大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-SMA和TGF- β1表达的影响

目的 观察大蒜素对肺纤维化大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,并初步探讨大蒜素对大鼠肺纤维化抑制作用的机制.方法 通过气管内注射博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,空白对照组大鼠用生理盐水代替.造模后的Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(气管内注入生理盐水+生理盐水灌胃)、大蒜素组(博莱霉素造模+大蒜素灌胃)、秋水仙碱组(博莱霉素造模+秋水仙碱灌胃)和模型组(博莱霉素造模+生理盐水灌胃),分别于第7天和第28天处死大鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺组织肺纤维化程度,碱水解法检测大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度,免疫组织化学染色检测大鼠肺组织α -SMA及TGF-β1的表达.结果 在HE染色和Masson染色中,大蒜素组及秋水仙碱组肺炎分级和肺纤维化分级较模型组降低.与模型组相比,大蒜素组大鼠肺组织内羟脯氨酸的浓度降低,肺组织内α-SMA及TGF-β1的表达均明显减少,与秋水仙碱组相似.结论 大蒜素对大鼠肺纤维化的干预作用可能与下调TGF-β1的表达,从而减少成纤维细胞α-SMA基因的表达有关.     

VEGF在肺纤维化肺组织内的表达及其作用研究

目的:探讨血管内皮生长因子（VEGF）在肺纤维化病人及模型小鼠内的表达及其在肺纤维化疾病中发挥的作用。方法:收集临床确诊为肺纤维化的病人及正常供体肺组织,通过免疫组织化学染色检测VEGF和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,统计VEGF阳性表达与肺纤维化严重程度的相关性。给予小鼠气管注射博来霉素21 d诱导肺纤维化模型,免疫组织化学染色检测模型小鼠肺组织内VEGF和α-SMA的表达水平。给予小鼠气管注射VEGF164抗体后,给予博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型,H&E染色和Masson三色染色比较小鼠肺组织纤维化病理损伤和胶原表达,并进行Ashcroft评分,使用荧光定量PCR比较肺组织内α-SMA和纤连蛋白的表达水平变化,使用试剂盒检测肺组织内羟脯氨酸含量的变化。结果:VEGF在肺纤维化病人和小鼠肺组织内明显的阳性表达,且阳性表达率越高,α-SMA表达水平越高,呈显著的相关性。给予VEGF164抗体阻断小鼠肺组织内VEGF表达后,小鼠肺纤维化病理损伤明显减轻,胶原含量减少,α-SMA和纤连蛋白的mRNA水平降低,羟脯氨酸含量减少。结论:VEGF在肺纤维化病人和小鼠肺组织内呈显著的阳性表达,阻断肺组织内VEGF表达缓解了博来霉素诱导的肺纤维化。     

五味子乙素减轻博莱霉素诱导的肺纤维化

[目的]观察五味子乙素对小鼠肺纤维化的保护作用,并初探其可能的作用机制。[方法]将96只小鼠随机分为4组:空白对照(N)组,模型(M)组,地塞米松(DM)组,五味子乙素(Sch-B)组,每组24只。N组气管内滴入0.9%氯化钠注射液,其余各组小鼠经气管给予博莱霉素溶液建立肺纤维化模型。造模后第2天,N组和M组每日灌胃给予橄榄油,DM组给予地塞米松腹腔注射3 d,Sch-B组灌胃给予五味子乙素治疗。各组分别于治疗后第7、14、28天随机处死8只,进行肺组织苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察小鼠肺组织病理形态变化,用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测小鼠血清中白介素-6(IL-6)水平,试剂盒检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和羟脯氨酸(HYP)含量,用免疫组化检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2(p-Smad2)以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达量来评价治疗效果。[结果]Sch-B组小鼠肺泡炎及肺纤维化程度较M组均明显减轻(P0.05),血清中IL-6水平明显下降(P0.05),抗氧化指标较M组有所升高(P0.05),肺组织TGF-β1、pSmad2及α-SMA蛋白表达明显减少(P0.05)。[结论]五味子乙素能减轻小鼠肺纤维化程度,可能是通过减轻炎症反应,增强机体抗氧化能力和通过调节TGF-β1、p-Smad2和α-SMA蛋白发挥作用。     

