人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病大鼠脑片模型tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病（AD）大鼠脑片模型中磷酸化tau蛋白（P-tau）及钙调神经磷酸酶（CaN）表达的影响,探讨人参皂苷Rg1是否通过上调CaN表达从而抑制AD模型大鼠脑片tau蛋白磷酸化。方法 制备5周龄雄性SD大鼠脑片（含皮质和海马）,随机分为4组：对照组、模型组和人参皂苷Rg1组,人参皂苷Rg1＋他克莫司（FK506）（一种CaN抑制剂）组,每组10张脑片。各组脑片首先置于人工脑脊液中孵育1h,之后人参皂苷Rg1组和人参皂苷Rg1＋FK506组分别加入人参皂苷Rg1作用2h,然后除对照组外的各组分别加入冈田酸作用3h。干预结束后脑片经多聚甲醛固定后做冰冻切片,采用免疫组织化学染色、图像分析技术等方法检测各组大鼠脑片P-tau、CaN的表达水平。结果 与对照组比较,模型组各脑区P-tau表达水平增加（P＜0.05）,CaN表达水平减少（P＜0.05）;与模型组比较,人参皂苷Rg1组各脑区P-tau表达水平减少（P＜0.05）,CaN表达水平增加（P＜0.05）;与人参皂苷Rg1组比较,人参皂苷Rg1＋FK506组P-tau表达水平增加（P＜0.05）,CaN表达水平减少（P＜0.05）。结论 人参皂苷Rg1可能通过上调CaN蛋白表达途径抑制AD大鼠脑片模型tau蛋白磷酸化,从而发挥抗痴呆作用。     

人参皂苷Rg1对AD模型大鼠脑片P-Tau、PKA影响的实验研究

目的 研究人参皂苷Rg1对AD模型大鼠脑片磷酸化微管相关蛋白(P-Tau)、蛋白激酶A(PKA)表达的调控作用.方法 采用冈田酸诱导大鼠培养脑片Tau 蛋白过度磷酸化,制备成AD模型,运用免疫组织化学、图像分析技术等方法,观察人参皂苷Rg1对各组大鼠脑片P-Tau、PKA表达的影响.结果 模型组P-Tau、PKA表达水平明显高于空白对照组(P＜0.01);人参皂苷Rg1各剂量组P-Tau、PKA表达水平虽高于空白对照组,但低于模型组(P＜0.01或P＜0.05),且大、中剂量组优于小剂量组;人参皂苷Rg1呈一定的剂量依赖性下调P-Tau、PKA的表达.结论 人参皂苷Rg1能通过降低P-Tau水平、下调PKA的表达从而减缓神经纤维缠结、老年斑的形成,以发挥抗痴呆的作用.     

人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病大鼠海马细胞周期依赖性蛋白激酶和p-tau的影响

目的研究人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)5和磷酸化(p)-tau(Ser404)的影响,探讨其对AD大鼠的保护作用机制。方法清洁级SD大鼠60只,随机分为青年组、模型组、人参皂苷Rg1小剂量组、人参皂苷Rg1大剂量组,每组15只。采用D-半乳糖联合Aβ1⁴0海马内注射制作AD大鼠模型,免疫组化(SABC)法和免疫蛋白印迹法检测CDK5蛋白和p-tau(Ser404)蛋白的表达水平。结果与青年组比较,模型组海马组织CDK5蛋白和p-tau(Ser404)蛋白表达均明显增加(P<0.05);与模型组比较,人参皂苷Rg1小剂量组和大剂量组CDK5蛋白和p-tau(Ser404)蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1通过抑制CDK5蛋白过度激活和降低其活性来减少tau蛋白过度磷酸化的途径防治AD的发生发展。     

人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病大鼠模型脑片神经元自噬小体相关蛋白表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑片神经元自噬小体相关蛋白表达的影响及其分子机制。方法:选取6周龄SD大鼠断头取脑制备海马脑片,将海马脑片随机分为空白对照组、模型组及低、中、高浓度Rg1组,每组10张脑片。模型组人工脑脊液中加入Aβ 1-42(终浓度5 μmol/L)处理2 h造模,低...     

