错配修复基因hMSH2与突变p53在散发性消化道肿瘤中的表达

人类ＤＮＡ错配修复系统 (ｍｉｓｍａｔｃｈｒｅｐａｉｒｓｙｓｔｅｍ ,ＭＭＲ )是由一系列特异性修复ＤＮＡ碱基错配的酶分子组成 ,此系统的存在 ,能避免遗传物质产生突变 ,保证ＤＮＡ复制的高保真度[1] 。ｈＭＳＨ2是目前研究较广泛的ＤＮＡ错配修复基因 ,它的失活可导致ＤＮＡ错配修复能力的降低 ,引起微卫星不稳定性 (ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ ,ＭＳＩ) ,可使癌基因激活或抑癌基因失活 ,诱发细胞癌变[2 ] 。我们对 30例散发性消化道肿瘤ＤＮＡ上ｈＭＳＨ2基因与肿瘤组织中突变ｐ5 3的表达进行研究 ,以探讨ｈ…     

P16蛋白在肺癌组织和癌旁组织的表达研究

近年发现的多肿瘤抑制基因 1(ＭＴＳ1)是一种细胞周期素Ｄ依赖性激酶的抑制基因 ,其突变、缺失及外显子 1内部的 5′ＣＰＧＤＮＡ序列甲基化与多种肿瘤的发生、发展相关[1] 。我们利用免疫组织化学检测了肺癌及癌旁组织手术标本的Ｐ16蛋白表达水平以探讨Ｐ16与肺癌的关系。材料与方法　 (1)材料来源 :取自我院 1995～ 1997年肺癌手术常规石蜡组织标本 41例并选取其中 30例患者的癌旁组织 30份作对照组 (癌旁组织与癌组织的距离≥ 5ｃｍ)。年龄 2 2～ 75岁。男 2 9例 ,女 12例。所有病例术前均未行化疗及放疗。非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ) 35…     

大鼠肺鳞癌癌变过程中INK4a/ARF 基因纯合性缺失的研究

ＩＮＫ4ａ/ＡＲＦ基因是一个在人类癌症中 (包括肺癌 )最容易被破坏的基因 ,它可利用不同的第一个外显子 (1α、1β)和下游两个共同的外显子编码两个不同的蛋白 ,一个是细胞周期素依赖激酶抑制剂Ｐ16ＩＮＫ4ａ;另一个是Ｐ19ＡＲＦ(ｐ19ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ)是一个可以改变的阅读框架 ,能结合ＭＤＭ2(ｍｕｒｉｎｅｄｏｕｂｌｅｍｉｎｕｔｅ 2 ,小鼠双微 2 )并促进ＭＤＭ2的降解 ,而稳定野生型Ｐ5 3蛋白 ,从而使ｐ2 1上调引起细胞周期阻滞或诱导细胞凋亡。本研究在石蜡切片中利用免疫组化Ｓ Ｐ法检测Ｐ16ＩＮＫ4ａ…     

200例动态心电图的心率变异性分析

现将我院 1999～ 2 0 0 1年检测的 2 0 0例 2 4ｈ动态心电图 (ＤＣＧ)进行心率变异性 (ＨＲＶ)分析 ,报告如下。1　资料与方法1 1　 2 0 0例 2 4ｈＤＣＧ记录检查使用加拿大产ＷＩＳＭＡＧＯ 5 0版本软件分析系统。采用 3通道、快速闪光卡记录回放。分析方法以单位时间内窦性心律不齐的频度和程度来分析ＨＲＶ。选用统计指标如下 :ＳＤＮＮ 2 4ｈ所有窦性心搏间期 (Ｒ -Ｒ)的标准差。ＳＤＡＮＮ 2 4ｈ中每 5ｍｉｎＲ -Ｒ间期平均值的标准差。ｒＭＳＳＤ 2 4ｈ中相邻Ｒ -Ｒ间期差值的均方根。ＳＤＮＮｉｄｅｘ心率变异指数 ,指心搏总数与全…     

