槲皮素对HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的影响

目的:探讨不同浓度的槲皮素对HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的影响及意义。方法:采用不同浓度槲皮素处理体外培养的HeLa细胞,培养48h后免疫组织化学法检测HeLa细胞P21、CDK4蛋白表达的变化。结果:不同浓度的槲皮素均能显著增高P21和降低CDK4蛋白在HeLa细胞中的表达,且与空白对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论:槲皮素可能通过上调HeLa细胞P21蛋白表达和下调CDK4蛋白表达,促进HeLa细胞凋亡。     

miR-579-3p过表达抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的 探讨miR-579-3p在宫颈癌HeLa细胞中的表达及对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，及其潜在机制。方法 将细胞分为H8组[正常培养正常宫颈上皮永生化细胞(H8细胞)]、HeLa组[正常培养宫颈癌细胞(HeLa细胞)]、HeLa+mimic-NC(HeLa细胞转染mimic-NC)和HeLa+mimic-miR-579组(HeLa细胞转染mimic-miR-579-3p)。用细胞计数试剂盒检测各组细胞的增殖情况，用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-579-3p和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关基因mRNA的表达水平，用迁移实验和侵袭小室法检测细胞的迁移和侵袭情况。结果 H8组中miR-579-3p mRNA相对表达水平(1.00±0.04)显著高于HeLa组(0.12±0.01),差异有统计学意义(P<0.001)。HeLa+mimic-NC组和HeLa+mimic-miR-579组的miR-579-3p mRNA相对表达水平分别为0.13±0.01和0.83±0.10,第2天的增殖能力分别为165.91±9.46和111.35±9.66,侵袭细胞数分别为(124....     

杨梅素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及凋亡通路的研究

目的研究杨梅素体外对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及凋亡通路的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,MTT和SRB法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡,计算机分析细胞周期;Western Blot法检测caspase-3、caspase-9和survivin含量。结果杨梅素对HeLa细胞的体外增殖具有抑制作用,并具有浓度和时间依耐性;杨梅素体外诱导HeLa细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在S期;杨梅素促进caspase-3和caspase-9蛋白表达,抑制survivin蛋白表达。结论杨梅素可抑制HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,其凋亡途径同时涉及细胞内途径和细胞外途径。     

金粉蕨素体外诱导人宫颈癌HeLa 细胞凋亡的机制

目的：探讨金粉蕨素（ONY）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞,采用MTT法检测ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长抑制率的影响;Hoechst33258染色检测ONY对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术（FCM）检测ONY对HeLa细胞凋亡率的影响;DNA琼脂糖电泳检测HeLa细胞凋亡的DNA条带;Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化。结果 ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,以HeLa细胞对ONY最为敏感,作用24 h的IC50值为10.48μg·mL-1。经ONY作用于HeLa细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态学改变,表现出典型的凋亡特征的亚二倍体峰,且呈剂量依赖性,同时出现典型的凋亡DNA条带;同时,cytochrome c、caspase-9和caspase-3蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达下调,而bax蛋白表达不变, Bcl-2/Bax比值下调（P〈0.05）。结论 ONY可能通过调控线粒体途径相关蛋白抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡。     

7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素钝化Pim-1对宫颈癌细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的 检测7-二氟甲氧基-5,4''-二正辛烷氧基金雀异素(7-difluoromethoxyl-5,4''-di-n-octylygenistein,DFOG)对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制。方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,用MTT法检测DFOG对HeLa细胞的增殖抑制作用;用PI染色FCM检测DFOG对HeLa细胞周期分布的影响;用Transwell法检测DFOG对HeLa细胞迁移及侵袭的抑制作用;用Western blotting、siRNA/cDNA转染检测DFOG对HeLa细胞增殖、迁移侵袭抑制作用的可能分子生物学机制。结果 DFOG在体外对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭呈浓度依赖性的抑制作用,阻滞细胞周期于G1期,伴随着Pim-1蛋白表达下调,同时Pim-1下游蛋白Cyclin D、Cyclin E、Cyclin A表达下调,而p15和p21蛋白表达上调。用siRNA干扰沉默Pim-1基因,则DFOG对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用明显加强;用Pim-1-cDNA转染HeLa细胞,则能部分抵消DFOG对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论 DFOG通过钝化Pim-1组织细胞与G1期而发挥其抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的作用。     

豨莶草对人宫颈癌HeLa细胞的体外抑制效应

目的 研究中药豨莶草提取物对人宫颈癌细胞HeLa的体外抑制效应. 方法 培养人宫颈癌HeLa细胞,体外加入不同浓度的豨莶草提取物,MTT法观察其对细胞增殖的影响. 结果 豨莶草的乙酸乙酯和正丁醇部位对HeLa细胞有较强的体外增殖抑制作用. 结论 豨莶草对He1a细胞有较强的体外抑制效应.     

