内眼手术并发脉络膜上腔出血的处理与危险因素分析

背景 脉络膜上腔出血(SCH)是一种少见但严重威胁视力的内眼手术并发症,控制SCH的危险因素并给予合适的治疗非常重要. 目的 探讨内眼手术(白内障摘出术、青光眼阀植入术和玻璃体切除术)并发SCH的处理和危险因素. 方法 采用回顾性系列病例研究设计,分析1998年5月至2009年7月在北京协和医院眼科就诊的因内眼手术并发SCH患者15例15眼的临床资料,分析发生SCH的危险因素.所有患者均给予全身及眼局部药物治疗,有手术指征者施行后巩膜切开术和/或玻璃体切除术,分析治疗方法及效果.本组患者中10眼SCH发生于术中,5眼发生于术后1～3d.8眼施行巩膜切开术引流脉络膜上腔积血,其中3眼联合玻璃体切除术;7眼行单纯药物治疗. 结果 治疗后12眼脉络膜上腔积血完全吸收.治疗后视力提高者6眼,视力无变化者6眼,视力下降者3眼.9眼合并视网膜脱离,其中6眼视网膜复位.7眼合并高度近视,6眼有青光眼,1眼为无晶状体眼.4例患者合并高血压病,2例为糖尿病患者. 结论 内眼手术并发SCH时发病急骤,术中发生SCH者处理方法为立即关闭切口,视病情施行巩膜切开术引流,同时给予静脉滴注高渗制剂降低眼压.术后发生SCH者可根据出血范围及合并症选择药物治疗或巩膜切开术.高度近视、眼压突然下降和青光眼等为发生SCH的常见危险因素.     

巩膜切开术治疗严重眼外伤脉络膜上腔出血

目的评价巩膜切开术治疗严重外伤眼脉络膜上腔出血的疗效。方法对18例（18眼）因严重眼外伤致脉络膜上腔出血行巩膜切开联合玻璃体切除术治疗。在睫状体平坦部做巩膜切口,必要时于赤道前做放射状巩膜切口引流脉络膜上腔积血,然后行玻璃体切除术,术终眼内填充气体或硅油。结果经睫状体平坦部切口脉络膜上腔积血引流充分者11眼;7眼需要另外做放射状巩膜切口引流,其中3眼完全复位,4眼部分复位。2眼因合并脉络膜破口,术后硅油进入脉络膜上腔。2眼因眼球萎缩而摘除眼球。结论巩膜切开术可以有效引流眼外伤所致脉络膜上腔出血。有脉络膜破口的出血性脉络膜脱离是治疗的难点,预后差。     

基于二氯代环二聚体的微电极阵列芯片兔眼脉络膜上腔植入术的实验研究

目的 探讨基于二氯代环二聚体的微电极阵列(microelectrode array,MEA)芯片兔眼脉络膜上腔植入的手术方法及并发症和该芯片的组织相容性.方法 12只健康成年青紫兰兔,左眼为术眼,右眼为对照眼,于鼻下方角膜缘后6.0 mm处切开巩膜,暴露脉络膜,将MEA芯片放置于兔眼脉络膜上腔,术后3 d、14 d、1个月时用裂隙灯显微镜观察眼前节情况,用间接检眼镜观察玻璃体、视网膜及芯片情况,用OCT进行眼底扫描及眼底照相.结果 12眼均成功植入MEA芯片,其中1眼发生脉络膜、视网膜破裂,缝合切口后在另一眼植入芯片;5眼在术中发生脉络膜出血,待出血停止后再切除血块继续手术;2眼发生芯片前端折叠,取出芯片展平后重新植入.术后眼底检查、OCT检查及组织病理学检查发现芯片位置稳定,未见明显的视网膜、脉络膜损伤.结论 兔眼脉络膜上腔MEA芯片植入术是一种安全有效的MEA芯片植入方式,二氟代环二聚体MEA芯片组织相容性良好.     