1,25-(OH)2D3治疗肺纤维化的动物实验研究

目的观察1,25-(OH)2D3对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法将C57BL/6雄性小鼠110只分为对照组(n=30),模型组(n=40),干预组(n=40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3.5mg/kg)气管内滴入构建肺纤维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0.5μg/kg灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模第7、14、28天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,在第28天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果造模第7和14天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28天,干预组小鼠肺纤维化评分低于模型组(P<0.05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P<0.05)。结论 1,25-(OH)2D3可减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。     

百部生物碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用

对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/kg)为阳性对照药,以肺组织羟脯氨酸含量、TGF-β1水平、炎性水平、胶原沉积和α-SMA表达等为指标考察其抗肺纤维化效果。结果表明,总碱和新对叶百部碱均能显著改善模型小鼠的肺组织炎症和损伤,降低羟脯氨酸含量和胶原沉积;新对叶百部碱能显著降低模型小鼠肺组织α-SMA表达和TGF-β1水平。初步机制研究表明,新对叶百部碱能抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中α-SMA的升高,表明抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化是其作用机制之一。     

黄芩苷对UUO大鼠肾间质纤维化的影响及可能机制

目的 探讨黄芩苷对单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能机制.方法 40只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、黄芩苷组、贝那普利组及黄芩苷+贝那普利组,每组各8只.黄芩苷组给予黄芩苷溶液灌胃40 mg·kg-1·d-1,贝那普利组给予贝那普利混悬液灌胃10 mg·kg-1·d-1,黄芩苷+贝那普利组给予黄芩苷溶液40 mg·kg-1·d-1和贝那普利混悬液10 mg·kg-1·d-1灌胃,假手术组与模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃.在造模第14、21和28天处死动物,取肾脏标本,免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠在造模第14、21和28天,肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达均明显升高(P＜0.05).与模型组相比,黄芩苷组、贝那普利组及黄芩苷+贝那普利组大鼠在造模第14、21和28天,肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达均不同程度降低(P＜0.05).而黄芩苷组、贝那普利组和黄芩苷+贝那普利组3组之间各时间点肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 黄芩苷可能通过下调TGF-β1、减少α-SMA表达,从而延缓UUO大鼠RIF的进展.     

黄芪甲苷抗二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠效应研究

目的探讨黄芪甲苷对二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠模型的作用。方法选取27只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组和黄芪甲苷组。模型组和黄芪甲苷组大鼠,采用腹腔注射DMN诱导肝纤维化模型,持续4周。于造模第3周开始,黄芪甲苷组在继续造模的同时予以黄芪甲苷干预,正常组和模型组给于等容量蒸馏水灌胃。4周末(即药物干预两周)处死全部大鼠,观察各组大鼠一般情况、肝组织病理学;检测各组大鼠血清肝功能水平、肝组织中羟脯氨酸(Hydroxypro鄄line,Hyp)含量;免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组肝脏明显缩小,组织炎细胞浸润增加,胶原沉积明显增多,肝功能指标明显异常(P<0.01),提示纤维化形成。与模型组比较,黄芪甲苷可以显著改善肝脏病理,减轻肝脏胶原沉积及肝脏Hyp含量,降低血清ALT、AST、GGT水平及TBil含量,升高ALB含量,显著抑制肝组织α-SMA蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论黄芪甲苷具有显著保肝降酶抗肝纤维化形成作用,其机制可能跟抑制肝星状细胞的活化相关。     