2-苯基-3,4-噻二唑[3,2-α]并嘧啶-7-酮对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及相关因子表达的影响

目的研究新化学合成药物2-苯基-3,4-噻二唑[3,2-α]并嘧啶-7-酮(TPh)对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及相关因子表达的作用。方法MTT法检测空白对照组和不同浓度TPh(0.6、0.4、0.2、0.1和0.05μmol·mL^-1)组培养24、48、72 h后对HeLa细胞增殖的作用,流式细胞术检测TPh对HeLa细胞周期的影响,Annexin-V FITC/PI双染检测TPh对HeLa细胞凋亡的影响,JC-1染色观察TPh对HeLa细胞线粒体膜电位的影响,Western blotting法检测凋亡相关因子表达情况。结果与空白对照组相比,TPh组Hela细胞增殖被显著抑制,HeLa细胞G0/G1期比例增加、G2/M期比例减少,HeLa细胞线粒体膜电位降低,HeLa细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9表达增加、凋亡细胞比率增加(P<0.05,P<0.01),且呈剂量依赖性趋势。结论TPh可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,并促进凋亡,这可能与其激活细胞内源性和外源性凋亡途径有关。     

紫花牡荆素对宫颈癌HeLa 细胞凋亡及DAPK 基因甲基化的影响

目的探讨紫花牡荆素(casticin)对人宫颈癌HeLa细胞的凋亡和DAPK基因甲基化以及DAPK蛋白表达的影响。方法用不同浓度的casticin处理体外培养的HeLa细胞;AnnexinV-PI染色流式细胞术定量分析细胞凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞DNA断裂;基因甲基化特异性PCR检测DAPK基因甲基化状态;Western blotting检测DAPK蛋白表达。结果 casticin可以浓度依赖性的方式有效诱导HeLa细胞凋亡;casticin作用于宫颈癌HeLa细胞48小时后,DAPK基因甲基化程度显著降低;casticin以浓度依赖的方式上调DAPK蛋白表达。结论 casticin可能通过使DAPK基因去甲基化上调DAPK蛋白的表达,进而诱导HeLa细胞凋亡。     

艾香素的提取、分离与体外抗人宫颈癌活性测定

目的通过回流提取及多种溶剂萃取和柱层析分离技术得到艾香素,并观察其对人宫颈癌HeLa细胞活性及凋亡的影响。方法采用乙醇回流提取和分离技术得到艾香素,并行结构鉴定。体外培养HeLa细胞,MTT法测定细胞活性;PI染色流式细胞术分析细胞凋亡率。结果蔓荆子60%醇提物经聚酰胺柱层析、硅胶柱层析得到黄色固体物,经化学鉴别和波谱鉴定其结构为5-羟基-3,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮（艾香素）。艾香素以剂量依赖性方式抑制HeLa细胞活性,其IC50是79.9μmol.L-1。流式细胞术分析显示,艾香素诱导HeLa细胞凋亡,呈剂量依赖性。结论从蔓荆子提取分离得到的多甲氧基黄酮类化合物（即艾香素）具有抑制HeLa细胞活性和诱导细胞凋亡作用。     

多西紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的研究

目的：观察多西紫杉醇对体外培养的宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法：不同浓度（1、5、10、20、40μg/mL）的多西紫杉醇处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72h后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR法检测自噬基因Beclin1表达的变化情况。结果：多西紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制宫颈癌HeLa细胞增殖（P〈0.05）;多西紫杉醇10μg/mL处理的HeLa细胞,早期（24h内）可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G2/M期阻滞,且自噬基因Beclin1的表达明显增高。结论：多西紫杉醇具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,其机制可能与上调自噬基因Beclin1的表达水平有关。     