hMLH1和hMSH2蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

本研究采用免疫组织化学法 ,对ＤＮＡ错配修复 (ＭＭＲ)系统中 2个主要基因ｈＭＬＨ1和ｈＭＳＨ2在肝细胞癌 (ＨＣＣ)中的表达状况进行了检测和相关指标分析 ,以进一步了解ＭＭＲ路径在ＨＣＣ发生中的可能作用。一、对象与方法1 .研究对象 :随机选择第二军医大学东方肝胆外科医院病理科 2 0 0 0年 6月～ 7月期间连续手术切除的ＨＣＣ标本 50例 ,患者中男 40例 ,女 1 0例 ,年龄范围 35～ 76岁 ,所有患者术前均未做过放疗或化疗。于癌和癌旁肝组织交界处取材 ,1 0 %中性甲醛固定 ,常规石蜡包埋 ,4μｍ连续组织切片 ,分别行常规ＨＥ染色和ｈＭ…     

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段序列分析

媒介昆虫抗性已成为当前虫媒病防制中的突出问题[1 - 3] ,作者曾报道白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶 (ＡＣｈＥ)基因片段的克隆及鉴定[4 ] ,本实验选择白纹伊蚊基因组ＤＮＡＡＣｈＥ基因片段克隆进行ＤＮＡ测序 ,并分析其序列特征 ,为进一步研究其ＡＣｈＥ与抗药性的关系提供依据。1　材料与方法1 .1　实验蚊株　白纹伊蚊敏感株由中山医科大学寄生虫学教研室惠赠。1 .2　实验菌株　ＪＭ 1 0 9由中山医科大学寄生虫学教研室惠赠。1 .3　质粒载体　ＰＭＤ 1 8 Ｔｖｅｃｔｏｒ试剂盒为大连宝生物公司产品。1 .4　主要试剂　ＣＴＡＢ为Ｓｅｒｖａ公司产品…     

P27及bcl-2在人非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

ｐ2 7基因是新近发现的肿瘤抑制基因[1] ,研究Ｐ2 7蛋白在人非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)中的表达 ,并与组织类型、分化程度、临床分期、预后的关系及其与ｂｃｌ 2蛋白表达相关性有重要意义。材料与方法　 (1) 5 4例人非小细胞肺癌石蜡组织切片取自 1989年 3月～ 1993年 3月本院外科手术切除的肺癌组织石蜡块 (男 39例 ,女 15例 ,年龄 42～ 6 9岁 ,中位年龄 5 2 3岁。鳞癌 2 6例 ,腺癌 2 8例。肺癌ＴＮＭ分期按国际抗癌联盟1997年标准 :Ⅰ期 18例 ,Ⅱ期 2 7例 ,Ⅲ期 9例。高分化 10例 ,中分化 32例 ,低分化 12例 )。所有病例均有明确的病理诊…     

雷公藤抑制致敏小鼠T细胞IL-5 mRNA表达及GATA3活性

通过对致敏小鼠Ｔ细胞ＩＬ 5ｍＲＮＡ表达和ＧＡＴＡ3 活性的观察 ,探讨雷公藤内酯醇 (ＴＰ)对ＩＬ 5基因转录水平的调节机制 ,并与地塞米松 (ＤＭ)的作用比较。材料与方法　 (1)动物模型建立及分组 :ＢＡＬＢ/ｃ小鼠2 4只 ,随机平均分为 4组 :正常对照组 ,以生理盐水代替卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏和激发 ;致敏组 ,以ＯＶＡ致敏和激发[1] ;ＴＰ组 ,每次激发前 1ｈ腹腔注射ＴＰ 40 μｇ/ｋｇ体重 ;ＤＭ组 ,每次激发前 1ｈ腹腔注射ＤＭ 10ｍｇ/ｋｇ体重。ＴＰ组与ＤＭ组最后一次激发后 2 4ｈ再给药 1次。 (2 )原位杂交 (ＩＳＨ) :制备脾脏Ｔ细胞涂…     

