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1.
目的:探讨甲状旁腺激素(PTH)调节骨吸收作用的途径和机制。方法:观察PTH对人成骨细胞(HOB)表达护骨素(OPG)、护骨素配体(OPGL)及其相关因子,如肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体(TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的影响,用RT-PCR法检测OPG,OPGL,TRAIL及M-CSF基因表达情况,用Western blotting分析法检测OPG和OPGL蛋白表达情况。结果:PTH下调HOB细胞中OPG的表达,上调OPGL,M-CSF及TRAIL的表达。结论:PTH通过降低成骨细胞中OPG与OPGL的比值,增加M-CSF和TRAIL的表达,促进破骨细胞生成、活化,促进骨吸收。 相似文献
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杨林 《中华医学杂志(英文版)》2011,124(13)
摘 要
背景 骨保护素和骨保护素配体在骨代谢过程中具有重要作用。本实验研究骨保护素和骨保护素配体在人骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化过程中的表达情况,及对破骨细胞形成的影响,探讨其在骨代谢过程中的调节作用。
方法 采用梯度离心法获得人骨髓基质细胞,并将骨髓基质细胞向成骨细胞方向诱导分化。通过形态学观察、生化指标检测、细胞染色和矿化结节测定等方法,确定骨髓基质细胞的功能状态和分化程度。采用RT-PCR和Western blot方法,检测骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中骨保护素和骨保护素配体的表达情况。在进一步的实验中采用骨髓法获得破骨细胞前体细胞,与分化中或者未分化的骨髓基质细胞共同培养,并加入OPG和OPGL进行实验,观察抗酒石酸阳性多核的破骨细胞形成情况。
结果 获得的骨髓基质细胞生长状态良好,生化指标稳定。骨髓基质细胞分化后,碱性磷酸酶分泌明显增加,可以产生大量的矿化结节,具有成熟成骨细胞的表型特征。RT-PCR和Western blot检测结果显示,在骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中,骨保护素在mRNA和蛋白质水平的表达明显升高,而骨保护素配体的表达则逐渐下降。细胞中OPG mRNA和蛋白质表达水平在第21天时达到最大,约为未分化时水平的2.5倍左右,而OPGLmRNA和蛋白质表达减少约为未分化时1/2。统计学分析,P<0.01,差异有显著性。实验结果显示破骨前体细胞与未分化骨髓基质细胞共同培养后,可以观察到TRAP阳性的多核破骨细胞形成,而与分化骨髓基质细胞共同培养后,不能检测到TRAP阳性多核破骨细胞的形成。但加入OPGL试剂后可以看到破骨细胞的形成。
结论 在人骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中,骨保护素表达逐渐升高而骨保护素配体表达显著降低,两者比值逐渐增大,骨形成增加,并进一步抑制破骨细胞形成,减少骨吸收,这可能是调节MSC分化,OB和OC形成,使骨代谢周期平衡有序进行的重要机制。 相似文献
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OPG/RANKL/RANK系统信号通路对调节破骨细胞分化与骨吸收过程中具有至关重要的作用。成骨细胞及骨髓基质细胞表达RANKL与破骨细胞前体细胞或破骨细胞表面上的RANK结合后,促进破骨细胞的分化与激活,并抑制破骨细胞的凋亡;另一方面成骨细胞及骨髓基质细胞则分泌表达OPG与RANKL竞争性结合,阻止RANKL与RANK的结合。作为破骨细胞形成、分化和骨吸收调节的关键调节物OPG/RANKL/RANK系统信号通路在口腔领域中乳牙的萌出及替换、正畸牙的移动、牙周炎等生理性及病理性过程中的改建发挥功能。 相似文献
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人骨保护素(osteoprotegerin.OPG)为一种破骨细胞抑制因子,其对破骨细胞的形成、分化和调节骨吸收的具有重要作用,骨保护素的研究在骨质疏松、骨硬化病、类风湿性关节炎、骨肿瘤、心血管疾病等临床疾病的发病机制及治疗方面均取得了较大进展。目前国外已经进行重组骨保护素治疗绝经后骨质疏松的临床试验,未发现明显毒性作用。本文对重组骨保护素-卡介苗的构建及防治骨质疏松症的研究进展发展前景进行了展望。 相似文献
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TNF-α对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)的核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及其饵受体骨保护素(OPG)mRNA表达的影响,了解TNF-α在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法 将体外培养的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的TNF-α处理24h,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来观察人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达强度变化。结果 TNF-α上调人牙周膜成纤维细胞的RANKLmRNA表达,RANKL/OPG比率呈上升趋势。结论TNF-α通过调节人牙周膜成纤维细胞的RANKL/OPG的比值可间接地调节破骨细胞分化和活性,从而影响骨代谢。 相似文献
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目的:观察不同葡萄糖浓度对人成骨肉瘤MG63细胞株护骨素(OPG)、护骨素配体(OPGL)及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法:MG63细胞经不同浓度(5.5、16.7、33.3 mmol/L)葡萄糖处理后,用RT-PCR法检测上述基因表达情况.结果:高糖能下调MG63细胞中OPG及TGF-β的表达(P<0.05),上调OPGL、M-CSF和TRAIL的表达(P<0.05). 结论:高糖环境可能导致成骨细胞中OPG及TGF-β的表达减少, OPGL、M-CSF和TRAIL等细胞因子的表达增多,使破骨细胞的数目和活性增加,骨吸收增强和骨量丢失,这可能是糖尿病骨质疏松症的一个重要的发病机制. 相似文献
