胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中HBV DNA及免疫组织化学检测

我国为乙型肝炎（ＨＢ）高发区，表面抗原携带率达１０％，ＨＢ与肝细胞性肝癌的关系密切，但关于ＨＢＶ与胆管细胞性肝癌（ＣＣＣ）之间关系的研究罕见报道，我们应用ＰＣＲ对ＣＣＣ及肝胆管结石的石蜡包埋组织中ＨＢＶＤＮＡ进行了检测，并与酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳ...     

肝癌病人树突状细胞诱导高效而特异的抗肝癌免疫

目的 以肝癌病人树突状细胞（ＤＣ）体外诱导抗肝癌免疫。方法 自肝癌病人外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ０;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）联合刺激ＰＢＭＣ中ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖,分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２,ＢＥＬ－７４０２,ＬＯＶＯｅｙ ＨＯＳ－８６     

尿中HBV-DNA检测在诊断乙型肝炎病毒相关性肾炎中的意义

自１９７１年Ｃｏｍｂｅｓ等首次报道１例乙肝相关膜性肾病后,ＨＢＶ感染与肾小球肾炎的关系已引起了各国学者的普遍关注。１９８９年我国学者正式将本病命名为乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎（ＨＢＶ－ＧＮ）。我们试就ＨＢＶ－ＧＮ患儿尿中能否检测到ＨＢＶ－ＤＮＡ及其对ＨＢＶ－ＧＮ的诊断意义进行初步探讨。 一、材料和方法 １．临床资料：１９９３－１９９９年本院收治的肾病患儿经临床检测血清ＨＢＳＡｇ或ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３２例,均行肾活组织病理检查及活检组织ＨＢＶ－ＤＮＡ、ＨＢＶ－Ａｇ的检测,并运用原位杂交（ＩＳＨ）…     

血管内皮细胞生长因子是预测肝细胞癌患者术后转移复发的潜在指标

目的　检测肝细胞癌（ＨＣＣ） 患者术前血清血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）水平与ＨＣＣ切除术后转移复发的关系。方法　采用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＣＣ患者血清ＶＥＧＦ水平,同时应用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法对２４ 例相应ＨＣＣ组织ＶＥＧＦ表达水平进行定量分析。结果　高转移复发倾向组ＨＣＣ 患者术前血清ＶＥＧＦ水平（２８３．３３±２６３ ．１５） ｎｇ／Ｌ显著高于低转移复发倾向组（１４７．０４ ±１３２ ．６８） ｎｇ／Ｌ（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 显示,ＨＣＣ患者血清ＶＥＧＦ水平变化与其对应肿瘤组织ＶＥＧＦ表达变化一致。结论　ＨＣＣ患者术前血清ＶＥＧＦ水平可作为预测ＨＣＣ切除术后转移复发的指标。ＨＣＣ患者血清ＶＥＧＦ水平升高是其对应肿瘤组织高表达的结果。     

原发性肝细胞肝癌患者癌组织和血清中HBV前C区基因的检测

目的 乙型肝炎炎病毒（ＨＢＶ）是原发性肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的主要诱导因素之一。为探讨ＨＢＶ在ＨＣＣ中的重要性，我们检测了ＨＣＣ患者癌组织及血清中的ＨＢＶ前Ｃ区基因。方法 根据ＨＢＶ前Ｃ区ＤＮＡ序列，采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对２３例手术切除后病理确诊有ＨＣＣ患者癌组织以及血清进行了检测。结果 ＰＣＲ显示２３例ＨＣＣ患者癌组织和血清中ＨＢＶ前Ｃ区基因的阳性率分别为５２．２％（１２／２３）和３０．４     

人巨细胞病毒感染对肾移植受者血清白细胞介素－6水平的影响

应用ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＧ，诊断肾移植受者ＨＣＭＶ感染，６５例受者中ＨＣＭＶ感染者３９例，非感染者２６例。应用ＭＴＴ法检测受者血清ＩＬ－６生物活性，阐明了ＨＣＭＶ感染对肾移植受者血清ＩＬ－６水平的影响。结果表明：感染与非感染组间血清ＩＬ－６水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；６例原发性感染者血清ＩＬ－６水平随感染时间延长呈增高及降低双相改变，表明慢性迁延性感染者血清ＩＬ－６水平降低。临床工作中监测ＨＣＭＶ感染的肾移植受者血清ＩＬ－６水平变化具有重要意义。     

