聚焦超声对SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型外阴皮肤转化生长因子β3及B淋巴细胞瘤-2蛋白表达的影响

摘要 目的 观察聚焦超声治疗对SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型外阴皮肤转化生长因子β及B淋巴细胞瘤-2蛋白表达的影响。方法 建立40只雌性SD大鼠外阴慢性单纯性苔藓模型,随机分为实验组（n = 20）和对照组（n = 20）。实验组大鼠采用聚焦超声治疗,对照组采用聚焦超声假辐照治疗。另取10只正常SD大鼠为空白对照组。聚焦超声治疗后,masson染色鉴定真皮浅层胶原纤维的密度,免疫组化和Western blotting检测转化生长因子β和B淋巴细胞瘤-2在外阴皮肤组织中的表达。比较三个组的组间差异。结果 实验组大鼠中,70%（14/20)的大鼠外阴皮肤恢复正常。对照组大鼠仅10%（2/20）恢复正常,两组间治愈率差异有统计学意义（P＜0.05）。实验组真皮浅层胶原纤维密度明显高于对照组,转化生长因子β蛋白检测在外阴组织中的表达明显低于对照组;而B淋巴细胞瘤-2的蛋白检测则高于对照组。空白对照组蛋白表达趋势均与实验组相同（P＞0.05）。结论 聚焦超声治疗通过影响外阴皮肤组中化生长因子β和B淋巴细胞瘤-2的表达,抑制真皮浅层胶原纤维化,从而达到治疗疾病的目的。     

聚焦超声对慢性湿疹模型豚鼠皮肤淋巴细胞和角质形成细胞凋亡的影响

目的探讨聚焦超声诱导慢性湿疹模型豚鼠皮肤淋巴细胞和角质形成细胞凋亡的作用及其机制。方法健康豚鼠40只,每只背部剃毛2处,应用2,4-二硝基氯苯为抗原,小剂量多次刺激豚鼠皮肤制备慢性湿疹模型。将模型随机分为1W组和2W组,自身空白对照。辐照后在24、48h采用TUNEL法和免疫组化法观察2W组、1W组和对照组细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果辐照组的皮肤淋巴细胞和角质形成细胞凋亡率和Bax蛋白表达高于对照组,2W组高于1W组,48h高于24h。辐照组Bcl-2蛋白表达低于对照组。Bcl-2蛋白表达与凋亡细胞率呈负相关,Bax与凋亡细胞率呈正相关。结论聚焦超声辐照豚鼠慢性湿疹模型可明显提高Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,进而促进慢性湿疹动物模型皮肤淋巴细胞和角质形成细胞的凋亡。     

象皮生肌膏对2型糖尿病大鼠溃疡肉芽组织转化生长因子-β及纤维结合蛋白表达影响的实验研究

[目的]探讨象皮生肌膏治疗2型糖尿病大鼠溃疡,观察溃疡创面肉芽组织转化生长因子-β(TGF-β)及纤维结合蛋白(FN)表达的影响。[方法]从160只SD大鼠中随机挑选40只为空白对照组,其余120只SD大鼠制备2型糖尿病模型,成模后再制备溃疡模型,其中糖尿病模型大鼠按照血糖及体重分层随机分为模型组、阳性对照组及实验组,每组40只;模型组予生理盐水纱布外敷,阳性对照组予水胶体敷料外敷,实验组予象皮生肌膏外敷。分别在第1天、第7天、第14天、第21天从每组随机挑选10只处死并取相同部位创面组织制成切片,采用免疫组化法检测TGF-β及FN含量。[结果]除空白对照组TGF-β和FN无明显变化,其余3组TGF-β表达在第7天均达峰值,而后一直降低;3组FN表达只有实验组最先在第14天达峰值,其余两组一直处于上升趋势。实验组大鼠在任意时间段TGF-β的表达、FN的表达及创面愈合率都高于阳性对照组和模型组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]对于2型糖尿病大鼠溃疡,象皮生肌膏能快速促进肉芽组织TGF-β及FN的表达,促进伤口愈合。     

