青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中TGF-β1、TNF-α的影响

[摘要] 目的 观察青蒿琥酯对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中转化生长因子（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法 40只大鼠气管内注入博莱霉素复制肺纤维化模型后,分为青蒿琥酯干预组和模型组,另取20只大鼠为正常对照组。各组动物于造模后第7,14,21,28天分别处死5只。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。测定肺泡灌洗液（BALF）中TGF-β1及TNF-α和肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP) 的浓度;通过HE染色、Masson染色观察肺组织形态的变化。结果 ①第7天,模型组肺泡炎明显,青蒿琥酯组病变较轻微;第28天,模型组出现肺纤维化和蜂窝肺;青蒿琥酯干预组病变明显减轻。②各时间点青蒿琥酯干预组肺组织HYP含量较模型组明显下降(P<0.01) ③各时间点模型组BALF中TGF-β1及TNF-α的水平均高于对照组,青蒿琥酯干预组以上各指标均较模型组降低。结论 TGF-β1及TNF-α是肺间质纤维化进展的重要因子,青蒿琥酯能抑制TGF-β1及TNF-α的表达,对博莱霉素诱发的肺纤维化有阻断作用。 [关键词] 转化生长因子 肿瘤坏死因子-α 肺间质纤维化 青蒿琥酯     

青蒿琥酯对肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中TGF-β1及TNF-α的影响

目的观察青蒿琥酯对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法40只大鼠气管内注入博莱霉素复制肺纤维化模型后,分为青蒿琥酯干预组和模型组,另取20只大鼠为正常对照组。各组动物于造模后第7,14,21,28天分别处死5只。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。测定肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1及TNF-α和肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的浓度;通过HE染色、Masson染色观察肺组织形态的变化。结果①第7天,模型组肺泡炎明显,青蒿琥酯组病变较轻微;第28天,模型组出现肺纤维化和蜂窝肺;青蒿琥酯干预组病变明显减轻。②各时间点青蒿琥酯干预组肺组织HYP含量较模型组明显下降(P<0.01)③各时间点模型组BALF中TGF-β1及TNF-α的水平均高于对照组,青蒿琥酯干预组以上各指标均较模型组降低。结论TGF-β1及TNF-α是肺间质纤维化进展的重要因子,青蒿琥酯能抑制TGF-β1及TNF-α的表达,对博莱霉素诱发的肺纤维化有阻断作用。     

N-乙酰半胱氨酸对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N acetylcysteine,NAC）对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及可能的机制.方法 100只SD雄性大鼠随机分为健康对照组、肺纤维化模型组、地塞米松干预组和NAC干预组,每组25只.各组分别于第1,3,7,14,28 d各处死5只,收集肺组织作切片行HE和Masson染色判断肺组织肺泡炎和肺纤维化程度,行免疫组化测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）,收集血清和支气管肺泡灌洗液行Elisa检测TGF-β1,收集肺组织检测羟脯氨酸含量.结果与模型组比较,两个干预组的肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻（P〈0.05）,肺组织TGF-β1的蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,血清和支气管肺泡灌洗液的TGF-β1的蛋白表达水平明显降低（P〈0.05）,其中NAC干预组较地塞米松干预组更为显著（P〈0.05）,与模型组比较,两个干预组的羟脯氨酸含量也明显降低（P〈0.05）,其中NAC干预组较地塞米松干预组更为显著（P〈0.05）.结论 NAC具有与地塞米松相似的较强的抗纤维化效应,机制可能为通过抑制细胞因子TGF-β1的表达来抑制肺纤维化.     

γ干扰素后期干预对大鼠肺纤维化影响

目的：观察γ干扰素（IFN-γ）对博莱霉素（BLM）诱导的肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IFN-γ和白细胞介素10（IL—10）的变化，探讨IFN-γ可能的调节作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组、BLM组和IFN-γ组。一次性气管内注入BLM造模后，于第15d开始给药，分别于第17、21和28d处死，对苏木精-伊红染色（H-E）病理结果行半定量分析；用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定BALF中TNF-α、IFN-γ和IL-10的含量；用消化法测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果：①IFN-γ组和BLM组于造模后第17d起肺泡炎症和肺纤维化的程度及羟脯氨酸含量显著重于正常对照组（P〈0．01）；②IFN-γ组BALF中TNF-α含量于造模后第17d起显著高于正常对照组和BLM组（P〈0．01）；IFN-γ于造模后第21和28d显著高于其余两组（P〈0．05）；IL-10于造模后第17d显著高于对照组（P〈0．01）。结论：IFN-γ在BLM致大鼠肺纤维化的形成阶段增加BALF中的TNF-α、IFN-γ和IL-10含量，对肺纤维化无明显改善作用。     

大鼠慢性阻塞性肺病模型体内TNF-α和VEGF含量的变化及其意义

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF—α）及血管内皮生长因子（VEGF）在慢性阻塞性肺病（COPD）发病中的作用。方法香烟熏吸法复制COPD大鼠模型。将20只清洁级Wister大鼠随机分为对照组和COPD模型组，每组各10只。肺组织切片行苏木精-伊红染色，测定两组大鼠血清、肺组织匀浆及支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF—α和VEGF的含量，并用RT-PCR法测定肺组织中VEGF mRNA的表达。结果模型组大鼠血清、肺组织匀浆及BALF中TNF-α含量较对照组明显升高（P〈0．01），而VEGF的含量较对照组有明显降低（P〈0．01，P〈0．05）。模型组大鼠肺组织内VEGF的表达较对照组有明显下降（P〈0．05）。结论TNF-α和VEGF参与了COPD的发病过程且在COPD细胞凋亡过程中起重要作用。     

