高纯脱水河豚毒素的结构表征与毒力测定研究

目的对制备的高纯脱水河豚毒素(Anh-TTX)样品进行结构验证与毒力测定。方法采用LC-FLD检测法分析Anh-TTX样品纯度,采用MS和~1H NMR对样品进行结构验证;进行高纯Anh-TTX对小鼠的LD_(50)测定。结果Anh-TTX样品纯度为98.3%,样品MS图谱信息与Anh-TTX的结构完全相符,~1H NMR数据与文献报道值基本一致;测得高纯Anh-TTX对小鼠的LD_(50)为(1862±6)μg·kg~(-1)。结论Anh-TTX样品的纯度高,得到MS和~1H NMR的确证。Anh-TTX对小鼠有较强毒性,但毒力远低于河豚毒素(TTX)。     

11-脱氧河豚毒素的结构表征与毒力测定研究

目的对制备获得的11-脱氧河豚毒素(11-deoxyTTX)纯品进行结构确证与毒性测定。方法采用HRMS、1 H NMR和13 C NMR对样品进行结构表征;同时进行11-deoxyTTX对小鼠的急性毒性试验。结果样品的HRMS图谱信息与11-deoxyTTX相对分子质量吻合;1 H NMR和13 C NMR谱揭示了两组数据,该数据与文献报道基本一致;测得11-deoxyTTX对小鼠的半数致死量(LD50)为(128.82±2.09)μg.kg-1。结论 11-deoxyTTX是以半缩醛型-内酯型的互变异构体存在,与河豚毒素(TTX)的结构差别在于TTX中C-11上的羟基被氢取代。11-deoxyTTX的毒性很强,但明显低于TTX的毒性,表明TTX中C-11上的羟基对阻滞钠离子进入钠通道也发挥了重要作用。     

依普利酮合成中有关物质的NMR研究

在合成依普利酮时得到4个结构未知的有关物质,采用1H NMR、13C NMR、DEPT、二维谱1H-1H COSY、HMBC、HMQC、IR和高分辨质谱(HRMS)研究并确定这些化合物的结构,并对它们的1H NMR、13C NMR全谱给予相应归属.     

浒苔正丁醇相化学成分及其抗肝损伤活性研究

目的研究浒苔(绿藻门,石莼科,浒苔属)正丁醇萃取相的化学成分及其对CCl4和D-GalN诱导的小鼠肝损伤的保护作用。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱、薄层制备等方法进行分离纯化;利用MS、1 H NMR、13 C NMR波谱分析结合文献对照鉴定化合物结构;用CCl4和D-GalN诱导小鼠肝损伤造模,检测小鼠肝脏指数,血清中AST、ALT水平,肝脏中总SOD、MDA水平来探讨其对肝损伤的保护作用。结果从浒苔正丁醇萃取相分离鉴定出了6种化合物:对羟基苯甲酸甲酯,2-脱氧尿嘧啶核苷,尿苷,尿嘧啶,次黄嘌呤,腺嘌呤;活性实验方面,与模型组相比,中剂量组、高剂量组均可...     

HPLC法测定河豚毒素的含量及稳定性

目的:建立测定河豚毒素含量的反相高效液相色谱法,并用该方法对河豚毒素及注射剂的稳定性进行测定。方法:以ZORBAX C8(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱分析柱;0.02 mol·L-1磷酸氢二钠-0.02 mol·L-1磷酸二氢钾(1:1)为流动相;流速0.4 mL·min-1;UV检测波长210 nm,柱温为25℃。结果:河豚毒素在0.5～80μg·mL-1范围内线性关系良好,通过该方法的测定,河豚毒素及注射剂在光、热等因素的影响下,含量明显下降,杂质明显增加。结论:该方法可以为河豚毒素原料及注射剂的稳定性研究提供灵敏、准确的检测方法。河豚毒素及注射剂对光和热的稳定性较差,需避光,低温(0～4℃)保存。但河豚毒素原料对光的稳定性优于注射剂。     

河豚毒素对斑马鱼的急性毒性研究

目的 研究河豚毒素对斑马鱼的急性毒性。方法 在斑马鱼中用最大非致死浓度(MNLC)和10%致死浓度(LC₁₀)测定和评估河豚毒素的急性毒性。结果 经Origin 8.0软件模拟,得出河豚毒素对斑马鱼急性毒性MNLC为8.62μmol/L,LC₁₀为15.2μmol/L。在本实验条件下,16.0μmol/L及以上浓度河豚毒素可诱发斑马鱼心包水肿和心律异常,终点时出现部分或全部死亡。河豚毒素的急性毒性靶器官是心脏和肝脏,主要表现为心包水肿、心律异常和卵黄囊吸收延迟,毒性出现浓度为0.958μmol/L。结论 河豚毒素对斑马鱼具有一定的心脏和肝脏毒性,且其毒性与河豚毒素的浓度相关。     