暴发性脉络膜上腔出血的模型改良及其病理学研究

背景暴发性脉络膜上腔出血是内眼手术过程中最严重的并发症,目前多为个案报告。建立理想的暴发性脉络膜上腔出血动物模型对研究其自然病程、预防和治疗具有重要意义。目的对已有的暴发性脉络膜上腔出血动物模型的建立方法进行改良,并探讨暴发性脉络膜上腔出血的病因、发病机制、相关危险因素及其对视网膜组织和视功能的损害情况。方法采用改良的Zauberman结扎涡静脉法结扎15只成年家兔的巩膜涡静脉,同时用耳缘静脉快速滴注生理盐水法迅速升高眼压,然后经角膜缘切口快速降低眼压,制备暴发性脉络膜上腔出血动物模型。于术后即刻及术后1、2、4周行B型超声检查脉络膜出血情况和视网膜脱离情况,同时光学显微镜下观察上述各时间点视网膜组织和细胞的病理形态学改变。结果暴发性脉络膜上腔出血动物模型制备的成功率为100％,其病程与临床自然转归相符。B型超声检查确定了脉络膜出血的形态、部位和性质,显示出血和视网膜脱离随着时间的延长逐渐好转。眼球组织病理学检查显示Bruch膜和视网膜色素细胞层破裂,大量红细胞进入脉络膜上腔和玻璃体内,术后1周视网膜的组织学改变以细胞变性、水肿和坏死为主,术后4周以纤维母细胞及胶原纤维增生等修复性改变为主。结论采用改良的Zauberman结扎涡静脉配合静脉快速滴注生理盐水法建立暴发性脉络膜上腔出血模型的成功率高。高眼压持续后的眼压骤降是暴发性脉络膜上腔出血的主要危险因素。暴发性脉络膜上腔出血可造成脉络膜和视网膜组织细胞的严重破坏。     

23G后节灌注辅助下的巩膜扣带术治疗球形视网膜脱离

目的：观察23G后节灌注辅助下的巩膜扣带术治疗球形视网膜脱离的疗效,探讨其可行性。

方法：选取我院2017-02/2018-02被确诊为孔源性视网膜脱离且视网膜下液较多、呈球形脱离外观的患者21例21眼,在行巩膜扣带术中引流视网膜下积液前于睫状体扁平部预置23G后节灌注,术中对裂孔未作凝固处理,术后裂孔周围行激光光凝治疗。术后随访观察3～10mo,观察视网膜复位和并发症情况。

结果：所有患者手术过程顺利,术中均引流出视网膜下液并未见脉络膜出血和视网膜嵌顿; 术后第1d视网膜完全复位者18眼; 术后2～3d残留视网膜下液吸收完毕者2眼,视网膜脱离未复位者1眼,经再次外加压块调位术后视网膜复位,术后视网膜脱离复发者1眼,经玻璃体手术后视网膜复位。术中有视网膜下出血者1眼,出血范围<1PD,3mo后吸收,未见眼压异常、眼前段缺血和其他严重并发症。

结论：在球形视网膜脱离的巩膜扣带术中引流视网膜下积液前预置灌注,可有效维持术中眼内压平稳,减少因引流视网膜下积液时眼压过快下降导致的爆发性脉络膜上腔出血和术后发生脉络膜脱离的可能性,同时术中视网膜基本趋于平伏,裂孔定位相对准确,可提高手术成功率。     

内眼手术术中及术后暴发性脉络膜上腔出血的原因、处理和预后

目的　分析与评价内眼手术及术中术后暴发性脉络膜上腔出血的原因、处理和预后。方法　选取暴发性脉络膜上腔出血患者１１例,术前５例合并高度近视,４例合并高眼压,２例有既往内眼手术史,２例患者发生二次出血。出血后采取保守或于出血后１０～１６ｄ（平均１２．１ｄ）手术治疗。手术方法包括单纯后巩膜脉络膜上腔积血穿刺放液术,或联合玻璃体切割及硅油填充术。结果　１１例患者中有７例发生于术中,４例发生在术后１～３ｄ,约占同期我科内眼手术的０．１５％（１１／７２０４）。１１例患者中,２例保守治疗,４例行单纯后巩膜脉络膜上腔积血穿刺放液术,１例行玻璃体切割及后巩膜脉络膜上腔积血穿刺放液术,另外４例行玻璃体切割硅油填充及后巩膜脉络膜上腔积血穿刺放液术。平均随访８．２个月,术后７例患者视力改善,１例无变化,３例恶化。结论　术前高眼压、高度近视及既往内眼手术史是暴发性脉络膜上腔出血的高危因素。通过术中迅速关闭切口,术后采取保守治疗,择机行后巩膜脉络膜上腔积血穿刺放液术,视网膜脱离时联合玻璃体切割术,可保留患者部分视力。     

