川白芷花药培养技术体系的建立

目的:探讨川白芷花药培养中愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:以川白芷花药为外植体,以MS为基本培养基,研究低温(4℃)预处理时间、光暗培养条件以及不同激素配比对川白芷花药培养愈伤组织诱导和植株再生的影响.结果:不经过低温预处理的花药诱导率最高,低温预处理2d的花药诱导率次之;暗培养为最佳培养条件;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0mg·L-12,4-D+1.0mg·L-16-BA,愈伤组织诱导率可达38.89％;MS +0.5 mg·L-1NAA+1.5 mg·L-1KT+10mg· L-1AgNO3适于不定芽的诱导,不定芽转入附加0.5 mg·L-1IBA的1/2 MS的生根培养基上,生根后获得完整的再生植株.结论:初步建立了川白芷花药培养愈伤组织诱导及植株再生体系.     

盾叶薯蓣四倍体诱导的研究

目的 选育盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis新种质资源,以期为高产、高皂苷元含量薯蓣育种打下基础。方法 以刚露出绿色芽点的盾叶薯蓣愈伤组织块为材料,采用两种方法处理:①愈伤组织块浸泡到秋水仙素水溶液中。②培养基中添加秋水仙素。结果 成功获得了染色体数加倍的薯蓣新材料,其中以1×103mg/L秋水仙素水溶液浸泡24 h效果最好,诱导率达到35.2%,四倍体植株与二倍体亲本相比,二者在外观形态、生理指标、显微结构上有明显区别。结论 四倍体植株体型大、具生长优势,离体条件下利用愈伤组织块诱导多倍体是盾叶薯蓣倍性育种的一条有效途径。     

不同盾叶薯蓣诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量分析

目的 探讨离体培养中诱导材料对盾叶薯蓣再生植株中薯蓣皂苷元含量的影响.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对不同材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量进行分析.结果 薯蓣皂苷元含量高的材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量一般也较高;相同材料诱导的再生植株中薯蓣皂苷元含量差异不明显.结论 盾叶薯蓣具有一定的遗传稳定性,要获得薯蓣皂苷元含量不低于2%的皂苷工业原料,选择薯蓣皂苷元含量高的种质引种和培育优良品种是十分重要的.     

盾叶薯蓣成熟叶片植株再生的研究

目的 :以成熟叶片为外植体 ,建立一套盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis的快速繁殖技术。方法 :以大量元素减半的MS培养基为基本培养基 ,通过研究BA ,NAA和IBA对愈伤组织诱导、不定芽分化、不定芽增殖和生根的影响找出相应的最佳激素组合。结果与结论 :在含 1.0～ 5 .0mg·L^-1BA和 1.0～ 2 .0mg·L^-1NAA的培养基上 ,80 %以上的叶片可以在 60d内形成愈伤组织 ;愈伤组织转到含 2 .0～ 5 .0mg·L-1BA和 0 .2～ 0 .5mg·L^-1NAA的培养基上后 ,60 %以上的愈伤组织可以在 50d内分化出不定芽 ;在含 2 .0mg·L-^-1IBA的培养基上 ,100 %的不定芽可在20d内长出 4～ 6条不定根。再生植株移栽后 ,生长健壮 ,成活率达 80 %以上。     

湖北麦冬花药愈伤组织诱导及再生植株的获得

目的:探讨药用植物湖北麦冬花药愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:以湖北麦冬花药为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验.常规压片法结合显微镜进行再生植株染色体的计数分析.结果:MS+2,4-D 1.0 mg·L~(-1)+KT 2.0 mg·L~(-1)诱导愈伤组织效果最好,愈伤组织诱导率可达41.07%.MS+6-BA 1.5～2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1～0.3mg·L~(-1)适于不定芽的诱导,不定芽转入附加NAA 0.1～0.3 mg·L~(-1)的1/2 MS的生根培养基上,生根后获得完整的再生植株,再生植株为体细胞起源.同时,讨论了4℃低温预处理对愈伤组织诱导的影响.结论:建立了湖北麦冬花药体细胞组织培养体系和快速繁殖途径.     