曲美他嗪对慢性心力衰竭大鼠的心肾保护作用及其机制探究

目的探讨曲美他嗪对慢性心力衰竭(CHF)大鼠的心肾保护作用及其机制。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和实验组各8只。采用肾上腹主动脉缩窄法建立CHF模型,给予实验组大鼠曲美他嗪10mg/(kg·d)灌胃,给予模型组和对照组大鼠等量的生理盐水灌胃。3组大鼠均灌胃4周。比较3组大鼠的左室舒张末压(LVEDP)、左心室压力最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax);比较3组大鼠心肌组织在HE染色、肾组织在Masson染色下结构的变化;比较3组大鼠肾功能指标血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr);采用蛋白质印迹法(Western bloting),比较3组大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β(TGF-β)的蛋白表达。结果与模型组大鼠相比较,实验组大鼠的LVEDP明显降低,+dp/dtmax、-dp/dtmax明显升高(均P0.05);BUN、Scr明显降低(均P0.05);水肿比例明显减小,心肌纤维排列比较整齐,细胞肿胀程度明显减轻(P0.05);肾组织胶原纤维面积/视野面积的比值明显减小,肾小球毛细血管处胶原纤维增生明显减少(P0.05);MMP-2、MMP-9、α-SMA、TGF-β蛋白相对表达量明显降低(均P0.05)。结论曲美他嗪可以明显保护CHF大鼠的心肾功能,能够改善心肾组织结构。     

大鼠低温爆震伤对肺组织中IL-1β和TNF-α表达的影响

目的:建立大鼠低温爆震伤致肺损伤模型,研究爆震伤后大鼠血清和肺组织中IL-1β和TNF-α表达的变化。方法:将40只大鼠随机分成空白对照组(10只)、低温对照组(10只)及低温实验组(20只),进行爆震伤造模,实验后对大鼠进行状态观察,行苏木精-伊红染色观察肺脏病理变化,采用ELISA方法检测大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量,采用荧光定量PCR和Western blot方法测定IL-1β和TNF-α基因和蛋白相对表达量变化,并对其结果进行分析。结果:苏木精-伊红染色结果显示,低温对照组大鼠肺脏有少量炎性细胞,低温实验组大鼠肺组织肺泡壁增厚,有大量的血细胞及炎性细胞产生。血清ELISA结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量高于空白对照组(P0.05)。荧光定量PCR和Western blot结果显示,低温对照组和低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于空白对照组,且低温实验组大鼠肺组织中IL-1β和TNF-α基因相对表达量高于低温对照组(P0.05);低温对照组和低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量高于空白对照组,且差异有统计学意义(P0.05);与低温对照组比较,低温实验组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量较高,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:大鼠低温肺爆震伤导致血清中IL-1β和TNF-α含量升高,肺组织中IL-1β和TNF-α基因和蛋白的相对表达量升高,其损伤机制可能是IL-1β和TNF-α表达量升高导致炎症反应的产生。     

TGF-β2对豚鼠实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞MMP-2表达的影响

目的明确转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrix metallo proteinase,MMPs)表达的影响。方法选择2周龄已脱离母乳喂养的豚鼠12只,随机选取12只中各一眼用镜片诱导法制备近视动物模型(实验组),对侧眼不予任何处理(自身对照组)。30 d后采用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞,并传2代。将每只眼(两组24只眼)培养出的细胞分别分为空白对照组、1 ng/mlTGF-β2组、10 ng/ml TGF-β2组、100 ng/ml TGF-β2组,利用实时荧光定量聚合酶链反应、western-blot蛋白印迹法对各组细胞MMP-2、MMP-2mRNA进行定量分析。结果经30 d镜片诱导,实验组诱导出(-6.70±1.93)D的相对近视,眼轴相对延长(1.53±0.31)mm,实验前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中空白对照组与自身对照组中空白对照组比较,MMP-2、MMP-2mRNA表达量增高,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β2浓度为10 ng/ml时实验组和自身对照组细胞MMP-2、MMP-2mRNA的表达量最高,与本组其他浓度比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论凹透镜诱导可引起豚鼠明显轴性近视,TGF-β2能有效刺激MMP-2的表达。     

转化生长因子β1在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及川芎嗪与氯沙坦联合干预对其影响的研究