潘生丁增强阿霉素对体外 Hela 细胞和体内 S_(180)肉瘤的细胞毒性

潘生丁(Dipyridamole,)是临床用于舒张血管和抗血小板的药物;它也是一种膜核苷转运的强抑制剂。潘生丁与抗代谢药物如acivicin、氨甲蝶呤、N-膦乙酰天冬氨酸(PALA)、5-氟尿嘧啶合用,在细胞株培养中会增强它们的细胞毒作用。作者发现潘生丁在体内外增强阿霉素对细胞的杀伤作用。潘生丁本身不影响HeLa细胞的生长,但增强阿霉素对细胞的毒性,使其半数有效浓度降低2.4倍。潘生丁也增强阿霉素抑制HeLa细胞的克隆形成;潘生丁和阿霉素合用时,HeLa细胞的克隆存活百     

西多福韦对HeLa细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究抗病毒药西多福韦(CDV)对HeLa细胞的增殖抑制作用.方法 采用MTT法分析CDV和阳性对照药顺铂(DDP)对HeLa细胞增殖活力的影响;利用细胞集落形成实验和Giemsa染色技术,观察CDV和DDP导致HeLa细胞凋亡情况;利用流式细胞仪观察CDV和DDP对细胞凋亡及细胞周期影响.结果 MTT法和细胞集落实验结果显示CDV能明显抑制HeLa细胞的增殖活性;流式细胞仪测定显示CDV和DDP使HeLa细胞阻滞于细胞周期的S期,并诱导HeLa细胞发生凋亡.结论 CDV对HeLa细胞具有明显的增殖抑制作用,并能诱导细胞凋亡,CDV有可能成为宫颈癌治疗的另一策略.     

白英水提物诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的实验研究

目的:观察白英水提物诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并初步探讨其分子机制。方法:常规方法制备白英水提物,体外培养人宫颈癌HeLa细胞。实验组设白英水提物12.5、25.0、50.0mg/mL3种浓度,以顺铂(25.0mg/L)为阳性对照组。采用细胞毒试验(MTT法)检测HeLa细胞抑制率,荧光显微镜观察HeLa细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形泳带,半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因survivin mRNA和caspase-3mRNA表达的变化。结果:白英水提物对HeLa细胞增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系,并诱导其发生凋亡,表现为细胞核固缩、染色质凝集、边聚等。琼脂糖凝胶电泳显示DNA梯形泳带,半定量RT-PCR法检测显示survivin mRNA表达下调、caspase-3mRNA表达上调。结论:白英水提物对HeLa细胞有较强的增殖抑制和诱导凋亡作用,其诱导HeLa细胞凋亡的分子机制可能与上调caspase-3基因表达、下调survivin基因表达有关。     

X染色体连锁的凋亡抑制蛋白对米非司酮诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的观察X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP蛋白)对米非司酮诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法 XIAP重组质粒转染HeLa细胞,共聚焦显微镜观察其在细胞内的分布;流式细胞仪检测米非司酮处理和未处理的各组细胞凋亡率。结果 XIAP在HeLa细胞中弥漫分布于细胞核和细胞浆,米非司酮可诱导HeLa细胞凋亡,XIAP能抑制由米非司酮诱导的HeLa细胞凋亡。结论米非司酮能促进HeLa细胞凋亡,XIAP能抑制由米非司酮诱导的HeLa细胞凋亡。     

螺旋藻多糖对HeLa细胞生长的影响

目的；研究螺旋藻多糖（polysaccharide from Spirulina platensis,PSP)对体外培养的HeLa细胞生长的影响。方法：MTT法测定螺旋藻多糖的抗肿瘤活性；光镜观察螺旋藻多糖对HeLa细胞形态学的影响；流式细胞术检测螺旋藻多糖对肿瘤细胞周期的影响。结果：随螺旋藻多糖浓度的增加，HeLa细胞存活率逐渐降低。抑制率逐渐增加；光镜下的观察显示，螺旋藻多糖作用24-48h后，细胞出现明显的形态学改变；流式细胞术证实螺旋藻多糖对肿瘤细胞存在周期特异性，使细胞发生G1期阻滞。结论：螺旋藻多糖抑制HeLa细胞的增殖，可能与该细胞发生G1期阻滞有关。     