复杂眼外伤合并脉络膜上腔出血的综合治疗

目的 探讨复杂眼外伤合并脉络膜上腔出血的综合治疗.方法 对12例(12眼)复杂眼外伤合并脉络膜上腔出血行药物及手术治疗.早期应用皮质类固醇及脱水剂,通过B超监测选择手术时机,由睫状体平坦部巩膜切口引流脉络膜上腔积血,同时行玻璃体切除联合视网膜手术,术中眼内填充膨胀气体或硅油.结果 12例均成功引流脉络膜上腔积血,脉络膜和视网膜复位.术后随访5-24个月,视功能改善者8眼(66.67%),眼球全部保存.结论 采用皮质类固醇、高渗剂药物治疗及玻璃体手术相结合的方法,治疗复杂眼外伤合并脉络膜上腔出血,可以取得较好的效果.     

兔眼出血性视网膜脱离后的超微结构变化

目的：观察兔出血性视网膜脱离（hemorrhagic retinal detachment,HRD）模型的超微结构变化。 方法：18只健康青紫蓝兔的36眼随机分为HRD组（视网膜下腔注入0．2mL自体抗凝血）和肝素盐水组（视网膜下腔注入0．2mL肝素盐水）。于HRD模型建立后1h;1,3,7,14和28d制作超薄切片,行透射电镜观察。 结果：HRD组透射电镜下,早期光感受器外节膜盘脱落、破碎,内节线粒体高度肿胀,随后光感受器外节脱落、消失,内节变性破碎,内外核层出现核固缩、核碎裂,细胞数目减少,14d后原注血区部分视网膜缺失。 结论：超微结构观察发现HRD对视网膜的损伤是涉及视网膜多层组织的严重的不可逆损害。     

合并脉络膜脱离的视网膜脱离的临床观察

目的:探讨合并脉络膜脱离的视网膜脱离手术治疗方法和手术时机的选择并观察疗效。方法:总结、分析2010-01/2012-01因视网膜脱离合并脉络膜脱离在我院住院的患者45例45眼,其中原发性裂孔源性视网膜脱离合并脉络膜脱离38例,复发性视网膜脱离合并脉络膜脱离7例。手术方法包括巩膜环扎、经巩膜穿刺口脉络膜上腔引流、玻璃体视网膜手术、眼内光凝、C3F8填充术或硅油填充术。结果:患眼45眼均行巩膜环扎术,均于手术中成功引流脉络膜上腔液体,6眼行C3F8填充,39眼行硅油填充术,45眼视网膜脉络膜全部复位,视网膜裂孔封闭。其中23眼术后视力≥0.1。结论:合并脉络膜脱离的视网膜脱离,采用巩膜环扎和玻璃体视网膜手术联合经巩膜穿刺口脉络膜上腔积液引流的联合手术方式有效。     

驱逐性脉络膜上腔出血的危险因素和预后分析

目的分析驱逐性脉络膜上腔出血的危险因素及其预后.方法 16例(16只眼)术中或术后发生的驱逐性脉络膜上腔出血,2例药物治疗,14例于出血后平均13.6天采用手术处理,先从角膜缘持续灌注,赤道部1或2个巩膜切口引流脉络膜上腔积血,睫状体脱离回复后改从平坦部灌注,行闭合式玻璃体切除视网膜复位术.结果 12例术中发生的均有眼内压突然下降,4例术后发生者均有明显低眼压,高度近视眼6例,7例记录术中心率加快.14例均成功引流脉络膜上腔积血,积血为巧克力色,无血凝块.经平均9.2个月随访,4例眼球萎缩,12例视力有提高,其中7例视力≥0.1.结论术中眼内压突然下降和持续低眼压、青光眼、高度近视等可能为发生驱逐性脉络膜上腔出血的危险因素.及时关闭切口,控制眼压,适时选择手术,引流脉络膜上腔积血联合玻璃体视网膜手术是处理驱逐性脉络膜上腔出血的有效方法,可明显改善预后.     

