LncRNA CASC7/miR-21/Wnt2b轴介导糖尿病肾病小鼠肾纤维化的机制研究

目的 探究miR-21靶向调控肾纤维化的发生发展机制,为临床糖尿病肾病（DN）的治疗提供新的思路。方法 24只C57BLKS/J-Leprdb/db小鼠随机分为实验1组、实验2组与对照组,每组8只。实验1组进行单侧肾切除术,术后2月,实验1组和实验2组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立糖尿病肾病动物模型。HE染色法观察肾组织病理学改变,Masson染色法观察肾组织纤维化状况,qRT-PCR法检测各组肾组织中LncRNA CASC7、miR-21、Wnt2b、SMAD7表达水平,western blot法检测Wnt2b和SMAD7的蛋白表达水平,荧光素酶报告系统鉴定LncRNA CASC7和miR-21靶向关系。Pearson相关性分析肾组织中LncRNA CASC7和miR-21的表达水平与糖尿病肾病肾纤维化之间的关系。结果染色试验中观察到实验1组与实验2组小鼠肾小球肥大,系膜细胞及系膜基质增生,肾小管上皮细胞空泡变性。肾组织存在炎性细胞浸润、肾小管萎缩与间质纤维化。肾组织纤维化评分：实验1组（2.87±0.66）分>实验2组（2.17±0.62）分>对照组（0...     

miR-155在糖尿病肾病大鼠及大鼠肾系膜细胞表达的研究

目的：探讨miR-155表达水平在链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病肾病（DN）大鼠及大鼠肾系膜细胞中是否存在同样的变化。方法：将雄性清洁sD大鼠8只随机分成实验组（DN组,n=4）和对照组（Nc组,n=4）,DN组大鼠腹腔注射足量STZ诱导DN大鼠。观察血糖及肾脏结构变化,用real—timePCR检测肾脏miR-155表达水平;大鼠肾系膜细胞分为高糖培养组和正糖培养组,培养24h、48h、72h,用real-timePCR检测miR-155表达水平。结果：与对照组相比,DN组大鼠肾脏miR-155表达水平下降（P〈0．05）：高糖培养的大鼠肾系膜细胞miR-155表达水平较正糖培养的表达水平下降（P〈0．05）,于48h表达水平最低。结论：miR-155在高糖培养大鼠肾系膜细胞表达下降。     

血红蛋白、基质金属蛋白酶-7水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化以及预后的关系分析

目的 探讨血红蛋白(Hb)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化(RIF)以及进展为终末期肾病(ESRD)的关系。方法 选择2014年4月至2020年4月石家庄市第三医院肾内科收治的103例老年糖尿病肾病患者(肾病组),95例单纯糖尿病患者(糖尿病组),59例体检志愿者为对照组。所有患者均接受Hb、MMP-7、肾功能、RIF血清学指标检测,出院后随访至2022年4月,统计ESRD发生情况。Pearson分析Hb、MMP-7与肾功能、RIF血清学指标的相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析不同Hb、MMP-7水平下糖尿病肾病患者肾脏累积存活率。单因素或多因素COX风险比例回归分析老年糖尿病肾病患者ESRD的危险因素。结果 肾病组Hb、估算肾小球滤过率(eGFR)低于对照组(P<0.05),MMP-7、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-α水平高于对照组(P<0.05)。肾病组Hb与eGFR呈正相关(P<0.05),与Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α呈负相关(P<0.05),MMP-...     

肾间质纤维化模型大鼠转化生长因子β/Smads信号传导通路变化与温阳活血方的干预

背景:转化生长因子β/Smad信号转导通路在肾纤维化的发生发展中起重要作用。目的:探讨温阳活血方对肾纤维化转化生长因子β/Smads信号传导通路的影响。方法:选用清洁级雄性SD大鼠28只,随机分为假手术组和模型组,模型组行左侧输尿管结扎术,单侧输尿管梗阻模型。假手术组大鼠打开腹腔后分离左侧输尿管但不结扎,随即关闭腹腔。造模后第2天开始分别给予温阳活血方、血管紧张素转化酶抑制剂或生理盐水灌胃,1次/d,各组均连续灌胃14d。结果与结论:温阳活血组转化生长因子β1、Smads3的表达显著低于模型组(P<0.01),Smad7表达显著高于模型组(P<0.01),与福辛普利组相当。推测温阳活血方可能通过抑制转化生长因子β1、Smads3的表达,上调Smad7的表达,进而影响转化生长因子β/Smad信号传导通路,对肾间质纤维化起防治作用。     

