慢性乙型、丙型肝炎患者肝脏铁调素表达的下调

目的:研究慢性乙型、丙型肝炎患者体内炎性反应与铁代谢调节的相互作用机制.方法:纳入慢性乙型、丙型肝炎患者各45例、健康成人90例(各对照45例),分为慢性乙型肝炎患者组(HBV组)、慢性丙型肝炎患者组(HCV组)及对照组,ELISA法检测血清铁调素(hepcidin)、白介素-6(interleukin6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α),全自动生化仪检测丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferases,AST)、血清铁(Fe).选取慢性丙型肝炎患者肝脏及十二指肠标本15例(HCV组)、慢性乙型肝炎患者肝脏及十二指肠标本12例(HBV组)和对照组12例,免疫组织化学检测肝脏铁调素(hepcidin)及十二指肠膜铁转运蛋白(ferroportin)表达情况,肝脏铁蓝染色检测肝脏铁蓄积情况.结果:与对照组比较,HBV、HCV组血清铁调素水平及肝脏铁调素表达均降低(P0.05);十二指肠膜铁转运蛋白表达均升高(P0.05),HCV组升高更明显(P0.05),肝脏铁蓝染色的阳性表达均升高(P0.05),HCV组升高更明显(P0.05).HBV及HCV组十二指肠膜铁转运蛋白表达与肝脏铁调素表达均呈负相关(r=-0.638,P0.05;r=-0.538,P0.05),与血清铁调素均呈负相关(r=-0.407,P0.05;r=-0.519,P0.05),与血清Fe均呈正相关(r=0.611,P0.05;r=0.637,P0.05).在HBV组,血清铁调素与IL-6及TNF-α均呈负相关(r=-0.510,P0.05;r=-0.450,P0.05);在HCV组,血清铁调素与IL-6呈负相关(r=-0.620,P0.05),与TNF-α呈正相关(r=0.243,P0.05).结论:慢性乙型、丙型肝炎患者体内铁调素水平下调并通过上调膜铁转运蛋白的表达导致体内血清铁水平升高及肝铁蓄积,HCV组肝铁蓄积更明显.     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨毒消肝清丸对肝硬化内毒素血症大鼠肝组织炎症反应的影响

目的通过CCl4复合造模制备肝硬化内毒素血症模型,探讨毒消肝清丸对大鼠肝脏炎性损伤的保护机制。方法:66只大鼠造模过程中有17只死亡,取3只大鼠检测内毒素和观察肝脏结构,确定造模成功,剩余随机分成正常组(n=6),模型组(n=8)、乳果糖组(n=8)、毒消肝清丸高、中、低剂量组(223. 4 mg/kg、111. 7 mg/kg、58. 9 mg/kg,n=8)。采用CCl4复合造模法造模8周,制备肝硬化内毒素血症动物模型。正常组和模型组给予蒸馏水,乳果糖组予乳果糖,毒消肝清丸药物组按上述剂量每天给药1次,连续8周。测定内毒素含量变化、HE染色观察肝脏组织变化情况、采用ELISA检测肝脏组织TNFα、IL-1β、IL-6的含量;Western Blot和RT-PCR技术检测TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及其mRNA的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t法。结果各组间大鼠血浆内毒素水平差异有统计学意义(F=26. 011,P 0. 001);模型组内毒素水平较正常组显著升高(P 0. 01);给药后乳果糖组、毒消肝清丸不同剂量组大鼠血清内毒素含量较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠血清IL-6、IL-1β以及TNFα水平差异均有统计学意义(F值分别为35. 390、38. 271、40. 241,P值分别为0. 002、0. 001、0. 001);与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα显著升高(P值均0. 01);给药后乳果糖组及毒消肝清丸不同剂量药物组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα水平较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白表达差异均有统计学意义(F值分别为24. 483、29. 547、19. 242、18. 752、22. 146、15. 834,P值均0. 01);与正常组大鼠相比,模型组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量均显著升高(P值均0. 01);乳果糖和毒消肝清丸不同剂量治疗后大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量较模型组均显著下降(P值均0. 01)。与低剂量治疗组比较,中高剂量组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量下降尤为显著(P值均0. 01)。结论药物组可能通过下调肝脏组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路来抑制炎症信号的转导,减少了细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6的表达,进而缓解内毒素血症并对肝脏组织起到保护作用。     

