MMP-2/9活性与TIMP-1/2蛋白表达在大鼠肺纤维化形成中的变化特点

目的观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)-2/9的活性及其活性抑制物——基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMP)-1/2蛋白表达的动态变化,探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)降解的调控规律。方法SD大鼠48只,随机分为模型组(30只)与正常对照组(18只)。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型,正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1d、3d和1、2、3、4周共6个时间观察点,动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变;Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况;Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)的含量;Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化;明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病变,肺泡壁与间隔增厚,肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润,伴有少量成纤维细胞;肺系数明显增高;肺组织内Hyp含量稍升高;MMP-2/9蛋白的表达与活性增加,以活化型MMP-2增加更为明显;TIMP-1/2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3~4周时,肺泡结构遭到破坏,部分肺泡腔塌陷消失,由胶原纤维和成纤维细胞占据,肺泡壁与间隔进一步增厚,形成严重的肺纤维化;肺系数较2周时有所下降,肺组织Hyp含量和TIMP-1/2蛋白的表达明显增加,至染毒后4周时最为明显;MMP-2/9活性较2周时有所下降,尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论博来霉素诱导肺纤维化形成过程中,早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主,肺组织内MMP-2/9活性增高;后期以纤维化为主,肺组织TIMP-1/2表达明显增加,MMP-2/9活性则有所下降。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮肤癌中的表达

目的 探讨金属基质蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮肤癌中的表达.方法 取皮肤癌手术切除标本40份,进行免疫组化检测MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1的表达.结果 MMP-2、MMP-9在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著高于正常皮肤.TIMP-2、TIMP-1在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著低于正常皮肤.结论 基质金属蛋白酶（MMP）在非黑色素性皮肤癌中呈高表达,基质金属蛋白酶组织抑制因子呈低表达,两者比例失衡与皮肤癌的浸润和转移有关.     

脐血间充质干细胞对肺纤维化大鼠MMP2/TIMP-1的影响

目的观察脐血间充质干细胞(CB-MSCs)对肺纤维化大鼠MMP2/TIMP-1的影响。方法选取广东省医学实验动物中心提供的36只雄性SD大鼠随机均分为3组,每组各12只。对照C组气管内注入生理盐水0.1 m L,模型M组及治疗T组按5 mg/kg气管内注入博来霉素0.1 m L;造模后T组经尾静脉注射CB-MSCs 106,C组、M组注射生理盐水对照。于第28、42 d分别处死各组大鼠的一半(分别为C1、C2、M1、M2、T1、T2组),留取肺组织测定MMP-2、TIMP-1水平及病理观察、结果 (1)M组大鼠较C组的肺泡结构严重紊乱,大量胶原纤维沉积,并随时间进展,T1、T2组较同期M1、M2组均显著减轻。(2)比较肺纤维化评分、肺泡炎程度,M组较对照C组显著加重,T组较M组明显减轻。(3)C1、C2、M1、M2、T1和T2组大鼠肺组织MMP-2/TIMP-1比值,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4)各组大鼠肺组织MMP-2、TIMP-1水平与肺纤维化评分呈正相关(P<0.05)。结论脐血间充质干细胞可通过调节MMP-2/TIMP-1水平延缓肺纤维化进展。     

口服普萘洛尔对婴幼儿血管瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响

目的 研究口服普萘洛尔前后婴幼儿血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响.方法 选择2010年5月至2011年12月来我院就诊、年龄≤3个月、血管瘤病灶位于肢体或隐蔽部位、家属要求手术治疗却具备单独口服普萘洛尔治疗条件、排除口服普萘洛尔禁忌证、先前未接受过其他任何相关治疗的病例作为研究对象,共39例.经过与家属沟通并征得其书面同意,先按口服普萘洛尔诊疗常规,口服用药前在局麻下夹取血管瘤体组织活检,后口服8周普萘洛尔[剂量:2 mg/(kg·d),分2次,每12小时用药],继而手术切除瘤体.采用免疫组化、实时荧光定量RT-PCR的方法,检测口服用药前后病灶组织内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的变化,计算口服用药前后病灶微血管密度(MVD).结果 免疫组化与实时荧光定量RT-PCR结果均提示,口服普萘洛尔后血管瘤病灶内MVD值明显减低且具有统计学意义(t =18.458,P＜0.01),MMP-2、MMP-9表达水平较用药前明显减少(P＜0.01),TIMP-1、TIMP-2表达水平明显增高(P＜0.01).且口服用药后上述4个因子免疫组化平均积分光密度、mRNA相对表达量变化与MVD值变化密切相关.结论 普萘洛尔可下调血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9的表达,上调TIMP-1、TIMP-2的表达,从而抑制新生血管的形成.     

CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在不同级别的脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2在胶质瘤中的表达及其相关性,方法采用免疫组织化学法对78例石蜡包埋的胶质瘤组织和12例正常脑组织进行标记和分析。结果CD147、MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的阳性率分别为62%、66%、64%、75%、59%、59%,采用Spearm an进行相关性分析,他们与胶质瘤的恶性程度均呈正相关（rs=0.2671-0.5631,P〈0.05）,CD147与MMP-1、MMP-2和MMP-9呈正相关（rs=0.3481-0.4951,P〈0.05）。结论CD147、MMPS、TIMPs可以作为临床判断胶质瘤预后的分子生物学标志。     

益气活血中药对心力衰竭大鼠MMP-1、TIMP-1影响的实验研究

[目的]观察益气活血复方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织基质金属蛋白酶1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。[方法]选用雄性SD大鼠,采用冠状动脉结扎术配合饥饿、游泳等方法造成慢性心力衰竭的动物模型。将造模成功的大鼠随机分为3组:模型组、中药组和西药对照组;中药干预6周后,将动物处死,取其心肌组织,利用实时定量荧光聚合酶链反应(PCR)技术和蛋白印迹分析法(Western blot)分别检测心肌组织中MMP-1、TIMP-1基因表达和蛋白表达。[结果]与对照组比较,大鼠模型组MMP-1的表达高于正常组(P<0.01),而TIMP-1的表达明显低于正常组(P<0.01);中药组和西药组MMP-1的表达均低于模型组(P<0.01),TIMP-1的表达明显高于模型组(P<0.01)。[结论]益气活血中药可以下调MMP-1的表达,增加TIMP-1的表达,从而阻止MMP-1对心肌细胞外基质结构的破坏作用,延缓心肌重塑,改善心脏功能,从而阻止CHF的发展。     

MMP-2/TIMP-2在乳腺癌中表达的临床意义

目的:探讨MMP-2/TIMP-2在乳腺癌中的表达及意义.方法:本实验采用免疫组织化学方法(immunohistochemistry,IHC)研究MMP-2/TIMP-2在20例正常乳腺组织、40例导管内癌、80例浸润性乳腺癌组织中的表达差异情况,并分析二者在乳腺癌中的表达与腋窝淋巴结受累数目、肿瘤大小(体积)、组织学类型、临床分期、激素受体等临床病理指标之间的相关性以及对乳腺癌患者生存状况的影响.结果:MMP-2/TIMP-2的平均灰度的比值在正常乳腺组织、原位癌、浸润癌中分别为0.96±0.168、0.61±0.064、0.40±0.081,t检验结果显示:MMP-2/TIMP-2的平均灰度比值在正常组与原位癌组、浸润癌组与原位癌原位癌之间比较均有显著性的统计学差异(两者P＜0.01),在原位癌、浸润癌中与预后均存在相关性.结论:MMP-2/TIMP-2在乳腺癌的早期阶段(原位癌)开始发挥作用,并一直持续到浸润癌阶段,而且与乳腺癌的转移、术后生存状况有关,故可以独立的预后参考指标.     

血清MMP-2、TIMP-1与糖尿病心肌病相关性分析

目的:探究基质金属蛋白酶2(MMP-2)和组织金属蛋白抑制因子-1(TIMP-1)与糖尿病心肌病的相关性.方法:随机在该院选择55例诊断为糖尿病心肌病患者为心肌病组,55例无心肌病的糖尿病患者为无心肌病组,挑选55例健康志愿者作为对照组.患者入院后对比三组患者血清中MMP-2和TIMP-1的水平.结果:对比MMP-2可知,心肌病组患者最低,健康志愿者水平最高,三组差异明显(P＜0.05);对照组、无心肌病组和心肌病组患者的TIMP-1水平依次升高,三组差异显著(P＜0.05).结论:MMP-2、TIMP-1与糖尿病心肌病具有显著相关性,评价糖尿病患者的心肌功能具有一定作用,值得临床推广.     