78例急性心梗合并室性心律失常动态心电分析

动态心电图 (ＤＣＧ)作为 1种长时间观察心电变化规律的方法 ,已广泛应用于临床 ,为更好了解急性心肌梗死(ＡＭＩ)并发室性心律失常 (ＶＲ)对预后的影响 ,对 78例进行分析 ,报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　 118例ＡＭＩ中 ,男 62例、女 5 6例 ,年龄 (5 6± 17 5 )岁。ＡＭＩ部位 :前间壁 3 5例、广泛前壁 2 3例、下壁3 0例、下壁 +后壁 19例 ,前壁 +下壁 7例 ,心内膜下 4例。均符合ＷＨＯ诊断标准。1 2　方法　采用ＤＭＳ -Ｐ5ＤＣＧ分析系统 ,在ＡＭＩ后 6ｈ～ 4Ｗ接受检查 ,采用ＣＭ1、ＣＭ2 、ＣＭ3双极导联 3通道记录。1 3　随…     

细胞色素P-450 4F新基因分离与序列分析

已发现人类细胞色素Ｐ４５０氧化酶４Ｆ的两个基因。现报道从人类肝脏中分离出的新基因。１．材料与方法：应用ＰＣＲ从Ｃｌｏｎ－ｔｅｃｈ公司的ＭａｒａｔｈｏｎＲｅａｄｙｃＤＮＡ中分离出人胎肝一个ｃＤＮＡ克隆，用ＡＢＩ３７７型测序仪对ｃＤＮＡ进行双方向测序。从已知序列中合成一对特异引物，以成人肝组织总ＲＮＡ为模板行逆转录ＰＣＲ，同时用该引物对成人肝脏。ＤＮＡ文库进行筛选。将ｃＤＮＡ重组于ＥＳＰ酵母表达载体中。在ＥＭＭ酵母培养液中合成ＧＳＴ溶合蛋白，纯化后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶电泳、染色。２．结果：ｃＤＮＡ全…     

老年消化道肿瘤外周T淋巴细胞亚群的研究

利用流式细胞仪检测老年消化道肿瘤外周Ｔ淋巴细胞亚群 ,旨在了解老年消化道肿瘤发生发展与Ｔ淋巴细胞的关系 ,为深入研究老年消化道肿瘤提供实验资料。1　材料和方法1 1　 病例选择　老年消化道肿瘤组 :经病理确诊为老年消化道肿瘤 5 2例 ,其中胃癌 17例 ,结肠癌 35例。男 34例 ,女 18例。年龄 6 0～ 81(平均 6 8)岁。ＴＮＭ分期为Ⅰ～Ⅳ期 ,其中Ⅰ～Ⅱ期13例 ,Ⅲ～Ⅳ期 39例。对照组 :随机选健康成年人 2 5例。1 2 　 方法　仪器 :流式细胞仪 (ＦＣＭ) ,ＥＰＩＣＳＸ2型 (美国Ｃｏｕｌｔｅｒ公司产品 )。试剂 :ＦＩＴＣ标记的ＣＤ3、ＣＤ4…     

泌尿系统疾病——长期雷米普利治疗对慢性肾病患者肾功能和透析需求的影响:REIN随访研究

雷米普利 (Ｒａｍｉｐｒｉｌ)肾病治疗研究 (ＲＥＩＮ)发现 :2 4ｈ尿蛋白≥ 3ｇ的肾病患者口服雷米普利后肾小球滤过率 (ＧＦＲ)下降速度减慢 ,出现血清肌酐倍增和末期肾衰竭 (ＥＳＲＦ)的综合危险减少。为评价长期雷米普利治疗对慢性肾病患者肾功能和透析需求的影响 ,作者进行了ＲＥＩＮ随访研究。方法　 97例病人ＲＥＩＮ结束后进入随访研究。原雷米普利组 5 1例继续服用雷米普利 ,原安慰剂加常规抗高血压药物组 46例在首次随访后改服雷米普利 ,每日 1 2 5ｍｇ ,若舒张压未达到 90ｍｍＨｇ( 1ｍｍＨｇ=1 3 3ｋＰａ)以下 ,则逐步增至每日…     

雌二醇对大鼠血管内皮素1和平滑肌细胞增殖的影响(摘要)