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦和中药川芎嗪对其表达的影响,探讨中西医结合治疗糖尿病肾病的新方法。方法右侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病肾病模型。随机分为肾切除对照组(NC组)、氯沙坦治疗组(DN1组)、川芎嗪与氯沙坦联合治疗组(DN2组)、安慰剂治疗对照组(DN组)。分别应用ELISA法和免疫组化检测血浆和肾皮质TGF-β1蛋白表达。结果 NC组血浆及肾小球TGF-β1蛋白低表达,各治疗组血浆及肾小球TGF-β1蛋白高表达;DN1组较DN组血浆及肾小球TGF-β1蛋白表达降低(P均<0.05);DN2组较DN1组血浆及TGF-β1蛋白明显下降(P均<0.05)。结论糖尿病肾病大鼠血浆及肾脏中TGF-β1明显升高,氯沙坦可下调其表达;川芎嗪与氯沙坦联合干预对其表达的下调作用更明显,提示川芎嗪与氯沙坦联合应用可能更有利于糖尿病肾病的治疗。     

聚焦超声治疗外阴硬化性苔藓20例护理体会

外阴硬化性苔藓又名外阴营养不良，是女性外阴皮肤及黏膜发生变性及色素改变的一组慢性疾病。主要表现为外阴皮肤及黏膜奇痒，皮肤及黏膜有不同程度的变白，部分患者有外阴皮肤破溃、粗糙、肥厚、黏连及阴道口狭窄等，严重影响生活质量。聚焦超声治疗主要是通过超声波的良好组织穿透性、定位性和瞬息聚增的热力作用。     

脉冲超声波治疗对大鼠膝关节内侧副韧带损伤愈合的影响

目的通过检测转化生长因子-β1（TGF-β1）在大鼠膝关节内侧副韧带（MCL）损伤模型中的表达以及观察局部瘢痕愈合的情况,探讨脉冲超声波治疗对韧带损伤愈合的作用。 方法选择18只Sprague-Dawley大鼠,行内侧副韧带切断术,造模成功后随机分为对照组、0.5 W/cm2超声组和1.0 W/cm2超声组。对照组不予以治疗,0.5 W/cm2超声组和1.0 W/cm2超声组依次予以每天10 min相应强度的脉冲超声波治疗,治疗8 d后处死各组大鼠。大体观察各组大鼠局部韧带愈合的情况后,取内侧副韧带进行苏木素-伊红（HE）染色、Van Gieson(VG)染色及免疫组织化学染色,观察并比较各组大鼠炎症细胞浸润、胶原纤维排列情况及TGF-β1表达强度。 结果①肉眼观察：断裂的内侧副韧带均以瘢痕组织形式愈合,与对照组比较,2个超声组的瘢痕组织明显增大。②HE染色以及VG染色后光镜下观察：对照组中炎症细胞以及新生血管数较2个超声组少,并且对照组胶原纤维排列较0.5 W/cm2超声组、1.0 W/cm2超声组紊乱。③0.5 W/cm2超声组、1.0 W/cm2超声组的TGF-β1表达较对照组强,差异有统计学意义（P<0.05）;1.0 W/cm2超声组的TGF-β1表达较0.5 W/cm2超声组强,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论①脉冲超声波治疗韧带损伤,可使局部瘢痕组织增生,炎症反应增强,胶原纤维排列规则,从而改善近期软组织愈合,远期效果尚待进一步研究。②软组织损伤后,脉冲超声波治疗可以促进TGF-β1表达增加;并且治疗强度增大,TGF-β1表达增强。③脉冲超声波治疗可能通过促进TGF-β1表达而促进软组织愈合。     