通络化纤颗粒对肺纤维化大鼠NF-κB、α-SMA含量的影响

目的观察通络化纤颗粒对博来霉索所致肺纤维化大鼠核因子-κB(NF-κB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量的影响。方法将60只健康Wistar大鼠(雌雄兼用)随机分为5组,即空白组、模型组、阳性药(醋酸泼尼松)对照组和通络化纤颗粒高、中剂量组。除空白组外,其余4组用博来霉素注入大鼠气管内制作肺纤维化模型,于造模后第1天起,各组给予相应的药物,分别于第7、28天处死大鼠,取肺组织进行HE染色,光镜下观察大鼠肺组织病理学变化,并进行免疫组化染色,观察大鼠肺组织NF-κB、α-SMA表达的变化。结果在造模后第7天和第28天,空白组无NF-κB及α-SMA阳性表达,模型组有阳性表达,通络化纤颗粒组和阳性药对照组NF-κB、α-SMA的表达较模型组明显降低(P<0.01);且通络化纤颗粒高、中剂量组较阳性药对照组有所降低(P<0.05)。病理学观察显示,模型组炎性反应明显,纤维化程度重;阳性药对照组及通络化纤颗粒高、中剂量组显著减轻。结论通络化纤颗粒可以有效地抑制实验性肺纤维化大鼠NF-κB、α-SMA的表达。     

七龙天干预博来霉素模型小鼠肺纤维化的作用机制研究

目的：观察七龙天对博来霉素致小鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法：将36只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、七龙天低、中、高剂量组、吡非尼酮组。建立小鼠肺纤维化模型后,空白组和模型组以0.9%NaCl溶液灌胃,七龙天组和吡非尼酮组分别以七龙天和吡非尼酮灌胃。给药21 d后,采用HE染色和Masson染色检测小鼠肺组织形态和胶原沉积情况,碱水解法检测羟脯氨酸（HYP）含量,qRT-PCR法检测TGF-β、α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α、CCL2、FOSL1、MMP9、CXCL5、AREG mRNA表达水平,Western blot、免疫荧光双标法检测TGF-β、α-SMA、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TNF-α、IL-17R、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达水平,并对空白组和模型组小鼠肺组织进行转录组测序。结果：(1)与空白组比较,模型组小鼠肺组织呈现炎症细胞浸润和肺泡间隙扩大现象,胶原沉积较多（P<0.01）;与模型组比较,发现七龙天各剂量组可抑制炎症细胞浸润和肺泡间隙扩大,且吡非尼酮组和七龙天各剂量组肺部胶原沉积明显减少（P<0.0...     

姜酮在博来霉素诱导小鼠肺纤维化中的保护作用及机制研究

目的 观察并探究姜酮(zingerone, ZO)在博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化中的疗效及潜在分子机制。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为4组,依次为:对照组、模型组、低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组。给予小鼠单次气管内注射BLM (5mg/kg)建立肺纤维化模型。低剂量ZO治疗组和高剂量ZO治疗组小鼠给予不同浓度ZO灌胃处理。HE染色及Masson染色观察肺病理损伤及纤维化状况;试剂盒检测肺组织氧化应激水平;碱水裂解法检测肺组织羟脯氨酸的含量;Western blot法检测肺组织中collagen Ⅰ、α-SMA及NRF2的蛋白表达状况。结果 与对照组比较,模型组小鼠出现了明显的肺病理损伤及纤维化,同时氧化应激明显升高而NRF2蛋白表达明显降低;ZO预处理可明显减轻BLM所致的小鼠肺纤维化和氧化应激,同时上调NRF2蛋白表达。结论 姜酮具有减轻博来霉素小鼠肺纤维化的潜力,其机制与NRF2的激活有关。     