miR-21介导Wnt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究

目的 选择miR-21介导Wnt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究。方法 选择人胰腺腺癌细胞株ASPC-1,分为As组（正常ASPC-1细胞）、Ay组（ASPC-1细胞转染+miR-21-inhibitions）、Nc组（ASPC-1细胞转染+miR-21-阴性对照）。RT-PCR法检测Wnt1、β-catenin水平变化,Westernblot法检测Wnt1、β-catenin蛋白,Transwell法、MTT法检测ASPC-1细胞的迁移、活力变化,流式细胞仪检测ASPC-1细胞凋亡率。结果 三组miR-21、Wnt1、β-catenin水平、Wnt1蛋白、β-catenin蛋白、ASPC-1细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义（F分别=55.47、14.30、123.60、3.54、5.85、30.27,P均<0.05）。与As组、Nc组比较,Ay组miR-21、Wnt1、β-catenin水平、Wnt1蛋白、ASPC-1细胞凋亡率有明显下降,β-catenin蛋白明显上升（P均<0.05）,ASPC-1细胞迁移能力明显下降。培养24 h、48 h、72 h时,三组间A...     

回回甘松饮对糖尿病肾病大鼠miR-192及TGF-β1/Smads的调控作用

目的 探究回回甘松饮(Hui-hui Gan-song Yin,HGY)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小球的保护作用.方法 随机选取10只大鼠作为空白对照组(NC).选用高脂饲料喂养SD大鼠联合链脲佐菌素的方法复制大鼠早期DN模型,DN模型复制成功的大鼠随机分为:DN模型组(DN)...     

miR-21对肝癌细胞Keap-1/Nrf2通路的调控作用分析

目的探讨miR-21对肝癌细胞Keap-1/Nrf2通路的调控作用。方法人肝癌细胞株HSMMC-7721随机分为三组,实验组、对照组分别转染miRNA-21模拟剂(mimics)、miRNA-21 NC,空白组不进行转染。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪实验检测细胞周期,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western blot检测蛋白表达。结果转染后36 h与48 h,实验组的miRNA-21相对表达量显著高于空白组和对照组(P 0. 05),实验组的细胞增殖率、侵袭率显著低于空白组和对照组(P 0. 05);转染后48 h,实验组的S期与G2/M期比率显著高于空白组和对照组,(P0. 05),GO/G1期比率显著低于空白组和对照组,(P 0. 05),空白组和对照组对比差异无统计学意义(P 0. 05)。转染后36 h与48 h,与空白组和对照组相比,实验组的Keap-1、Nrf2蛋白相对表达量显著下降(P 0. 05)。结论miRNA-21高表达能抑制Keap-1/Nrf2通路的激活,可调节肝癌细胞周期,从而抑制肝癌细胞的增殖与侵袭。     

黄芪总苷通过PAR2信号通路减轻糖尿病大鼠肝纤维化的机制研究

目的 探讨黄芪总苷在蛋白酶激活受体2(PAR2)信号通路的作用下缓解糖尿病大鼠肝纤维化的作用机制.方法 采取随机数字表法分组,将100只大鼠平均分为5组,各20只,分别为空白对照组、模型组、黄芪总苷低、中、高剂量组.除空白对照组,其他各组均采用一次性腹腔注射构建糖尿病大鼠模型.空白对照组和模型组大鼠给予0.5 mg/k...     

苯那普利对阿霉素肾病大鼠肾皮质Smad3、Smad7表达的影响

目的 :评估苯那普利对阿霉素肾病大鼠肾皮质中Smad3、Smad7表达的影响。方法 :建立阿霉素肾病大鼠模型 ,药物组予苯那普利 10mg·kg-1·d-1灌胃。分别于第 4、7周取肾皮质 ,通过RT PCR半定量分析Smad7mRNA表达 ,通过光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,用免疫组化法测定转化生长因子 β1(TGF β1)、Smad3、Smad7蛋白表达。结果 :Smad3、Smad7主要表达于肾小管上皮细胞 ,肾病组Smad7mRNA、蛋白的表达随病变加重而上调 ,Smad3蛋白表达下调 ,而苯那普利可抑制Smad7的上调和Smad3的下调。结论 :在阿霉素肾病大鼠肾皮质的小管病变进展中 ,Smads起着重要作用。苯那普利可通过调节Smads的表达而保护肾脏     

保肾宁提取液糖尿病大鼠的防治作用

目的 观察保肾宁提取液对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏细胞凋亡及相关基因蛋白Bax与Bcl-2表达的影响.方法 将SD大鼠单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制DN模型,每日灌胃保肾宁提取液,8周后检测24 h尿蛋白及肾功能,流式细胞术检测大鼠肾组织Bax及Bcl-2的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肾皮质细胞凋亡.结果 保肾宁提取液能明显改善糖尿病肾病大鼠肾功能,大鼠肾皮质细胞Bcl-2表达增强,Bax表达减弱;肾小管和肾小球内凋亡细胞数明显减少.结论 保肾宁提取液可通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达抑制肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用.     