胆酸中有关物质的分离及结构鉴定

胆酸是以牛或羊的胆汁、胆膏为原料经皂化、酸化和精制而成,主要用于配制人工牛黄、体外培育牛黄以及复方制剂清开灵口服液和注射液.从胆酸原药中分离得到两个结构未知的有关物质,采用核磁共振一维谱(1H NMR、13C NMR、DEPT谱)、二维谱(1H-1H COSY、HSQC、HMBC)及高分辨质谱(HRMS)研究其结构,分别为3α,12α-二羟基-7-氧代胆烷酸和3α,7α-二羟基-12-氧代胆烷酸,并对它们的1H NMR和13C NMR信号给予相应归属.     

河豚毒素及其注射剂中有关物质的分离与测定

河豚毒素 (ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ)是由河豚鱼的卵和肝脏中提取出来的 ,对人和动物有极毒 ,给药途径为肌肉注射 ,对人的半数致死量 (ＬＤ50 )为 10 μｇ·ｋｇ- 1·ｄ- 1。另一方面药理试验表明 ,河豚毒素有镇痛作用 ,在戒毒方面有显著效果。在河豚毒素的研究中 ,有关河豚毒素分离测定的研究 ,在已报道的综述方法[1] 中生物法是最早被采用的方法 ,但该方法重现性差 ;紫外法和气相色谱法虽然有很大改进 ,但它们均需对样品进行衍生化处理 ,方法繁琐。此外 ,荧光法[2 ] 、毛细管电泳法[3] 等也曾被采用但均不理想。本文采用高效液相色谱法对…     

亲水液相色谱-质谱联用法测定河豚子中的河豚毒素

目的:建立河豚子中河豚毒素的亲水液相色谱三重四极杆质谱联用(LC-MS/MS)定量检测方法。方法:样品经匀浆,超声,乙腈沉淀离心后取上清液进样测定。色谱柱为Innovation HP Amide柱(100 mm×3.0 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%甲酸(体积比为70∶30);流速为0.5 mL.min-1;柱温为30℃;进样量5μL。以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子对为[M+H]+320.1→162.1。结果:河豚毒素的线性范围为0.0313～2.00μg.mL-1,r=0.9999;检测限(S/N=3)为0.30 ng.mL-1,即3.0 pg;加样回收率在95.9%～102.7%之间。结论:本法简单、快速,灵敏度高,重复性好,适用于河豚子中河豚毒素的定量测定。     

海洋细菌S-9801代谢产灵菌红素最佳培养条件的研究

目的对从渤海大陆架海泥中分离得到的细菌S-9801代谢产灵菌红素最佳培养条件进行了研究。方法通过16S rDNA测序鉴定菌株S-9801属于弧菌属(Vibrio sp.),从该菌的次级代谢产物中分离得到一个红色化合物;运用1H NMR、13C NMR、HPLC-TOF-MS等波谱数据进行结构鉴定,确定该红色化合物为灵菌红素(prodigiosin,PG)。通过正交实验,对菌株S-9801产灵菌红素的培养条件进行了优化。结果与结论以灵菌红素的产量为指标,确定细菌S-9801大量产生灵菌红素的最佳培养条件为:采用蛋白胨和酵母粉培养基,NaCl浓度2%,pH5,30℃条件下培养48h。在该最佳培养条件下灵菌红素产量可达30mg·L-1。     

皱纹盘鲍性腺正丁醇萃取相化合物研究

目的研究皱纹盘鲍性腺正丁醇萃取相的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层层析等手段对化合物进行分离纯化;应用理化性质和波谱分析(1H NMR,13C NMR,MS)并结合文献对照,鉴定化合物的化学结构。结果与结论从皱纹盘鲍性腺的正丁醇萃取相分离并鉴定了8个单体化合物,即:焦谷氨酸甲酯,1-甲基胸腺嘧啶,2’-脱氧胸腺嘧啶核苷,尿嘧啶,2’-脱氧尿嘧啶核苷,3-Hydroxy-4-hydroxymethyl-4-butanolides,尿嘧啶核苷,3-甲基胸腺嘧啶。     

米氮平有关物质C和D的合成

为控制抗抑郁药米氮平产品质量,分别合成了美国药典34版(USP34-NF29)收载的(14bRS)-2-甲基-3,4,10,14b-四氢吡嗪基[2,1-a]吡啶并[2,3-c] [2]苯并氮草-1(2H)-酮(有关物质C)及(14bRS)-1,2,3,4,10,14b-六氢吡嗪基[2,1-a]吡啶并[2,3-c] [2]苯并氮革(有关物质D),并经1H NMR、13C NMR和HRMS等确证结构.     

