糖皮质激素受体基因在胎鼠肺发育中的表达

本文作者用分子生物学杂文技术观察了胎鼠全肺组织及肺二种细胞的糖皮质激素受体（ＧＲ）ｍＲＮＡ水平，并通过孕鼠腹腔注射地塞米松、细胞培养液加可的松，测定外源性糖皮质激素对胎鼠肺ＧＲ基因表达的作用。同时测定肺表面活性物质蛋白Ａ（ＳＰ—Ａ）的基因表达。结果ＧＲｍＲＮＡ和ＳＰ－ＡｍＲＮＡ水平都在孕１９天为最高，这说明对糖皮质激素敏感性增加和表面活性物质生成有密切关系。而外源糖皮质激素对ＧＲ在全肺组织及细胞水平的表达未见明显变化，ＧＲ蛋白质却有变化，提示糖皮质激素对ＧＲ的调节可能在转译后水平。     

糖皮质激素对兔脑,肺和肝细胞糖皮质激素受体的调节

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比较无显著差异。提示糖皮质激素对兔不同靶器官ＧＲ的调节存在不同特点。     

产前糖皮质激素应用对胎鼠脑发育的影响

目的:探讨产前应用不同剂量糖皮质激素(antenatal corticorsteriod theray,ACT)对胎鼠脑发育的影响.方法:对怀孕第17天的SD大鼠每天肌注地塞米松0.8 mg/kg,肌注1次的为1剂组、肌注3次的为3剂组和肌注4次的为4剂组,没有使用地塞米松的为对照组.对各组孕鼠所生的胎鼠,分别于生后第1、第7和第14天测量体重、全脑重量、脑细胞凋亡情况并与对照组作比较.结果:实验组胎鼠的体重、全脑重量较对照组明显下降,尤以4剂组最明显;脑细胞凋亡数3剂组、4剂组与对照组在第1天有差别,第7天和第14天差别减弱.结论:ACT对胎鼠的体重、全脑重量、脑细胞凋亡等产生不良影响,剂量越大副作用越明显.     

早产中预防性应用糖皮质激素促胎肺成熟

早产一直是临床上新生儿死亡中一大因素，其中早产儿的主要并发症包括肺透明膜病（新生儿呼吸窘迫综合征）、新生儿坏死性小肠结肠炎、缺血缺氧性脑病，头颅血肿，等等。早产的内在生理学和分子学方面的病因十分复杂而且并未完全被理解。其原因往往是不尽相同且是多方面的。而早产所引起的并发症几乎是殊路同归的。对妇产科、儿科医生来说，早产新生儿的首要问题就是建立正常的自主呼吸。早产儿的肺发育不够成熟，表面活性物质少，易发生肺透明膜病。临床上很早就在为促进胎儿肺成熟进行实验、研究，而糖皮质激素在可能发生早产的孕妇中的预防性应用以促进胎儿肺成熟早以被大家所公认。本文主要介绍糖皮质激素对促胎肺成熟方面的作用以及其可能的副作用。     

糖皮质激素对兔脑、肺和肝组织糖皮质激素受体的调节

采用放射配基结合分析法，研究地塞米松（Ｄｅｘ）对兔脑、肺、肝的糖皮质激素受体（ＧＲ）的调节作用。结果发现，静脉注射Ｄｅｘ５ｍｇ／ｋｇ后兔肺、肝胞液ＧＲ的结合量明显下降，与对照组比较Ｐ＜０．００１，脑胞液ＧＲ与对照组比较无显著差异。提示糖皮质激素（ＧＣ）对兔不同靶器官ＧＲ的调节存在不同特点。     

氨溴索?糖皮质激素对大鼠胎肺形态发育的影响

目的:比较产前给药氨溴索和糖皮质激素(地塞米松、倍他米松)对大鼠胎肺形态发育的影响.方法:12只孕鼠随机分成四组:生理盐水对照组,氨溴索组,地塞米松组,倍他米松组.通过光镜观察、图像分析及电镜观察比较各组孕鼠的胎仔肺组织形态发育差异.结果:光镜下各治疗组呼吸膜周径大于对照组(P＜0.05),肺泡表面积大于对照组(P＜0.01),肺泡间隔均低于对照组(P＜0.01).倍他米松组与地塞米松组相比肺泡间隔小(P＜0.01),呼吸膜周径及肺泡表面积大(P＜0.01).透射电镜下各治疗组肺泡Ⅱ型上皮内可见板层小体,细胞器多见,倍他米松组和地塞米松组上述改变尤为明显;而对照组内未见板层小体、细胞器少见.结论:氨溴索、地塞米松、倍他米松均能促进肺发育,且倍他米松效果优于地塞米松.氨溴索无激素用药的毒副作用,可能成为产前促进胎肺成熟的更好的选择.     

