电针足三里对大鼠脑肠肽含量的影响及神经免疫调控作用

背景针刺对红细胞免疫和T细胞亚群均有正向调节作用,但其机制尚未完全阐明.目的探讨免疫系统在针刺治疗相关疾病中的调控作用及可能的机制.设计随机对照实验研究.地点和对象实验地点解放军第四军医大学唐都医院消化内科实验室.将SD大鼠40只随机分成正常对照组、非经非穴组、免疫抑制组、足三里组、足三里+免疫抑制组(n=8).干预应用放射免疫法测定脑垂体和外周血P物质放免活性(ir-SP)和血管活性肠肽放免活性(ir-VIP)含量的变化;应用流式细胞仪技术,通过微量全血直接免疫荧光染色法测定外周血T细胞亚群以反映细胞免疫功能;应用红细胞C3b受体-酵母菌花环试验和红细胞-IC花环试验检测红细胞免疫功能.主要观察指标各组大鼠的ir-SP和ir-VIP含量;T细胞亚群和红细胞免疫功能的变化.结果足三里组大鼠外周血和脑垂体中P物质(substance P,SP)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)含量[外周血SP(591.83±142.59)pg/L,VIP(92.05±22.11)pg/L;脑垂体SP(47.00±9.12)pg/L,VIP(308.36±34.16)pg/L、T4(CD4+)细胞百分率[(65.55±8.42)%]、C3b受体花环率(RBC-C3bRR)[(15.88±2.99)%]、红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)[(12.14±1.22)%]明显高于正常对照组[(569.36±8,04)pg/L,(20.45±6.74)pg/L,(27.86±7.67)pg/L,(236.71±22.83)pg/L,(43.06±3.14)%,(8.63±2.13)%,(6.75±2.32)%](P均＜0.01);且CD4+与外周血和脑垂体中P物质、血管活性肠肽含量的变化(r=0.744,P＜0.05;r=0.738,P＜0.05;r=0.822,P＜0.05r=0.848,P＜0.05)、CD4+与C3b受体花环率(RBC-C3bRR)呈显著正相关(r=0.719,P＜0.05).免疫抑制组外周血和脑垂体中SP,VIP含量均下降,与正常对照组相比有统计学差异(P＜0.01),T4(CD4+)细胞百分率[(34.50±2.52)%]、C3b受体花环率(RBC-C3bRR)[(5.25±1.17)%]明显低于正常对照组(P＜0.01,P＜0.05).结论针刺治疗可以提高机体免疫力,其机制可能与相应脑肠肽合成和释放增多有关,通过这些免疫递质对神经-内分泌-免疫调节网络发挥作用.     

肺癌患者围手术期免疫功能动态检测及临床价值

目的探讨肺癌患者围手术期T淋巴细胞亚群、NK细胞和可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)的动态变化其临床价值。方法应用荧光免疫法和酶联免疫吸附法(ELISA)对15例健康对照组、15例肺良性肿瘤和60例肺癌患者围手术期T淋巴细胞亚群、NK细胞和sIL-2R进行检测。结果肺癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞明显低于肺良性肿瘤患者和健康对照组(P<0.05),sIL-2R高于肺良性肿瘤患者和健康对照组(P<0.01);肺癌患者术后第二天的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞较术前更低(P<0.01),sIL-2R迅速降低(P<0.01),至术后7～14天除sIL-2R外其它指标恢复到术前水平(P>0.05),术后28天CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞较术前升高,sIL-2R接近术后2天水平(P>0.05);肺癌患者CD3+、CD4+水平无论早期或晚期均比正常对照组下降(P<0.05),CD4+/CD8+比值只有晚期比对照组下降(P<0.01),早期与对照组相似(P>0.05);术后28天根治性切除和姑息性切除CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞较剖腹探察组升高(P<0.01),sIL-2R明显降低(P<0.01)。结论围手术期T细胞亚群、NK细胞和sIL-2R的动态监测是反映肺癌患者免疫功能变化的客观指标,对指导患者的临床治疗有重要的参考价值。     

亚砷酸对BXSB小鼠血清免疫指标的影响

目的观察亚砷酸对BXSB自发狼疮鼠血清免疫指标的影响。方法2个月龄雄性BXSB小鼠12只，随机分为对照组(生理盐水)和治疗组(亚砷酸0．8mg／kg，隔日腹腔注射，共55d)。观察血清IgG、dsDNA、ANA及脾脏淋巴细胞亚群百分率的变化。结果治疗组血清IgG和dsDNA值比对照组明显低，治疗组的CD4％和CD3％也比对照组明显下降。结论亚砷酸能抑制BXSB狼疮鼠的自身免疫反应，对狼疮治疗有一定的作用。     