1　材料与方法8周龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为双侧卵巢切除组(ＯＶＸ)、卵巢切除 +苯甲酸雌二醇组 (ＯＶＸ +Ｅ2 )和假手术组(Ｓｈａｍ) ,每组 8只 ,均手术一周后开始用药。ＯＶＸ +Ｅ2 组按 1μｇ/ｇ体重肌注苯甲酸雌二醇 ,每 3天 1次 ,另两组肌注等量玉米油。 2周后处死动物 ,取动脉血和胸主动脉中膜 ,采用煮沸法获取组织上清液 ,血浆和组织ＥＴ - 1测量采用放射免疫法。胸主动脉中膜切成 2～ 3ｍｍ大小的组织块 ,放入无酚红的ＤＭＥＭ中培养 2 4ｈ ,再在含有3Ｈ -ＴｄＲ的同样培养液中培养 48ｈ ,用ＤＭＥＭ冲洗 3次 ,再用ＰＢＳ冲洗…     

谷氨酸脱羧酶抗体检测的临床意义

1型糖尿病 (ＤＭ )在发病机制上分免疫介导和特发性 ,绝大多数 1型ＤＭ是由免疫介导的胰岛 β细胞破坏造成的 ,而 2型ＤＭ发病主要为胰岛素(ＩＮＳ)抵抗和 (或 )ＩＮＳ分泌相对不足 ,在发病机制上两者不同。因此胰岛 β细胞免疫损伤的特异性指标成为区别 1型和 2型ＤＭ的重要标志。自 1990年Ｂｅａｋｋｅｓｋｏｖ等首次证实谷氨酸脱羧酶 (ＧＡＤ)为 1型ＤＭ胰岛β细胞免疫损伤的主要抗原后 ,ＧＡＤ抗体 (ＧＡＤ -Ａｂ)在 1型ＤＭ预测、诊断及免疫干预治疗中的作用正越来越受到重视 ,成为近年来ＤＭ研究的热点问题。1　ＧＡＤ的两种同工酶Ｇ…     

正常糖耐量、糖耐量低减和糖尿病人群中胰岛素抵抗与胰岛素分泌功能研究

流行病学调查表明胰岛素抵抗 (ＩＲ)不仅存在于糖尿病(ＤＭ)患者中 ,在糖耐量低减 (ＩＧＴ)甚至正常糖耐量 (ＮＧＴ)人群中也发现ＩＲ存在。本研究从糖尿病流行病学的角度探讨ＩＲ和胰岛素分泌 (ＩＳ)在ＮＧＴ、ＩＧＴ和ＤＭ 3组人群中的改变。一、对象和方法1.对象 :874例馒头餐后 2ｈ指尖毛细血管血糖超过6 .6 7ｍｍｏｌ/Ｌ者行 75ｇ口服葡萄糖耐量 (ＯＧＴＴ)试验 ,并测定空腹胰岛素 (ＦＩＮＳ)和ＯＧＴＴ 2ｈ胰岛素 (ＰＩＮＳ)。根据 1985年ＷＨＯ糖尿病诊断标准 ,将所有受试者分为 3组 :ＮＧＴ 35 1例 ,年龄 (44 .0± 14 .7)岁 ;ＩＧＴ…     

非小细胞肺癌P53、CyclinD1蛋白表达及与细胞增殖的关系

应用免疫组化方法观察非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)和正常肺组织中抑癌基因Ｐ5 3和癌基因ＣｙｃｌｉｎＤ1产物的表达 ,并进行增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)的检测 ,探讨Ｐ5 3、ＣｙｃｌｉｎＤ1蛋白在ＮＳＣＬＣ的异常表达及其与细胞增殖的关系。材料与方法　实验组取自天津医科大学总医院、天津医科大学第二附属医院病理科 1990～ 1997年手术切除ＮＳＣＬＣ石蜡包埋标本 74例 ,其中鳞癌 36例 ,腺癌 38例 ,所有病例术前均未行放疗和化疗。对照组正常肺组织取自同期手术切除的炎性假瘤标本共 10例。采用链霉亲和素 生物素化过氧化物酶复合物 (ＳＰ…     