半枝莲诱导大肠癌干细胞凋亡

【摘要】 目的 探讨紫草素对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的作用及机制。 方法 选取8～10周龄SPF级小鼠,将20只设对照组,剩余小鼠予以博来霉素诱导肺纤维化,成功造模80只,分为治疗组（紫草素腹腔注射）、对照干预组（同等剂量生理盐水腹腔注射后给予紫草素腹腔注射）、治疗干预组（治疗组处理的基础上给予shAMPK慢病毒剂尾静脉注射）、模型组（不作任何处理）。对照组给予同等剂量生理盐水腹腔注射。通过检测肺中胶原蛋白的含量,HE染色,Masson染色评估肺纤维化程度。Western Blot 检测NOX4、CollagenI、α-SMA蛋白水平。通过siRNA沉默AMPK基因探讨紫草素对博来霉素诱导肺纤维化的机制。 结果 模型组小鼠肺胶原尿蛋白含量及出现肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化较对照组明显增加（P＜0.05）,而治疗组小鼠肺中的胶原尿蛋白含量及出现肺组织炎症细胞浸润、间质纤维化较模型组明显降低（P＜0.05）。较对照组相比,模型组Nox4、p smad3、α SMA在肺组织中的光密度明显增加（P＜0.05）,而治疗组与模型组比较以上蛋白的表达明显被抑制（P＜0.05）。Western Blot的结果显示NOX4及细胞外基质（Collagen I、α-SMA）在模型组小鼠肺组织中大量表达,但治疗组小鼠以上蛋白分子的表达被明显抑制（P＜0.05）,且在对照干预组中,紫草素不影响NOX4、CollagenI、α-SMA的表达改变。与对照组相比,模型组小鼠肺组织中NOX4、CollagenI、α-SMA的表达明显升高,p-AMPK表达降低（P＜0.05）,而治疗组小鼠肺组织NOX4、CollagenI、α-SMA的表达升高及p-AMPK的表达降低均得到了缓解,但治疗干预组中对NOX4、CollagenI、α-SMA的表达抑制被解除,同时抑制了紫草素对p-AMPK的表达增加（P＜0.05）。结论 紫草素通过AMPK来抑制NOX4的表达从而减轻博来霉素诱导小鼠肺纤维化。     

格列卫对肺纤维化小鼠的干预机制

目的 探讨格列卫对小鼠肺纤维化的干预机制.方法 120只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和格列卫组,每组30只.采用气管内注射博莱霉素构建肺纤维化小鼠模型,分别于7、14、21 d随机处死10只动物.免疫组化检测各组肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达,RT-PCR检测肺组织TGF-β1mRNA含量.结果 模型组各时间点TGF-β1和α-SMA的表达均较对照组显著增加,地塞米松和格列卫处理组各时间点TGF-β1和α-SMA的表达均较模型组显著降低,而地塞米松组和格列卫组的表达水平无显著差异.TGF-β1,与α-SMA表达水平呈直线正相关(r=0.251,P<0.05).结论 格列卫对博莱霉素诱导肺纤维化的抑制作用与其抑制TGF-β1和α-SMA的表达有关.     

黄芪甲苷对哮喘小鼠转化生长因子β1和胸腺基质淋巴细胞生成素表达的影响

目的 观察黄芪甲苷对哮喘模型小鼠呼吸道重塑以及对转化生长因子(TGF)-β1和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达的影响.方法 48只BALB/c小鼠按随机分成对照组、哮喘组、黄芪甲苷组,布地奈德组,每组12只.卵蛋白致敏、激发8周,黄芪甲苷组给予黄芪甲苷溶液(50 mg/kg)灌胃,1次/d,共8周.检测小鼠呼吸道阻力,肺组织病理检查观察呼吸道炎症、杯状细胞增生、胶原染色面积;酶联免疫吸附( ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中自细胞介素(IL)-4和IL-13表达,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,实时定量PCR和Western印迹检测TGF-β1和TSLP的表达.结果 小鼠呼吸道阻力结果显示,乙酰胆碱浓度30 μg/kg时,黄芪甲苷和布地奈德能显著抑制哮喘小鼠的呼吸道阻力(均P＜0.05).哮喘组PAS+上皮细胞/支气管上皮细胞、胶原染色面积和α-SMA染色面积明显高于对照组(均P＜0.01),黄芪甲苷组和布地奈德组明显低于哮喘组(均P＜0.05).哮喘组BALF中IL-4和IL-13明显高于对照组(均P＜0.01),黄芪甲苷组和布地奈德组明显低于哮喘组(均P＜0.05).哮喘组TGF-β1和TSLP的mRNA相对表达量(5.23±1.44和5.70±1.65)明显高于对照组(1.02±0.21和1.02±0.25)(均P＜0.01),黄芪甲苷(2.27±0.65和2.97±1.03)和布地奈德组(2.10±0.57和3.32±1.11)明显低于哮喘组(均P＜0.05);哮喘组TGF-β1和TSLP蛋白水平(0.89±0.11和0.74±0.10)明显高于对照组(0.39±0.04和0.44±0.05)、黄芪甲苷(0.51±0.08和0.59±0.12)和布地奈德组(0.55±0.08和0.60±0.08)(均P＜0.05).结论 黄芪甲苷能够抑制哮喘小鼠模型的呼吸道炎症和呼吸道重塑,其机制可能通过抑制TGF-β1和TSLP的表达而实现.     