原发性肝癌与HBV及HCV感染关系的探讨

本文观察原发性肝癌、肝硬化、慢性肝炎及肝脏良性占位性病变等患者血清ＨＢｓＡｇ及抗ＨＣＶ的检测结果。探讨ＨＣＣ与ＨＢＶ及ＨＣＶ感染之间的关系，结果显示，１０６例ＨＣＣ病人中，９６例血清ＨＢｓＡｇ阳性（占９０．６％）；１１例抗ＨＣＶ阳性（占１０．４％）；ＨＢｓＡｇ与抗ＨＣＶ均阳性者７例（占６．６％），表明ＨＢＶ感染与ＨＣＣ的发生关系密切；抗ＨＣＶ阳性率低于日本及欧美报道的结果，提示在我国ＨＣＶ感染与Ｈ     

原位杂交检测乙型肝炎病毒DNA在肾脏的存在

目的：探讨乙型肝炎病毒对肾脏的致病作用。方法：应用地高辛素标记的ＨＢＶ ＤＮＡ两种探针原位杂交，检测１５例乙型肝炎病毒相关性肾炎（ＨＧＶ－ＧＮ）患者肾活检石腊包埋切片ＨＢＶ ＤＮＡ。结果：ＩＳＨ采用ＨＢＶ ＤＮＡ全长段探针９／１５例阳性，其中５例阳性和４例阴性者再用ＨＢＶ ＤＮＡ Ｘ＋Ｃ段探针检查，各获１例阳性（２０％和２５％），阳性信号主要见于肾小管上皮细胞，其次是肾小球系膜细胞，呈胞浆型或核型     

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目的 探讨拉米夫定防治乙肝病毒在肝癌围手术期活跃的效果。方法 对７２例肝癌合并ＨＢＶ感染者随机分组,研究组的３８例在围手术期每日１次给予拉米夫定１００mg,进行定量ＨＢＶ ＤＮＡ及其它检查。对照组在围手术期不进行抗乙肝病毒治疗。结果 对照组的ＨＢＶ ＤＮＡ量,在术后１周内、２周内较术前的增高值具显著性意义（Ｐ＜０.０１）,研究组中术后１周内、２周内ＨＢＶ ＤＮＡ量较术前的ＨＢＶ ＤＮＡ量低值亦有显著性意义（Ｐ＜０.０１）,皆低于安全治愈阈值;两组的术前、术后Ｃhild分级,术前、术后ＡＬＴ比较差异无显著性意义（Ｐ＞０.０5）。术后２周内并发症发生率比较,差异有显著性意义（Ｐ＜０.０５）。结论 外科治疗可激活ＨＢＶ的复制能力,须加强肝癌围手术期对ＨＢＶ的防范。拉米夫定有强大的抗ＨＢＶ功能,可短期内迅速降低ＨＢＶ ＤＮＡ的量至安全范围,应用拉米夫定可以预防和治疗肝癌围手术期乙肝病毒的活跃。但其短期内改善肝脏功能的效果不明显。     

人巨细胞病毒感染对肾移植受者血清白细胞介素—6水平的影响

应用ＰＣＲ检测ＨＣＭＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ，ＩｇＧ，诊断肾移植受者ＨＣＭＶ感染，６５例受者中ＨＣＭＶ感染者３９例，非感染者２６例。应用ＭＴＴ法检测受者血清ＩＬ－６生物活性，阐明了ＨＣＭＶ感染对肾移植受者血清ＩＬ－６水平的影响。结果表明：感染与非感染组间血清ＩＬ－６水平差异无显著性；６例原发性感染者血清ＩＬ－６水平随感染时间延长呈增高及降低双相改变，表明慢性迁延性感染者血清ＩＬ－     

梗阻性黄疸兔血浆内毒素和内皮素1含量与血流动力学改变的关系

研究梗阻性黄疸内毒素血症对血管内皮细胞产生内皮素１（ＥＴ－１）的作用及ＥＴ－１与梗阻性黄应时血流动力学改变的关系。方法用肝总管结扎法建立梗阻性黄疸（ＯＪ）兔模型,偶氮显色法定量测定血内毒素含量,特异性放射免疫分析法测定血浆ＥＴ－１,生理记录仪和电磁血流计测定心率（ＨＲ）、平均动脉压（ＭＡＰ）、心输出量（ＣＯ）、肝动脉血流量（ＨＡＢＦ）、门静脉血流量（ＰＶＢＦ）、门静脉压力（ＰＶＰ）及内脏血管阻力（ＳＡＲ）。结果ＯＪ组血浆内毒素含量明显高于正常对照（ＮＣ）组;血浆ＥＴ－１低于ＮＣ组。ＯＪ组血浆内毒素与血浆ＥＴ－１含量呈负相关;ＯＪ组血浆ＥＴ－１含量与ＭＡＰ、ＨＡＢＦ、ＰＶＢＦ及ＳＡＲ呈正相关。结论梗阻性黄疽时血浆ＥＴ－１水平降低,内毒素血症不能刺激血管内皮细胞产生ＥＴ－１,血浆ＥＴ－１水平下降在系统血流动力学改变中起一定的作用。     