糖皮质激素促胎肺成熟的进展

早产是产科常见并发症，其发生率约为5％～10％，占非畸形新生儿死亡的75％，其死亡的主要原因为：新生儿呼吸窘迫综合征RDS)和脑室内出血(IVH)等。早产儿患病率明显增高，如窒息、新生儿高胆红素血症等。如何降低早产儿的患病率和死亡率关系到出生人口素质，是产科医生面临的重要课题。     

糖皮质激素受体基因在受体缺失型哺乳动物细胞中的表达

本文在证实小鼠成纤维细胞系Ｅ８２．Ａ３无糖皮质激素受体（ＧＲ）的基础上，采用磷酸钙共沉淀法，用含大鼠肝ＧＲｃＤＮＡ的质粒ｐＲＧＲ－Ｎｅｏ转染给Ｅ８２．Ａ３细胞，并用Ｇ４１８筛选稳定表达细胞，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明，转化细胞特异性结合［３Ｈ］曲安缩酮的结合参数及甾体特异性与经典ＧＲ相同，说明所筛选得的细胞确实表达了ＧＲ。     

扶肺固肾饮对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及糖皮质激素受体的影响

目的:探讨扶肺固肾饮对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠气道炎症及糖皮质激素受体的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠,随机分为5组:空白对照组、COPD模型组及扶肺固肾饮高、中、低剂量组,每组10只,除空白对照组,其余4组以烟熏联合脂多糖、冷空气刺激制造COPD大鼠模型。造模成功后,空白对照组、COPD模型组予蒸馏水3 mL/只灌胃,扶肺固肾饮高、中、低剂量组予1.02、0.51、0.26 g中药配方颗粒/100 g/天,每日2次灌胃,连续给药28 d。采集样本,观察苏木素-伊红染色肺组织的病理变化,酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清和右肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-17A(IL-17A)的含量以及左肺组织中基质金属蛋白酶(MMP-9)、金属蛋白酶-1组织抑制因子(TIMP-1)表达的水平,实时荧光定量聚合酶链式反应测定大鼠左肺组织糖皮质激素受体(GR)mRNA含量,免疫组化测定左肺组织GR的表达水平。结果:扶肺固肾饮高、中、低剂量组COPD大...     

阿霉素肾病在鼠外周血白细胞及肾脏糖皮质激素受体的变化

目的：为弄清大鼠肾小球肾炎时外周血白细胞糖皮质激素受体（GR）与肾脏受体的变化的关系。方法：通过静脉注射阿霉素复制大鼠微小病变型肾小球肾病模型,用放射配体结合法测定外周血白细胞GR及肾脏GR的变化。结果：外周血白细胞GR显著降低,而肾胞浆GR无明显变化,两者无明显相关性。     

Effect of Dexamethasone on Expression of Glucocorticoid Receptor in Human Monocyte Cell Line THP-1

Glucocorticoid(GC)is one of the steroid hor-mones possessing anti-inflammatory and i mmuneinhibitory functions and has satisfactory effective-ness in controlling some chronic inflammation andi mmune diseases.But few patients are not sensi-tive to the therapy of massive-dose GC,named asGC resistance[1].GC exerts its biological effectsbybinding to a glucocorticoid receptor(GR).Twohuman isoforms of GR have been identified,termed GRαand GRβ.GRαis ubiquitously ex-pressed in al most all hu…     

姜黄素对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角和背根神经节GR和NMDAR-NR1表达的影响

目的探讨姜黄素对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角和背根神经节皮质激素受体(GR)和NMDAR-NR1表达的影响。方法将雄性SD大鼠72只(体质量220～250g),随机分成4组:假手术组(Sham组)、慢性坐骨神经结扎损伤组(CCI组)、CCI+溶剂组(SC组)、CCI+姜黄素100mg/kg组(Cur100组)。SC组和Cur100组大鼠在坐骨神经结扎后,分别腹腔注射溶剂或100mg.kg-1.d-1姜黄素,至术后14d。于术前2d和术后1、3、5、7、10、14d测定机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL);术后3、7、14d取大鼠术侧L4、L5脊髓背角和背根神经节,用免疫组化法检测脊髓背角和背根神经节GR和NMDAR-NR1表达情况。结果与Sham组相比,CCI组术后TWL、MWT明显降低(P<0.01),术侧脊髓背角和背根神经节内GR和NMDAR-NR1表达明显增多(P<0.01)。与CCI组相比,Cur100组大鼠TWL和MWT明显提高(P<0.05),脊髓背角和背根神经节GR和NMDAR-NR1表达明显减少(P<0.05)。结论姜黄素可通过抑制脊髓背角和背神经根节GR和NMDAR-NR1的表达而减轻CCI大鼠神经病理性疼痛。     