山茱萸多糖对阿尔茨海默病模型大鼠认知能力和海马磷酸化-tau蛋白表达的影响

目的观察山茱萸多糖对阿尔茨海默病(AD)大鼠认知能力的影响及作用机制。方法 100只Wistar大鼠随机分为青年组、假手术组、模型组、多奈哌齐组、山茱萸多糖组各20只。采用D-半乳糖联合β-淀粉样蛋白(Aβ)1~40注射建立AD模型。水迷宫实验观察大鼠认知能力,免疫组化(SABC)法检测大鼠海马CA4区磷酸化tau(p-tau)蛋白表达量。结果药物干预后,山茱萸多糖组平均逃避潜伏期较模型组明显缩短(P<0.05);120 s穿越原平台次数较模型组明显增加(P<0.05)。山茱萸多糖组海马区p-tau蛋白阳性染色较模型组明显减弱(P<0.05)。结论山茱萸多糖对AD大鼠认知能力有改善,可能与降低海马区p-tau蛋白表达量相关。     

人参皂苷Rg1对痴呆模型大鼠行为学及酪氨酸蛋白激酶A表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响及其对酪氨酸蛋白激酶A（TrkA）阳性细胞的保护作用。方法采用切断成年Wistar大鼠左侧穹窿海马伞（FF）的方法，建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。分为模型组、治疗组和假手术对照组3组。治疗组经腹腔内注射Rg1（5mg／kg），模型组和假手术对照组给予生理盐水。利用Morris水迷宫测定其学习记忆能力，利用免疫组化及图像分析测定大鼠内侧隔核（MS）和斜角带垂直支（VDB）TrkA阳性细胞数及OD值。结果治疗组大鼠的学习记忆成绩优于模型组（P〈0．05），其MS和VDB的TrkA阳性细胞数及OD值与模型组相比也有改善（P〈0．05）。结论人参皂苷Rg1对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善学习记忆能力。     

山茱萸多糖对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白的影响

目的 研究山茱萸多糖对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制.方法 清洁级Wistar鼠63只,随机分为青年组、假手术组、模型组、多奈哌齐组和山茱萸多糖组.采用D-半乳糖与Aβ联合诱导法制作AD大鼠模型,Morris水迷宫检测学习记忆能力,免疫组化法检测海马神经元p-tau(Ser422)及tau蛋白的表达情况,Western印迹法检测大鼠海马神经元tau蛋白在Ser422位点、Ser396位点的磷酸化水平.结果 与青年组、假手术组比较,模型组大鼠海马p-tau(Ser422) 、p-tau(Ser396)表达增加(P＜0.05),多奈哌齐和山茱萸多糖显著降低p-tau(Ser422)、p-tau(Ser396)表达(P＜0.05)、提高tau蛋白表达(P＜0.05).结论 山茱萸多糖可通过抑制p-tau(Ser422)、p-tau(Ser396)生成,改善AD大鼠学习记忆能力.     

人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响及机制。方法 SD大鼠随机分为4组,每组10只。衰老模型组,皮下注射D-半乳糖120 mg/kg,1次/d,42 d;Rg1衰老模型组,注射D-半乳糖剂量与时间同衰老模型组,第15天起腹腔注射Rg1 20 mg/kg,1次/d,28 d正常对照组,皮下注射生理盐水1次/d,42 d;Rg1正常对照组,注射生理盐水1次/d,14 d,第15天起腹腔注射Rg1(同Rg1衰老模型组)。模型复制或药物注射完成后第2天,取胸腺测定胸腺指数,石蜡切片观察胸腺形态学;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测胸腺细胞衰老,CCK-8检测胸腺细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖能力,ELISA检测胸腺细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、GM-CSF、白细胞介素(IL)-2与IL-6的能力,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)、胸腺细胞凋亡,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA),酶学检测超氧化物歧化酶(SOD),DTNB法测定谷胱甘肽(GSH)、氧化谷胱甘肽(GSSG)含量,Western印迹检测细胞衰老相关蛋白p21、p53、Rb的变化。结果 Rg1衰老模型组大鼠胸腺指数升高、胸腺皮质面积比例增加、胸腺细胞的增殖能力提高,凋亡率减少、SA-β-Gal阳性胸腺细胞百分率下降、TNF-α、GM-CSF、IL-2、IL-6的分泌能力明显提高、SOD活性明显提升;ROS和MDA含量下降;p53、p21、Rb蛋白表达有显著下调。结论 D-半乳糖复制的衰老模型大鼠胸腺结构与功能损伤明显,人参皂苷Rg1对其致衰损伤有明确的保护作用,其机制可能与抑制氧化损伤和下调p16-Rb、p53/p21信号通路有关。     