益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β、Smad2和Smad3表达的影响

目的 探讨益气活血中药对肾间质纤维化大鼠转化生长因子-β(TGF-β)、Smad2和Smad3表达的影响.方法 将36只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、西药对照组及中药大、中、小剂量组,每组6只.采用单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型.西药对照组及中药大、中、小剂量组于术前2 d灌胃福辛普利钠(10 mg·kg-1·d-1)及中药提取液(7.2、3.6、1.8 ml·kg-1·d-1)各2 ml;假手术组和模型组给予等量生理盐水.各组于术后3周处死大鼠取肾组织,用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达.结果 模型组大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达较假手术组均明显升高(P<0.05或P<0.01);益气活血中药各剂量组可以明显抑制模型大鼠肾组织TGF-β、Smad2和Smad3的mRNA和蛋白表达,其中除中药小剂量组对Smad3mRNA的抑制作用较大、中剂量组明显降低外(均P<0.05),其余指标各剂量组间比较差异均无统计学意义.结论 益气活血中药可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路中TGF-β、Smad2和Smad3等表达起到治疗作用.     

膀胱癌大鼠LASS2基因及肿瘤增殖凋亡相关蛋白表达分析

目的通过构建膀胱癌大鼠模型,分析膀胱癌大鼠LASS2基因及肿瘤增殖凋亡相关蛋白表达水平变化。方法将20只大鼠随机分为膀胱癌模型组及空白对照组。对模型组大鼠饲喂含0. 05%N-正丁基-N-(4-羟基-丁基)亚硝胺(BBN)的饮用水至第8周,建立膀胱癌模型;空白对照组正常饲养。观察记录两组大鼠状态,检测两组大鼠膀胱组织或肿瘤组织的LASS2蛋白及mRNA表达水平,检测肿瘤增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、P53表达水平。结果对照组大鼠无异常症状;模型组大鼠饲喂过程中死亡3只,活动减少,毛发无光泽,出现血尿症状,HE染色肿瘤组织中大量细胞胞质深着色,胞核异形,形态不规则,膀胱黏膜固有层出现浸润;模型组大鼠相较于对照组,LASS2蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P 0. 05),肿瘤增殖相关蛋白Ki-67及PCNA表达水平均更高,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达水平更高,P53表达水平更低,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论在膀胱癌大鼠中,LASS2表达下调,肿瘤增殖相关蛋白Ki-67及PCNA蛋白表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白P53表达下调,LASS2可能与肿瘤增殖及凋亡存在一定关系。     

氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系

目的分析氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系。方法将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,三组各12只。对照组给予生理盐水;模型组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射;实验组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射,待0. 5 h后应用氯沙坦溶液进行灌胃,每日10 mg/kg。1周、2周、3周取各组大鼠肺组织,对其肺系数进行计算以评估其肺水肿的状况;采用HE染色对各组大鼠肺泡炎的程度进行观察,并用Masson染色评估大鼠肺纤维化的严重程度;采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠肺组织匀浆中Ang-(1-7)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,并通过免疫组织化学法对各组大鼠肺组织中Mas受体和血管紧张素转换酶II(ACE2)蛋白的表达水平进行检测。结果在染毒后1周、2周、3周时,模型组和实验组肺系数较对照组均显著升高(P 0. 01),而实验组各时间点时的肺系数较模型组均显著下降(P 0. 01)。在染毒后1周、2周、3周,模型组出现明显肺泡炎症,且随着染毒时间的增加,可出现肺纤维化,实验组肺泡炎症程度轻于模型组,实验组肺纤维化程度较模型组明显减轻。随着染毒时间的增加,Ang-(1-7)和TGF-β1在模型组与实验组肺组织匀浆中的水平均逐渐升高,且模型组与实验组各时间点Ang-(1-7)和TGF-β1的含量较对照组均显著升高(P 0. 01);染毒后1、2、3周,Ang-(1-7)在实验组肺组织匀浆中的水平较模型组明显升高,而TGF-β1的含量较模型组显著下降(P 0. 01)。随着染毒时间的增加,模型组与实验组大鼠肺组织中Mas受体和ACE2蛋白的表达水平均显著升高(P 0. 05),且实验组染毒后2周、3周Mas受体和ACE2蛋白的表达水平较模型组均显著升高(P0. 05)。结论在百草枯中毒后,肺组织匀浆中Ang-(1-7)和TGF-β1的表达水平明显上调,而氯沙坦可能通过升高ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴的表达水平而起到下调纤维化因子TGF-β1表达的作用,因此可改善百草枯中毒所引起的肺损伤和肺纤维化的形成。     