褪黑激素对HeLa细胞生长的影响

目的　研究褪黑激素对体外培养的人宫颈癌 (HeLa)细胞活性的影响。方法　MTT测定褪黑激素的抗肿瘤活性 ;电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响 ;流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响。结果　高浓度 (2mmol·L- 1 )褪黑激素可抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞倍增时间TD 延长 ,细胞杀伤率达 6 1 0 %。用此浓度作用 3天 ,可使S期细胞的比例减少 ,细胞形态学发生非特异性改变 ,有较多的坏死细胞和少量凋亡细胞。结论　高浓度褪黑激素抑制HeLa细胞增殖 ,可能与抑制细胞的S期有关     

IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨炎症抑制因子IL-37 对宫颈癌HeLa 细胞株增殖和凋亡的影响。方法　将携带有目的基因IL-37 的过表达载体转染入体外培养的HeLa 细胞，用MTT 法检测细胞的增殖情况，流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率，以野生型HeLa 细胞以及转染空载体的HeLa 细胞作为阴性对照和空载体对照。结果　荧光显微镜观察结果显示IL-37 质粒成功转染HeLa 细胞。MTT 检测结果显示，转染后12 h 至96 h，转染组OD 值明显低于空载体对照组（P<0.01），而空载体对照组和阴性对照组的OD 值无明显差异；流式细胞仪检测测结果显示，转染组细胞早期凋亡率较空载体对照组显著升高（P<0.05），而空载体对照组和阴性对照组的早期凋亡率无显著性差异。结论　过表达IL-37 的HeLa 细胞株构建成功。IL-37 可抑制宫颈癌HeLa 的增殖并诱导其凋亡。     

巴豆生物碱上调TRAIL配体、caspase-8的表达诱导HeLa细胞凋亡的体外研究

目的研究巴豆生物碱对人宫颈HeLa细胞诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法 MTT法观察巴豆生物碱对HeLa细胞的抑制率;流式细胞仪检测HeLa细胞TRAIL及其受体DR5的表达及其巴豆生物碱对HeLa细胞TRAIL配体表达的影响;Caspase-8活性检测;RT-PCR检测TRAIL配体及Caspase-8、Caspase-3 mRNA的表达。结果巴豆生物碱对HeLa细胞生长有抑制作用,且呈剂量依赖关系。流式细胞仪检测HeLa细胞TRAIL及其受体DR5的表达阳性,巴豆生物碱处理HeLa细胞后发现TRAIL配体的表达明显上调,Caspase-8活性明显增加,TRAIL配体、Caspase-3及Caspase-8 mRNA高表达。结论巴豆生物碱对人宫颈癌HeLa细胞有增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其诱导机制可能与上调TRAIL配体和Caspase-8mRNA的表达有关。     

Akt/FoxM1在VB-1诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用

目的研究Akt/FoxM1在新木脂素(VB-1)诱导的人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法采用不同浓度VB-1处理HeLa细胞后,通过MTT法测定细胞活力,琼脂培养集落形成法检测细胞集落形成能力,Histone/DNAELISA和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,Western Blot检测p-AKT和FoxM1的表达水平。结果 VB-1以浓度依赖的方式显著抑制HeLa细胞的活力和集落形成,提高细胞内Histone/DNA片段化水平,呈现出典型DNA梯形条带,同时下调p-AKT和FoxM1表达水平。结论 VB-1能以浓度依赖性方式有效诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,其作用机制可能与下调p-AKT和FoxM1有关。     

雷帕霉素对宫颈癌患者HeLa细胞侵袭转移抑制作用的实验

目的:研究雷帕霉素对宫颈癌患者HeLa细胞侵袭转移抑制作用。方法:取宫颈癌患者HeLa细胞标本进行实验,空白组不加雷帕霉素,雷帕霉素组加入雷帕霉素30 nmol/L,分别培养48 h后,采用MTT法检测细胞活力(计算细胞生长抑制率)、Transwell法检测细胞迁移侵袭能力,以及采用Western blot法检测蛋白激酶B(Akt)和兔抗雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化水平以及兔抗基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、兔抗基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、波形蛋白(Vimentin)与钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果:雷帕霉素组患者宫颈癌HeLa细胞生长抑制率、E-cadherin表达率明显多于对照组(P<0.05),且宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭数量、Akt与mTOR磷酸化水平、MMP-2、MMP-9与Vimentin表达明显少于对照组(P<0.05)。结论:雷帕霉素能抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭转移,主要是通过Akt/mTOR信号通路发挥作用。