肠内免疫营养联合重组人生长激素对烫伤大鼠的治疗作用

目的 研究肠内免疫营养联合重组人生长激素（rhGH）对烫伤大鼠营养代谢、免疫功能及炎性反应的影响及其机制。方法 64只SD大鼠制备30％总体表面积（TBSA）Ⅲ度烫伤模型，然后随机分为肠内免疫营养（EIN）组及EIN联合rhGH（EIN＋rhGH）组，两组给予等热量肠内营养液。分别于伤后1、4、7、10d（n=8）抽取静脉血，检测营养代谢、T淋巴细胞亚群、血清免疫球蛋白和有关炎性介质指标。另取8只大鼠检测上述各指标作为伤前对照值。结果 与EIN组比较，EIN＋rhGH组在伤后各时间点的血清总蛋白、自蛋白、转铁蛋白、CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、IgG、IgM和IgA均有所升高，但差异均无显著性（P均〉0．05），CD8。有所降低，差异也无显著性（P均〉0．05）；与EIN组比较，EIN}rhGH组在伤后4、7、10d血清内毒素（LPS）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNFQ）明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论 EIN联合rhGH可以改善烧伤后营养代谢和免疫功能，减少炎性反应，其作用要优于单纯肠内免疫营养。     

不同运动负荷对大鼠巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶活性及细胞免疫功能的影响

目的 探讨不同运动负荷对大鼠免疫功能的影响。方法 40只SD大鼠,随机分为对照组、45min组、90min组、150min组和力竭组,进行无负重游泳训练8组,每周6次。测定腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和血液中表面受体细胞（CD）CD4＋／CD8＋变化。结果 150min组及力竭运动组腹腔巨噬细胞iNOS与对照组相比显性上升（P＜0．05）,且力竭组显高于150min组。血浆CD4＋／CD8＋的比值在90min组、150min组显上升（P＜0．05）,而在力竭组则显下降。结论 适量运动引起的腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）活性提高,增强机体的细胞免疫,增强机体的抗癌能力。而力竭运动引的腹腔巨噬细胞iNOS的活性增强,可能与大强度运动引起的细胞免疫抑制有关。     

不同运动负荷对大鼠巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶活性及细胞免疫功能的影响

目的探讨不同运动负荷对大鼠免疫功能的影响。方法40只SD大鼠,随机分为对照组、45min组、90min组、150min组和力竭组,进行无负重游泳训练8周,每周6次。测定腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血液中表面受体细胞(CD)CD4＋/CD8＋变化。结果150min组及力竭运动组腹腔巨噬细胞iNOS与对照组相比显著上升（P<0.05）,而在力竭组则显著下降。结论适量运动引起的腹腔巨唑细胞诱导型一氧化碳合成酶（iNOS）活性提高,增强机体的细胞免疫,增强机体的抗癌能力,面力竭运动引起的腹腔巨唑细胞iNOS的活性增强,可能与大强度运动引起的细胞免疫抑制有关。     

电针足三里穴对腹腔脓毒症大鼠肠缺血及氧自由基损伤的作用研究

目的 探讨电针足三里穴对脓毒症大鼠肠缺血和氧自由基损伤的保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型.雄性Wistar大鼠32只,随机分为CLP+电针足三里(CLP/EA)组、CLP+假电针(CLP/SEA)组、迷走神经切断+CLP+SEA(VA/CLP/SEA)组、VA+CLP+EA(VA/CLP/EA)组,每组8只.EA组持续针刺双侧足三里穴30 min,刺激强度为2～3 mA,2～100 Hz;SEA组采用相同频率和强度刺激非经非穴(足三里外侧旁开0.5 cm)30 min;VA组于CLP前切断迷走神经.各组大鼠于CLP后6 h测定空肠黏膜血流量(JMBF),处死动物取空肠组织,测定丙二醛(MDA)含量、黄嘌呤氧化酶(XOD)和二胺氧化酶(DAO)活性及肠组织含水量.结果 与CLP/SEA组比较,CLP/EA组JMBF和DAO活性显著增加,XOD和MDA及肠组织含水量显著降低(P均<0.05);VA/CLP/SEA组和VA/CLP/EA组JMBF和DAO活性显著降低,XOD和MDA水平显著升高,且组织含水量明显高于CLP/EA组(P均<0.05).VA/CLP/EA组与VA/CLP/SEA组各指标均无明显差异(P均＞0.05).结论 电针足三里可显著增加CLP大鼠JMBF和DAO活性,减轻肠组织水肿和脂质过氧化损伤;切断腹腔迷走神经能减轻或消除电针的作用,增强小肠组织过氧化反应,加重肠组织水肿和黏膜细胞损害.电针足三里穴对肠缺血和氧自由基损伤的保护机制可能与兴奋胆碱能通路有关.     

