JNK抑制剂SP600125对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

目的：研究特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对低钾诱导的小脑颗粒神经凋亡的保护作用。方法：把体外培养的小脑颗粒神经元从含去极化浓度钾离子(KCl 25 mmol／L)的培养基中转移至低钾培养基(KCl 5mmol／L)中诱导神经元凋亡。以Western blot法检测JNK和c-Jtm的磷酸化水平。结果：低钾(KCl 5mmol／L)磷酸化并激活JNK,诱导c-Jun磷酸化和小脑颗粒经济元凋亡。SP600125通过抑制c-Jun磷酸化而浓度依赖性地促进低钾环境中培养的小脑颗粒神经元的存活。其保护作用的半数有效量(ED50)为1．01μmol／L。结论：SP600125通过特异性地抑制JNK活性而对低钾培养的小脑颗粒神经元具有保护作用;提示JNK是介导低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的关键激酶,它可能可以作为干扰神经元凋亡的药物的作用靶点。     

咖啡因在骨肉瘤细胞株顺铂化疗中增效作用的实验研究

目的探讨咖啡因在骨肉瘤细胞株(OS-U2)顺铂化疗中的增效作用。方法骨肉瘤细胞株经不同浓度(0.2、2、5、10、20μg/L)顺铂单药作用及分别添加0.2、2.0mmol/L咖啡因作用24、48、72h,通过MTT法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡水平,荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态并记录其阳性率。结果在添加0.2、2.0mmol/L咖啡因的各浓度顺铂组中,骨肉瘤细胞增殖明显受抑,凋亡水平明显升高。咖啡因对顺铂杀伤骨肉瘤细胞株的增效作用存在量效及时效关系。结论咖啡因对骨肉瘤细胞株顺铂化疗具有显著增效作用,其机制可能是咖啡因能加强诱导骨肉瘤细胞凋亡,从而增强顺铂对骨肉瘤细胞株的杀伤作用。     

人脑挫裂伤后神经细胞凋亡及其与caspase-3基因表达的关系

目的观察人脑急性创伤性脑损伤后神经细胞凋亡及其与caspase-3基因表达的关系。方法术中采集12例重型颅脑损伤患者挫裂伤脑组织和脑叶切除组织标本15个，分别应用凋亡细胞原位末端标记法（TUNEL）、DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜等检测神经细胞凋亡的变化，采用免疫组织化学技术检测caspase-3蛋白的表达，并借助caspase-3荧光分析试剂盒检测caspase-3蛋白酶活性的变化。结果12个挫裂伤脑组织标本中10个透射电镜发现有散在分布、数量不等的凋亡神经细胞；TUNEL染色11个出现阳性凋亡神经细胞；5个DNA出现凋亡特异性的“梯状”电泳带；9个出现caspase-3蛋白超表达；11个caspase-3蛋白酶活性明显增高；凋亡出现时间从伤后4h直到216h，高峰在23-72h。结论急性创伤性脑损伤患者存在神经细胞凋亡，并且具有时间和空间依赖性。caspase-3的超表达与激活参与了人脑创伤性脑损伤后的细胞凋亡过程。     

模拟失重对前成骨细胞MC3T3-E1内钙离子浓度的影响

目的：研究模拟失重对前成骨细胞MC3T3-E1内钙离子浓度的影响。方法：利用回转器模拟失重条件培养前成骨细胞MC3T3-E1 48h。然后将细胞用Fluo-3AM标记,使用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度。结果：模拟失重条件培养后,细胞内钙离子浓度检测显示,与对照组相比,模拟失重组细胞内钙离子浓度降低。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,模拟失重组细胞的荧光阳性率显著降低,提示模拟失重可以抑制细胞活性。结论：模拟失重导致前成骨细胞MC3T3-E1内游离钙离子浓度降低,并可能抑制细胞活性。     

辐射诱导凋亡与放疗的关系

从几方面综述辐射诱导凋亡：凋亡和有丝分裂相关死亡的定量比较；辐射诱导凋亡与放疗的关系；分次放疗期间凋亡敏感细胞中新细胞的补充；辐射诱导凋亡的调节；今后需要研究的辐射诱导凋亡问题     