银杏叶提取物减轻糖基化终末产物对大鼠肾脏TGF-β及CTGF表达的影响

目的观察银杏叶提取物对糖基化终末产物（AGEs）引起的大鼠肾脏TGF-β及CTGF过表达的影响。方法每日给正常大鼠尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白（AGEs组）,部分大鼠同时灌胃给予银杏叶提取物（GBE组）,注射天然大鼠血清蛋白（RSP组）和不施加处理的正常大鼠（空白对照组）作为对照。Elisa法检测肾皮质TGF-β及CTGF蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β及CTGF mRNA的表达。结果与RSP组及空白对照组比较,AGEs组大鼠尿蛋白含量明显增加（P〈0.05）,TGF-β及CTGF蛋白、mRNA的表达均增高（P〈0.01）,给予GBE后尿蛋白含量明显降低（P〈0.01）,TGF-β及CTGF蛋白含量及mRNA表达均明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论 GBE改善AGEs引起的肾功能变化,减轻AGEs诱导的大鼠肾皮质TGF-β及CTGF过表达。提示GBE可通过抑制AGEs引起的TGF-β及CTGF过表达而在糖尿病中起到肾脏保护作用。     

外阴上皮内非瘤样病变的治疗与护理

外阴上皮内非瘤样病变是女性外阴皮肤和黏膜组织发生变性及色素改变的一组慢性疾病.病理以 外阴鳞状上皮增生和硬化性苔藓多见.因病变部位皮肤和黏膜多呈白色,故又称外阴白色病 变或外阴营养不良.常规治疗有药物和手术.药物治疗复发率高,手术治疗病人非常痛苦. 我科2005年5月-2007年5月运用超声聚焦技术治疗,取得满意疗效,现总结如下.     

TGF-β减轻异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病

为了探讨转化生长因子β(TGF-β)对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病发生发展的影响,用C57BL/6小鼠作为供鼠,BABL/c小鼠为受鼠,建立小鼠同种异基因骨髓移植模型。BABL/c受鼠随机分为4组:空白对照组、单纯照射组、移植对照组和TGF-β实验组。TGF-β实验组于移植前2天至移植后7天每日皮下注射TGF-β1(1μg/kg)。结果显示:TGF-β实验组小鼠生存时间明显长于移植对照组(p<0.01),TGF-β实验组小鼠小肠、皮肤及肝脏GVHD病理改变明显轻于移植对照组。移植后7天TGF-β实验组小鼠血清IL-2浓度较空白对照组高,但远低于移植对照组;TGF-β实验组血清IL-10浓度明显高于移植对照组。结论:TGF-β能够减轻或抑制小鼠allo-BMT后致死性的aGVHD发生,提高移植后存活率。TGF-β可能使Th1细胞向Th2细胞偏移,抑制IL-2等Th1类细胞因子的分泌,同时促进了Th2类细胞因子IL-10的表达,降低aGVHD的发生。     

超声聚焦治疗外阴白色病变疗效观察

外阴白色病变是指女阴皮肤和粘膜组织发生变性及色素改变的一组慢性疾病。其主要临床表现外阴皮肤瘙痒及色素减退。主要病理改变在真皮层微小血管的胶原纤维，表皮的病变是继发性的退形性变。目前病因不明，传统治疗有药物治疗、激光治疗等方法。其疗效均不理想。我院采用超声聚焦治疗该病取得良好的疗效。现总结报告如下。     

聚焦超声对外阴上皮内非瘤样病变组织生物学行为的影响

目的 探讨聚焦超声对外阴上皮内非瘤样病变组织生物学行为的影响.方法 观察聚焦超声治疗前后外阴上皮内非瘤样病变患者临床症状体征变化和疗效评分;HE染色法检测其病理改变,免疫组化法检测其人原始造血细胞抗原(CD34),髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达水平的变化.结果 聚焦超声治疗后,痰痒症状消失,外阴皮肤外观逐渐恢复正常;上皮细胞层数恢复正常且排列整齐,基底层内黑色素细胞增加,真皮内的微血管和神经末梢增多,淋巴细胞浸润明显减少;CD34,MBP表达较治疗前明显增高(P<0.05),各类型之间并无明显差异.结论 聚焦超声治疗可促进外阴上皮内非瘤样病变局部微血管、神经系统正常转归.     