EGFR/Foxo3a/Snail1通路在博来霉素肺纤维化小鼠中的作用机制探讨

目的以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对博来霉素所致小鼠肺纤维化进行干预,探讨转录因子叉头盒O3a(Foxo3a)的相关下游信号通路,阐明Foxo3a在肺纤维化中可能的作用机制。方法将30只6周龄SPF级C57BL/6小鼠(雌雄各半)随机平均分为3组:对照组(气管内滴入0.9%的氯化钠注射液)、博来霉素组(气管内滴入博来霉素3 mg/kg)和吉非替尼组(气管内滴入博来霉素3 mg/kg后以吉非替尼20 mg·kg–1·d–1灌胃)。14 d后收集小鼠肺组织,左肺行HE及Masson染色,取右肺以逆转录–聚合酶链反应法与免疫印迹法分别检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮钙黏素(E-cadherin)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Foxo3a、叉头盒M1(Fox M1)、Snail1 m RNA与蛋白表达水平。结果吉非替尼处理后,肺组织病理损伤及纤维化程度评分较博来霉素组明显降低(均P0.01),与博来霉素组比较,α-SMA、Snail1(均P0.01)、HMGB1(P0.05)m RNA表达水平下调,E-cadherin(P0.01)、Foxo3a、Fox M1(均P0.05)m RNA表达水平上调;α-SMA(P0.05)、Snail1(P0.01)、 HMGB1蛋白水平(P0.05)以及Foxo3a蛋白磷酸化水平(P0.01)表达下调,E-cadherin(P0.05)、Foxo3a及Fox M1蛋白表达上调(均P0.05)。结论 Foxo3a活性增加可下调Snail1,使α-SMA表达降低、E-cadherin表达升高,从而减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。     

两种表皮生长因子抑制剂下调肿瘤抑制素M抑制博来霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的比较两种表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼和厄罗替尼对肿瘤抑制素M(OSM)及下游通路的调节作用,以及对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用。方法将40只SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(生理盐水气管内雾化)、博来霉素组(博来霉素3 mg/kg气管内雾化)、吉非替尼组(博来霉素3 mg/kg气管内雾化后吉非替尼20 mg·kg~(–1)·d~(–1)灌胃)以及厄罗替尼组(博来霉素3 mg/kg气管内雾化后厄罗替尼25 mg·kg~(–1)·d~(–1)灌胃)。实验第14 d使用小动物CT对小鼠进行胸部CT检查,检查完毕后收集小鼠肺组织,行HE、Masson染色,Western blot法检测肺组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、OSM、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平。结果吉非替尼和厄罗替尼处理后,小鼠胸部CT影像中肺部渗出及纤维化病灶较博来霉素组明显减少,肺组织病理损伤及纤维化损伤均较博来霉素组明显减轻(均P0.05),α-SMA蛋白、OSM蛋白、p-JAK1/JAK1、p-STAT3/STAT3表达较博来霉素组明显下调(均P0.05)。吉非替尼和厄罗替尼的上述作用无显著差异(均P0.05)。结论两种表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼和厄罗替尼均能抑制博来霉素诱导的小鼠肺纤维化,其抑制作用相近,机制可能与下调OSM蛋白的表达以及下游JAK/STAT通路的磷酸化密切相关。     