移植排斥治疗中不同免疫抑制剂对调节性T细胞活化及功能的影响：结合基础和临床的系统评价

目的系统评价不同免疫抑制剂对调节性T细胞活化及功能的影响。方法计算机检索Cochrane Library（2009年第4期）、MEDLINE（1966～2009.11）和EMbase（1980～2009.11）,收集所有相关临床和基础研究。以移植受者外周血调节性T细胞含量、急排发生率、移植物功能作为临床研究的分析指标;以调节性T细胞的增殖活性、抑制活性、表型及可能机制作为基础研究的分析指标分析纳入文献并进行方法学评价及数据分析。结果共纳入42篇文献,其中临床研究19篇,基础研究23篇。涉及的免疫抑制剂有CNI、Rapa、MMF、IL-2受体阻断抗体、共刺激通路封闭抗体、T细胞清除抗体;主要集中在CNI和Rapa两类免疫抑制剂上。8个关于Rapa与CNI比较的基础研究显示：Rapa能够增强调节性T细胞的增殖活性及抑制功能,而CNI则会抑制其增殖。5个关于Rapa与CNI比较的临床研究（共158例肾移植受者）显示：Rapa组移植受者外周血调节性T细胞含量高于CNI组,但两组间随访6～42个月移植物功能无明显差异。结论 Rapa能够增强调节性T细胞的增殖活性及功能,但增加的调节性T细胞与移植物功能间并未显示出相关性,这不排除是样本量少和随访时间短引起的偏倚。因此,还需要更多大样本长时间的高质量研究以证实或否定上述结论。     

脐血浆神经营养活性蛋白成分对CD34＋细胞增殖分化的影响

背景：迄今为止,人们对于脐血浆中是否存在活性成分及其对于神经发育及神经损伤修复的作用认识尚不足,有待深入研究。目的：检测脐血浆生物活性成分,观察其在神经发育及神经损伤修复中的作用。方法：采用抗体芯片技术对脐血浆和健康青年女性静脉血浆活性成分进行对比分析,采用免疫磁珠从脐血中分选出CD34＋细胞,经体外培养计数观察CD34＋细胞增殖能力,通过免疫组化法观察细胞分化情况。结果与结论：脐血浆中有31种蛋白分子的含量显著高于静脉血浆,其中具有促进神经再生和神经修复潜能的活性蛋白10种,包括FGF4、Frizzled-3、IL-3、RAGE、CRIM-1、Neuritin、Neuropilin-2、Neurturin、SFRP-3、Tomoregulin-1;在CD34＋细胞培养液中加入脐血浆能显著促进细胞增殖,促进细胞向神经细胞分化。     

改善睡眠质量对老年膀胱肿瘤术后患者情绪及免疫功能的影响

目的:探讨睡眠质量的改善对老年膀胱肿瘤术后患者情绪及免疫功能的影响,以及护理干预的实施对提高睡眠质量的可行性。方法:筛选病例68例,并按随机数字表法将其分为实验组与对照组各34例。对照组采用泌尿外科常规治疗与护理。实验组则采用睡眠规律化训练。两组患者实验前后分别进行抑郁自评量表(self-ratingdepressionscale,SDS),焦虑自评量表(self-ratinganxietyscale,SAS),汉密顿焦虑量表(Hamiltonanxietyscale,HAMA)和汉密顿抑郁量表(Hamiltonratingscalefordepression,HRSD)24项评定及血清免疫球蛋白和外周血淋巴细胞亚群指标测定。结果:经2周实验观察,实验组和对照组患者的夜间睡眠时间、夜醒次数、再入睡时间实验前差异无显著性意义(t=0.37～0.69;P>0.05),实验后差异有显著性意义(t=2.55～3.14,P<0.05)。实验前两组患者SDS总分、SAS总分及HRSD和HAMA评分差异无显著性意义,实验后,对照组的各项评分无明显改善,而实验组可见分值明显降低,与实验前比较差异有显著性意义(t=2.40～3.14,P<0.01)。实验组3周后患者免疫球蛋白M(IgM),CD3,CD4,CD8等免疫参数有显著性变化,与对照组免疫球蛋白G(IgG),IgM,CD3,CD4,CD8等免疫参数的改变比较有显著性意义(t=2.58～6.19,P<0.01)。结论:经过对睡眠觉醒节律紊乱的调     