人心房肌细胞内钙离子浓度与心房颤动的关系

目的研究人心房肌细胞内钙离子(Ca2+)浓度与心房颤动(AF)的关系。方法急性分离风湿性心脏病(RHD)伴或不伴有AF患者以及先天性心脏病(CHD)窦性心律患者的心房肌细胞,用Fluo3作为钙指示剂,用激光共聚焦显微镜技术测定细胞内Ca2+浓度。结果在RHD患者中,伴有AF者的心房肌细胞内Ca2+浓度(517±98nmol/L)明显高于不伴有AF者(262±65nmol/L,P<0.01),而二者均明显高于CHD患者的心房肌细胞内Ca2+浓度(117±48nmol/L,P均<0.01)。结论RHD患者心房肌细胞内Ca2+浓度升高。RHD伴AF患者心房肌细胞内存在Ca2+超载。     

“益精方”提高小鼠精子特异性钙通道蛋白1及胞内Ca2+浓度的表达

目的 研究以“益精方”为代表的中药对小鼠精子尾部特异性钙通道蛋白(cation channel 1 of sperm,CatSper1)及其胞内Ca2+浓度的影响.方法 将60只成年雄性昆明小鼠用分层法随机分为大剂量中药治疗组(large dose,LD)、小剂量中药治疗组(small dose,SD)、模型组(model group,MG)和对照组(control group,CG),按60 mg/kg体质量给MG、SD、LD组小鼠腹腔注射环磷酰胺,给CG组小鼠腹腔注射生理盐水,1次/d,连续5d,第6天开始按体质量分别给SD和LD组小鼠灌服“益精方”,剂量分别为人类常规用量(以60 kg为标准)的1倍和5倍,MG组小鼠给予等体积的生理盐水灌胃,1次饵,连续34 d,CG组小鼠常规饲养,然后对小鼠进行精液常规分析,并用RT-PCR法检测小鼠精子CatSper1的表达,流式细胞术检测精子胞内Ca2+浓度.结果 经“益精方”治疗后,LD组精子密度、前向运动精子百分率、精子活动率明显增加,与MG组比较有统计学意义(P＜0.05);MG组小鼠精子密度,前向运动精子百分率,精子活动率显著低于CG组(P＜0.05);MG组小鼠精子CatSper1的表达量虽然下降,但与CG组比较没有明显区别,治疗后LD组显著高于MG组(P＜0.05),而与CG组比较没有明显区别;MG组小鼠精子胞内Ca2+浓度明显减少,与CG组小鼠比较有统计学意义(P＜0.05),而治疗后LD组小鼠胞内Ca2+浓度显著改善,与MG组小鼠比较有统计学意义(P＜0.05).结论 环磷酰胺腹腔注射可降低小鼠前向运动精子百分率、精子总活动率和精子密度,降低CatSper1表达量,大剂量“益精方”通过增加精子尾部CatSper1的表达,提高精子胞内Ca2+浓度,进而增加精子前向运动率和活动率,并可以增加小鼠精子密度,从而达到治疗少弱精子症的目的.     

恶性间皮瘤细胞凋亡与凋亡调节蛋白Bax及Bcl-2表达的关系

目的研究恶性间皮瘤组织中Bcl-2、Bax表达,肿瘤细胞自发凋亡率(AI)与患者生存时间之间的关系。方法选取79例恶性间皮瘤标本,采用免疫组织化学方法检测肿瘤细胞中Bcl-2、Bax的表达。采用脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端原位标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞的自发凋亡率。结果79例中,女性患者32例,男性47例。发病年龄11~79岁,发病高峰年龄40~50岁。患者生存时间5~160个月。根据组织学亚型分类:上皮细胞型51例,肉瘤样型20例,混合型8例。肿瘤细胞自发凋亡率(AI)为0.14~6.9%,高凋亡指数组的生存时间明显短于低凋亡指数组(P<0.01)。另外,Bcl-2阴性表达组的凋亡指数(AI=1.92)大大高于Bcl-2阳性组的凋亡指数(AI=0.82,r=0.288 0,P=0.01),说明Bcl-2的表达与肿瘤细胞凋亡之间存在联系。但是凋亡指数与另外一种凋亡调节蛋白Bax之间无显著联系(r=0.0770,P=0.46)。Bcl-2和Bax两种凋亡调节蛋白表达情况对恶性间皮瘤患者的生存时间没有显著性影响(分别为r=0.077 3,P=0.43;r=0.145 7,P=0.26)。结论恶性间皮瘤细胞凋亡指数可以作为判断其预后的重要指标,Bcl-2的表达与肿瘤细胞的凋亡有相关性。     

