低相对分子质量透明质酸的促血管生成作用

 目的研究低相对分子质量透明质酸(LMWHA)的促血管生成作用。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成模型,观察不同相对分子质量(M_r)的LMWHA及不同给药剂量对血管生成的影响。结果M_r低于10×10³的LMWHA对CAM血管生成的影响与溶剂对照组相比,差异有非常显著性意义(P<0.01);随着给药剂量的增大,新生血管总数明显增多(M_r6 000,r=0.992 9;M_r6 240,r=0.994 4)。结论M_r低于10×10³的LMWHA具有促进CAM血管生成作用,且呈剂量依赖性。     

HPLC 测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中 8 种组分的含量

  目的 建立高效液相色谱法同时测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中氢氯噻嗪、维生素 B₆ 、维生素 B₁ 、硫酸胍生、地巴唑、氯氮、磷酸氯喹和盐酸异丙嗪等 8 种组分含量的方法。 方法 提取溶剂为甲醇 - 水 (50 ∶ 50) ,色谱柱为 Ultimate XB-C₁₈(4.6 mm × 150 mm , 5 μm) ,流动相为甲醇 -5 mmol·L^-1 庚烷磺酸钠溶液 - 冰醋酸 (55 ∶ 45 ∶ 0.25), 检测波长为 284 nm 。 结果 线性范围分别为氢氯噻嗪 30.2~151.0 mg·L^-1 (<>r=0.999 8) ;维生素 B₆10.2 ～ 51.0 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;维生素 B₁ 10.1~50.5 mg·L^-1 (<>r=0.999 9) ;硫酸胍生 12.1~60.5 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;地巴唑 99.8~499.0 mg·L^-1 (<>r=0.999 2) ;氯氮 20.1~100.5 mg·L^-1 (<>r= 1.000 0) ;磷酸氯喹 24.88~124.4 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;盐酸异丙嗪 30.3~151.5 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) 。平均回收率 (<>n=9) 分别为氢氯噻嗪 101.2%(RSD=1.4%) ,维生素 B₆102.2%(RSD=0.9%) ,维生素 B₁100.5% (RSD=1.5%) ,硫酸胍生 101.6%(RSD=1.5%) ,地巴唑 101.8% (RSD=1.1%) ,氯氮 99.3% (RSD= 1.3%) ,磷酸氯喹 101.5%(RSD=1.6%) ,盐酸异丙嗪 101.7 % (RSD=1.7%) 。 结论 本法简便快速,准确可靠,适于该复方制剂中 8 种组分的同时测定。     

反相高效液相色谱法同时测定血浆中10种苯二氮类药物

 目的建立反相高效液相色谱法同时测定人血浆中10种苯二氮类药物(氯氮、咪达唑仑、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、劳拉西泮、阿普唑仑、氯硝西泮、地西泮和三唑仑)。方法血浆样品经二氯甲烷萃取后,采用Shim-pack CLC-C₈色谱柱,柱温35℃,流动相为0.01mol·L^-1磷酸盐缓冲液-乙腈-无水乙醇-甲醇(68.2∶31.2∶0.3∶0.3),流速为1.10mL·min^-1,紫外检测波长230nm。结果血浆中氯氮、咪达唑仑、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑、劳拉西泮、阿普唑仑、氯硝西泮、三唑仑和地西泮在40～2000μg·L^-1内线性关系良好(r≥0.9992),平均方法回收率均在97%～104%,萃取回收率均在70%以上,日内和日间RSD均≤11%(n=5)。结论本方法准确快速、简便易行,适用于人血浆中10种苯二氮类药物的同时检测。     

HPLC 同时测定林蛙油中α-亚麻酸、亚油酸和油酸含量

目的: 建立同时测定林蛙油中α-亚麻酸、亚油酸和油酸含量的HPLC方法。 方法: Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm), 以乙腈-0.1%磷酸(80:20)为流动相,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长203 nm。 结果: α-亚麻酸在4.76~152.16 mg·L^-1 (r=1),亚油酸在15.36~491.59 mg·L^-1 (r=0.999 8),油酸在47.28~1512.80 mg·L^-1 (r =0.999 9) 呈良好的线性关系;平均回收率α-亚麻酸为95.8%,RSD 1.79% (n=6);亚油酸为98.6%,RSD 1.32% (n=6);油酸为99.3%,RSD 1.59% (n=6)。 结论: 该法操作简便,结果准确,专属性强,重复性好,可作为林蛙油质量控制的参考。     