微小RNA-21和转化生长因子β1在急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化组织中的表达变化

目的检测微小RNA-21（miR-21）和转化生长因子β1（TGF-β1）在脓毒症诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠肺纤维化组织中的表达变化。 方法将72只大鼠分为对照组和实验组,每组36只。对照组大鼠仅开腹后关腹处理;实验组大鼠采用盲肠结扎-穿孔法建立ARDS模型。每组大鼠分别于术后12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d时间点各处死6只大鼠。取大鼠左肺组织用于苏木精-伊红（HE）染色,镜下观察肺组织结构变化,免疫组织化学法检测TGF-β1表达。取右肺组织,应用PCR法检测大鼠肺组织miR-21表达情况。 结果各实验组大鼠术后较相应对照组出现活动明显减少,反应迟钝,呼吸急促。显微镜下,对照组大鼠肺组织未见明显炎症细胞浸润和肺实质胶原沉积。实验组大鼠肺组织可见大量炎症细胞及红细胞渗出,成纤维细胞明显增多并可见纤维组织增生。实验组大鼠肺组织miR-21表达水平术后2~5 d与同时间对照组相比均显著增高（t=7.121、5.330、6.513、19.371,P均< 0.05）。对照组各时间点阳性细胞数均为0,实验组大鼠术后1~5 d肺组织TGF-β1表达阳性率分别为22.64%、32.69%、36.20%、38.32%、45.64%。 结论miR-21和TGF-β1在ARDS所致的肺纤维化组织中表达升高,提示miR-21和TGF-β1在ARDS大鼠的肺纤维化形成中起着重要作用。     

沉默转化生长因子β1基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响

目的:探讨以小分子干扰RNA技术沉默肺转化生长因子β1(TGF-β1)基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响.方法:75只新生KM小鼠,随机分为干扰组、空白对照组和阴性对照组各25只,构建TGF-β1 shRNA慢病毒载体,经鼻内吸入法导入干扰组生后3 d新生小鼠肺内,同时设计一无关序列构建阴性表达慢病毒载体同法导入阴性对照组小鼠肺内,空白对照组不予干预.各组别按小鼠生后4、7、14、21、28 d分别取肺组织观察其组织形态学变化,以RT-PCR和Western blot法检测肺组织中TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平.结果:与两对照组相比,干 扰组肺TGF-β1 mRNA在小鼠生后4、7、14、21、28 d明显降低,生后7、14、21、28 d,干扰组肺TGF-β1蛋白水平也明显降低,同时肺泡平均截距明显增大,放射状肺泡计数减少,差异均有统计学意义.阴性对照组和空白对照组各时间点各项指标无统计学差异.结论:沉默TGF-β1基因可阻滞新生小鼠晚期肺泡发育.     

烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响

目的分析烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响。方法取28只健康成年雄性SD大鼠,按照随机分配原则,分为空白对照组(正常大鼠,不采取任何处理)、阴性对照组(正常大鼠+烟雾暴露)、模型组(制备卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型)、实验组(急性支气管哮喘大鼠+烟雾暴露),每组各7只。行苏木精-伊红染色,观察各组大鼠肺组织病理学改变;采用免疫印迹法检测大鼠肺组织中激活素A蛋白表达水平;根据实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肺组织中激活素A mRNA相对表达量。结果经病理学染色结果可知,空白对照组肺组织病理学未见异常,而阴性对照组、模型组及实验组肺组织出现不同程度的病理学改变,且实验组更加明显。经免疫印迹法检测可知,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较空白对照组均明显升高(P <0. 05);模型组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组明显升高(P <0. 05);实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组和模型组明显升高(P <0. 05)。经实时荧光定量聚合酶链反应检测可知,相比空白对照组,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量均明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组,模型组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组和模型组,实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05)。结论在卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型中,经烟雾暴露可促进大鼠肺组织激活素A蛋白表达,提高激活素A mRNA表达量,并进一步导致气道炎症加重。