癌基因与正常及骨关节炎中软骨细胞凋亡关系的研究

用免疫组化及ＤＮＡ缺口末端标记法观察了正常及骨关节炎软骨组织中ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的表达以及软骨细胞的凋亡情况。发现在正常软骨组织的表层有软骨细胞的凋亡及＆ｕ，ｃ－ｍｙｃ的表达，在移行层有ｂｃｌ－２的表达，在柱状层下层有ｃ、ｎａｙｃ的表达及ＤＮＡ缺口末端标记的阳性信号；在骨关节炎的软骨组织中发现软骨细胞凋亡及ｆａｓ表达的减少或消失，ｂｃｌ－２的表达增强。结果表明：在骨关节炎软骨组织中软骨细胞凋亡的减少可能是软骨细胞对软骨组织损伤的反应，这种反应可以延长软骨细胞的存活时间，增强软骨细胞的修复能力。     

胃黏膜端粒酶活化与细胞凋亡的关系

目的研究胃癌及胃癌前病变组织端粒酶催化亚单位的表达,探讨端粒酶活性与细胞凋亡的关系,以揭示端粒酶活化和细胞凋亡在胃癌发生中的作用。方法选择64例慢性胃炎及胃癌患者,其中慢性胃炎伴萎缩者16例,伴肠上皮化生者15例,伴中、重度异型增生者14例,胃癌19例。采用SP法检测hTERT蛋白表达,采用TUNEL染色法原位检测细胞凋亡。结果萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生和胃癌组织hTERT蛋白表达率分别为25.0%、46.7%、64.4%和78.9%,呈递增趋势,两两比较均有显著性差异(P<0.05)。萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生和胃癌组织细胞凋亡指数(%)分别为11.54±2.28、17.05±2.88、7.41±1.32和5.03±2.23,呈递减趋势,两两比较均有显著性差异(P<0.05)。hTERT蛋白阳性患者细胞凋亡指数为8.45%±5.30%,显著低于hTERT蛋白阴性患者(11.86%±4.24%,P<0.05)。结论胃癌前病变至胃癌的演化过程中,端粒酶激活并诱导细胞凋亡异常,二者同时存在,破坏了胃黏膜上皮的稳定性,这可能是胃黏膜细胞癌变的机制之一。     

唑吡坦与咖啡因药动学相互作用研究

 目的 研究咖啡因与唑吡坦之间的药动学相互作用.方法 经双盲、单剂量、6批次、轮换式志愿者人体试验评价了咖啡因与唑吡坦同时口服药动学相互作用.结果 咖啡因可中度增加唑吡坦最大血浆浓度(coadministration modestly increased maximum,Cmax)和血浆浓度一时间曲线下面积(area under the plasma concentration-time,AUC)约30%～40%,而唑吡坦并不明显影响咖啡因及其代谢物的药动学特点.结论 实验研究表明,咖啡因能够减弱唑吡坦的药理作用.     

烧伤后血与血钙浓度变化与补钙疗效分析

目的：寻找烧伤后血钙降低的规律与最佳补钙时机。方法：取烧伤后20天内的未补钙组与补钙一组和补钙二组各30例，进行组问对照。观察各组血钙及其它离子的变化。结果：三组血钙浓度均低于正常值(2．25mmol／L～2．75mmol／L)，但以未补钙组烧伤后血钙降低明显，第三天达最低值，持续时间与烧伤严重程度成正比，一般在伤后三周趋向恢复：补钙一组(连续5天补钙)血钙变化最小，补钙二组(隔日补钙10天)次之。结论：烧伤早期补钙可维持血钙浓度，早期连续补钙5天较隔日补钙10天效果为佳。     

