鸦胆子油乳抑制肺癌NCI-H460细胞的增殖及其机制

目的:探讨鸦胆子油乳在体外对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的抑制作用及其机制。方法:以不同质量浓度鸦胆子油乳(2.5、5.0、10、20、40、80μg/ml)处理NCI-H460细胞,24、48、72h后收集细胞,MTT法检测鸦胆子油乳对NCI-H460细胞增殖的抑制作用;吉姆萨染色后光学显微镜下观察NCI-H460细胞形态学改变;流式细胞仪测定NCI-H460细胞凋亡率;caspase-3酶活性试剂盒检测NCI-H460细胞caspase-3酶活性。结果:鸦胆子油乳可剂量和时间依赖性抑制NCI-H460细胞的增殖,80μg/ml鸦胆子油乳作用72h时的抑制率达(91.07±1.60)%。鸦胆子油乳作用后,NCI-H460细胞呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术检测结果显示,10、20和40μg/ml鸦胆子油乳作用48h后,NCI-H460细胞凋亡率分别为(45.23±4.30)%、(54.14±3.09)%和(61.57±7.28)%(P<0.01)。鸦胆子油乳可剂量依赖性上调NCI-H460细胞caspase-3酶活性,40μg/ml鸦胆子油乳时caspase-3酶活性为(1.07±0.07)μmol/μg,是对照组的4.97倍(P<0.01)。结论:鸦胆子油乳可能通过活化caspase-3诱导NCI-H460细胞凋亡,抑制NCI-H460细胞增殖。     

鸦胆子油乳抑制肺癌NCI-H460细胞的增殖及其机制

目的:探讨鸦胆子油乳在体外对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的抑制作用及其机制.方法:以不同质量浓度鸦胆子油乳(2.5、5.0、10、20、40、80μg/ml)处理NCI-H460细胞,24、48、72 h后收集细胞,MTT法检测鸦胆子油乳对NCI-H460细胞增殖的抑制作用;吉姆萨染色后光学显微镜下观察NCI-H460细胞形态学改变;流式细胞仪测定NCI-H460细胞凋亡率;caspase-3酶活性试剂盒检测NCI-H460细胞caspase-3酶活性.结果:鸦胆子油乳可剂量和时间依赖性抑制NCI-H460细胞的增殖,80μg/ml鸦胆子油乳作用72 h时的抑制率达(91.07±1.60)%.鸦胆子油乳作用后,NCI-H460细胞呈现典型凋亡形态学改变;流式细胞术检测结果显示,10、20和40 μg/ml鸦胆子油乳作用48 h后,NCI-H460细胞凋亡率分别为(45.23±4.30)%、(54.14 +3.09)%和(61.57±7.28)%(P＜0.01).鸦胆子油乳可剂量依赖性上调NCI-H460细胞caspase-3酶活性,40 μg/ml鸦胆子油乳时caspase-3酶活性为(1.07±0.07)μmol/μg,是对照组的4.97倍(P＜0.01).结论:鸦胆子油乳可能通过活化caspase-3诱导NCI-H460细胞凋亡,抑制NCI-H460细胞增殖.     

IL-24对C6细胞JNK及caspase-3表达的影响

目的:白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)是由黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation -associated gene-7,mda-7)编码的一种分泌蛋白.以转入外源性IL-24基因的C6/IL-24细胞、空载体C6/pLXSN细胞以及亲代C6细胞为研究对象,探讨外源性IL-24体外抑制胶质瘤细胞增殖的相关机制.方法:应用MTT法体外观察IL-24对胶质瘤细胞增长的抑制作用.Western blot方法检测c-Jun氨基末端蛋白激酶(c-Jun NH2-terminal kinases,JNK)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白的表达.探讨外源性IL-24体外抑制胶质瘤细胞增殖的相关机制.结果:C6/IL-24细胞与C6/pLXSN和亲代C6细胞相比,其吸光值降低,细胞生长曲线显示其体外增殖能力降低.与C6/pLXSN及C6细胞比较,C6/IL-24细胞的JNK和caspase-3蛋白表达增高(P＜0.05).C6/pLXSN与C6细胞比较无显著性差异(P＞0.05).结论:外源性IL-24基因可抑制C6胶质瘤细胞增殖.外源性IL-24基因对胶质瘤细胞诱导凋亡作用,与其上调并激活JNK及caspase-3表达有关.     