血和尿中7-氨基硝西泮的GC-ECD检测

 目的　建立血、尿中硝西泮的代谢物 7-氨基硝西泮GC-ECD检测方法。方法　碱性条件下用苯-异戊醇(98.8∶1.5)提取,七氟丁酸酐为酰化试剂,室温无水条件下进行酰化,GC-ECD法检测。结果　血、尿中7-氨基硝西泮浓度在5～300ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,血、尿中的提取率分别为(86.9±4.5)%(n=5)和(96.9±3.9)%(n=5),检出限分别为2.8及1.4ng·mL^-1。结论　该方法灵敏度高,线性范围宽,将建立的方法应用于人口服药物后的血、尿检测,结果满意。     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

 目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量。方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50μm;运行缓冲液为50 mmol·L^-1 SDS-50 mmol·L^-1的硼酸钠溶液(pH8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃。结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L^-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L^-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L^-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L^-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L^-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L^-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L^-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L^-1。结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠。     

非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂的制备及其在兔体内药动学研究

 目的制备非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂,研究其经家兔皮肤给药的药动学。方法健康新西兰白兔6只,3剂量3周期随机交叉单次给予低、中、高3种不同剂量的非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂,其中非洛地平/美托洛尔剂量分别为:1/10,3/30,9/90 mg·kg^-1/mg·kg^-1,剂间间隔为2周,给药时间为48 h。分别于给药后60 h内多点取静脉血;用气相色谱-电子捕获法分别测定血浆中非洛地平和美托洛尔的浓度。用DAS软件计算药动学参数并评价不同剂量组间的参数差异和贴剂的体内作用特征。结果贴剂缓释特征明显,血药浓度稳定持久。经皮给药后低、中、高3种剂量组间非洛地平和美托洛尔的ρ_max、AUC_0→60和AUC_0→∞均有显著性差异(P<0.05),且ρ_max和AUC_0→∞均与剂量(D)呈良好的线性关系(P<0.05),非洛地平的回归方程为ρ_max=6.634 2D+4.355(r²=0.993 8)和AUC_0→∞=295.08D+92.322(r²=0.992 6),美托洛尔的回归方程为ρ_max=8.462 8D+51.528(r²=0.991 4)和AUC_0→∞=315.14D+1 474.8(r²=0.998 7);两药的t_max,MAT,MRT_0→60和MRT_0→∞均无显著性差异(P>0.05),t_max均较长,分别为(21.50±8.14)～(27.00±12.30)h和(25.33±14.40)～(37.50±9.99)h,MRT_0→∞均较长且相近,分别为(28.48±2.71)～(31.80±0.85)h和(28.09±4.41)～(31.79±1.29)h。结论非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂缓释长效的药动学特征明确而稳定,达到了预期较长时间维持平稳有效血药浓度、提高药物生物利用度、减少服药频次、降低毒副作用的设计目的。     

反相高效液相色谱法测定来氟米特

 目的:建立反相高效液相色谱测定来氟米特的方法。方法:采用Hypersil ODS C₁₈柱,流动相为甲醇-水-磷酸,检测波长为260nm,流速为1.0ml·min^-1,进样量为20μl,以萘或联苯酚为内标。结果:两峰分离完全,以萘为内标:来氟米特线性范围0.0955～7.6400μg·ml^-1(r=0.9999),检测限为0.8ng,日内偏差和日间偏差分别为0.76%(n=5)和0.86%(n=5),平均回收率为99.66%(RSD=0.80%);以联苯酚为内标:来氟米特线性范围0.141～8.460μg·ml^-1(r=0.9997),检测限为0.8ng,日内偏差和日间偏差分别为0.86%(n=5)和1.06%(n=5),平均回收率为100.48%(RSD=1.60%)。结论:方法简便,结果准确。     