甘草酸二铵上调急性肺损伤大鼠糖皮质激素受体的表达

目的观察甘草酸二铵(DG)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织糖皮质激素受体(GR)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)表达的影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、ALI组、DG干预组(HLG组)、地塞米松干预组(HLD组)、ALI受体阻断组(ALIR组)和DG干预受体阻断组(HLGR组)。各组动物造成失血性休克,然后给予内毒素(LPS)2mg/kg腹腔注射;LPS注射前1h,分别给予DG 20mg/kg或地塞米松2mg/kg腹腔注射,ALIR组和HLGR组大鼠肌肉注射受体阻断剂RU486。测定大鼠肺湿干比(W/D)、血氧分压(PaO2),并检测肺组织GR mRNA及GR蛋白的表达,同时测定血清TNF-α、IL-10浓度。结果 (1)ALI组TNF-α明显高于S组、HLGR组和HLG组(P<0.01);ALI组IL-10明显高于S组(P<0.01),但低于HLG组和HLGR组(P<0.05)。(2)ALI组GR mRNA和蛋白的表达明显低于S组(P<0.01);HLG组GRmRNA和蛋白的表达则明显高于ALI组(P<0.05,P<0.01)。(3)ALI组肺组织出现充血、水肿、中性粒细胞浸润,HLG组肺部炎症较ALI组减轻。结论 DG可能通过上调GR及IL-10的表达,同时抑制TNF-α的过度表达,从而起到减轻ALI的作用。     

RNA干扰技术抑制糖皮质激素受体在大鼠肺泡巨噬细胞表达及活性的研究

目的利用RNA干扰技术,建立糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)基因阻断的大鼠肺泡巨噬细胞模型.方法构建2个针对GR的RNAi表达载体,分别命名为psilencer 3.1-GR1和psilencer 3.1-GR2,经测序确认后,转染大鼠肺泡巨噬细胞.RT-PCR、Western Blot分别检测GR mRNA水平和蛋白水平表达变化;相对荧光素酶活性法检测GR转录激活功能的变化.结果经测序证实:成功构建2个针对GR的RNAi表达载体(psilencer 3.1-GR1和2);转染psilencer 3.1-GR2可明显降低细胞内GR mRNA的丰度及GR蛋白表达,细胞GR转录激活活性明显降低;转染psilencer 3.1-GR1与对照组相比无显著变化.结论成功地构建并筛选出一个特异而高效地阻断GR表达及功能的质粒表达载体,为进一步研究糖皮质激素受体的功能提供新方法.     

糖皮质激素对哮喘模型大鼠肾阴阳虚证候演变的影响

目的：观察地塞米松干预哮喘模型大鼠的不同阶段（撤停前、撤停中、撤停后）对阴阳虚证候及下丘脑一垂体一肾上腺皮质（hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA）轴的影响。方法：通过雾化吸入1％卵清白蛋白建立大鼠慢性哮喘模型。腹腔注射地塞米松模拟激素干预过程,观察不同阶段大鼠的症状表现,根据阴虚、阳虚证计量标准,判断阴虚、阳虚证候属性;酶联免疫吸附测定法检测血清皮质酮（corticosterone,CORT）含量,放射免疫测定法检测血浆促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone,ACTH）、下丘脑匀浆液促肾上腺皮质激素释放激素（corticotropin—releasing hormone,CRH）及血浆骨钙素（bone Gla—protein,BGP）含量。结果：激素干预组大鼠于激素撤停前阶段属阴虚证,撤停中阶段属阴亏、阳虚证,撤停后阶段属阴阳两虚证。激素撤停前阶段及撤停中阶段,对HPA轴（CORT、ACTH、CRH含量）有显著抑制作用,激素撤停后HPA轴的功能有所恢复;激素应用的各个阶段,均存在BGP的明显抑制。结论：激素干预哮喘模型大鼠在激素应用的不同阶段具有不同的证候特点,激素干预后动物呈现明显的肾虚表现。     

干扰原代Leydig细胞糖皮质激素受体表达的重组腺病毒构建研究

目的:获得可对原代大鼠Leydig细胞的糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)产生干扰作用的含miRNA的重组腺病毒.方法:首先设计并构建针对大鼠GR基因的4对miRNA表达载体,将此4种miRNA表达载体经脂质体转染大鼠胚胎成纤维细胞(Rat embryonic fibroblast,...     