阿尔茨海默病模型建立及神经生长因子对于ChAT的影响

目的　探讨神经生长因子 (NGF)治疗阿尔茨海默病 (AD)的作用机理。方法　利用 β淀粉样蛋白 (Aβ)建立大鼠AD模型 ,经脑室注射给予NGF ,观察大鼠行为学变化 ,用液体闪烁仪测定ChAT的活性。结果　Aβ注射后 ,大鼠出现认知能力、记忆能力减退 ,ChAT活性明显下降 ;给予NGF治疗后 ,上述症状改善 ,ChAT活性升高。结论　提示NGF治疗AD的机制之一是提高ChAT活性 ,从而恢复胆碱能神经的功能     

人参皂苷Rb1对内源性Aβ所致小鼠神经细胞Tau蛋白过磷酸化的干预作用

目的 探讨人参皂苷Rb1对神经干细胞的保护作用及机制.方法 将人参皂苷Rb1作用于APP转基因鼠分化中的神经细胞,用免疫荧光化学和免疫蛋白印记法测定总Tau蛋白磷酸化水平及Tau蛋白在Ser-396、Ser-262位点磷酸化水平.结果 与阳性对照组相比,人参皂苷Rb1处理组Tau蛋白的总磷酸化水平及在Ser-396和Ser-262位点磷酸化水平明显下降;而与阴性对照组相比,Tau蛋白总磷酸化水平及在Ser-396和Ser-262位点的磷酸化水平明显增高.结论 人参皂苷Rb1具有一定神经保护作用;其机制可能为直接促进神经细胞活性或通过调节Tau蛋白上游作用因子的活性.     

人参皂苷Rg2对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元结构及突触素表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg2对Aβ25～35诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元结构及突触素(SY)表达的影响。方法大鼠腹腔注射人参皂苷Rg2预防给药,海马内注射Aβ25～35建立AD模型,5 w后采用HE染色法光镜观察大鼠海马神经元的一般结构;免疫组化染色显示大鼠海马神经元SY的表达,并进行定量分析;透射电子显微镜观察大鼠海马神经元的超微结构。结果与正常对照组相比,AD模型组大鼠海马神经元数量明显减少,暗细胞神经元数量增多;SY免疫组化染色浅,吸光度值显著下降;神经元核内异染色质增多,胞质内线粒体肿胀、嵴断裂,可见脂褐素颗粒,神经毡内突起空化,神经丝和线粒体减少。人参皂苷Rg2各剂量组大鼠海马神经元的一般形态结构和超微结构较AD模型组均有不同程度的改善;SY免疫组化染色加深,吸光度值上升。结论人参皂苷Rg2对AD模型大鼠海马神经元的结构和SY的表达均有一定的保护作用。     

人参皂苷Rg1治疗神经退行性疾病的研究进展

神经退行性疾病通过毁坏维持正常脑功能的神经元,引起脑损害或躯体功能障碍,最常见的有阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)和脑缺血。神经退行性疾病主要发生于老人,随着人口老龄化,发病率将会有所增加。世界卫生组织预测,到2040年神经退行性疾病将超过癌症,成为世界人口的第二大死     

人参皂苷Rg1预处理对脂多糖诱导大鼠心肌细胞损伤的影响

目的探讨不同剂量人参皂苷Rg1预处理对培养乳鼠心肌细胞脂多糖（LPS）损伤的影响。方法取SD新生大鼠60只,分离心肌细胞培养,培养第4天随机分为4组（每次取12只,每组重复5次）：对照组、LPS组、低剂量人参皂苷Rg1（Rg110μmo1／L）＋LPS组、高剂量人参皂苷Rg1（Rg140μmo1／L）＋LPS组,分别观察各组心肌细胞搏动频率、细胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性、TNFα水平。结果①细胞搏动频率、细胞存活率：LPS组较对照组明显降低（P〈0．01）,人参皂苷Rg1＋LPS组较LPS组显著增高（P〈0．01）,高剂量人参皂苷Rg1组比低剂量组增高（P〈0．01）。②LDH活性：LPS组较对照组明显升高（P〈0．01）,人参皂苷Rg1＋LPS组与LPS组相比LDH明显降低（P〈0．01）,高剂量人参皂苷Rg1组较低剂量组低（P〈0．01）。③TNFα水平：与对照组相比,LPS组细胞悬液中TNFα增加（P〈0．01）,人参皂苷Rg1＋LPS组较LPS组明显减低（P〈0．01）;人参皂苷Rg1高剂量组较低剂量组低（P〈0．01）。结论人参皂苷Rg1对心肌细胞LPS损伤具有保护作用。     

