梅毒螺旋体感染兔模型的研究

通过家兔睾丸接种梅毒螺旋体建立家兔感染动物模型是研究梅毒的重要实验方法.接种后的梅毒螺旋体展现出5个阶段的变化:孵育期、指数增长期、静止生长期、退化期、潜伏期.各阶段根据损害的表现、损害的持续时间、寄生菌的特征、感染器官的表现、病理学改变、血清学的改变、与青霉素治疗的相关性共7个方面的变化各自有其特点.该模型的建立,对梅毒发病机制、早期诊断、药物治疗及预后等多方面的研究均具有重要意义.

Abstract：

It is an important experimental approach to study syphilis by upbuilding a rabbit model of Treponema pallidum (Tp) infection through inoculation of Tp into the testicles of rabbits. After inoculation, Tp undergoes five stages of evolution, i.e., incubation,exponential growth,stationary phase, retrogression and latency. And, each stage is characterized by the appearance and duration of lesions, features of the parasite, infectivity of the animal's organs, pathological findings, serological changes and correlations of these findings with treatment with penicillin. To establish this model is of great significance for the investigation of pathogenesis, early diagnosis, pharmacotherapy and prognosis of syphilis.     

梅毒螺旋体感染兔模型中特异性抗体分析

目的　确立早期诊断梅毒及判定临床疗效的抗体指标。方法　试用梅毒兔模型 ,采用RPR法、TPPA法及免疫印迹法检测梅毒螺旋体感染兔模型治疗前后血清抗体的变化情况。结果　梅毒螺旋体接种入兔机体后 ,3天就可用免疫印迹法检测到血清中 47kD特异性抗原抗体 ,之后相继出现 45kD、17kD、3 7kD、92kD及 15 .5kD抗原的抗体 ,其中45kD、15 .5kD和 92kD抗原的抗体在治疗后逐渐减弱并可消失 ;RPR法检测的心磷脂抗体滴度在感染早期 1～ 1.5个月可随治疗明显下降 ;TPPA法检测到血清中TP抗体较 47kD特异性抗原抗体出现晚 ,且出现的高峰时间及变化的时间均较心磷脂抗体晚。结论　免疫印迹法检测血清 47kD抗原抗体可作为梅毒的早期诊断指标 ,45kD、15 .5kD、92kD抗原抗体和心磷脂抗体在治疗中变化明显 ,可考虑作为疗效观察的指标。     

新西兰兔感染梅毒螺旋体体内扩散模型构建

【摘要】 目的 构建新西兰兔梅毒螺旋体感染体内扩散模型。方法 新西兰兔睾丸内复苏梅毒螺旋体标准株（Nichols）,并连续分离传代,收集第2代梅毒螺旋体菌株悬液接种于新西兰兔背部皮肤。感染21 d后麻醉处死新西兰兔,收集血液,无菌分离感染部位组织以及肝脏、脾脏、睾丸和淋巴结。荧光实时定量PCR检测各组织器官梅毒螺旋体扩散情况。结果 新西兰兔梅毒螺旋体感染后第21天所有接种部位均出现皮肤损伤（硬结和溃疡）,病理检查显示感染部位出现大量炎症细胞,主要包括浆细胞、巨噬细胞和淋巴细胞,实时定量PCR显示肝脏、脾脏、睾丸等组织器官存在大量梅毒螺旋体。结论 新西兰兔背部皮肤接种梅毒螺旋体后能通过血液和淋巴结扩散到肝脏、脾脏、睾丸等组织器官,成功构建新西兰兔梅毒螺旋体感染体内扩散模型。     