青光眼术后迟发性脉络膜上腔出血9例的临床观察

目的:分析青光眼术后迟发性脉络膜上腔出血的危险因素及其预后。方法:对我院自2003-04/2009-12行抗青光眼手术后发生迟发型脉络膜上腔出血的9例患者的临床资料进行整理分析。结果:患者9例9眼术后发生的迟发性脉络膜上腔出血,其中高度近视眼2例,婴幼儿青光眼3例,2例复杂青光眼联合前房人工晶状体取出术,1例无玻璃体眼,另外1例老年患者伴有全身血管性疾病。均于小梁切除术后1~7d发生。早期均药物治疗,1例于出血后11d采用手术处理,成功引流脉络膜上腔积血,余8例出血自行吸收。经平均14mo随访,无眼球萎缩,其中1例视力1.0,3例婴幼儿患者不能配合检查,其余患者术前术后视力无明显变化。4例于1~12mo出现眼压再次升高。结论:术前长时间高眼压、术中眼内压突然下降和持续低眼压、无玻璃体眼、高度近视、复杂青光眼及婴幼儿青光眼等可能为发生迟发性脉络膜上腔出血的危险因素。发生迟发性脉络膜上腔出血后可先给予药物治疗观察,若出血不能吸收,可考虑手术引流脉络膜上腔积血改善预后。     

地塞米松对玻璃体积血兔视网膜病理变化的影响

目的:观察地塞米松(dexamethasone,Dxm)对兔玻璃体积血后视网膜病理变化的影响。方法:白兔24只,随机分为实验对照组(A),积血组(B)和Dxm干预组(C),每组8只。A组玻璃体内注入生理盐水0.2mL,B组、C组玻璃体内注入自体血0.2mL;注入后1,24,48h,A和B组给予生理盐水3mL/kg,C组给予Dxm3mg/kg。分别于造模后3,7,14,21d随机处死每组中的2兔4眼观察视网膜病理变化。结果:A组所有时间点,B组3,7d,C组3,7,14d视网膜形态正常。B组14d神经节细胞、内丛状层水样变性;21d视网膜内界膜不完整,内、外核层细胞和光感受器内、外节水样变性。C组21d神经节细胞染色变淡,内丛状层、内核层水样变性。结论:玻璃体积血可引起视网膜细胞水样变性,Dxm可缓解玻璃体积血后视网膜水样变性。     

视网膜挫伤兔模型的病理学观察

目的:建立视网膜挫伤的动物模型,观察视网膜损伤后的形态特点。方法:选取40只健康成年无眼疾青紫蓝兔,随机分为挫伤后1,3h;1,3,7,14,30d及正常对照共8组,每组5只,选取右眼为致伤眼,以改良Allen重击法制备兔单眼挫伤性视网膜病变模型,挫伤后获取兔眼标本,以光镜及电镜观察视网膜神经感觉层的病理变化,目镜测微尺(0.01mm)对视网膜神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)厚度、内核层(inner nucler layer,INL)厚度进行测量,并对视网膜神经节细胞(ganglion cell,GC)计数。结果:挫伤后1,3h组和1d组NFL明显增厚(P<0.05),而7d组和14d组NFL明显变薄(P<0.05),3d组和30d组NFL厚度与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05);各挫伤组GC计数明显少于正常对照组(P<0.05)。电镜显示挫伤后3h组;1,3d组视网膜神经感觉层均出现较多的,具有凋亡形态学与生化改变特征的凋亡细胞,其中在3d组视网膜神经感觉层凋亡细胞数量达到高峰,7d组显著下降。结论:视网膜水肿和神经感觉层细胞凋亡是挫伤性视网膜病变的一个重要机制。     

兔出血性视网膜脱离模型B超与光学相干断层成像观察

目的　观察兔出血性视网膜脱离 (hemorrhagicretinaldetachment,HRD)模型的视网膜脱离状态及视网膜下血液吸收过程。方法　 10只健康青紫蓝兔设立HRD组及肝素盐水组、盐水组、假注射组和正常组 4组对照 ,通过玻璃体腔向视网膜神经感觉层下注射 0 .2mL自体抗凝血制成HRD后 1h ,1、3、7、14和 2 8d行B型超声和光学相干断层成像(opticalcoherencetomography ,OCT)检查。结果　B超显示 :HRD组 :早期呈明显的中高密度回声光带 ,光带与球后壁间为致密回声光点 ,隆起高度逐渐降低 ,14d后光带及光点基本消失 ;对照组视网膜脱离的中高密度回声光带 1d后基本消失。OCT显示 :HRD组 :早期视网膜神经感觉层隆起、增厚 ,随后逐渐变薄 ,2 8d时下方视网膜仍可见隆起的神经感觉层及少量血液 ;视网膜脱离组 :隆起的神经感觉层于 3d后大部分复位 ,脉络膜反光增强。结论　B超及OCT对HRD均能作出较为明确的诊断 ,2者结合可更全面有效的观察到HRD视网膜下血液吸收缓慢 ,视网膜明显变薄。     