心肌重构对抗β1受体自身抗体及免疫功能的影响

目的 检测心肌重构患者血清中抗β1受体自身抗体和相关免疫指标的变化情况，探讨其变化特点、相互关系及临床意义。方法 选择心室壁增厚、心腔与心壁比值增大、拟行手术的患者28例，正常人10例作为对照。应用链霉亲和素-酶联免疫吸附测定技术(SA-ELISA)，测定血清中抗β1受体自身抗体；应用流式细胞技术，测定CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 含量及CD4^ ／CD8^ 比值，IgG、IgA、IgM及C3、C4含量。结果 当心肌发生重构时，患者产生抗β1受体自身抗体，随着术后好转，该自身抗体也会随之降低。当抗β1受体自身抗体存在时．机体的细胞免疫CD4^ ／CD8^ 比值明显增高，体液免疫5项指标均有先下降后上升的趋势，与细胞免疫基本一致。结论 心肌重构后，患者抗β1受体自身抗体的变化能反映术后疗效及心脏功能的恢复情况。可用来指导临床治疗。免疫功能的变化，说明心肌重构早期，机体免疫功能受到抑制，应注意围手术期采用综合性预防感染的措施。     

督脉电针与NSCs移植联合应用对大鼠脊髓全横断损伤组织NT-3含量及受体表达的影响

目的：探讨督脉电针与神经干细胞（NSCs）联合应用对大鼠脊髓全横断损伤组织神经营养素-3（NT-3）含量及其受体表达的影响。方法：将30只成年大鼠分为对照14d组、督脉电针14d组（电针14d组）、神经干细胞移植14d组（NSCs 14d组）、督脉电针＋神经干细胞移植14d组（电针NSCs 14d组）、神经干细胞移植30d组（NSCs 30d组）和督脉电针＋神经干细胞移植30d组（电针NSCs 30d组）6组，所有动物均实施T10段脊髓全横断手术．其中电针组和电针NSCs组于术后5d进行电针治疗。结果：①电针NSCs 14d组受损伤的脊髓组织含有较高水平的NT-3，其次是电针14d组和NSCs 14d组，对照14d组受损伤的脊髓组织含有较低水平的NT-3。②NSCs30d组和电针NSCs30d组脊髓全横断处的移植神经干细胞均有TrkC表达。结论：督脉电针与神经干细胞移植联合应用能够明显增高大鼠脊髓全横断损伤处邻近组织的NT-3水平；在大鼠脊髓损伤处及邻近组织有些移植神经干细胞表达TrkC。     

CM1—3对大鼠移植性肝癌红细胞免疫功能的影响及抑瘤作用…

本文旨在研究中药对移植性肝癌的红细胞免疫的影响及其抑瘤作用，对大鼠移植性肝癌模型，分别从扶正解毒，活血化瘀解毒，扶正活血化瘀解毒三个不同角度立方ＣＭ１－３进行研究，结果提示扶正解毒组，扶正活血化瘀解毒组红细胞免疫功能提高，与生理盐水组相比差异显著，且红细胞免疫与肿瘤存在着相关性。     

电针调控海马头蛋白mRNA的表达对慢性脑低灌注大鼠学习记忆及海马神经发生的影响

目的:通过电针刺激慢性脑低灌注模型大鼠百会穴和大椎穴,观察海马组织头蛋白(Noggin)mRNA的表达,以及电针对慢性脑低灌注模型大鼠学习记忆和海马神经发生的影响。方法:选取雄性Sprague Dawley(SD)大鼠120只,采用改良永久性结扎双侧颈总动脉法制作慢性脑低灌注模型,将造模成功的104只大鼠分为模型组和电...     

不同标记法及去红细胞法对检测微量脐血CD34+造血干细胞含量的影响

目的 采用ISHAGE(international society of hematotherapy and graft engineering)法和常用的CD34^ 造血干细胞流式检测方法对同一脐血样品进行比较实验，确定更适用于微量脐血CD34 ^ 造血干细胞含量检测的方法。方法 分别采用ISHAGE造血干细胞计数协会推荐方法、低渗NH4C1去红细胞CD45／CD34双色标记法(NH4C1双标法)、OptilyseC溶血剂去红细胞CD34单色标记法(OptilyseC单标法)、低渗NH4C1去红细胞CD34单色标记法(NH4C1单标法)、羟乙基淀粉沉淀去红细胞CD45／CD34双色标记法(HES双标法)检测脐血造血干细胞含量，并比较不同方法测得数据的差异。结果 8份脐血标本用ISHAGE方法测得CD34^ 造血干细胞含量的中位数为0．278％，NH4C1双标法测得结果为0．297％，与ISHAGE方法相比差异无显性。用HES双标、OptilyseC单标法和NH4C1单标法测得的结果分别为5．715％，0．391％和0．741％，与ISHAGE方法相比差异有显性。结论 ISHAGE方法是一种公认的准确性高，重复性好的检测造血干细胞方法。OptilyseC单标法、NH4C1单标法和HES双标法测定结果比实际值偏高。     