转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6，7在肾间质纤维化大鼠肾脏表达与益气活血法的影响

目的:观察肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6,7表达变化与益气活血法中药制剂的影响。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法随机分为模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组、假手术组,每组5只。益气活血法中药提取液(生黄芪15g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10g,车前草15g,牛膝15g等)经水提醇沉得4.4kg/L生药提取液。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术。假手术组打开大鼠腹腔后分离左侧输尿管,并不结扎即关闭腹腔。中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组,于手术前2d给予灌胃给药0.072mL/(kg·d),0.036mL/(kg·d),0.018mL/(kg·d),10mg/(kg·d),1次/d,连续2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织Smad6,7蛋白表达,通过医学病理图像分析系统对Smad6,7蛋白的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。苏木精-伊红染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少。中药大剂量组、中剂量组、西药蒙诺组较模型组肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况明显减轻。Smad6,7蛋白主要在肾皮质肾小管上皮细胞内表达,在模型组它们的表达较假手术组明显减弱且分布面积减少,两组间积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05);中药中剂量组、大剂量组、西药蒙诺组Smad6,7蛋白的表达较模型组明显增强、面积增加,积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血法可以通过诱导肾组织Smad6,7蛋白表达而抑制肾间质纤维化。     

糖尿病肾病中Notch信号通路调控机制的研究进展

Notch信号通路为生物细胞重要的信息通路,在生物的进化过程起关键作用。近年来,肾脏病领域的研究证实Notch信号通路与糖尿病肾病有关,参与肾间质纤维化、肾小球硬化的发生。本文以理论探析为研究方法,以既往文献及报道为核心数据,旨在介绍Notch信号通路在糖尿病肾病的调控机制,为创新糖尿病肾病理论提供依据。     

miR-21靶向调控PTEN/PI3K/AKT通路对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的 检测微小核糖核酸（micro RNA, miR）-21在人正常骨细胞hFOB1.19与人骨肉瘤细胞系U2OS,Saos-2和MG-63中的表达,并探讨miR-21对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 实时荧光定量PCR法(real-time fluorescent quantitative PCR, qRT-PCR)检测人正常骨细胞hFOB1.19与人骨肉瘤细胞系U2OS,Saos-2和MG-63中miR-21的表达。选择MG-63细胞随机分为3组,利用脂质体2000分别转染空白对照（control）、阴性对照miR-21-NC及抑制剂组（miR-21-inhibitor）,再通过qRT-PCR法验证转染后MG-63细胞中miR-21表达。CCK-8法检测MG-63细胞增殖能力变化;流式细胞技术检测抑制miR-21表达对MG-63细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对MG-63细胞侵袭能力的影响以及采用Western blot检测抑制miR-21表达对MG-63细胞中PTEN,PI3K,AKT及p-AKT蛋白表达的影响。结果 人骨肉瘤细胞系Saos-2,U2OS和MG-...     

百令胶囊联合依那普利治疗早期糖尿病肾病的效果及对肾纤维化、血流动力学的影响

目的 探究百令胶囊联合依那普利治疗早期糖尿病肾病的效果及对肾纤维化、血流动力学的影响。方法 随机择取2018年6月至2020年9月我院收治的104例早期糖尿病肾病患者进行研究,根据治疗方案不同将其分为对照组和观察组,各52例。对照组接受常规治疗+依那普利,观察组在对照组基础上加用百令胶囊。比较两组的治疗效果。结果观察组的治疗总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组的胱抑素C(CysC)、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平低于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组的肾动脉收缩期最大流速（Vsmax）、舒张期最低流速（Vdmin）高于照组,搏动指数（PI）、阻力指数（RI）低于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组的血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）水平及红细胞（RBC）低于对照组,白蛋白（ALB）水平高于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组的生理机能（PF）、活力（VT）、社会功能（SF）、精神健康（MH）评分高于对照组（P<0.05）。结论 百令胶囊联合依那普利治疗早期糖尿病肾病的效果显著,可改善肾纤维化,促进肾...     

丹参酮ⅡA对糖尿病肾病大鼠肾组织氧化应激的影响

目的研究丹参酮ⅡA对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织氧化应激的影响。方法 26只雄性SD大鼠随机分成正常对照(Sham)组、DN组、丹参酮ⅡA组。DN组、丹参酮ⅡA组大鼠经一侧肾切除后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)成DN模型,实验8周后分别处死大鼠。测定大鼠体重、血糖、肾功能、尿白蛋白排泄率(UAER),并检测肾组织中的总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果 DN组与Sham组比较体重明显减轻,血糖、Bun、Cr、UAER显著增高(P<0.01),肾组织T-AOC和GSH-PX含量下降,SOD活力下降,MDA含量明显增高(P<0.05或P<0.01)。丹参酮ⅡA干预后,上述增高的指标除血糖外均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论 DN大鼠肾脏存在明显氧化应激反应,丹参酮ⅡA具有抗氧化活性,进而起到保护肾脏和延缓DN发生、发展的作用。     