替代对照品法用于石杉碱甲片含量测定的研究

 目的建立HPLC替代对照品测定石杉碱甲片含量的测定方法。方法在不同的条件下测定替代对照品西咪替丁对石杉碱甲对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品西咪替丁进行石杉碱甲片的含量测定。结果石杉碱甲和西咪替丁分别在2.5～160mg·L^-1(r=1.0000)和0.1～20.0mg·L^-1(r=1.0000)内与峰面积呈良好的线性关系(n=7),测得校正因子f=2.3624,用替代对照品测定方法测得回收率为97.0%(n=5),RSD=1.7%。结论本实验首次在高效液相色谱仪上使用替代对照品测定了石杉碱甲片含量,结果证明,用替代对照品进行药品质量控制是可行的、实用的。     

HPLC-离子检测法测定心脏停跳液中主要成分的含量

 目的　建立同时测定心脏停跳液中钾、钙、镁含量的离子检测法。方法　采用Alltech Universal Cation色谱柱 (100mm×4.6mm),柱温为35℃,5mmol·L^-1 HCl为流动相,流速为1.0mL·min^-1。结果　钾离子在12.00～28.00μg·mL^-1范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为101.1% ,重复性试验RSD为1.59%(n=6);镁离子在12.00～28.00μg·mL^-1范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为101.1%,重复性试验RSD为1.94%(n=6);钙离子在2.40～5.60μg·mL^-1范围内,峰面积与其浓度线性关系良好(r=0.9925),平均回收率为100.8%,重复性试验RSD为2.00%(n=6)。结论　本方法准确、简便、快速,有希望用于停跳液的质量控制。     

基于结构方程模型探讨大学生阳虚体质睡眠质量和抑郁的关系

目的 研究睡眠质量在大学生阳虚体质与抑郁症状之间的中介作用,为制定中医防治抑郁的综合方案提供依据。方法 采用横断面研究的方法,随机抽取湖北、甘肃、广东中医药大学大一至大三1028名在校学生作为研究对象,采用一般资料调查表、中医阳虚体质量表、匹兹堡睡眠质量指数、抑郁自评量表进行调查。采用Spearman法进行相关性分析,应用潜变量中介效应模型分析中介效应。结果 大学生失眠的检出率为23.7%,抑郁检出率为40.9%。相关分析结果显示,大学生阳虚体质得分与SDS得分（r = 0.23,P < 0.01）、PSQI得分与SDS得分（r = 0.40,P < 0.01）、阳虚体质得分与PSQI得分（r = 0.36,P < 0.01）呈正相关关系,有统计学意义。在阳虚体质与抑郁相关的潜变量中介效应模型中,睡眠质量中介效应值为0.21。结论 大学生睡眠质量欠佳在阳虚体质与抑郁之间起中介作用。     

加味柴平汤对HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床研究

为观察在"大辨证理论"指导下结合"攻下排毒"和"中药现代药理研究"认识组合而成的加味柴平汤治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎的临床效果,选择119例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者,随机分为治疗组69例,对照组50例。治疗组采用加味柴平汤治疗(每日1剂分2次口服,每周服用6剂),对照组采用拉米夫定治疗(每次100 mg,每日1次),共用药48周。2组患者分别在治疗12,24,36,48周进行肝功能、血清HBV-DNA和临床症状的观察,并对停药后24和48周的患者进行ALT和血清HBV-DNA的随访。治疗组在24周总有效率与对照组比较无统计学差异,但在12,36,48周总有效率高于对照组(P0.05);在12,36,48周改善肝功能方面优于对照组(P0.01或P0.05),但在24周改善ALT方面与对照组比较无统计学差异;在12周改善血清HBV-DNA方面明显低于对照组(P0.01),但在24,36,48周改善血清HBV-DNA方面与对照组比较无统计学差异;在12,24,36周HBV-DNA阴转率低于对照组(P0.01或P0.05),但在48周HBV-DNA阴转率与对照组比较无统计学差异;在12周和24周改善疲乏、纳差、腹胀和胁痛优于对照组(P0.01或P0.05),但在36周和48周改善疲乏和胁痛方面与对照组比较无统计学差异;患者的ALT在停药后24和48周异常率明显低于对照组(P0.01),血清HBV-DNA定量异常率在停药后24周与对照组比较无统计学差异,但在48周则低于对照组(P0.05)。加味柴平汤长期用药与间歇用药相结合对HBeAg阴性慢性乙型肝炎具有较好的临床疗效,应进一步在辨病施治与辨证论治相结合指导下优化和完善其处方组成,并开展其对肝纤维化和生存质量影响的临床研究。     