三种梅毒螺旋体黏附素在梅毒兔模型中转录水平的差异性比较

目的:从宿主水平探讨梅毒螺旋体(TP)黏附素——TP0136、TP0155和TP0751蛋白在梅毒兔模型中转录水平变化情况。方法:(1)予新西兰白兔皮下注射TP Nichols Seattle株,建立早期兔梅毒感染模型;(2)制备TP0136、TP0155和TP0751质粒标准品;(3)荧光定量PCR连续动态观察兔硬下疳皮损形成过程中TP0136、TP0155和TP0751 mRNA水平的表达差异。结果:(1)新西兰白兔背部在第6天出现红色丘疹,到第19天皮疹达最大并出现溃疡形成硬下疳。第25天起,全身陆续出现播散性二期梅毒疹;(2)TP0136、TP0155和TP0751 mRNA水平在早期呈现上升趋势,到第15天达最高峰(P0.05),其后迅速下降,在第27天又有少许上升(P0.05);(3)标准化的TP0136 mRNA水平在第30天达最高峰(P0.05);标准化的TP0155 mRNA水平分别在第24天和第30天出现峰值(P0.05);标准化的TP0751 mRNA水平在第24天达最高峰(P0.05)。结论:从宿主水平证实TP0136、TP0153和TP0751三种TP黏附素间存在转录水平差异,提示TP表达的多个黏附蛋白是具有各自特异性的宿主-病原体相互黏附作用机制。     

梅毒螺旋体重复基因K与梅毒持续感染

近年来,全球梅毒发病率呈现上升趋势。梅毒螺旋体（ Tp）作为梅毒的致病病原体,可引起宿主慢性持续感染。 Tp是如何出现抗原变异从而逃避宿主免疫识别,最终导致持续感染正成为近年研究热点。 Tp重复基因K（ tprK）作为Tp重复基因（ tpr）家族成员之一,由于其基因序列具有高度可变性,在Tp逃避宿主免疫监视、造成慢性感染中发挥重要作用。本文从tprK来源、基因结构特点、抗原变异和免疫逃逸机制及研究应用等方面对其进行综述。     

新西兰兔接种梅毒螺旋体后主要器官病理表现

目的：观察接种不同代数的菌株及不同药物剂量组治疗梅毒后的梅毒兔主要脏器的病理改变。方法:睾丸接种组选择原代组、一代组、二代组及阴性对照组各1只进行解剖,取心、肝、脾、肾。背部皮肤的接种组药效学评价选择阳性对照家兔1只、普鲁卡因青霉素和头孢曲松中间两个剂量组治疗的家兔各1只,解剖心、肝、脾、肾,10%福尔马林溶液固定、包埋、切片和HE染色。结果：梅毒螺旋体感染家兔后2周,可引起心、肝和肾炎症细胞的浸润,但不引起脾脏的病理改变。一代组及二代组引起的脏器的炎症改变与原代组相似。梅毒感染后的家兔药物治疗后12周,部分梅毒兔主要脏器仍有炎症反应,头孢曲松治疗RPR滴度转阴11周后家兔的心、肝及肾脏无明显炎细胞浸润。结论：在进行梅毒兔药效学模型建立过程中无需增加病理学的数据,但在治愈转阴后通过病理切片的观察能够更好地了解治疗效果。     

宫颈癌、卵巢癌患者梅毒螺旋体感染情况分析

目的:分析并探讨妇科恶性肿瘤宫颈癌、卵巢癌的发生与感染梅毒螺旋体的关系。方法:选取2005年1月至2015年5月期间来我院接受治疗的妇科恶性肿瘤宫颈癌658例、卵巢癌246例,检测肿瘤患者梅毒螺旋体感染情况,分析妇科肿瘤宫颈癌和卵巢癌对梅毒螺旋体感染的发生影响。结果:658例宫颈癌患者中合并梅毒螺旋体感染患者68例(10.33%),246例卵巢癌患者合并梅毒螺旋体感染患者4例(1.63%)。宫颈癌合并梅毒螺旋体感染率明显高于卵巢癌(P0.05)。病理类型分析结果显示,鳞癌患者594例,其中梅毒感染者68例,而腺癌56例、腺鳞癌8例患者中均无梅毒感染者;Ⅰ期肿瘤患者354例,梅毒感染58例;Ⅱ期304例,梅毒感染10例。年龄分析结果显示,30~39岁136例,梅毒感染32例(23.53%);40~49岁170例,梅毒感染30例(17.65%);年龄50~59岁258例,梅毒感染6例(2.33%);年龄60岁以上94例,梅毒感染0例。教育水平结果显示,高中及高中以上264例,梅毒感染6例(2.27%);高中以下394例,梅毒感染62例(15.74%)。结论:宫颈癌患者梅毒螺旋体感染率明显高于卵巢癌患者,且与年龄、教育水平和病理类型、病理分期相关,为临床防治提供理论支持。     