推拿疗法对骨骼肌纤维化大鼠MMP-1和TIMP-1表达的影响

[目的]观察推拿疗法对大鼠急性腓肠肌钝挫伤后纤维修复的影响,探讨其可能的作用机制。[方法]将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、推拿治疗组(n=10),运用自制砸伤装置复制经典骨骼肌钝挫伤模型。治疗组进行推拿治疗,每次干预10 min,每日1次,连续实施25 d。通过苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠腓肠肌纤维化程度;qPCR和蛋白印迹检测大鼠腓肠肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白的表达情况。[结果]HE染色镜下发现对照组大鼠骨骼肌纤维排列整齐,形态结构完整;模型组大鼠骨骼肌纤维排列紊乱,甚至断裂,肌成纤维细胞增多,细胞外基质ECM)增多且胶原纤维明显沉积;治疗组大鼠骨骼肌纤维排列较整齐、间距小,且大小均一,胶原纤维生成减少,仅有少量ECM生成,损伤基本恢复。qPCR和蛋白印迹结果显示模型组大鼠损伤腓肠肌MMP-1的mRNA和蛋白表达量及MMP-1/TIMP-1比值明显降低(P<0.01),而TIMP-1的mRNA和蛋白表达水平明显升高;给予推拿治疗后可明显提高损伤大鼠腓肠肌MMP-1的mRNA和蛋白水平及MMP-1/TIMP-1的比值(P<0.01,P<0.05),且降低TIMP-1的转录水平(P<0.01,P<0.05)。[结论]推拿治疗可有效减轻骨骼肌钝挫伤后纤维化程度,其作用可能与上调MMP-1/TIMP-1比值有关。     

红景天对肺纤维化大鼠MMP-2与TIMP-1表达关系的影响

目的:观察红景天干预肺纤维化形成的作用,初步探讨其作用机制.方法:SD大鼠45只,随机分为3组,模型组和干预组气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化,空白组在相同条件下给予生理盐水.第2 d起干预组均给予红景天灌胃,其余各组在相同条件下给予生理盐水.治疗第7 d、第14d和第28 d,用免疫组织化学方法观察各组鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(Matrix metallipro teinase-2,MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表达的变化.结果:对照组各视野仅见少量MMP-2、TIMP-1阳性细胞,模型组在7 d、14 d、28 d阳性细胞明显增多,治疗组与模型组对应时间点相比阳性细胞数均有减少(P＜0.01),但仍比对照组增多(P＜0.01),差异有统计学意义.结论:红景天能抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化模型肺纽织的MMP-2、TIMP-1的合成及分泌,能在一定程度上调整MMP-2和TIMP-1的比值使其趋于平衡,可减轻博莱霉素所致大鼠的肺纤维化.     

MMP-14、MMP-2、TIMP-2在胃癌组织中表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(Metalloproteinase,MMP)-14、-2、基质金属蛋白酶组织抑制因子(Tissue inhibitor ofmetalloproteinase.TIMP)-2在胃癌、癌旁组织及胃溃疡中的表达情况及相互关系.方法:用免疫组织化学方法(SP法)检测30例胃癌手术病人及20例胃镜活检胃溃疡病人中MMP-14、MMP-2、TIMP-2的表达.结果:(1)胃癌组织中,TIMP-2、MMP-2及MMP-14表达阳性率分别为43.3%、76.7%、53.3%,胃癌癌旁组织中分别为56.7%、46.7%和40%,胃溃疡组织中分别为70%、45%和30%.(2)在胃癌中,TIMP-2的阳性表达与癌旁组织及胃溃疡组织比较有统计学差异(P0.05),而TIMP-2阳性表达与前两者均呈显著负相关(γ8=-1.0,P<0.0l).结论:(1)MMP-1在胃癌中高表达.(2)MMP-14和MMP-2阳性表达呈正相关,是胃癌的侵袭转移性因素之一.(3)MMP-14表达上调的同时激活了更多的MMP-2,增加了胃癌向周围组织侵袭转移的能力.     