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不同浓度葡萄糖对MG63细胞株护骨素和护骨素配体及其相关因子表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观察不同葡萄糖浓度环境下人成骨肉瘤MG63细胞株护骨素(OPG)、护骨素配体(OPGL)及其相关因子如肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)、巨噬细胞集落刺激因子(M—CSF)、转化生长因子β(TGF-β)的表达。方法:用RT—PCR法检测基因表达情况。结果:高糖能下调MG63细胞中OPG及TGF—β的表达,上调OPGL、M—CSF和TRAIL的表达。结论:高糖环境可能导致成骨细胞中OPG及TGF—β的表达减少,OPGL、M-CSF和TRAIL等细胞因子的表达增多,使破骨细胞的数目和活性增加,骨吸收增强和骨量丢失,这可能是糖尿病骨质疏松症的一个重要的发病机制。 相似文献
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大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨组织骨保护素及其配体mRNA表达的影响 总被引:5,自引:1,他引:5
目的:观察大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素(osteoprote-gerin,OPG)和骨保护素配体(osteoprotegerin ligand,OPGL)mRNA表达的影响,探讨SI防治绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMO)的作用机制。方法:健康雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组和SI治疗组。假手术组仅牵动卵巢,其余两组均行双侧卵巢切除术。SI治疗组造模后予以SI50 mg.kg-1.d-1灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,1次/d,每周用药6 d,共12周。12周后取大鼠L3~L6脊椎行骨密度检测。取大鼠左侧股骨提取总RNA,采用实时定量聚合酶链反应(real-timequantitative polymerase chain reaction,RTQ-PCR)技术检测OPG和OPGL mRNA的表达水平。结果:SI可以增加去卵巢大鼠的腰椎骨密度,上调去卵巢大鼠骨组织中OPG mRNA的表达水平,使OPGL mRNA/OPG mRNA比值下降,但对OPGL mRNA的表达则无明显影响。结论:SI防治PMO的效应可能与其调控OPG mRNA的表达及OPGL mRNA/OPG mRNA比值相关。 相似文献
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兔下颌骨牵张成骨组织中c—los和OPG及OPGL的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:探讨在机械张力作用下骨细胞将生物力学信号转变为生物学效应的作用机理。方法:建立兔下颌骨牵张成骨模型,用免疫组化方法检测牵张中期(牵张第4天)、牵张末期(牵张第8天)与固定期2周、4周、6周的牵张区新生骨组织中c—los、骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(OPGL)的分布和表达。结果:在牵张中期和末期c—los的表达为强阳性,明显强于固定期2周、4周、6周的组织。牵张中、末期和固定期2周组织OPG的表达为强阳性,在固定期4周、6周组织中逐渐减弱。OPGL仅在固定期6周组织中有较弱表达,其余各时间点均无明显阳性表达。结论:在下颌骨牵张新骨形成改建过程中,c—los与机械力刺激关系密切,OPG能促进新骨形成,而OPGL则与骨改建有关。 相似文献
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目的:探讨中药合剂对种植体周围骨整合的作用机理;方法:健康雄性6m龄新西兰大白兔24只,随机分为对照组(12只)和实验组(12只)。实验组饲料中加入补肾中药合剂,对照组常规饲料。分别喂养3 d后在其胫骨顶端植入纯钛种植体3颗。于种植后30、60、90 d处死相同例数动物( n=6)。免疫组织化学技术检测OPG、PGL、COX-2的表达变化;结果:30 d时实验组OPG、OPGL、COX-2均中度阳性表达,明显高于对照组(弱阳性),两组间有统计学意义(P<0.05);60d时实验组OPG、OPGL表达(强度阳性)明显高于对照组(中强阳性),两组间有统计学意义( P<0.05),而两组COX-2均弱阳性表达,两组间没有统计学意义(P>0.05);90d两组OPG、OPGL、COX-2均弱阳性表达,两组间没有统计学意义(P>0.05);结论:OPG、OPGL和COX-2参与了种植后的骨组织修复过程,而中药合剂能进一步提高种植术后OPG、OPGL和COX-2的表达水平,提示补肾中药合剂可能促进种植体的周围骨整合。 相似文献
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目的探讨产后哺乳大鼠和妊娠大鼠正畸牙移动速率的变化,为临床正畸治疗提供依据。方法选取健康Wistar大鼠50只,其中雌性大鼠45只,6~8周龄分成未妊娠组、妊娠组、哺乳组,雌、雄鼠按2:1合笼饲养造妊娠、哺乳大鼠模型,每组按7、14、21d时间段正畸牙移动并检测同期骨密度、骨保护素。结果哺乳组胫骨骨密度低于妊娠组低于未妊娠组(P〈0.01),差异有统计学意义。哺乳组骨保护素高于妊娠组高于未妊娠组(P〈0.05),差异有统计学意义。哺乳组正畸牙移动速率大于妊娠组大于未妊娠组(P〈0.05),差异有统计学意义。结论①哺乳大鼠骨密度低于妊娠大鼠,低于未妊娠大鼠。②哺乳大鼠正畸牙移动速率在相同力时明显大于妊娠大鼠及未妊娠大鼠,且于21d最显著。 相似文献
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目的:观察不同浓度的尼尔雌醇(NYL)和左炔诺孕酮(LNG)对MG-63细胞株OPG/OPGL表达的作用,探讨旁分泌效应对其表达的影响。方法:用半定量RT-PCR检测不同浓度的两种药物分别干预的MG-63细胞OPG/OPGL mRNA表达。结果:两种药物均能促进MG-63细胞株OPG表达增多,最佳作用浓度均为10-6 mol/L。两者均能显著抑制OPGL mRNA表达。更换培养液可使NYL (10-10 mol/L)干预组表达OPG减少。结论:NYL和 LNG均能促进MG-63细胞株OPG表达,并抑制OPGL的表达。NYL对OPG表达调控过程中可能涉及MG-63细胞旁分泌作用。 相似文献