鸦胆子油乳对Hep-2细胞增殖与凋亡诱导作用的研究

目的：探讨鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞的增殖抑制及调亡诱导作用。方法：利用MTT比色法检测5个不同药物浓度（0.1、0.2、0.4、0.6和0.8g/L）对细胞的抑制率;采用倒置显微镜观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测凋亡基因Bcl-2和Bax的表达。结果：MTT显示,鸦胆子油乳对Hep-2细胞的生长抑制作用呈剂量和时间依赖性。倒置显微镜下可见细胞凋亡的形态学改变,显示加药组细胞染色体固缩,聚集呈块状、新月状,出现凋亡小体。流式细胞仪检测显示,0.2、0.4和0.6g/L药物作用48h后凋亡率分别为（42.58±4.36）%、（57.71±3.07）%和（75.50±3.93）%,显著高于对照组（0.96±0.17）%,差异有统计学意义,F=8.82,P=0.003;实时荧光定量PCR结果显示,随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加,Bcl-2mRNA的表达减少,Bax mRNA的表达量逐渐上升,与对照组比较差异有统计学意义,P〈0.01。结论：鸦胆子油乳能够抑制Hep-2细胞的增殖并诱导其凋亡,作用呈剂量和时间依赖性。     

外源性白介素24促进C6细胞凋亡的体外研究

目的 探讨外源性白细胞介素24(interleukin 24,IL-24)体外抑制胶质瘤细胞增殖及促凋亡的相关机制.方法 应用MTT体外观察转染IL-24对胶质瘤C6细胞增殖的抑制作用.应用Hoechst 33258荧光染色体外观察IL-24对C6细胞的促凋亡作用.Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和caspase-3蛋白的表达变化情况.结果 IL-24能使C6细胞的体外增殖能力降低,转入IL-24的C6细胞(C6/IL-24)增殖能力下降.经Hochest 33258染色,转入IL-24的C6细胞凋亡后出现核固缩、染色质凝集呈块或碎裂状改变.与转入空载体的C6细胞(C6/pLXSN)及C6细胞比较,C6/IL-24细胞的JNK和caspase-3蛋白表达均增高(均P＜0.05).C6/pLXSN与C6细胞比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 外源性IL-24基因可抑制C6胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,该诱导凋亡的作用可能与其上调并激活JNK及caspase-3表达有关.     

鸦胆子油乳诱导白血病K562细胞凋亡及分子机制的实验研究

目的研究鸦胆子油乳诱导白血病细胞的凋亡及其机制。方法MTT法检测鸦胆子油乳对K562细胞增殖的抑制率；细胞形态及流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡；FCM法检测凋亡相关基因Fas和Fas-L表达水平的改变。结果鸦胆子油乳可抑制K562细胞的增殖并呈时间-剂量-效应关系,IC_(50)为187μg/ml；K562细胞表现为典型的凋亡形态；125、250、500μg/ml鸦胆子油乳作用24、48、72h的细胞凋亡率均高于对照组(P＜0．01)；500μg/ml鸦胆子油乳作用48h后,Fas阳性细胞率高于对照组(P＜0．01),而Fas-L的表达无明显改变。结论鸦胆子油乳在体外可诱导K562细胞凋亡,上调Fas表达可能是其诱导凋亡的机制之一。     

全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响

目的:探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响.方法:建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,流式细胞仪检测细胞增殖时相变化及免疫组化检测p27Kip1蛋白和GFAP蛋白的变化.结果:流式细胞仪检测显示治疗组较对照组G1期细胞比例增加(P<0.05),S期细胞比例减少(P<0.05),免疫组化检测显示p27Kip1蛋白和GFAP蛋白的表达增加(P<0.05).结论:反式维甲酸可诱导大鼠C6脑胶质瘤分化,降低肿瘤恶性程度.     

鸦胆子油乳诱导白血病K562细胞凋亡及分子机制的实验研究

目的研究鸦胆子油乳诱导白血病细胞的凋亡及其机制。方法MTT法检测鸦胆子油乳对K562细胞增殖的抑制率;细胞形态及流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;FCM法检测凋亡相关基因Fas和Fas-L表达水平的改变。结果鸦胆子油乳可抑制K562细胞的增殖并呈时间-剂量-效应关系,IC_(50)为187μg/ml;K562细胞表现为典型的凋亡形态;125、250、500μg/ml鸦胆子油乳作用24、48、72h的细胞凋亡率均高于对照组(P＜0．01);500μg/ml鸦胆子油乳作用48h后,Fas阳性细胞率高于对照组(P＜0．01),而Fas-L的表达无明显改变。结论鸦胆子油乳在体外可诱导K562细胞凋亡,上调Fas表达可能是其诱导凋亡的机制之一。     