玻璃体积血对兔眼视网膜影响的研究

目的　观察兔眼玻璃体积血后不同时间视网膜电图（electroretinogram，ERG）及超微结构的变化，为玻璃体积血治疗及预后评估提供实验依据。方法　新西兰大白兔32只，右眼均为实验眼，自体全血0.2 mL玻璃体内注射构建玻璃体积血模型，左眼为空白对照眼。随机分为4组，分别于造模后3 d、7 d、14 d及30 d选取一组常规检查后记录ERG的变化，随后处死动物立即摘取眼球制备标本观察超微结构。结果　实验性玻璃体积血3 d后常规ERG波形消失，造模后7 d逐渐出现。强闪光源刺激下，造模后3 d实验眼ERG的b波振幅与a波振幅与对照眼相比均明显降低（均为P＜0.01）。a波振幅在造模后30 d明显恢复，与对照眼无明显差异（P＞0.05），较造模后14 d差异有统计学意义（P＜0.05）；b波振幅在造模后7 d时开始回升，与对照眼无明显差异（P＞0.05），较造模后3 d差异有统计学意义（P＜0.05），造模后14 d及30 d接近正常。扫描电镜显示实验眼造模后3 d无玻璃体后脱离（posterior vitreous detachment，PVD）发生，造模后7 d部分性PVD占1/8，完全性PVD占1/8，造模后14 d部分性PVD占2/8，完全性PVD占5/8，造模后30 d部分性PVD占1/8，完全性PVD占7/8；对照眼各阶段未见PVD发生。结论　玻璃体积血后约1周可轻度可逆地影响视网膜功能并加速导致PVD形成，为实验及临床判断玻璃体积血后视网膜功能变化和临床玻璃体手术治疗的时间窗的选择提供了参考。     

结膜下注射丝裂霉素C的抗瘢痕化效果和安全性研究

目的　研究结膜下注射丝裂霉素Ｃ（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ,ＭＭＣ）对兔眼瘢痕化模型的抗瘢痕化效果及对兔眼局部组织的毒副作用,探讨其作为青光眼滤过性手术后抗瘢痕形成辅助用药的可行性及有效性。方法　取１８只健康成年新西兰大白兔,随机分为３组,分别为Ａ组、Ｂ组和Ｃ组,每组１２眼,建立实验性瘢痕化模型。Ａ组术后３ｄ结膜下注射０．４ｇ?Ｌ－１的ＭＭＣ０．３ｍＬ,Ｂ组术中巩膜瓣下放置浸泡０．４ｇ?Ｌ－１ＭＭＣ的棉片５ｍｉｎ,Ｃ组术后３ｄ结膜下注射生理盐水（ｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅ,ＮＳ）０．３ｍＬ。应用结膜印迹细胞学检查观察结膜损伤情况。分别于术后７ｄ、１４ｄ、２８ｄ分批处死实验兔,摘出眼球,应用免疫组织化学染色检查观察成纤维细胞增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达情况,应用光镜观察手术部位的病理改变。结果　术后３组均未出现结膜伤口渗漏,Ａ组、Ｂ组角膜上皮点状缺损于术后１周消失,Ｃ组无角膜上皮点状缺损。结膜印迹细胞学检查显示Ａ组和Ｂ组结膜印迹细胞分级均为２～３级,Ｃ组为２级。术后７ｄ、１４ｄ、２８ｄ光镜下,Ｃ组手术区球结膜下炎性细胞、纤维细胞、新生毛细血管增多,纤维组织增生较Ａ组和Ｂ组显著。免疫组织化学染色结果显示,术后７ｄ,Ａ组、Ｂ组、Ｃ组每高倍视野ＰＣＮＡ阳性细胞计数分别为（１２．８３±２．０８）个、（１４．３７±３．７６）个、（２８．１２±６．７４）个;术后１４ｄ,３组ＰＣＮＡ阳性细胞计数分别为（１３．８１±１．５３）个、（１６．２８±３．７８）个、（２５．６７±４．４５）个;术后２８ｄ,３组ＰＣＮＡ阳性细胞计数分别为（１１．９６±１．４５）个、（１３．０７±２．０４）个、（１７．６９±３．１１）个;相应时间点,Ａ组、Ｂ组ＰＣＮＡ阳性细胞计数均较Ｃ组少（均为Ｐ＝０．０００）,但Ａ组与Ｂ组间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　结膜下注射ＭＭＣ能有效抑制手术后术区的瘢痕化,与术中常规应用ＭＭＣ相比,其对结膜的损伤程度无明显差异,对其进一步研究有望为青光眼滤过手术后抗瘢痕化提供一种使用方便、安全、有效的局部用药方式。     