糖尿病肾病大鼠血管钙化与骨钙素表达的实验研究

目的探讨糖尿病肾病大鼠肾脏钙化、血管钙化与骨钙素表达的关系。方法用链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,并以正常大鼠作为对照组,于第3、6个月末分别采用VonKossa染色观察肾脏钙盐沉积、免疫组化观察肾脏骨钙素的表达水平。结果糖尿病肾病大鼠肾脏及血管有骨钙素的表达,且与钙盐沉积正相关(r=0.81,P<0.05)。正常大鼠肾脏没有发现骨钙素的表达。结论糖尿病肾病晚期肾脏、血管出现钙盐沉积,骨钙素的表达水平与钙盐沉积程度呈正相关。     

肾康联合贝那普利治疗糖尿病肾病患者的效果研究

在本次研究中,选取2012年3月~2014年9月在我院接受治疗的100例糖尿病肾病(DN)患者进行研究,按入院的先后顺序分为观察组和对照组各50例。对照组使用贝那普利进行治疗,而观察组则使用肾康联合贝那普利进行治疗,观察两组患者治疗前后的尿微量的清蛋白、24h的尿蛋白量、尿素氨、血肌酐、三酰甘油、总胆固醇改善情况。结果治疗前两组的各项治疗没有明显的差异,对数据进行比较,无统计学的意义(P>0.05);而两组患者在治疗后的各项指标均得到了改善,而观察组的改善效果要明显好于对照组,对数据进行比较,具有统计学的意义(P<0.05)。DN患者应用肾康联合贝那普利治疗具有不错的效果。     

对糖尿病大鼠进行重复开放肾活检的初步研究

肾活检技术对于肾脏疾病的诊断和鉴别诊断以及指导治疗和判断预后都起着十分重要的作用[1]。在模拟肾脏疾病的实验大鼠模型上进行重复开放肾活检,可更好地研究病变的发生发展,目前日本有少数报道[2]。为此,本研究对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型在不同时间段进行重复开放肾活检,初步探讨该方法的可行性和应用价值。材料和方法一、大鼠糖尿病模型的建立和分组清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,6周龄,体重(200±10)g,购自上海中国科学院动物室;随机选取24只予一次性腹腔注射1%STZ(Sigma公司,美国),按60mg/kg体重剂量[1%STZ…     

IRF4通过JAK/STAT信号通路调控糖尿病肾病炎症进展

目的 筛选分析糖尿病肾病（DN）的差异表达基因（DEG）,探讨IFN调节因子4(IRF4)在DN中的作用机制,为DN治疗寻找潜在的分子靶点。方法 经基因表达综合（GEO）数据库下载GSE142025数据集[包含对照组9例与进展期DN(aDN)组21例],进行DEG筛选,行基因集富集分析（GSEA）示DEG参与的分子生物学过程。使用String及Cytoscape软件可视化DEG蛋白质相互作用网络,定量逆转录PCR(RT-qPCR)和过碘酸-希夫（PAS）染色及链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）染色并进一步验证主要DEG在6例DN肾组织（DN组）和6例肿瘤切除术后癌旁正常肾组织（NC组）中的表达。结果 GEO数据库筛选出1213个差异表达mRNA,其中684个上调、529个下调。GSEA及京都基因和基因组百科全书分析显示aDN组DEG在酪氨酸激酶/信号转导及转录激活因子信号通路、趋化因子信号通路、Fcγ受体介导巨噬细胞的吞噬作用信号通路、白细胞跨内皮迁移、T细胞受体信号通路明显富集。DN组肾组织中IRF4、信号淋巴细胞活化分子6和IL-2受体α亚基mRNA相对表达量均高于NC组肾组织...     

真武汤调节肾间质纤维化大鼠NF-κB表达的研究

目的研究真武汤对NF-κB蛋白表达的影响,从分子水平对真武汤治疗肾间质纤维化的机制进行探索。方法采用单侧输尿管结扎的方法(UUO)制备大鼠肾间质纤维化模型,将150只SPF级健康雄性wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组、尿毒清组以及真武汤低、中、高剂量组。术后2周、3周、4周分别处死大鼠,收集尿液、血清,结扎单侧肾组织,对24 h尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量进行检测,分别用免疫组织化学法、ELISA法检测NF-κB的表达。结果在各时间点,真武汤各给药组与模型组相比,大鼠梗阻侧肾脏肿大和积水程度较轻,血肌酐、尿素氮含量较低,肾组织和血清中NF-κB蛋白表达均较弱。结论真武汤可减少间质纤维化,减轻肾组织损伤,其延缓肾间质纤维化进程的作用机制可能是通过抑制NF-κB的表达来实现的。