人参皂甙Rg1对大鼠急性心肌梗死的治疗作用

目的探讨人参皂甙Rg1对大鼠心肌梗死后缺血心肌的治疗作用。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为治疗组和对照组,治疗组大鼠采用人参皂甙Rg1治疗。于建模后24h、2周和4周时杀死大鼠,取出心脏,HE染色观察细胞形态特征和心肌基本结构,并测量梗死面积,计算心室肌质量/体重、心肌梗死总面积/左心室肌总面积的百分比;免疫组织化学方法观察心肌组织CD34阳性细胞的表达;并比较治疗前后外周血中CD34阳性细胞数量的变化。结果应用人参皂甙Rg1治疗后,外周血中CD34细胞数量治疗组制模前为0.043%±0.023%,24h时为0.202%±0.081%,2周为0.937%±0.142%,4周为0.834%±0.110%;对照组制模前为0.046%±0.022%,24h为0.056%±0.037%,2周为0.069%±0.045%,4周为0.064%±0.042%;治疗组制模后24h、2周和4周的CD34阳性细胞百分率均比制模前和对照组大鼠的百分率明显升高(P<0.05);治疗组大鼠在第2周、第4周时,心室肌质量/体重均比对照组明显低(P<0.05);治疗组大鼠心肌梗死区可见大量CD34阳性细胞浸润,其梗死面积明显减小;治疗组大鼠心肌梗死程度较对照组减轻,其缺血心肌的基本结构得到保护。结论应用人参皂甙Rg1治疗AMI大鼠,能显著提高外周血的干细胞数量,并促进干细胞归巢梗死心肌,分化为心肌细胞样细胞,缩小梗死面积,明显减轻心室重塑,保护缺血心肌的基本结构。     

阿尔茨海默病患者脑脊液磷酸化tau蛋白的检测及临床意义

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者脑脊液磷酸化tau蛋白在诊断AD中的临床价值.方法 选取AD患者31例(AD组),血管性痴呆患者38例(VD组)以及健康对照组30例.采用ELISA法检测三组患者的脑脊液磷酸化tau蛋白浓度,并分析其诊断AD的敏感度和特异度.结果 AD组患者脑脊液磷酸化tau蛋白浓度显著高于健康对照组和VD组患者(P＜0.05),而VD组患者与健康对照组患者的磷酸化tau蛋白的浓度差异无统计学意义(P＞0.05).将脑脊液磷酸化tau蛋白的分界值定为60 ng/L,其诊断AD的敏感度为83.87％,特异度为89.47％,准确性为86.96％.结论 脑脊液磷酸化tau蛋白可能成为AD重要的生物学标记物,可以为AD的诊断提供临床依据.     

人参皂苷Rg1对帕金森病小鼠黑质EphB1、ephrinB2表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对帕金森病(PD)小鼠黑质中EphB1、ephrinB2表达的影响及其意义。方法将27只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rg1组。小鼠腹腔注射人参皂苷Rg1预防给药,腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)构建PD模型。观察小鼠游泳情况并评分。2 w后采用免疫组化方法检测小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达,采用RT-PCR法检测黑质EphB1、ephrinB2 mRNA的表达,采用Western印迹法检测黑质EphB1、ephrinB2蛋白的表达。结果模型组小鼠不同时间点游泳实验分值均显著低于对照组和人参皂苷Rg1组(P0.05);免疫组化结果显示模型组和人参皂苷Rg1组TH蛋白表达水平显著低于对照组(P0.05);RT-PCR结果显示模型组EphB1、ephrinB2 mRNA表达水平显著高于对照组和人参皂苷Rg1组(P0.01);Western印迹显示模型组ephrinB2蛋白表达水平显著高于对照组和人参皂苷Rg1组(P0.05)。结论人参皂苷Rg1可能通过降低EphB1、ephrinB2的表达而改善PD症状。     