鸦胆子油乳对宫颈癌SiHa细胞的抑制

目的：探讨鸦胆子(Brucea javanica)油乳在体外对宫颈癌SiHa细胞的抑制作用及其作用机制。方法：以鸦胆子油乳（2.5、5.0、10、20、40、80 μg/ml）作用于SiHa细胞24、48、72 h,以MTT法检测鸦胆子油乳对SiHa细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞的超微结构;琼脂糖凝胶电泳观察SiHa细胞基因组DNA片段化改变;流式细胞术测定AnnexinV/PI双染色后SiHa细胞凋亡率。结果：MTT结果显示,鸦胆子油乳以剂量和时间依赖方式对SiHa细胞增殖有明显的抑制作用,其中80 μg/ml 药物作用72 h时的抑制率可达92.43%;20 μg/ml药物作用后,透射电镜下可观察到细胞出现凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳显示细胞凋亡特征性的DNA片段化“梯状”条带;流式细胞仪检测显示,10、20、40 μg/ml药物组作用48 h后凋亡率分别为（8.02±241）%、（51.60±7.67）%、（77.22±5.80）%。结论：鸦胆子油乳能够抑制SiHa细胞增殖,其作用机制可能为诱导SiHa细胞发生凋亡。     

全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。方法：MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化。Western blot法在不同时间点对凋亡相关基因caspase-3活性蛋白产物的表达进行了检测。结果：MTT结果表明ATRA对C6细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性。流式细胞仪检测证明与对照组相比,处理组C6细胞发生G1期阻滞;S、G2期细胞比例下降;细胞出现亚二倍峰,凋亡比例明显增加。电镜下全反式维甲酸作用72h后处理组C6细胞呈凋亡改变：如核固缩、染色质趋边凝聚。Western blot检测发现,处理组出现了caspase-3蛋白活性裂解片段。结论：全反式维甲酸抑制C6脑胶质瘤细胞生长,全反式维甲酸抑制脑胶质瘤的作用机理可能至少通过改变细胞周期分布、诱导凋亡来实现。     

鸦胆子油对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用

目的:探讨鸦胆子油抑制肝癌细胞生长的机制.方法: 人肝癌细胞SMMC-7721培养于含10%胎牛血清、100 U·ml-1青霉素、链霉素的RPMI1640 培养液中.以不同浓度的鸦胆子油乳加入培养液,作用一定的时间,进行MTT 比色实验,检测生长抑制率及分析细胞周期.结果: MTT比色法测定显示鸦胆子油抑制肝癌细胞的生长,随着浓度增加和作用时间的延长,抑制作用呈现逐渐增加的趋势.细胞周期分析提示:G0-G1期比例逐渐增加,而S期比例逐渐减少,1μg·ml-1组中各时间点及2μg·ml-1组中各时间点均有显著差异(P<0.01).G2-M期细胞比例减少,但差异无统计学意义 (P>0.05).结论: 鸦胆子油抑制体外培养的人肝癌细胞的增殖,机制可能是将肝癌细胞阻滞于G0-G1期.     

鸦胆子油对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用

目的：探讨鸦胆子油抑制肝癌细胞生长的机制。方法：人肝癌细胞SMMC-7721培养于含10%胎牛血清、100 U·ml^-1青霉素、链霉素的RPMI1640培养液中。以不同浓度的鸦胆子油乳加入培养液,作用一定的时间,进行MTT比色实验,检测生长抑制率及分析细胞周期。结果：MTT比色法测定显示鸦胆子油抑制肝癌细胞的生长,随着浓度增加和作用时间的延长,抑制作用呈现逐渐增加的趋势。细胞周期分析提示：G0-G1期比例逐渐增加,而S期比例逐渐减少,1μg·ml^-1组中各时间点及2μg.ml-1组中各时间点均有显著差异（P〈0.01）。G2-M期细胞比例减少,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：鸦胆子油抑制体外培养的人肝癌细胞的增殖,机制可能是将肝癌细胞阻滞于G0-G1期。     

鸦胆子油乳联合阿帕替尼及替莫唑胺治疗复发性恶性脑胶质瘤

目的 探讨鸦胆子油乳联合阿帕替尼及替莫唑胺治疗复发性恶性脑胶质瘤患者的临床疗效、免疫功能影响及不良反应.方法 选取2016年6月至2018年12月期间郑州大学第一附属医院复发性恶性脑胶质瘤患者52例,随机分为2组,A组26例应用阿帕替尼及替莫唑胺治疗,B组26例应用鸦胆子油乳联合阿帕替尼及替莫唑胺治疗,比较2组临床疗效...     