基于胚性愈伤的四倍体盾叶薯蓣人工种子研究

目的:建立四倍体盾叶薯蓣人工种子的制作方法,并考察相关影响因素,为四倍体盾叶薯蓣的产业化推广提供技术支持。方法:以四倍体盾叶薯蓣的胚性愈伤作为人工种子的包埋繁殖体,研究人工胚乳组成、种皮基质、贮藏环境、萌发基质等因素对人工种子萌发与成苗的影响。结果:种皮基质为4%海藻酸钠+2%Ca Cl2+2%壳聚糖,胚乳成分为1/2 MS液体培养基+0.2 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L青霉素+0.3%多菌灵粉剂+0.2%苯甲酸钠+1.0%蔗糖+0.5%活性炭+1.0%木薯淀粉时,人工种子的萌发率和成苗率最高;4℃条件下贮藏20 d后其萌发率及成苗率分别为76.7%、71.7%。结论:以胚性愈伤作为包埋繁殖体的四倍体盾叶薯蓣人工种子制作技术具有生产应用前景。     

催眠睡茄植株再生体系的建立

目的:建立和优化催眠睡茄植株再生体系。方法:以催眠睡茄的叶片作为外植体,探讨不同植物生长物质对愈伤组织诱导,丛生芽分化以及试管苗生根的影响。结果和结论:愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+1.0 mg.L-12,4-D+0.1mg.L-1KT;丛生芽诱导的最优培养基是MS+1.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA,试管苗生根诱导最优培养基为1/2MS+0.5 mg.L-1NAA;在珍珠岩-腐殖土(1∶1)的基质中,再生植株室外移栽成活率达到92%。     

药用植物景天三七离体培养技术研究

目的探究建立完整的药用植物景天三七离体培养体系的方法。方法以药用植物景天三七的叶片为外植体,选用MS为基本培养基,附加激素6-BA、NAA、IBA和2,4-D,研究了不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导、不定芽诱导及丛生芽增殖的影响。结果诱导愈伤组织的培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA1.0mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4.5g·L-1的效果最佳;诱导不定芽的培养基以MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4.5g·L-1的效果最好;增殖培养以MS+6-BA 1.0 mg.L-1+NAA0.01 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4.5 g·L-1为佳;生根培养是以1/2MS+NAA0.3mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4.5g·L-1的培养基最好。结论筛选出了愈伤组织诱导、不定芽诱导、增殖和生根适宜的培养基,建立了药用植物景天三七的离体培养体系。     

野生小红参组织培养的初步研究

用不同外植体、基本培养基、光照条件、激素对野生药材小红参愈伤组织产生和不定芽形成进行实验研究.发现以真叶为外植体,进行暗培养,以MS为基本培养基诱导效果最好.当培养基为MS BA0.2mg/L NAA2.0mg/L时,愈伤组织的诱导率可达100%;培养基为MS KT1.0 mg/L IAA0.1 mg/L时,虽然其不定芽诱导率只有50%,但单株不定芽数为3,不定芽长势最好.     

野生小红参组织培养的初步研究

用不同外植体，基本培养基、光照条件、激素对野生药材小红参愈伤组织产生和不定芽形成进行实验研究。发现以真叶为外植体，进行暗培养，以MS为基本培养基诱导效果最好。当培养基为MS BA0.2mg／L NAA2.0mg／L时，愈伤组织的诱导率可达100％：培养基为MS KT1.0mg／L IAA0.1mg／L时．虽然其不定芽诱导率只有50％，但单株不定芽数为3，不定芽长势最好。     

老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

三裂叶野葛茎段和叶柄培养成再生植株

三裂叶野葛的叶柄和茎段外植体在含有６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上产生愈伤组织,愈伤诱导率分别为１００％和９４％,为进一步分化出芽,芽再生率分别为１００％和３３．３％,而在添加６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中叶柄和茎段外植体的愈伤诱导率分别为１００％和６４．３％,芽再生率分别为５７．１％和２１．４％,茎长成嫩枝后转移至增加０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的     

乌头离体培养和快速繁殖

目的建立乌头的快繁体系。方法利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA4.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.5mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L和MS NAA0.1mg/L 6-BA2.0mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS IBA1mg/L AC3.0g/L。结论以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。     