人参皂苷Rg1抗肝纤维化的实验研究

[目的]观察三七总甙单体成分人参皂苷Rg1对实验性肝纤维化的作用。[方法]用50?l4致大鼠肝纤维化模型,共35 d,同时给予三七总皂甙单体成分人参皂苷Rg1治疗,于实验第2、5周(实验结束)时检测肝功能、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN),于实验结束时分离肝组织光镜观察其病理变化。[结果]人参皂苷Rg1及三七总皂甙能改善肝纤维化大鼠的肝功能,降低血清PCⅢ、HA、LN水平;人参皂苷Rg1中、高剂量组及三七总皂甙明显减轻肝组织胶原的沉积,改善肝纤维化程度。[结论]人参皂苷Rg1及三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,人参皂苷Rg1是三七总甙抗肝纤维化有效成分之一。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡及FZD1、PIWIL1、FOXM1表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1(GsRg1)对脑缺血再灌注损伤模型大鼠神经功能的改善作用,并探讨其作用机制。方法缺血再灌注损伤Wistar大鼠随机分为假手术组、模型对照组、依达拉奉组(3. 2 mg/kg)、GsRg1低(10mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(50 mg/kg)剂量组6组。给药后1 d、7 d和14 d采用改良m-NSS法进行神经功能缺损评分,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积;采用原位TUNEL方法检测脑组织神经细胞凋亡;采用免疫组化法检测NF-κB、GAFP蛋白水平;采用RT-PCR法、Western Blot法分别检测FZD1、PIWIL1、FOXM1 mRNA和蛋白表达水平。结果与模型对照组比较,GsRg1低剂量组大鼠神经缺损评分明显降低(P0. 05),GsRg1中、高剂量组大鼠神经缺损评分明显降低(P0. 01); GsRg1低、中、高剂量组神经凋亡细胞明显减少(P0. 01),脑梗死体积显著缩小(P0. 01),大鼠脑组织NF-κB、GAFP表达显著降低(P0. 01),FZD1、FOXM1 mRNA及蛋白表达水平显著增加(P0. 01),PIWIL1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0. 01),且呈现一定的剂量依赖性。结论 GsRg1能够显著改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,其可能是通过调控FZD1、PIWIL1、FOXM1相关基因及蛋白的表达实现的。     

人参皂甙Rg1可促进大鼠心肌梗死后心肌再生

目的观察人参皂甙Rg1促进大鼠心肌梗死后缺血心肌的再生。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）模型,随机分为治疗组和对照组,治疗组大鼠采用人参皂甙Rg1治疗。于建模后24h、2周和4周时杀死大鼠,取出心脏,HE染色观察细胞形态特征和心肌基本结构,并测量梗死面积,计算心室肌质量/体质量的比值、心肌梗死总面积/左心室肌总面积的百分比;免疫组织化学方法观察心肌组织CD34阳性细胞的表达;并比较治疗前后外周血中CD34阳性细胞数量的变化。结果应用人参皂甙Rg1治疗后,外周血中CD34细胞数量变化:治疗组,制模前:（0.043±0.023）%,24h:（0.202±0.081）%,2周:（0.937±0.142）%,4周:（0.834±0.110）%;对照组,制模前:（0.046±0.022）%,24h:（0.056±0.037）%,2周:（0.069±0.045）%,4周:（0.064±0.042）%;治疗组制模后24h、2周和4周的CD34阳性细胞百分率均比制模前和对照组大鼠的百分率明显升高（P<0.05）;治疗组大鼠在第2、4周时,心室肌质量/体质量均比对照组明显低（P<0.05）;治疗组大鼠心梗区可见大量CD34阳性细胞浸润,其梗死面积明显减小;治疗组大鼠心肌梗死程度较对照组减轻,其缺血心肌的基本结构得到保护。结论应用人参皂甙Rg1治疗AMI大鼠,能显著提高外周血的干细胞数量,并促进干细胞归巢梗死心肌、分化为心肌细胞样细胞,促进心肌再生缩小梗死面积,明显减轻心室重构,保护缺血心肌的基本结构。     

人参皂苷Rg3对大鼠颈动脉球囊损伤模型PCNA、CyclinD1及CDK4表达的影响

目的研究人参皂苷Rg3对大鼠颈动脉球囊损伤后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK) 4表达的影响。方法雄性SD大鼠30只,其随机分成假手术组,模型组,人参皂苷Rg3组(10 mg/kg)。用球囊建立大鼠颈动脉损伤模型,次日灌胃给药,连续14 d;利用苏木精-伊红(HE)染色观察损伤血管组织形态学的变化;利用Western印迹和Real-Time PCR法检测损伤血管组织中PCNA、Cyclin D1及CDK4的表达。结果与假手术组比较,模型组血管新生内膜明显增厚,内膜/中膜面积比明显增加,PCNA、Cyclin D1及CDK4的表达显著增强;与模型组比较,人参皂苷Rg3组损伤血管内膜增生明显减轻,内膜/中膜面积比明显下降,PCNA、Cyclin D1及CDK4的表达明显降低。结论人参皂苷Rg3可能是通过下凋PCNA的表达,抑制细胞周期相关蛋白Cyclin D1和CDK4的活性,从而减轻血管内膜增生。