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目的 探讨血中的一氧化氮等自由基在急性胰腺炎（ＡＰ）及并发全身炎症反应综合征（ＳＩＲＳ）发病中的作用。方法 ３９例ＡＰ病人按有无并发ＳＩＲＳ分为有ＳＩＲＳ组及无ＳＩＲＳ组,另取５０例健康正常人作为对照组,检测血浆一氧化氮（Ｐ－ＮＯ）、血浆维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、血浆维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、血浆β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）、全血还原型谷光甙肽（ＷＢ－ＧＳＨ）的含量以及红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、红细胞过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）的活性变化。结果 有ＳＩＲＳ的ＡＰ组较无ＳＩＲＳ的ＡＰ组Ｐ－ＮＯ的含量明显增加,而Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、ＷＢ－ＧＳＨ的含量及Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ的活性明显减少（Ｐ〈０．００１）;病人组与正常对照组比较得出相同的结果（Ｐ〈０．００１）。结论 体内自由基释放－清除机制和氧化机     

ERCP及ES对腹腔镜胆囊切除术的辅助作用

将８８６例腹腔镜胆囊切除术（ＬＣ）的病人分为两组。院内组４０７例，在ＬＣ前选出其中１１６例可疑胆总管结石者进行ＥＲＣＰ检查，将检出的３例胆道蛔虫病人先行内镜胆管取出（ＥＲＢＡ）。７例胆总管结石病人先行内镜括约肌切开（ＥＳ）取石。然后再行ＬＣ。术后仅２例胆管残石（０．５％）。院外组因没有条件行ＥＲＣＰ，ＬＣ术后经证实的胆管残石发生率为３．３％（１６／４７９），明显高于院内组（Ｐ＜０．０１）。对于两组共１８例胆管残石病人，１４例通过ＥＳ取出残石．证明ＥＲＣＰ及ＥＳ与ＬＣ相结合，更能充分发挥微创外科的积极作用。     

膀胱癌组织微血管计数和上皮钙粘附素表达的临床意义

目的：探讨微血管计数（ＭＶＣ）和上皮钙粘附素（Ｅ－ＣＤ）表达与膀胱癌恶性程度、浸润及复发的关系,方法：应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法检测８１例膀胱移行细胞癌组织ＭＶＣ和Ｅ－ＣＤ的表达情况。结果：（１）组织学分级Ⅰ级和Ⅱ级间的ＭＶＣ没有显著性差异,但两者与Ⅲ级比较均有显著性差异（Ｐ均〈０．０１）。浸润性癌和复发组膀胱癌的ＭＶＣ分别显著高于浅表性癌（Ｐ〈０．０１）和未复发组膀胱癌（Ｐ〈０．０１）。（２）Ｅ     

肾癌原癌基因C－erb B－2蛋白产物的表达及意义

为探讨肾癌原癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物的表达及意义，采用免疫组化Ｓ－Ｐ（过氧化物酶－链霉卵白素）法对５５例肾癌组织中Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白进行检测。显示Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白呈局限性弱染色，表达率为２１．８％，与肿瘤直径相关（Ｐ＜０．０１），Ｒｏｂｓｏｎ分期Ｉ，Ⅱ期肿瘤阳性表达率明显高于Ⅲ、Ⅳ期肿瘤（Ｐ＜０．０５），随肿瘤分级增高阳性表达率呈递减趋势，颗粒细胞癌阳性表达率明显高于透明细胞癌（Ｐ＜０．０１），阳性表达组与阴性表达组预后无差异。结果提示：ＣｅｒｂＢ－２癌基因可能参与了肾癌发生的初始事件，而与晚期事件无关，强调颗粒细胞癌可能与Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因关系密切。     

HESW与抗癌药物对膀胱癌细胞C－myc癌基因表达的影响

利用国产液电碎石机（ＥＳＷＬ－Ⅲ／２Ｍ型）产生的高能冲击波和１０－羟基喜树碱单纯或联合处理人膀胱癌细胞系（ＢＴ５６３７）。实验分对照组，ＨＥＳＷ组，药物组和联合组。冲击波条件：２００ＳＷ（１０ｋＶ，６０次／ｍｉｎ），药物浓度（０．１μｇ／ｍｌ），水温３７℃。采用α－３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记Ｃ－ｍｙｃ癌基因探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，分析四组癌细胞Ｃ－ｍｙｃ癌基因表达。结果表明：对照组Ｃ－ｍｙｃ癌基因表达明显，其转录产物为２．７ｋｂ，而实验各组Ｃ－ｍｙｃ癌基因表达完全被抑制。结论：ＨＥＳＷ，１０－羟基喜树碱及其联合对人膀胱癌细胞的生长抑制作用与Ｃ－ｍｙｃ癌基因表达有密切关系。     