杭白菊子叶和下胚轴组织培养技术的研究

目的以杭白菊子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,寻找适宜诱导菊花子叶和下胚轴愈伤组织发生和分化的激素配比。方法采用不同的激素配比MS培养基对杭白菊子叶和下胚轴分别培养。结果试验设计的培养基均能诱导产生愈伤组织,但不同的激素配比对芽诱导分化的影响不同。其中MS IAA0.3mg/L 6-BA12mg/L诱导菊花子叶和下胚轴得到的愈伤组织粗大且致密;MS IAA0.3mg/L 6-BA4mg/L适宜子叶不定芽的诱导,诱导率为67.5%;MS KT2mg/L NAA0.2mg/L适宜下胚轴不定芽的诱导,诱导率为62.5%;生根培养采用1/2MS NAA0.1mg/L,7d后生根率为100%。结论本实验建立了以杭白菊子叶和下胚轴为外植体的高频快繁体系,不定芽诱导频率高且生长健壮。     

栀子叶片愈伤组织诱导优化研究

目的:对栀子(Gardenia jasminoides Ellis)叶片愈伤组织诱导进行优化研究。方法:通过以叶片为外植体,MS和WPM为基本培养基,添加不同激素组合(6-BA、NAA和IBA)进行愈伤组织诱导研究。结果:栀子叶片在WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L以及6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1(或0.5)mg/L中均有100%的诱导率;在MS培养基上,MS+6-BA 1.0(或1.5)mg/L+NAA 0.5 mg/L的诱导率最好,分别为70%和74%。栀子叶片愈伤组织在再分化培养基上均未诱导出丛生芽。结论:WPM培养基比MS培养基更易诱导栀子叶片愈伤组织,且栀子愈伤组织的再分化较困难。     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系.方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响.结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)与2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽.1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2,4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲(TDZ),可提高愈伤组织分化率.结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L.     

黑水缬草组织培养与快速繁殖研究

目的对黑水缬草愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建黑水缬草快速繁殖体系。方法通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对黑水缬草进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果诱导愈伤组织适宜培养基:MS 0.5mg/LNAA 5.0mg/L6-BA。芽增殖培养以MS 0.2mg/LNAA 10.0mg/L6-BA为宜。生根培养以MS 0.1mg/LNAA为佳。结论利用组织培养技术能够实现黑水缬草快速繁殖。     

北细辛叶柄愈伤组织的增殖培养及器官分化研究

目的研究北细辛Asarum heterotropoides叶柄愈伤组织增殖培养、再生芽分化及不定根诱导的最适条件,建立高效的愈伤组织培养和再生体系。方法以北细辛幼嫩叶柄诱导出愈伤组织,于含不同质量浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)的增殖培养基中扩大培养,选取嫩绿致密的愈伤组织接种在不同激素浓度配比的分化培养基上诱导再生芽及不定根,经驯化后移栽。结果愈伤组织增殖较适培养基为1/2 MS+0.40 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,在含0.40 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA的1/2 MS培养基中再生芽分化率最高,无激素添加的1/2 MS培养基适于壮苗培养,不定根诱导最适培养基为1/4 MS+0.25 mg/L IBA。结论确定北细辛愈伤组织增殖及分化的最适培养基及激素水平,建立了完善的北细辛再生体系,成功获得再生植株。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

南方红豆杉愈伤组织生长动力学及紫杉醇代谢动力学研究

目的通过愈伤组织细胞生长及其紫杉醇代谢动力学的研究,筛选确定南方红豆杉愈伤组织培养生产紫杉醇的最佳培养基配方与最佳收获期。方法以改良MS为基本培养基添加不同质量浓度的IBA、6-BA、GA3组合诱导培养南方红豆杉愈伤组织,通过测定愈伤组织鲜质量进行生长动力学研究,采用HPLC法检测不同生长阶段愈伤组织中紫杉醇的积累量,进行紫杉醇代谢动力学研究。结果改良MS+0.2 mg/L IBA+0.05 mg/L 6-BA+0.3 mg/L GA3、MS+0.2 mg/L IBA+0.01mg/L 6-BA+0.7 mg/L GA3及MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3培养条件均较有利于南方红豆杉愈伤组织的诱导培养,且紫杉醇的积累量也较高,最高可达0.037 76%。结论在添加IBA及6-BA的基础上适当增补GA3可使南方红豆杉愈伤组织诱导提前启动,缩短出愈时间,促进生长,降低褐变程度,增加愈伤组织中紫杉醇的积累量。愈伤组织的生长曲线呈S型,紫杉醇的积累呈线型增加,是一个逐渐积累的过程,但积累到一定程度就不再增加,且伴随着愈伤组织不断褐变。