兔自体静脉移植修复泪小管后植入静脉段病理变化的观察

目的 观察兔自体静脉移植修复泪小管后植入静脉段的病理变化.方法 实验研究.60只兔,切断一侧泪小管制作泪小管断裂模型,取自体静脉移植修复.常规病理学及免疫组织化学染色观察术后1、3、5、7、14、28 d植入静脉段管壁结构的组织学变化、细胞增殖情况;扫描电镜观察管腔细胞超微结构特点.结果 60只兔均造模成功,术后植入静脉段血管内皮细胞逐步脱落,术后7 d新生泪小管上皮移行覆盖植入静脉段管腔,扫描电镜可见部分上皮细胞形态变异,间有部分暴露的内皮下层纤维胶原结构,术后28 d管腔由形态均一的复层扁平上皮覆盖完全,扫描电镜下未见上皮缺损;上皮下结缔组织层可见炎性细胞浸润,平滑肌细胞退化,成纤维细胞增殖,植入静脉段管壁改建需28 d以上.结论 兔自体静脉移植修复泪小管后,植入静脉段管腔血管内皮细胞脱落,新生泪小管上皮移行覆盖;植入静脉段管壁组织结构改建成活.

Abstract：

Objective To observe the pathological changes of grafted vein after repairing lacrimal canaliculus with autogenous vein graft in rabbits. Methods Experimental research. Sixty rabbits were used in the present study. One side of lacrimal canaliculus was disconnected to produce an experimental model.The canaliculus injury was repaired by autogenous vein graft. Pathological changes and cell proliferation of grafted vein segment were observed by routine HE stain and immunohistochemistry. The cell ultrastructure changes were observed by scanning electron microscope at 1, 3, 5, 7, 14 and 28 day after the operation.Results Experimental models were successfully established in 60 rabbits. Endothelial cells of grafted vein segment gradually disappeared after operation, the vein lumen was covered by canalicular epithelial cells 7 days after the operation. At the same time some variations of epithelial cells and exposed collagen fiber structure in subendothelial layer were found by scanning electron microscope. The vein lumen was completely covered with stratified squamous epithelium 28 days after the operation and no epithelial defect could be found by scanning electron microscope. Inflammatory cell infiltration, smooth muscle cell degeneration and fibroblast proliferation were observed in the subepithelial connective tissues. The reconstruction of propria lamina required more than 28 day. Conclusion After autogenous vein graft repairing lacrimal canaliculus,endothelial cells of grafted vein were replaced by canalicular epithelial cells and the propria lamina of grafted vein segment was reconstructed.     

Experimental studies of retinal glial cell proliferation on retinal surface

Our previous reports described the formation processes of epiretinal membranes composed of retinal glial cells in the experimental vitreous hemorrhage. This report presents the pathological changes of retinal glial cells, inner limiting membranes and vitreous body in the early stage of experimental vitreous hemorrhage. Using an operating microscope, 0.3 ml of autologous whole blood was injected through the pars plana into the vitreous cavity of albino rabbits. The eyes were enucleated at 3, 7, 10, 14 and 28 days after injection. Three days after injection, normal vitreous structure disappeared and vitreous fibers condensed. Seven days after injection, red blood cells were found on the retinal surface. The inner limiting membrane, composed of lamina rara and lamina densa, had a normal appearance. Where the red blood cell were present on the retinal surface, the lamina rara of the inner limiting membrane became thin. Fourteen days after injection, where glial cells showed upheaval, lamina rara disappeared and lamina densa became thin. Afterward, glial cells extruded their cytoplasmic processes onto the retinal surface. Twenty-eight days after injection, the inner limiting membranes were normal in appearance except for the area of glial cells penetrating the inner limiting membranes. The results suggested that, in vitreous hemorrhage, glial cell proliferation onto the retinal surface is an active reaction in order to engulf the debris of the red blood cells.     