重组人生长激素促进烧伤病人创面愈合机制初探

目的观察严重烧伤病人接受重组人生长激素（ｒｈＧＨ）治疗后血清生长激素（ＧＨ）、胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）、创面ＤＮＡ合成。细胞增殖活性及表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达的变化，探讨生长激素促进烧伤创面愈合的机制。方法３３例严重烧伤病人随机分成ｒｈＧＨ组（１８例）和对照组（１５例）。ｒｈＧＨ组每晚１０点接受ｒｈＧＨ皮下注射（０．１ｍｇ· ｋｇ~(－１)），疗程 １４ｄ。ＥＬＩＳＡ检测血清 ＧＨ和 ＩＧＦ－１浓度；流式细胞计检测细胞 ＤＮＡ增殖指数（ＰＩ）和合成期细胞百分数（ＳＰＦ）；免疫组化学检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。ＥＧＦＲ、细胞角蛋白（ＣＫ）的表达。结果ｒｈＧＨ组血清ＧＨ、ＩＧＦ－１浓度较高，创面ＰＩ、ＳＰＦ明显高于用药前和对照组。免疫组化显示ＰＣＮＡ、ＥＧＦＲ、ＣＫ的表达明显增加。结论ｒｈＧＨ可以提高严重烧伤病人血清ＧＨ、ＩＧＦ－１水平，促进烧伤创面细胞ＤＮＡ合成和上皮细胞增殖，增加 ＥＧＦＲ表达，加速创面上皮化，促进烧伤创面愈合。     

肝门部胆管癌组织内血管形成与细胞凋亡相关性的研究

目的　研究肝门部胆管癌中细胞凋亡和血管形成的相互关系。方法　采用原位末端标记技术和抗因子Ⅷ的抗体分别检测肝门部胆管癌细胞凋亡指数和瘤内微血管的密度,同时用免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ） 和胆管癌细胞凋亡调控基因ｂｃｌ２ 的表达。结果　肝门部胆管癌组织ＶＥＧＦ阳性表达率５５－５６％ （２０／３６）,ＶＥＧＦ阳性表达与ＭＶＤ呈正相关（Ｐ＜ ０－０１） 。高血管组的ｂｃｌ２ 阳性表达明显高于低血管组（ Ｐ＜ ０－０５）,而低血管组的细胞凋亡指数高于高血管组（ Ｐ＜０－０１）。ｂｃｌ２ 表达丰富的区域,ＶＥＧＦ的表达率高。结论　肝门部胆管癌血管形成影响细胞凋亡的敏感性和发生率。     

乙型肝炎病毒感染与小儿膜性肾炎

目的研究ＨＢＶ感染在小儿膜性肾炎的致病作用。方法３２例肾穿刺活组织检查诊为膜性肾炎的小儿作为研究对象。所有病例检测血清ＨＢＶ感染标志物，２９例应用免疫组化技术检测肾组织ＨＢＶ抗原，１２例应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交检测肾组织ＨＢＶＤＮＡ，采用３２Ｐα－ｄＣＴＰ标记的探针；２８例应用原位杂交检测肾组织ＨＢＶＤＮＡ，采用地高辛标记的探针。结果三种方法综合分析，３２例膜性肾炎中，肾组织ＨＢＶ抗原和（或）ＨＢＶＤＮＡ阳性者共３０例，达９３．７４％。结论进一步证实ＨＢＶ感染在我国小儿膜性肾炎起主要致病作用     

IgA肾病是否与乙型肝炎病毒有关？

探讨ＩｇＡ肾病与乙型肝炎病毒的关系。方法采用免疫组化技术检测ＩｇＡ肾病患者肾组织中ＨＢＶ抗原及Ｓｏｕｒｔｈｅｒｎ印迹分子杂交技术检测肾组织中ＨＢＶＤＮＡ。结果８５例ＩｇＡ肾病患者血清ＨＢｓＡｇ阳性１５例（１７．６５％），肾组织ＨＢＶ抗原阳性２６例（３０．５９％），其中肾小球阳性１８例（５７．１４％），ＨＢｃＡｇ在肾小管和肾间质中阳性分别为９例（３４．６７％）和２例（７．６９％）；２例测肾组织ＨＢＶＤＮＡ，１例阳性；肾组织ＨＢＶ抗原阳性组比阴性组临床和病理改变更严重。结论乙型肝炎病毒与ＩｇＡ肾病的发病密切相关