糖皮质激素对神经免疫性疾病转化生长因子β1 的影响

糖皮质激素是治疗神经免疫性疾病 (ＩＮＤ)的主要方法 ,转化生长因子 β1(ＴＧＦ β1)在ＩＮＤ发生发展过程中有重要作用。我们检测糖皮质激素治疗前后ＴＧＦ β1含量。1 资料和方法 :ＩＮＤ组 2 2例 ,其中多发性硬化 7例 ,吉兰 巴雷综合征 9例 ,重症肌无力 (ＭＧ) 6例 ;非ＩＮＤ(ＮＩＮＤ)组2 0例 ,为同期住院的脑梗死患者 ;未用糖皮质激素的ＭＧ患者 (ＮＭＧ组 ) 11例 ;无神经系统病变的外科手术患者 (ＯＰ)组18例。前 3组于入院后 1～ 3ｄ、ＯＰ组于手术当天获取血和脑脊液保存冰箱备用 ,ＩＮＤ组使用地塞米松或泼尼松后 12～16ｄ、ＮＭ…     

一种在台湾地区新发现的感染病原SEN病毒的阳性率和临床意义

为了调查台湾地区最新发现的ＳＥＮ病毒(ＳＥＮＶ)的阳性率及其与临床的关联 ,作者对肝病高危人群、肝病患者和健康成年人感染ＳＥＮ病毒的两个变种 (ＳＥＮＶ Ｄ和ＳＥＮＶ Ｈ)的阳性率作了研究。方法　血清标本来自 61 5例研究对象 ,共分为 1 1组 :静脉吸毒者 50例 ;血友病 50例 ;多次输血的地中海贫血 41例 ;尿毒症透析者 50例 ;抗ＨＡＶＩｇＭ阳性的甲肝病毒感染者 2 5例 ;非Ａ Ｅ暴发性肝炎 (抗ＨＡＶＩｇＭ、抗ＨＢＣ、抗ＨＤＶ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＣＶ、抗ＨＥＶ均阴性 ,肝炎病毒基因ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ、ＨＤＶ ＲＮＡ、Ｈ…     

散发性大肠癌患者粪便APC基因突变的研究

本实验应用ＰＣＲ ＳＳＣＰ硝酸银染色技术检测了大肠癌患者肿瘤组织、粪便标本ＡＰＣ基因突变 ,旨在寻求新的大肠癌诊断标志物。材料与方法一、检测对象病例组 :大肠癌患者手术前粪便标本及手术中肿瘤组织标本。男 2 2例 ,女 19例 ,年龄 2 8～ 73岁 ,平均 5 2 .1岁。其中高分化腺癌 13例 ,中分化腺癌 17例 ,低分化腺癌 11例。Ｄｕｋｅｓ分期 :Ａ期 13例 ,Ｂ期 15例 ,Ｃ期 9例 ,Ｄ期 4例。对照组 :同一患者手术后粪便标本及手术中远离肿瘤组织的手术断端正常组织标本。二、实验方法(一 )粪便脱落细胞ＤＮＡ的提取 :参照文献 [1]并做改进。(…     

42例无症状性心肌缺血的动态心电图观察与探讨

1　资料与方法本文对诊断明确的 42例冠心病患者进行 2 4ｈＤＣＧ观察 ,其中男 2 8例 ,女14例 (包括陈旧性心肌梗死 8例 ) ,平均年龄为 60例 ,均符合无症状性心肌缺血的诊断标准。采用美国产ＨＳ 9616型携带式双道存贮分析器 ,选用双极胸前导联ＣＭ5和ＣＭ1 进行 2 4ｈ动态监测 ,连续记录和回放分析 2 4ｈ的心电图变化。2　结果42例中无症状性ＳＴ段缺血型压低的次数为 2 80次 ,而伴心绞痛的ＳＴ段压低次数为 60次。本组病例中 ,年龄在 60岁以上的患者为 3 2例 ,60岁以下的为 10例。还发现 ,60岁以上的患者在 2 4ｈＤＣＧ检查中 ,发作缺血型…