重组梅毒螺旋体抗原的研究进展

在梅毒螺旋体人工培养尚未获得成功的情况下,基因克隆技术的出现为该病原体的研究开辟了一条新的途径。应用基因工程技术目前已制备出多种重组梅毒螺旋体抗原,这些抗原的制备对梅毒发病机理的探讨,疫苗的研制,以及血清学诊断试验的建立与应用具有重要意义,为梅毒的预防和控制提供了更加有效的手段。     

梅毒螺旋体耐抗生素研究进展

青霉素一直是治疗梅毒的一线用药,常用替代药物有第三代头孢菌素、大环内酯类和四环素类抗生素.对大环内酯类耐药的梅毒螺旋体(Tp)菌株已在全球多个地区流行,近年也有四环素类治疗梅毒失败的例子,但其耐药情况尚不普遍.本文将对Tp耐药情况、已报道的耐药突变和潜在的耐药分子机制进行综述.     

一期梅毒患者梅毒螺旋体和血清学检测

目的比较评价几种用于一期梅毒(PS)的实验诊断方法.方法采用暗视野显微镜法(D-F)、镀银染色法(Ag)、间接免疫荧光法(IIF)、聚合酶链反应(PCR)等4种梅毒螺旋体(TP)检测方法和甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)对91例PS患者进行检测.结果Ag法、IIF法、RCR法检测TP阳性率较高,D-F法阳性率较低.对于病程小于2周患者TRUST阳性率明显低于TPPA.结论Ag法是TP检测的有效方法之一;对于病程小于2周的PS患者TPPA比TRUST更具有诊断价值.     

荧光定量PCR检测梅毒孕妇引产胎盘脐带组织中的梅毒螺旋体

目的：研究荧光定量PCR(FQ-PCR)检测梅毒孕妇引产胎盘脐带组织中的梅毒螺旋体，评估其在早期诊断先天梅毒中的作用。方法：采用荧光定量PCR技术检测13例梅毒孕妇引产胎盘脐带组织中的梅毒螺旋体DNA。结果：13例胎盘和脐带标本中6例(46．15％)荧光定量PCR检测阳性，6例阳性者中，4例未接受治疗，2例接受了治疗。结论：FQ-PCR可检出胎盘脐带组织中的梅毒螺旋体，可用于先天梅毒的早期诊断，干预治疗并不能完全阻断妊娠期间梅毒螺旋体的垂直传播。     

梅毒螺旋体抗体在诊断新生儿梅毒中的应用和讨论

目的:探讨梅毒螺旋体(treponema pallidum,TP)抗体在诊断新生儿梅毒中的应用。方法:分别用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、TP-ELISA和密螺旋体颗粒凝集实验(TPPA)法对84例确诊新生儿梅毒患者与100例健康新生儿血清进行检测。结果:三种检测梅毒螺旋体抗体方法的灵敏度分别为51.2%、98.8%和100%,相对而言,TRUST法不适合作为诊断新生儿梅毒的初筛试验。结论:TP-ELISA法灵敏度与特异性相对较高,操作简便易行,建议作为诊断新生儿梅毒的初筛试验;TPPA法由于操作繁琐复杂,可结合临床作为新生儿梅毒的确诊试验。     