黄芪甲苷对糖尿病KKAy小鼠肾组织TGF-β1、SMAD2/3及α-SMA表达的影响

目的 观察黄芪甲苷对糖尿病KKAy小鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、SMAD2/3、q-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其延缓肾脏纤维化的可能机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠10只作为对照组,20只2型糖尿病模型KKAy小鼠予以高脂饮食至14周,随机数字法分为模型组和黄芪甲苷组,每组10只,黄芪甲苷组给予黄芪甲苷40 mg·kg-·d-1,模型组与对照组给予等量生理盐水.实验期间,各组动物自由饮食、饮水.血糖仪测量16、20、24周龄时各组小鼠的血糖水平.24周时处死,观察各组小鼠肾的病理学变化,免疫组织化学法测定TGF-β1、SMAD2/3、α-SMA的表达.结果 (1)血糖:与对照组相比,14周龄的KKAy小鼠血糖明显升高,模型组血糖在16、20、24周时血糖明显升高(P＜0.05),黄芪甲苷组与其相比,血糖下降(P＜0.05).(2)肾组织形态学:对照组肾小球及肾小管结构清晰,未出现肾间质纤维化,模型组肾小球系膜基质增宽,系膜细胞增多,肾小管上皮细胞细胞质空泡样变性,肾间质炎性细胞增多,黄芪甲苷组肾小管上皮细胞细胞质较少,未呈现明显的纤维化.(3)肾组织TGF-β1、SMAD2/3、α-SMA的表达:对照组TGF-β1表达微弱,而模型组TGF-β1显著表达于肾小管上皮细胞细胞质(P＜0.01);与模型组相比,黄芪甲苷组TGF-β1、α-SMA表达明显下调(P＜0.05);对照组肾小管与肾小球细胞核有少量磷酸化的SMAD2/3表达,模型组表达增加(P＜0.01),与模型组相比,黄芪甲苷组表达减少(P＜0.05).结论 黄芪甲苷通过影响TGF-β/SMADS信号通路,下调TGF-β1、α-SMA表达,改善糖尿病小鼠肾脏纤维化.     

非诺贝特治疗单侧输尿管结扎小鼠肾纤维化的机制研究

  目的  探讨非诺贝特在单侧输尿管结扎诱导的小鼠肾纤维化中的作用机制,为肾纤维化提供潜在的治疗靶点。  方法  成年雄性C57BL/6J小鼠31只,随机分为假手术组（Sham组,n=9）、单侧输尿管结扎组（UUO组,n=10）和单侧输尿管结扎+非诺贝特治疗组（UUO+Feno组,n=12）。UUO组及UUO+Feno组小鼠均结扎左侧输尿管,Sham组小鼠仅游离左侧输尿管,不做结扎处理。术后第二日起,UUO+Feno组每日给予10 mg/kg （终浓度为0.08 mg/mL）的非诺贝特溶液灌胃,持续14 d;其余两组每日灌胃等量生理盐水。术后第15 天灌胃结束后处死小鼠取材,检测血清肌酐和尿素氮,肾组织行HE染色、Masson染色和Sirius Red染色,检测肾组织羟脯氨酸含量,免疫组化染色检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（COLⅠ）蛋白表达,Western blot法检测肾组织α-SMA、COLⅠ蛋白表达变化,实时荧光定量（RT）- PCR法检测肾组织纤维化相关基因基质金属蛋白酶（MMP）2、MMP9、COLⅠA1、COLⅠA2、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-SMA mRNA的表达变化。  结果  与Sham组相比,UUO组小鼠血清肌酐及尿素氮水平升高（P<0.05）;与UUO组相比,UUO+Feno组小鼠血清肌酐及尿素氮水平降低（P<0.05）。HE染色、Masson染色、Sirius Red染色以及肾羟脯氨酸含量的结果均表明UUO组较Sham组胶原沉积明显增多,炎性细胞浸润明显,UUO+Feno组较UUO组胶原沉积程度显著减轻,炎性细胞浸润程度显著改善,对肾纤维化的启动阶段有抑制作用。免疫组化结果显示:与Sham组相比,UUO组 α -SMA、COLⅠ在肾组织中的表达水平升高（P<0.05）;与UUO相比,UUO+Feno组α-SMA、COLⅠ在肾组织中的表达水平降低（P<0.05）;RT-PCR和Western blot结果显示:与Sham组相比,UUO组纤维化相关因子的mRNA及α-SMA、COLⅠ蛋白表达水平均升高（P<0.05）;与UUO组相比,UUO+Feno组纤维化相关因子的mRNA及蛋白表达水平均降低（P< 0.05）。  结论  非诺贝特通过调控与肾脏纤维化相关因子的表达水平改善肾脏纤维化。     