血府逐瘀方对动脉粥样硬化大鼠MMP-2及TIMP-2的影响

目的：通过研究血府逐瘀方对动脉粥样硬化大鼠动脉斑块组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制因子2（TIMP-2）表达的影响,探讨血府逐瘀方抗动脉粥样硬化作用的可能机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、血府逐瘀方组。对照组给予正常饲料,采用腹腔注射维生素D3及饲喂高脂饲料的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型。实验结束后,取大鼠主动脉粥样硬化组织检测MMP-2和的TIMP-2的表达水平。结果HE染色光镜下显示,对照组动脉壁形态结构完整,模型组动脉内膜粗糙,中膜平滑肌增生排列紊乱,血府逐瘀方组形态介于二者之间;免疫组化观察,与对照组相比,模型组和血府逐瘀方组MMP-2的表达显著升高,TIMP-2的表达显著下降;血府逐瘀方组与模型组相比,MMP-2表达显著降低,TIMP-2表达显著升高。结论血府逐瘀方能抑制动脉粥样硬化的形成,其机制可能与其能下调动脉粥样硬化大鼠动脉粥样硬化组织内的MMP-2的表达及升高TIMP-2表达有关。     

乳癌组织中MMP-2、TIMP-2的表达

目的:探讨MMP-2和TIMP-2与乳癌浸润转移的关系.方法:采用免疫组化法分析乳腺导管内原位癌(24例)及乳腺浸润性导管癌(58例)组织中MMP-2和TIMP-2的表达情况.结果:乳腺导管内原位癌及浸润性导管癌组织中MMP-2的阳性表达率分别为54.17%(13/24)、44.82%(26/58),2组比较差异无统计学意义(P＞0.05);乳腺导管内原位癌TIMP-2的阳性率为91.67%(22/24),高于浸润性导管癌组织中的51.72%(30/58)(P＜0.05).结论:乳癌组织中TIMP-2的表达状况与乳癌的浸润和转移有关.     

血府逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠MMP-9及TIMP-1的影响

目的研究血府逐瘀汤对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）大鼠动脉斑块基质金属蛋白酶9（MMP-9）及组织抑制物1（TIMP-1）的影响。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、血府逐瘀汤组,对照组给予正常饲料,模型组给予高脂饲料,血府逐瘀汤组给予高脂饮食同时给予该药干预。12周后,处死大鼠,取主动脉免疫组化法观察主动脉斑块内MMP-9和TIMP-1的表达水平。结果血府逐瘀汤组MMP-9的表达较模型组明显减少（P〈0.05）,TIMP-1表达明显升高（P〈0.05）。结论血府逐瘀汤可以通过下调动脉粥样硬化大鼠动脉斑块内MMP-9的表达,升高TIMP-1表达,起到防治动脉粥样硬化和稳定斑块的作用。     

脂多糖对血管平滑肌细胞表达MMP-2、9及TIMP-1、2的影响

目的 探讨脂多糖(1ipopolysaccharides，LPS)对培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)表达基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinase-2，-9；MMP-2，MMP-9)及其组织抑制因子1、2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1，-2；TIMP-1，TIMP-2)的影响。方法 贴块法进行血管平滑肌细胞培养，细胞免疫化学检测基质金属蛋白酶及其抑制剂的蛋白表达，原位分子杂交分析MMP-9 mRNA表达。结果 LPS是MMP-9的强诱导物。可在蛋白及mRNA水平诱导MMP-9的表达，同时LPS可诱导TIMP-1的表达，作用较对MMP-9减弱。LPS对二者诱导作用强度与LPS的浓度及作用时间呈正相关。LPS降低TIMP-2的表达，其表达与LPS的浓度及作用时间呈负相关。LPS对MMP-2的表达没有明显作用。结论 LPS诱导平滑肌细胞MMP-9、TIMP-1表达的同时可降低TIMP-2的表达，其作用呈浓度时间依赖性，在动脉粥样硬化发病过程中可能起一定作用。     