电针联合游泳训练对脊髓全横断大鼠脊髓神经营养因子-3及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶的影响

目的:探讨电针联合游泳训练对脊髓全横断大鼠脊髓神经营养因子-3(NT-3)及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的影响。方法:雌性成年SD大鼠180只,随机分为6个组(正常组,假手术组,损伤组,游泳组,电针组,联合组),每组30只。制作脊髓T10全横断损伤模型。术后第5天开始电针及游泳训练(电针每天30min,电流1m A,频率为2/100Hz,波型为疏密波。游泳第1周游一组,以后每周加一组,一组时间为4min。每周治疗7次)。对照组不进行治疗。术后7d、14d、21d、28d、35d进行运动功能评估(BBB评分),治疗结束时取材。用免疫组化及生化来检测相关因子的表达。结果:(1)各治疗组的运动功能评分较损伤组均有提高(除第1周(P0.05)),并随时间的延长效果更为明显;在各干预组中,联合组运动功能的恢复最为突出(P0.01)。(2)治疗组大鼠脊髓损伤区NT-3表达较损伤组均有提高(P0.05),并随时间的延长而提高,治疗组之间联合组NT-3的表达更为突出(P0.01)。(3)各治疗组中血清ALT、AST的表达水平较损伤组均有下降(P0.05),联合组下降最为明显(P0.01)。结论:游泳训练及电针能够促进脊髓损伤后运动功能的恢复,将两者联合应用效果更为明显。     

胃饥饿素在糖尿病神经病理性疼痛中的作用及对大鼠脊髓P2X4/NLRP3表达的影响

目的:探讨胃饥饿素(Ghrelin)在糖尿病神经病理性疼痛中的作用及对大鼠脊髓嘌呤受体2X-4/NOD样受体-3(P2X4/NLRP3)表达的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为5组,每组8只:正常+Ghrelin组(NG组)、正常+[D-Lys3]-GHRP-6组(ND组)、糖尿病组(D组)、糖尿病+Ghrelin组(DG组)、糖尿病+Ghrelin+[D-Lys3]-GHRP-6组(DGD组)。[D-Lys3]-GHRP-6为Ghrelin特异性抑制剂。NG组腹腔注射Ghrelin 200μg/kg 6周,ND组腹腔注射[D-Lys3]-GHRP-6 50 mg/kg 6周。腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg制备大鼠糖尿病模型,造模成功后3 d,腹腔注射Ghrelin 200μg/kg 6周,DGD组腹腔注射Ghrelin 200μg/kg+[D-Lys3]-GHRP-6 50 mg/kg 6周。分别于第2,4,6周测定大鼠机械痛阈(MWT)及坐骨神经导速率(MNCV);6周后处死大鼠,尼氏染色观察脊髓病理学变化,电镜观察腓肠神经病理学改变,Western blot法检测脊髓Ghrelin、P2X4、NLRP3和IL-1β表达水平。结果:与NG组比较,ND组脊髓Nissl染色和腓肠神经电镜显示细胞结构正常,MWT和MNCV无明显变化,P2X4、NLRP3、IL-1β表达水平差异无统计学意义(P>0.05);D组脊髓Nissl染色和腓肠神经电镜显示细胞部分受损,MWT、MNCV显著降低;Ghrelin表达降低,P2X4、NLRP3、IL-1β显著升高(P<0.05)。与D组比较,DG组中脊髓Nissl染色和腓肠神经电镜显示细胞结构相对正常,MWT和MNCV明显升高,Ghrelin表达升高,P2X4、NLRP3、IL-1β表达降低(P<0.05)。与DG组比较,DGD组中脊髓Nissl染色和腓肠神经电镜细胞结构破坏严重,MWT和MNCV明显降低,Ghrelin表达降低,P2X4、NLRP3、IL-1β表达升高(P<0.05)。结论:Ghrelin可能通过P2X4/NLRP3通路参与了糖尿病神经病理性疼痛的调控。