兔视网膜脱离后出现神经感觉层细胞凋亡

目的:研究实验性视网膜脱离(retinal detachment,RD)及脱离复位后神经感觉层细胞凋亡情况,探讨RD后视功能损害的机制为临床治疗提供理论基础。方法:健康成年无眼部疾病青紫兰兔40只,采用计算机随机数字表法分为RD后1,3h;1,3,7,14,28d组及正常对照组,共8组,每组5只,选取右眼为致伤眼,视网膜下注射透明质酸钠建立RD模型;分别于建立模型后按时获取兔眼标本,以TUNEL法观察视网膜神经感觉层细胞的凋亡情况。结果:视网膜脱离复位后存在着神经感觉层细胞凋亡现象,正常对照组、14d和28d组几乎不见凋亡细胞,脱离后1,3h;3,7d组在视网膜各细胞层均出现较多的、具有凋亡形态学与生化改变特征的凋亡细胞,其中在3d组视网膜感觉层细胞凋亡细胞数量达到高峰。视网膜神经感觉层凋亡细胞数目在1,3h;3,7d组之间两两比较均有显著性差异(P<0.01);1,3h;3,7d组与正常对照组、1h;1,28d组之间两两比较均有显著性差异(P<0.01);正常对照组、1h;14,28d组之间两两比较无显著性差异。结论:RD复位后,神经感觉层细胞发生凋亡。     

p21WAF1/CIP1在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的抑制作用

背景 p21是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,能阻止细胞从G1期进入S期,抑制细胞增生,研究认为内源性p21表达的动态变化可能与细胞增生性病变有关.外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼部增生性反应相关性疾病,了解PVR过程中p21表达的动态变化可能为PVR的靶向治疗提供依据.目的 检测p21WAFl/CIP1在兔外伤性PVR中的动态变化,探讨其在外伤性PVR发病机制中的作用.方法 选取青紫蓝兔54只,采用随机数字表法将实验兔随机分为正常对照组(6只)和造模后7、14、21和28 d组(每组12只),每只兔任意选取一眼作为实验眼.各模型组兔眼玻璃体腔注射人富含血小板血浆(PRP)0.4 ml,同时于鼻上方角巩膜缘后5 mm处行巩膜外冷冻约5 s,以建立外伤性PVR模型.各组兔眼行眼部B型超声检查以评估建模情况.分别于造模后7、14、21和28 d以过量麻醉法处死实验兔并制备实验眼视网膜组织切片,采用苏木精-伊红染色法检测兔眼视网膜的形态表现,分别采用免疫组织化学染色、Western blot及逆转录PCR(RT-PCR)法检测兔视网膜中p21WAFl/CIP1蛋白及其mRNA的相对表达. 结果 正常对照组兔眼眼前后节均正常,模型组兔造模后1～7 d兔眼玻璃体中增生条索逐渐变粗,可见视网膜皱褶,造模后14d兔眼出现牵引性视网膜脱离,造模后28 d兔眼漏斗状视网膜脱离.视网膜病理组织学检查显示,造模后7d兔眼视网膜表面有增生膜和炎性细胞聚集,造模后28 d可见视网膜呈花瓣形固定皱褶,视网膜结构紊乱.免疫组织化学染色显示,p21WAF1/CIP1蛋白在正常对照组兔眼视网膜神经节细胞层及内核层的细胞核内呈强阳性表达,造模后7、14、21和28 d表达强度减弱,以造模后14d表达量最低.Western blot结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为0.74±0.08、0.60±0.05、0.56±0.03、0.74±0.02和0.65±0.04,组间总体比较差异有统计学意义(F=20.55,P=0.00),造模后7d和14d的表达量均明显低于正常对照组和造模后21 d和28 d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).RT-PCR结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF/CIP1 mRNA的相对表达量分别为0.65±0.09、0.57±0.05、0.45±0.04、0.46±0.02和0.47±0.04,总体比较差异有统计学意义(F=18.06,P=0.00),造模后14、21和28 d P21WAF1/C1P1 mRNA的相对表达量均明显低于正常对照组和造模后7d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 p21WAF1/CIP1在外伤性PVR兔眼视网膜中的动态表达变化与PVR的病程发展过程相吻合,p21可能参与外伤性PVR发生和发展的病理过程,p21WAF1/C1P1表达量的下降与细胞增生的动态变化过程一致,可能促进了PVR的进展.