天龙竭胶囊对肺纤维化模型大鼠α-SMA和E-Cadherin的影响

目的：观察天龙竭胶囊对博来霉素诱导肺纤维化(pulmonary fibrosis, PF)大鼠的影响,探讨天龙竭胶囊改善PF的作用机理。方法：60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、天龙竭胶囊低剂量组(0.51 g·kg^-1)、天龙竭胶囊中剂量组(1.01 g·kg^-1)、天龙竭胶囊高剂量组(2.02 g·kg^-1)、吡非尼酮组(0.12 mg·kg^-1)。除空白组外,其余各组大鼠采用气管内滴注博来霉素(5 mg·kg^-1)复制肺纤维化模型。造模14d后,各组大鼠灌胃给予相应药物干预,空白组和模型组灌胃给予等体积生理盐水,每日1次,连续28 d。取大鼠腹主动脉血进行血气分析;采用试剂盒检测肺组织中羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)的含量;HE染色和Masson染色观察大鼠肺组织病理改变;RT-PCR和Western blot检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)...     

红景天苷下调组织蛋白酶B和NF-κBp65水平改善大鼠肺纤维化

目的：探讨红景天苷改善大鼠肺纤维化的相关机制。方法：SD大鼠随机分为空白组、肺纤维化模型组、 吡非尼酮组和红景天苷高剂量组、中剂量组、低剂量组。测定6组肺系数,血气分析,检测肺泡灌洗液中白蛋白 (ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、乳清脱氢酶(LDH)含量,肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,血清III型前胶原(PC-III)和IV型胶 原(COL4)含量,溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin,CB)和NF-κBp65表达的水平。结果：模型组肺系数明显高于空白组 (P<0.05),而氧分压明显低于空白组(P<0.05);吡非尼酮组、红景天苷高、中、低剂量组肺系数相比模型组均下降 (P<0.05),氧分压则升高(P<0.05)。模型组中ALB,ALP,LDH含量较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度的增 加,ALB,ALP,LDH呈下降趋势(P<0.05)。模型组谷胱甘肽(GSH)含量较空白组升高(P<0.05);随着红景天苷浓度 的增加,GSH含量呈下降趋势(P<0.05)。模型组肺组织中HYP及血清PC-III和COL4含量较空白组升高(P<0.05);随着 红景天苷浓度的增加,HYP及血清PC-III和COL4含量呈下降趋势(P<0.05)。模型组CB和NF-κBp65表达较空白组升高 (P<0.05);随着红景天苷浓度的增加,CB和NF-κBp65表达呈下降趋势(P<0.05)。结论：红景天苷能改善大鼠肺纤维 化,其机制可能与降低大鼠肺组织的CB和NF-κBp65的表达有关。     

养阴益气合剂对肺纤维化大鼠肺泡上皮间质转化的干预机制研究

目的研究养阴益气合剂对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺泡上皮间质转化的干预作用。方法将120只SPF级Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,泼尼松组,养阴益气合剂低、中、高剂量组,采用气管滴注博来霉素的方法复制肺纤维化大鼠模型,造模后1 d各组给予相应药物灌胃,连续给药28 d。于给药第14天和28天分批处死大鼠,左肺行HE染色和Masson染色观察病理变化,右肺用RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、I型胶原(ColI)、层黏连蛋白(LN)mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组α-SMA、Col I及LN mRNA表达均升高,E-cadherin表达下降(P0.05)。各治疗组α-SMA、Col I及LN mRNA出现不同程度下降,E-cadherin mRNA表达上调(P0.05)。第28天,与泼尼松组比较,养阴益气合剂高剂量组E-cadherin mRNA表达上调(P0.05),养阴益气高、中、低剂量组LN mRNA表达下调(P0.05)。结论养阴益气合剂能抑制博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺泡上皮间质转化,其机制可能与下调α-SMA、Col I、LN mRNA表达、上调E-cadherin mRNA表达有关。