动态观察非酒精性脂肪肝大鼠肝脏抵抗素的表达

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝脏抵抗素mRNA的动态表达,探讨抵抗素在大鼠NAFLD发病中的作用。方法雄性Wistar大鼠48只随机分为正常对照组(C组)和模型组(M组),C组给予普通饲料,M组给予高脂饮食喂养,分别于9,13,17周末处死各组大鼠。测定大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),以及肝组织TG,测定空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。应用半定量RT-PCR检测各组大鼠肝脏组织抵抗素mRNA的表达;HE染色观察肝脏组织病理变化并计算炎症活动度计分。结果第9,13,17周末M组大鼠抵抗素mRNA相对表达量显著高于C组(P<0.01),且随造模时间延长表达量显著增加(P<0.01)。M组大鼠血清FFA、TG、TC、TNF-α及肝组织TG较同期C组均显著升高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.01)。相关分析显示,M组大鼠各时点肝脏抵抗素mRNA相对表达量与血清TNF-α水平均呈正相关(r=0.787,0.888,0.873,P<0.05,P<0.01,P<0.01);在第9,13周末与肝脏炎症活动度计分呈正相关(r=0.861,0.892,P<0.01);而与ISI在第9周末呈负相关(r=-0.843,P<0.01)。结论高脂饮食NAFLD模型大鼠肝脏抵抗素基因表达随造模时间的延长而增加,抵抗素可以通过胰岛素抵抗及对炎症因子的调控参与NAFLD的发生发展。     

1,25(OH)_2D_3干预IL-17及巨噬细胞炎性蛋白3α表达抑制大鼠肝纤维化形成的作用机制

目的探讨在肝纤维化形成过程中肝组织及外周血中IL-17和巨噬细胞炎性蛋白(MIP)3α的表达变化,以及1,25(OH)2D3经干预IL-17通路抑制肝纤维化形成的作用机制。方法 48只SD大鼠随机分为4组:正常组(橄榄油)、模型组(CCl4橄榄油溶液)、药物对照组(CCl4橄榄油溶液+橄榄油灌胃)、治疗组(CCl4橄榄油溶液+1,25(OH)2D3橄榄油溶液灌胃)。8周后取肝组织行HE染色和Masson染色,并对其纤维化程度进行病理分期;采用ELISA法检测干预后不同时间点(4、6、8周)血清中IL-17水平;免疫组化法分析不同时间点(4、6、8周)各组大鼠肝组织IL-17和MIP3α的蛋白表达;real time-PCR法检测第8周各肝组织IL-17和MIP3α的mRNA表达。计量资料的组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验,相关性检验采用直线相关分析。结果 8周时模型组及药物对照组肝纤维化显著,治疗组肝纤维化程度明显减轻。4组间各个时间点(4、6、8周)血清IL-17水平比较差异均有统计学意义(F值分别为6.13、5.79、7.18,P值均0.05);正常组血清IL-17水平很低,各个时间点(4、6、8周)模型组及药物对照组血清IL-17水平与正常组比较显著升高(P值均0.01);治疗组各时间点血清中IL-17表达水平较模型组和药物对照组均显著降低(P值均0.05),但均以第4周表达水平最高。免疫组化和real time-PCR法检测显示,对照组肝组织中几乎不表达IL-17,且MIP3α表达甚微;随着肝纤维化的进展,血清中IL-17水平逐渐降低,肝组织中IL-17水平逐渐升高(r=-0.793,P0.01);4组间各时间点(4、6、8周)肝组织表达IL-17、MIP3α水平差异有统计学意义(IL-17:F值分别为11.02、9.61、7.45,P值均0.05;MIP3α:F值分别为9.47、8.93、6.15,P值均9.05);模型组及药物对照组各时间点(4、6、8周)肝组织表达IL-17、MIP3α蛋白较正常组均显著升高(P值均0.01),治疗组肝组织各时间点表达量较模型组和药物对照组均明显降低且差异均有统计学意义(P值均0.05),均于第8周时表达量最高。模型组及药物对照组第8周IL-17、MIP3αmRNA表达水平较正常组明显增多,治疗组较药物对照组和模型组显著减少,组间比较差异有统计学意义(F值分别为7.36、10.15,P值均0.05)。结论 (1)在肝纤维化发生发展过程中,血清IL-17水平先升高后降低,而肝组织中IL-17表达水平呈逐渐升高趋势,提示肝纤维化后期血清中Th17渐被趋于肝脏;(2)1,25(OH)2D3治疗组肝脏中IL-17和MIP3α蛋白及mRNA水平较模型组及药物对照组均明显降低,提示IL-17通路可能为1,25(OH)2D3抑制肝纤维化发生发展的作用机制之一。     