气郁质得分与健康相关生命质量:运动的中介效应

[目的]探讨运动在气郁质得分与健康相关生命质量(HRQOL)间的中介效应。[方法]采用横断面现场调查法,于2015年3月—2016年12月在北京、河北获得2 113例有效样本数据。运动水平由自我报告获得;气郁质得分采用中医体质量表气郁质亚量表计算;HRQOL评价采用简明健康状况调查问卷SF-36,获得生理领域(PCS)、心理领域(MCS)及其总体HRQOL得分。在相关分析的基础上,进一步应用分层多元线性回归模型探讨运动的中介效应。[结果] 1)气郁质得分与PCS(r=-0.461,P0.01)、MCS(r=-0.564,P0.01)以及总体HRQOL(r=-0.573,P0.01)呈负相关;运动水平与气郁质得分(r=-0.108,P0.01)呈负相关,与PCS(r=0.115,P0.01)、MCS(r=0.100,P0.01)以及总体HRQOL(r=0.111,P0.01)呈正相关。2)运动在气郁质得分与PCS、MCS和总体HRQOL间的中介效应分析具有统计学意义,中介效应量分别为0.93%、0.53%和0.69%。[结论]运动在气郁质对健康相关生命质量的负向影响中具有中介效应,但中介效应量较小,仅占不到1%。     

加味大柴胡汤治疗痰瘀阻窍型阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征52例

目的:观察加味大柴胡汤治疗痰瘀阻窍型阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)的临床疗效及对患者生活质量的影响.方法:将78例痰瘀阻窍型OSAHS患者按(1∶2)随机按数字法分为对照组26例和治疗组52例.对照组采用基础治疗、合并症治疗、药物治疗、气道内正压通气治疗等综合治疗方法;治疗组在对照组基础上加用加味大柴胡汤.疗程15d.采用多导睡眠图(PSG)监测睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、夜间平均SaO2、夜间最低SaO2,采用Epworth嗜睡量表(ESS)评价白天过度嗜睡情况,采用SF-36量表评价患者生活质量.结果:治疗组总有效率为96.15％优于对照组的80.77％(P＜0.05);治疗后治疗组AHI、ESS评分及SaO2＜90％比例均少于对照组(P ＜0.05,P＜0.01),治疗组夜间最低SaO2水平高于对照组(P＜0.01);治疗组生理功能、社会功能、生理职能、精神健康、情感职能、活力、总体健康各维度评分均高于对照组(P＜0.01).结论:加味大柴胡汤能改善OSAHS临床症状、体征,提高患者生活质量,提高临床疗效,值得临床使用.     

三七对酒精性肝病大鼠肝组织NF-κB/IκB表达的影响

 目的观察三七对酒精性大鼠肝组织的防治及对NF-κB/IκB表达的影响。方法SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组、三七高、低剂量组和硫普罗宁组,连续14周建立酒精性肝病模型。在模型制备同时,每天下午分别灌服给药,连续14周。ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)。常规HE及Masson染色,光镜观察肝组织的脂肪变、炎症及纤维化程度;免疫组化法检测肝组织中NF-κBp65/IκBα蛋白的表达。结果酒精性肝病模型组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度计分、血清TNF-α水平明显增高(P<0.01)。三七高、低剂量组,硫普罗宁组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度、血清TNF-α水平较模型组明显减轻(P<0.01,P<0.05)。酒精性肝病模型组大鼠肝组织NF-κBp65和IκBα均较正常组明显升高(P<0.01);三七高、低剂量组大鼠肝组织NF-κBp65/IκBα表达较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05)。相关分析显示,肝组织NF-κBp65表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.63,P<0.01),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.43,P<0.01);肝组织IκBα表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.36,P<0.05),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.44,P<0.01);血清TNF-α水平与与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.60,P<0.01)。结论用白酒-玉米油-吡唑混合液灌服大鼠14周可成功制作ALD模型。三七可明显减轻酒精性肝病大鼠肝组织脂肪变和炎症程度。三七能显著抑制肝组织中NF-κBp65/IκBα的过度表达,降低血清TNF-α水平,这可能是其有效防治酒精性肝病的发生发展的重要机制之一。     

涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6、超氧化物歧化酶表达的影响

[目的]通过观察涤痰散结活血软坚中药对非酒精性脂肪肝大鼠血清白介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响,探讨复方中药的作用机制。[方法]雄性SPF级Wistar大鼠60只,按体质量分层随机分为4组:正常对照组14只,自由饮水和普通饲料饮食。模型对照组18只,中药高剂量组14只,中药低剂量组14只,均予自由饮水和高脂饲料饮食,8周后随机处死模型对照组大鼠4只,确定脂肪肝模型成立。造模成功后,分别对中药低剂量组和高剂量组行中药灌胃,模型对照组、正常对照组以生理盐水灌胃,每周称大鼠体质量,治疗8周后处死,采用ELISA法检测血清IL-6、SOD。[结果]大鼠血清IL-6比较:高剂量组、低剂量组与模型对照组比较差异有显著性(P0.01),高剂量组与低剂量组比较,差异有显著性(P0.05)。大鼠血清SOD比较:高剂量组与模型对照组比较,差异有显著性(P0.01),低剂量组与模型对照组比较差异有显著性(P0.05),高剂量组与低剂量组比较无统计学意义(P0.05)。[结论]涤痰散结活血软坚中药可以显著减低血清IL-6浓度,此作用表现出剂量相关性趋势,可以明显升高血清SOD浓度,此作用没有体现出剂量相关性趋势。     

青竹汤对气阴两虚,湿热痹阻型成人Still病血清皮质醇水平的影响

目的:探讨青竹汤对气阴两虚,湿热痹阻型成人Still病(AOSD)血清皮质醇水平的影响。方法:选取2013年10月—2015年6月符合入选标准的AOSD患者(气阴两虚,湿热痹阻型)60例,随机分为试验组和对照组,各30例,试验组予以青竹汤治疗,每日1剂,bid,对照组予双氯芬酸钠缓释片治疗,每次75 mg,bid。两组患者持续治疗2周,分别记录治疗前后症状体征积分,测定血清皮质醇(CS)水平。疗程结束后第4,8周随访记录患者症状体征积分。结果:与治疗前比较,两组患者的症状体征积分均有明显改善(P0.01),试验组症状体征积分改善优于对照组(P0.05),治疗后试验组患者血清CS水平升高(P0.05),患者症状体征改善程度与血清CS水平呈显著正相关(r=0.609),且症状改善程度对血清CS水平有依存性(P0.05)。疗程结束后第4,8周随访记录患者症状体征积分,试验组明显优于对照组(P0.01)。结论:青竹汤可通过改善AOSD患者血清CS水平控制病情。     

高效液相色谱法测定人血清和脑脊液中莫西沙星浓度

 目的 建立测定人血清和脑脊液中莫西沙星药物浓度的高效液相色谱方法。方法 血清和脑脊液取样量均为10 μL;采用Shima-pack CLC-ODS色谱柱（6.0 mm×150 mm,5 μm）进行分离;以0.01 mol·L-1磷酸缓冲液（含硫酸四丁基铵5 mmol·L-1,pH 2.5）-乙腈（80∶20）为流动相;吡哌酸为内标,荧光检测器波长：Ex=295 nm、Em=495 nm。结果 内标和莫西沙星的保留时间分别为2.93和6.39 min;血清和脑脊液标准曲线在0.2~20 mg·L-1内线性良好（r>0.999 9,n=5）,其高、中、低质控样本方法学回收率分别在98.08%~104.81%和92.08%~101.73%间,方法学误差批内RSD均小于5.5%,批间RSD均小于7.8%。扩大取样量至0.1 mL,标准曲线下限可达2 ng·mL-1并良好检出。结论 该方法取样量小、操作简便、灵敏度高;为进行血清和脑脊液中莫西沙星临床PK/PD研究提供了数据保障。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。