血清MMP-1、TIMP-2检测对糖尿病心肌病早期诊断价值分析

目的：探讨血清MMP-1、TIMP-2检测对糖尿病心肌病早期诊断的价值。方法选择糖尿病心肌病患者、糖尿病非心肌病患者、健康体检人员各40例进行研究,用竞争ELISA法检测糖尿病心肌病患者（DCM组）、糖尿病非心肌病患者（NDCM组）和体检健康者（CON组）的血清MMP-1和TIMP-2水平。结果 CON、NDCM、DCM 3组患者的血清MMP-1水平依次降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;血清TIMP-2水平依次提高,且DCM组为（524.34±40.22）μg/L,显著高于NDCM组的（229.68±17.39）μg/L,差异具有统计学意义（P<0.05）。3组的MMP-1/TIMP-2比率依次降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论血清MMP-1与TIMP-2是DCM的独立危险因素,对评估和诊断早期DCM的发生有一定的价值。     

阿司匹林调节小鼠腹腔巨噬细胞MMP-2/9和TIMP-1基因的表达及分泌

目的研究阿司匹林对小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2/9和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）基因表达及分泌的影响。方法培养的小鼠腹腔巨噬细胞用阿司匹林处理后,用RT-PCR方法检测MMP-2/9和TIMP-1mRNA表达,用ELISA方法测定培养上清液中MMP-2/9和TIMP-1的含量。结果小鼠腹腔巨噬细胞经用阿司匹林12.5～50μg/ml处理24h后,MMP-2/9mRNA表达及分泌至培养上清液中的含量明显降低,MMP-2的降低百分率分别为18.6%～86.8%和37.7%～53.3%,MMP-9的降低百分率分别为32.1%～78.3%和6.5%～14.3%;而TIMP-1mRNA的表达及分泌却显著提高,其增加百分率分别为60.5%～110.9%和94.4%～80.6%。结论阿司匹林可抑制MMP-2/9的基因表达及分泌,同时还可增加TIMP-1的基因表达及分泌,这一效应对增加动脉粥样硬化斑块的稳定性和预防心血管事件的发生具有有利的作用。     

首参颗粒对动脉粥样硬化大鼠血清MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的观察首参颗粒对动脉粥样硬化(AS)大鼠血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的干预作用。方法 40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、西药对照组(西药组)、首参颗粒组(中药组),每组10只。除正常组外,其余大鼠均以高脂饲料喂养,并一次性腹腔注射维生素D3,以建立AS模型。同时模型组灌服生理盐水,中药组灌服首参颗粒,西药组灌服普伐他汀进行药物干预。12周后HE染色观察各组大鼠血管病理变化,ELISA法检测大鼠血清MMP-9及TIMP-1含量。结果模型组大鼠病理切片可见部分动脉内膜断裂,内皮细胞排列明显紊乱。中药组动脉内膜较模型组光滑平整,内膜脱落、内皮细胞排列紊乱较模型组明显减轻。模型组大鼠血清MMP-9含量较正常组明显增高(P0.01),而TIMP-1含量明显降低(P0.01)。与模型组相比较,中药组MMP-9含量明显降低(P0.01),TIMP-1含量明显增高(P0.05)。结论首参颗粒可能通过抑制MMP-9、促进TIMP-1的表达,调节MMP-9/TIMP-1的失衡状态,改善动脉粥样硬化病变。     

TIMP-4和MMP-2在原发性肝癌的表达及临床意义

目的：探讨组织基质蛋白酶抑制剂4（tissue inhibitor metalloproteinase-4,TIMP-4）和基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）在原发性肝癌的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学方法检测40例不同病理分期、分级的原发性肝癌组织中TIMP-4和MMP-2的表达情况,同时取15例正常肝组织作为对照。结果：MMP-2蛋白在肿瘤组织中表达远多于正常组织,在正常组织中仅呈散在表达且表达较弱;TIMP-4蛋白在肿瘤组织中表达远多于正常组织,在正常组织中仅呈散在表达且表达较弱,在肿瘤组织中两者表达比例失调;随着原发性肝癌临床病理分期、分级的升高,MMP-2表达呈现增高趋势（P〈0.05）,TIMP-4表达呈现减低趋势（P〈0.05）。结论：MMP-2与TIMP-4表达比例失调与原发性肝癌的浸润和转移有关。