大鼠肝胞液糖皮质激素受体的高效液相分析

目的：应用高效液相疏水作用层析法（HPHIC）分离并纯化大鼠肝胞液高、低亲和力糖皮质激素受体（GRH和GRL），为临床大剂量糖皮质激素（GC）冲击治疗提供实验依据。方法：超速离心大鼠肝组织，取上清，核素^3H-地塞米松（Dex）标记后，分别行Pseudoscatchard分析及HPHIC分析，SDS-PAGE及Western印迹法鉴定HPHIC分析后所收集的峰值管蛋白的性质。结果：在标准大气压，0～4℃条件下，只出现一个洗脱峰，峰值位置在9～11min。而在标准大气压，25℃且^3H-Dex≥50nmol/L时出现两个洗脱峰，峰值位置在3～7min及9～11min。SDS-PAGE及Western印迹法显示5～7min和9～11min时出现相对分子质量约60000、可与GC单克隆抗体结合的蛋白质分子。结论：提示有两种不同大小的GR分子存在，但是否存在GRH和GRL尚需进一步的实验证实。     

被动型Heymann肾炎大鼠肾胞液糖皮质激素受体的动态变化

应用放射配体结合法检测不同病期被动型Ｈｅ６ｍａｎｎ肾炎（ＰＨＮ）病鼠肾、肝胞液糖皮质激素受体（ＧＲ），同时测定相应病期血浆皮质酮（Ｂ）浓度。结果：病鼠第２周末肾胞液ＧＲ最大结合容量（Ｒ０）较正常大鼠减少（Ｐ〈０．０５）；３周末进一步减少（Ｐ〈０．００５）；４周末Ｒ０已回升，与正常大鼠差异不显著（Ｐ〉０．０５）。这种动态变化与疾病的发生、发展及转归相一致。肾胞液ＧＲ的Ｒ０与蛋白量呈负相关（Ｐ〈０．０     

低氧对A549细胞糖皮质激素受体表达的影响

目的研究不同低氧时间培养下,人肺腺癌上皮A549细胞糖皮质激素受体α(GRα)和糖皮质激素受体β(GRβ)的表达。方法将A549细胞分成6组,低氧组(3组)和对照组(3组),分别放置于低氧小室(37℃,95%N2,5%CO2)和普通培养箱中(37℃,95%空气,5%CO2)培养。24h、48h、72h后收集细胞,运用倒置显微镜下拍摄照片、RT-PCR和免疫细胞化学方法观察缺氧对A549细胞数目、形态以及细胞内GRα、GRβ mRNA和蛋白表达的影响。结果①低氧组细胞形态发生显著改变,随着低氧时间的延长,细胞生长速度逐渐减慢,细胞肿胀变形逐渐加剧。②RT-PCR的结果显示:24hGRα mRNA表达水平低氧组(0.914±0.079)与对照组(0.883±0.208)比较略有降低,但差异无显著性(P>0.05);48、72hGRα mRNA表达水平低氧组(0.794±0.029、0.828±0.171)与对照组(1.054±0.120、1.187±0.173)比较显著降低,差异有显著性(P<0.05);24、48、72hGRβ mRNA表达水平低氧组(0.439±0.175、0.437±0.117、0.433±0.101)与对照组(0.429±0.140、0.443±0.114、0.553±0.110)比较差异无显著性(P>0.05)。③免疫细胞化学的结果显示:24hGRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变;48、72hGRα蛋白表达水平低氧组与对照组比较显著降低;24、48、72hGRβ的蛋白表达水平低氧组与对照组比较无显著改变。结论低氧可导致A549细胞GRα的mRNA和蛋白表达水平显著降低;低氧环境可能会影响糖皮质激素作用的发挥。     

Effects of Dexamethasone on glucocorticoid receptor expression in a human ovarian carcinoma cell line 3AO

Ourpreviousworkhasshownthatdexamethasone (Dex) ,asyntheticglucocorticoid ,inhibitshumancarcinomacell(3AO)proliferationandinducesdifferentiationinatime andconcentration dependentmanner 1　Butthemolecularmechanismbehindtheseobservationswasunclear Thepresentstudyinvestigatestheexpressionofglucocorticoidreceptor (GR)in 3AOcellsbyDexaswellastheDex inducedcellulareffectsthatweremediatedbyGR METHODSMaterialsRPMI 16 40mediumwasobtainedfromNissuiPharmaceuticalCo ,Ltd (Tokyo ,Japan) 1,2 ,4 …