梅毒螺旋体特异性抗体对梅毒早期诊断和治疗的评价

目的：为评价梅毒血清特异性抗体在梅毒早期诊断及治疗后的意义。方法：采用蛋白印迹法(Western blottinG,WB)、快速血浆反应素(RPR)试验、梅毒颗粒凝集试验(TPPA)3种方法．对67例梅毒及其中经治疗后随诊18～24个月的21例患者作血清检测。对5年来诊治的临床一期、二期梅毒血清抗体的变化进行分析。结果：20例一期梅毒WB检测出现不同抗体谱条带,其中均有相对分子质量为47000的条带,RPR试验及TPPA部分为阴性。经治疗后随诊18-24个月的21例梅毒患者．18个月内检测时WB9．52％阴转,24个月时28．57％阴转;TPPA阴转的情况同WB;RPR滴度随疗后时间的增加而逐渐下降．6个月内28．57％阴转,24个月85．71％阴转：结论：相对分子质量为47000、17000的条带对早期梅毒的诊断既敏感又特异：部分一期和二期梅毒患者在经过有效治疗后2年,梅毒抗体可以完全消失;RPR试验可用于梅毒治疗期间的疗效判定。     

梅毒螺旋体分子流行病学研究进展

基于arp／tpr两个基因的梅毒螺旋体基因分型方法正被广泛应用,不同血液成分及脑脊液标本都可用于梅毒螺旋体检测及基因分型,结合tp0548基因加强分型,发现中国梅毒螺旋体菌株主要为梅毒螺旋体14d／f型,而脑脊液中常检测到梅毒螺旋体19d／e型。23SrRNA基因A2058G突变是梅毒螺旋体耐14、15元环大环内酯类抗菌素的原因,对16元环大环内酯类抗菌素同时耐药的A2059G突变菌株在国外已经出现。梅毒螺旋体分子流行病学研究有助于了解其基因型别与梅毒类型之间的相关性,通过监测梅毒螺旋体携带抗菌素耐药基因的情况,为临床选用抗菌素治疗梅毒提供依据。     

梅毒螺旋体部分外膜蛋白的研究现状

梅毒临床表现多种多样,传染性较强。由于梅毒螺旋体无法体外培养,使梅毒致病机制的研究较为困难。随着分子生物学技术的发展及梅毒螺旋体基因组序列全面解析,有关梅毒致病机制的研究取得了一定进展。梅毒螺旋体的外膜蛋白是其重要的毒力因子,是宿主保护性免疫的重要靶位。     

Multiple primary syphilis on the lip,nipple–areola and penis: An immunohistochemical examination of Treponema pallidum localization using an anti‐T. pallidum antibody

Primary syphilis caused by Treponema pallidum usually develops after sexual contact as an initial solitary sclerosis or hard chancre in the genital region. We describe a case of primary syphilis at three sites in genital and extragenital regions of a man who had sex with men. A 29‐year‐old man visited our hospital for skin lesions on his lower lip, nipple–areola and penis. A positive syphilis serological test for rapid plasma reagin had a titer of 1:16; the patient also tested positive for specific antibodies against T. pallidum, with a cut‐off index of 39.0. Histopathological examination of a nipple–areola biopsy specimen revealed a thickened epidermis and dense infiltration of inflammatory cells extending from the upper dermal layers to the deep dermis. The inflammatory cells were composed of abundant lymphocytes, plasma cells, histiocytes and neutrophils. Immunohistochemical staining for T. pallidum using an anti‐T. pallidum antibody showed numerous spirochetes in the lower portion of the epidermis, scattered inside inflammatory cell infiltrate and perivascular sites throughout the dermis. Based on these findings, the patient was diagnosed with primary syphilis. Treatment with oral amoxicillin hydrate was started. Five days after starting treatment, a diffuse maculopapular rash (syphilitic roseola) occurred on his trunk and extremities. Perivascular cuffing due to T. pallidum was present throughout the dermis in the biopsy specimen of a localized lesion of primary syphilis. Moreover, syphilitic roseola, which indicates generalized dissemination of T. pallidum, developed during the course of treatment for primary syphilis. Therefore, we considered perivascular cuffing to be indicative of the dissemination phase.