红藻多糖卡拉胶分子修饰研究I．酸降解

本文采用酸水解法对红藻多糖κ—卡拉胶进行降解，经超通分级，凝胶柱层折分离，获得8个卡拉胶低聚糖及寡糖组分；用高效凝胶渗透色语法(HPGPC)测得的平均相对分子质量Mw在1，750～11，500之间(平均聚合度DP4～28)。用光谱分折方法(1R，^1H—NMR，和^13C—NMR)测定了结构，并对理化性质进行了分折。     

环孢菌素A代谢产物的毒性

环孢菌素 A(CsA)进一步代谢可产生二十余种代谢产物,本文报道其中八种主要代谢产物对猪管状细胞(LLC-PK_1)的作用。CsA 代谢产物的分离从服用 CsA 的肾移植患者尿中通过乙醚提取和高压液相色谱分离 CsA 代谢产物。代谢产物的结构和纯度通过 FAB/MS 和~1H、~(13)C NMR 方法测定。     

河豚毒素的医药开发前景

河豚毒素（Tetrodotoxin，TTX）是一种氨基全氢喹唑啉化合物，分子式为C11H17N3O8，主要存在于河豚鱼卵巢、肝脏等内脏中^[1]，纽虫、蝾螈、蓝斑章鱼等海洋生物^[2]，为自然界毒性强的非蛋白质神经毒素。其在自然界中较难降解，且降解产物也有一定的毒性。将含有河豚毒素的海洋生物垃圾弃于自然界，     

奈韦拉平的波谱特征和结构确证

目的确定奈韦拉平的结构。方法采用IR、UV、MS、^1H—NMR、^13C-NMR对奈韦拉平进行结构确证，对所有的^1H—NMR和^13C—NMR谱进行了归属。结果与结论根据谱学特征确证了奈韦拉平的结构。     

绞股蓝皂苷Ⅸ的核磁共振研究

从加拿大产西洋参茎叶中分离得到一个化合物 ,为绞股蓝皂苷Ⅸ .利用1H NMR ,13C NMR和 2DNMR(2D HOHAHA ,HMBC)等谱学方法明确了其结构 ,并对其1H和13C谱数据进行了明确归属 ,为与绞股蓝皂苷Ⅸ结构类同的皂苷类化合物的结构研究提供了可靠的谱学方法和数据 .     

不同纯度山楂叶总黄酮降血脂作用的比较研究

目的观察不同纯度的山楂叶总黄酮降血脂作用的差异,为开发新一代降脂药物采用何种纯度的总黄酮样品为原料提供依据。方法采用高脂饲料造模的小鼠高脂血症模型,分别给予含等量总黄酮的不同纯度的山楂叶总黄酮样品,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的值。结果两种实验样品均显著降低小鼠血清TC和TG值,两者之间无显著性差异。结论不同纯度的山楂叶总黄酮样品均有明显降低高脂血症小鼠TC和TG的作用,但纯度为80%的样品用量仅为20%样品的1/4,为减少服用量,提倡用纯度80%的山楂叶总黄酮为原料进行制剂。     

对氯苄基四氢小檗碱氯化盐光学异构体的结构确证

目的:确证对氯苄基四氢小檗碱氯化盐的四个光学异构体的结构.方法:通过对对氯苄基四氢小檗碱氯化盐四个光学异构体的氢谱(1H NMR)、碳谱(13C NMR,DEPT135)、氢-氢相关谱(1H-1H COSY)、碳氢相关谱(HMQC)、碳氢远程相关谱(HMBC)的解析,对所有的1H NMR,13C NMR谱的信号进行了归属.结果及结论:确证了对氯苄基四氢小檗碱氯化盐的四个光学异构体的光学结构.     

河豚毒素单用及与吗啡合用对大鼠福尔马林致痛的影响

目的:探讨河豚毒素(tetrodoxin,TTX)单用及与吗啡合用的镇痛效应。方法:采用大鼠福尔马林致痛实验,分别单独肌注河豚毒素及将微量河豚毒素(0.39μg·kg~(-1),0.19μg·kg~(-1))与吗啡联合给药,比较合用是否具有镇痛增强或协同效应。采用概率单位法计算镇痛的半数抑制量(ID_(50))。结果:TTX的镇痛半数抑制量(ID_(50))为0.8μg·kg~(-1);单用吗啡的ID_(50)为2.6mg·kg~(-1);TTX0.39μg·kg~(-1)(1/50 LD_(50))和0.19μs·kg~(-1)(1/100 LD_(50))与吗啡合用,吗啡的镇痛ID_(50)分别下降为0.5mg·kg~(-1),1.1mg·kg~(-1),联合用药的性质经检验具有协同作用。结论:河豚毒素对福尔马林所致疼痛具有镇痛作用,与吗啡联合应用具有协同镇痛效应。