鸦胆子油乳联合放疗治疗脑转移瘤的疗效观察

目的：探讨鸦胆子油乳联合放疗治疗脑转移瘤的疗效.方法：34例脑转移瘤患者均采用6MV X射线行全脑照射DT 30-40Gy/15-20次,大部分病人缩野局部追加10-20Gy/5-10次.放疗同时给予鸦胆子油乳20mlO静滴,每天1次,连用30天为一疗程.结果：鸦胆子油乳注射液联合放疗治疗脑转移瘤总有效率（RR）为88.2%,生活质量明显提高.结论：鸦胆子油乳联合放疗治疗脑转移瘤可明显提高疗效,改善生活质量.     

雷公藤单体体外抑制胶质瘤细胞的实验研究

背景与目的：已有研究发现雷公藤具有抗肿瘤作用,本研究旨在探讨雷公藤单体对胶质瘤细胞的体外抑制作用。方法：通过MTT法测定3种雷公藤单体（甲素,红素和WilforolA)对胶质瘤细胞株SHG44,C6,U251的体外抑制作用;应用免疫组化法观察雷公藤甲素与雷公藤红素对SHG44胶质瘤细胞中Bax,Bcl-2蛋白表达的影响。结果：雷公藤二萜类单体雷公藤甲素对胶质瘤细胞有极显著的抑制作用;雷公藤三萜类单体中红素的抑制作用次之,两者均使SHG44细胞Bax表达增加,Bcl-2表达下降。结论：雷公藤甲素与雷公藤红素对胶质瘤细胞有明显的抗肿瘤作用,其作用与促进Bax表达,抑制Bcl-2表达,导致细胞凋亡有关。     

IL-24基因对大鼠胶质瘤细胞生长状况的影响

目的　探讨IL 2 4基因对C6大鼠胶质瘤细胞生长状况的影响。方法　应用逆转录病毒载体 ,将IL 2 4基因导入C6细胞 ,经G4 18筛选后获得表达IL 2 4分子的阳性细胞克隆C6 /IL 2 4 ;用RT PCR方法检测目的基因表达 ;四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检测细胞体外增殖状况 ,流式细胞技术检测细胞的增殖活性 ,并制作荷瘤动物模型 ,观察C6 /IL 2 4和C6细胞的体内致瘤性。结果　RT PCR检测表明 ,外源IL 2 4基因于mRNA水平在C6 /IL 2 4细胞已获得稳定表达。C6 /IL 2 4细胞系的体外增殖性较亲代C6细胞明显下降 ,流式细胞术检测其细胞增殖指数 (PI)为 (2 9.71± 0 .89) %。 9只接种C6 /IL 2 4细胞的实验组大鼠中 ,6只颅内成瘤 ,肿瘤体积为 (14 .0 8± 9.81)mm3 ,明显小于接种C6细胞大鼠的肿瘤体积 (P <0 .0 5 )。结论　外源性IL 2 4基因可部分抑制胶质瘤细胞异常增殖的肿瘤特性。     

雷公藤单体体外抑制胶质瘤细胞的实验研究

目的 :研究雷公藤单体对胶质瘤细胞的体外抑制作用。方法 :通过 MTT法测定 3种雷公藤单体 (甲素、红素和 Wilforol A)对胶质瘤细胞株 SHG4 4、C6、U2 5 1的体外抑制作用 ;应用免疫组化法观察雷公藤甲素与雷公藤红素后 SHG4 4胶质瘤细胞 bax、bcl- 2蛋白表达的变化。结果 :雷公藤二萜类单体雷公藤甲素对胶质瘤细胞有极明显的抑制作用 ;雷公藤三萜类单体中红素的抑制作用次之。两者均使 SHG4 4细胞 bax表达增加 ,bcl- 2表达下降。结论 :雷公藤甲素与雷公藤红素对胶质瘤细胞有明显的抑制作用 ,其作用与促进 bax表达、抑制 bcl- 2表达 ,导致细胞凋亡有关。