骨髓间充质干细胞对肺损伤大鼠的治疗作用

目的:观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠肺损伤的治疗作用.方法:将SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体大鼠体内.将受体大鼠分为4组:肺损伤组、MSCs治疗组、MSCs对照组和正常对照组.2 wk后观察肺组织结构、植入细胞的变化,同时检测支气管肺泡灌洗液中层黏连蛋白、透明质酸以及肺组织羟脯氨酸含量的变化.结果:MSCs治疗组大鼠肺组织中可见少量DAPI标记的细胞,其中部分细胞表达广谱细胞角蛋白,肺间质增生减轻;支气管肺泡灌洗液中层黏连蛋白、透明质酸及肺组织羟脯氨酸的含量在肺损伤组均有明显升高(P＜0.01),而在MSCs治疗组均有所下降(P＜0.01).结论:MSCs可在损伤的大鼠肺组织中分化为肺泡上皮细胞,降低支气管肺泡灌洗液中层黏连蛋白、透明质酸及肺组织羟脯氨酸的含量,减轻大鼠肺损伤及纤维化的形成.     

改良吸烟复合气道内注入LPS法COPD大鼠模型的建立

目的对大鼠被动吸烟复合气道内注入脂多糖（lipopolysaccharide,LPs）法建立慢性阻塞性肺病（COPD）模型进行改良,通过比较模型大鼠肺功能、肺组织病理学改变、支气管肺泡灌洗液细胞分类计数及TNFα浓度、模型制作成功率和死亡率等指标评价改良烟熏复合气道内注入LPS法COPD大鼠模型的有效性。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和改良模型组三组,予正常组大鼠常规喂养,模型组采用第1及第15天气道内注入1g／ml LPS0.2ml（当天不行香烟熏染）,第2-28天行每日3次（每次间歇2h）,每次10支香烟熏染30min。改良模型组除调整第15天气道内注入LPS剂量为0.1ml,第2-7天每次香烟熏染剂量为5支外,其余同对照组。于第29天比较三组大鼠的肺功能、肺组织病理学改变及支气管肺泡灌洗液TNFα浓度、模型制作成功率。结果与正常组比较,模型组、改良模型组COPD模型大鼠气道阻力、支气管肺泡灌洗液TNF仪浓度明显高于正常组,两者肺顺应性明显低于正常组,结果有显著统计学差异（P〈0.05）。结论改良大鼠被动吸烟复合气道内注入LPS法是更为经济、稳定和可靠的大鼠COPD造模方法。     

通腑法通腑利肺作用机制的实验研究

目的 从整体、细胞及分子3个层面探讨通腑法通腑利肺的作用机制。方法 将40只SD大鼠随机等分为正常对照组、模型组、解扎组及治疗组，每组各10只，采用体外直肠不全结扎法造模。然后用放射免疫分析法检测各组血清IL-8含量，RT-PCR法检测肺组织TNFα mRNA水平，检测各组支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中肺泡巨噬细胞（pulmonary alveolar macrophage，PAM）死亡百分率，并将通腑治疗组、解扎组与模型组及正常对照组对照。结果 模型组血清IL-8含量明显高于正常对照组（P〈0．01），肺组织TNF-α mRNA表达明显增高（P〈0．01）；通腑法治疗后IL-8含量和TNF-α mRNA表达均低于模型组（P〈0．01）。且肺损伤程度减轻。结论 IL-8、TNF-α在肠源性肺损伤过程中起重要作用。通腑法对损伤肺组织起保护作用。     

人工冬虫夏草菌液对大鼠肺纤维化早期抗氧化作用的研究

[摘要] 目的 探讨人工冬虫夏草菌液（虫草菌液）对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化早期抗氧化的作用。方法 48只SD大鼠,随机分为6组：正常对照组,模型组,强的松治疗组,虫草菌液低剂量1.5 g∕(kg·d）,中剂量5 g∕(kg·d）,高剂量10 g∕(kg·d）治疗组。采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给予生理盐水、生理盐水、强的松、虫草菌液（低、中、高剂量）灌胃治疗,第14天处死动物,肺组织标本进行病理形态学观察及肺泡炎评分,肺组织免疫组化检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS),肺泡灌洗液（BALF）检测肿瘤坏死因子α(TNF-α) 、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛(MDA) 含量。结果 虫草菌液和强的松能够减轻肺组织肺泡炎,降低BLAF中TNF-α、MDA含量,提高GSH、SOD含量,下调肺组织iNOS蛋白表达水平。结论 虫草菌液对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化早期肺泡炎有治疗作用,机制可能是通过下调TNF-α、iNOS等细胞因子的表达、减少脂质过氧化物的释放而达到抗氧化作用。     

灯盏花素对油酸性急性肺损伤家兔TNF-α的表达及呼吸功能的影响

目的 探讨灯盏花素对油酸性急性肺损伤时TNF-α的表达和呼吸功能的影响。方法 健康新西兰家兔40只，随机分为单纯复制油酸性肺损伤的模型组和使用灯盏花素治疗的治疗组，每组20只，对比两组家兔膈神经放电曲线、免疫组化显示的肺组织TNF-α的表达情况、外周血和支气管肺泡灌洗液中TNF-α水平。结果 治疗组家兔的呼吸曲线的幅度、强度、持续时间均高于模型组（P<0.05）；治疗组家兔肺组织TNF-α的表达弱于模型组（P<0.05）；同时治疗组家兔外周血和支气管肺泡灌洗液中TNF-α水平低于模型组（P<0.05）。结论 灯盏花素可能通过抑制TNF-α的表达，减轻油酸性肺损伤，从而保护呼吸功能。