近40年里发展起来的经典的合成方法。用重组技术制备多肽和蛋白质,对方法学的发展也有重要的贡献。本文对多肽合成方法的最新进展,特别是对液相方法合成多肽、固相方法合成多肽以及微波促进技术在多肽合成中的应用进展进行综述。     

IL-21对Jurkat细胞增殖及WAVE-1表达的影响

目的探讨白介素-21（IL-21）对Jurkat细胞增殖的抑制作用及WASP家族Verprolin同源蛋白-1（WAVE-1）在急性白血病（AL）发病中可能的作用及意义。方法以不同浓度IL-21处理Jurkat细胞;通过MTT（噻唑兰比色法）检测观察IL-21对Jurkat细胞生长的影响;流式细胞仪观察24h后IL-21对细胞凋亡的影响;采用RT—PCR检测WAVE-1的表达。结果IL-21能明显抑制Jurkat细胞增殖,抑制作用呈剂量时间依赖效应（P〈0．05）;IL-21作用24h后,细胞凋亡随药物浓度增高而增加（P〈0．05）;WAVE-1 mRNA表达水平随IL-21处理浓度的增高而降低（P〈0．05）。结论IL-21可以抑制人急性白血病细胞的生长和诱导其凋亡,其机制可能与降低WAVE-1的表达有关。     

甲型H1N1流感患者T细胞亚群变化特点

目的：探讨甲型H1N1流性行感冒（流感）患者T细胞亚群的变化特点。方法：采用美国BD公司生产Fascalibur流式细胞仪检测重症甲型H1N1流感患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞并与轻症患者对照进行比较。结果：重症甲型H1N1流感患者外周血CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋比值下降,与轻症比较,差别有统计学意义（P〈0.05,染的防治。     

一种合成H2N—Gly—王氏树脂的新工艺

目的：本研究旨在建立一种制备H2N－Gly-王氏树脂的新工艺，提高其结合率。方法：采用Fmoc-甘氨酸：DCC：DMAP：王氏树脂的摩尔比为10：5：1：1，反应时间1.5h.Fmoc-甘氨酸首先与DCC反应，然后加入DMF使反应中产生的沉淀溶解，再加入DMAP催化，使活化的Fmoc-甘氨酸与羟基树脂缩合，生成Fmoc-甘氨酸－王氏树脂。当合成产物结合率低于60％，可重复这一工艺。结果：第一轮制备产物的交换当量为0.15mmol/g，结合率为31．7％；第二轮产物结合率低于60％，可重复这一工艺。结果：第一轮制备产物的交换当量为0.15mmol/g，结合率为31．7％；第二轮产物的交换当量和结合率分别为0.27mmol/g和57．08％；第三轮产物的交换当量及结合率分别是0.32mmol/g和67．6％。结论：结果表明，该工艺反应时间短，第一轮产物的结合率较为满意，第二轮，第三轮反应可显著提高产物的结合率。     

巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在O-2A谱系细胞中的表达

目的 观察O-2A（oligodentrocyte-type-2 astrocytes）谱系细胞是否是表达神经干细胞的标志物。方法 取新生大鼠脑皮质体外培养纯化的O-2A祖细胞、少突胶质细胞和2型星形胶质细胞,应用激光共聚焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白（nestin）和阶段特异性胚胎抗原-1（SSEA-1）的表达。结果 nestin在O-2A祖细胞和2型星形胶质细胞中表达,在少突胶质细胞中不表达;SSEA-1仅在2型星形胶质细胞中表达。结论 nestin和SSEA-1在O-2A谱系细胞中的表达存在差异,可能具有神经干细胞的特征。     

ICAM-1表位模拟肽的合成与鉴定

目的对合成的ICAM-1模拟肽P1(KLYLIAEGSVAA)的抗原性及生物活性进行鉴定。方法化学合成ICAM-1模拟肽KLYLIAEGSVAA,以间接ELISA及竞争抑制试验鉴定合成肽的抗原性,以玻片免疫组化方法鉴定合成肽的生物活性。结果合成肽能与抗ICAM-1单抗15．2发生特异性结合,并且能够竞争抑制ICAM-1分子及相应的阳性噬菌体克隆与单抗15．2的结合作用。玻片免疫组化显示合成肽及ICAM-1分子均能有效抑制相应的阳性噬菌体展示肽与白细胞的结合。结论合成的短肽具有ICAM-1与15．2抗体结合的抗原性,并能有效模拟ICAM-1分子与白细胞结合的功能。     

丁酸钠上调白血病K562细胞CYP1A1和1B1基因的表达

目的 研究丁酸钠(NaB)在诱导白血病K562细胞分化过程中,对细胞色素CYP1A1/1B1基因转录的作用及作用机制.因为与肿瘤发生发展密切相关,细胞色素P450s(CYPs)已经成为最有潜力的抗肿瘤药物的靶标.对于白血病细胞中这些基因表达机制的研究将有助于揭示它们在造血过程以及血液肿瘤发生中的作用.方法 丁酸钠诱导K562细胞分化,RT-PCR检测CYP1A1/1B1转录水平的变化,染色质免疫沉淀(ChIP)分析乙酰化组蛋白H3和组蛋白乙酰转移酶p300与CYP1A1/1B1启动子的结合情况.结果 丁酸钠在诱导白血病K562细胞分化过程中,促进了组蛋白乙酰转移酶p300与启动子区域的结合、升高了CYP1A1/1B1基因启动子组蛋白H3乙酰化修饰水平、上调了CYP1A1/1B1基因的转录.结论 组蛋白乙酰化修饰和组蛋白乙酰转移酶p300参与了丁酸钠诱导的白血病K562细胞CYP1A1/1B1基因的转录.