血清同型半胱氨酸水平与冠状动脉病变的关系

目的　探讨血清同型半胱氨酸 (Hcy)水平与冠状动脉病变的发生及其严重程度的关系。方法　测定 6 7例经冠状动脉造影证实存在冠状动脉病变的患者和 4 3例冠脉造影完全正常者的Hcy水平 ,以Gensini积分系统对冠状动脉病变的严重程度进行评价 ,结合其他心血管危险因素进行统计分析。结果　冠脉病变组的Hcy水平明显比冠脉正常组高(P <0 0 5 )。Logistic回归显示Hcy是冠脉病变发生的一个独立危险因素。Hcy与Gensini积分之间相关性不显著 (r=0 15 7,P =0 10 2 )。Hcy不是冠脉病变严重程度的显著影响因素(P =0 931)。结论　Hcy是冠状动脉发生病变的独立危险因素 ,但与冠脉病变的严重程度无关     

An investigation of the effects of TETRA RF fields on intracellular calcium in neurones and cardiac myocytes

Purpose:?This study aimed to determine whether Terrestrial Trunked Radio (TETRA) fields can affect intracellular calcium signalling in excitable cells.

Materials and methods:?Intracellular calcium concentration ([Ca^{2 +} ]_i) was measured in cultured rat cerebellar granule cells and cardiac myocytes during exposure to TETRA fields (380.8875 MHz pulse modulated at 17.6 Hz, 25% duty cycle). [Ca^{2 +} ]_i was measured as fura-PE3, fluo-3 or fluo-4 fluorescence by digital image analysis.

Results:?Granule cells exposed at specific absorption rates (SARs) of 5, 10, 20, 50 or 400 mW · kg^?1 showed no significant changes in resting [Ca^{2 +} ]_i. Increases in [Ca^{2 +} ]_i in response to potassium-induced depolarization were significantly different from sham controls in TETRA-exposed cells, but the majority of the difference was attributable to initial biological variation between cell cultures. No difference was found between fura-PE3 (UV excitation) and fluo-3 (visible light excitation) measurements in these cells. Exposure to TETRA (50 or 400 mW · kg^?1) had no significant effect on either the rate or amplitude of spontaneous Ca^{2 +} transients in cardiac myocytes. The cells showed normal responses to salbutamol (50 μM) and acetylcholine (10 μM).

Conclusions:?Overall, these results showed no evidence of any consistent or biologically relevant effect of TETRA fields on [Ca^{2 +} ]_i in granule cells and cardiac myocytes at any of the SAR tested.     

妊高征孕妇血尿酸、血清镁及尿钙水平的临床价值研究

目的通过检测妊娠高血压综合征（pregnancy－induced hypertension,PIH）孕妇血尿酸、血清镁及尿钙的变化,来探讨上述指标对妊高征诊断、治疗及预后的价值。方法运用日立7180全自动生化分析仪对97例妊高征患者及108例正常孕妇进行血尿酸、血清镁及尿钙水平检测,并以正常孕妇为对照绘制ROC曲线。结果妊高征孕妇血尿酸显著高于正常孕妇组（t=2．286,P〈0．05）,血清镁和尿钙水平显著低于正常孕妇组（t=8．242,P〈0．01;t=9．033,P〈0．01）,且血清镁和尿钙浓度为0．805mmol／L和2．885mmol／L．对妊高征的诊断特异性和敏感性分别为89．8％、81．5％和91．7％、91．2％。结论检测孕妇血尿酸、血清镁及尿钙,对妊高征患者的诊断和监测具有非常重要的意义。     

唾液中钙浓度与慢性牙周炎的相关性

 目的 比较慢性牙周炎患者和牙周健康者唾液中钙离子浓度的不同及其水平,以及牙周临床指标的关系。方法 60例受试者分别为牙周健康对照组30例,试验组30例。收集研究对象的唾液样本,应用离子选择性电离分析仪对唾液标本钙离子浓度进行分析。将试验组唾液钙离子水平与其牙周临床指标进行相关性分析。结果 试验组唾液钙离子浓度为(2.24±0.02) mmol/L,对照组唾液钙离子浓度为(2.01±0.08)mmol/L,试验组唾液钙离子浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。试验组唾液钙水平与牙周探诊深度、临床附着丧失、牙龈指数、出血指数和牙石指数呈正相关关系,与菌斑指数无相关性。结论 唾液钙离子浓度可以通过提高牙菌斑矿化浓度影响慢性牙周疾病的发生和发展。