豁痰解毒通络方对SD大鼠颈总动脉球囊损伤后炎性因子表达的影响

目的探讨豁痰解毒通络方对SD大鼠颈总动脉球囊损伤后炎性因子表达的影响。方法建立球囊损伤大鼠颈总动脉模型,随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组、中西药组。灌胃给药28d后,用酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的表达;逆转录-聚合酶链反应检测损伤侧颈总动脉中Toll样受体4(TLR4)及IL-6的mRNA表达。结果模型组与假手术组比较,血清中TNF-α、IL-6水平均升高(P 0.01);中药组、西药组、中西药组与模型组比较,血清中TNF-α、IL-6的水平均降低(P 0.05)。模型组与假手术组比较,IL-6、TLR4mRNA表达水平显著升高(P 0.01);中药组、西药组、中西药组IL-6mRNA表达水平较模型组显著降低(P 0.01)。中药组、西药组与中西药组TLR4mRNA表达水平较模型组降低(P 0.05或P 0.01),中西药组下降程度更明显(P 0.01)。结论豁痰解毒通络方能够降低大鼠颈总动脉球囊损伤后炎性因子TNF-α、IL-6、TLR4的含量,减轻炎症反应。     

急性肝功能衰竭大鼠模型中程序性死亡-1及其配体的表达

目的 探讨程序性死亡-1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)在急性肝功能衰竭大鼠模型中的表达变化及其在肝脏急性炎性损伤中的作用.方法 SD大鼠分为2组:正常组6只,模型组30只,以D-氨基半乳糖(D-Gal)诱导急性肝功能衰竭大鼠模型.造模后分别在12、24、48、72和120 h取大鼠血及肝脏标本,采用RT-PCR法检测肝组织中PD-1 mRNA、PD-L1 mRNA的表达.计量资料组间比较用t检验,相关性检验用Pearson直线相关分析.结果 造模后12 h,大鼠血ALT、AST明显升高,分别为(217.3±33.7)U/L和(397.2±101.3)U/L,显著高于正常组的(30.5±3.1)U/L和(78.6±4.2)U/L,差异有统计学意义(t=-8.921,-6.121,均P＜0.01),至48 h达高峰.造模后12 h,模型组大鼠PD-1 mRNA表达(0.385±0.074)高于正常组(0.097±0.009),差异有统计学意义(t=-7.725,P＜0.01),48 h达高峰(0.927±0.132),72 h则明显下降.PD-L1mRNA在正常大鼠肝组织中表达很少,模型组PD-L1 mRNA水平逐渐升高,48 h达高峰(0.593±0.105)(t=-10.076,P＜0.01).造模后大鼠PD-1、PD-L1表达水平与血清ALT水平呈正相关(r=0.807,0.792,P＜0.01).结论 PD-1/PD-L1表达在急性肝功能衰竭大鼠肝脏炎性损伤中可能起重要作用.     

电针丰隆穴对高脂血症大鼠肝脏SR-BI、PPARγ的调控及炎症相关因子的影响

目的:探讨电针丰隆穴对高脂血症大鼠血脂水平、肝脏组织的清道夫受体BI(scavenger receptor clas s B type I,SR-BI)、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxi some proliferator-activated receptor-γPPARγ)的mRNA相对表达量及腹腔巨噬细胞炎症相关因子细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白介素-1β(intefleukin-1β,IL-1β)、IL-10含量的影响及其相关作用机制.方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、电针1组、电针2组这4组,每组10只.治疗结束后检测各组血脂含量,肝脏组织中SR-BI、PPARγ的mRNA相对表达量.最后分离出大鼠腹腔中的巨噬细胞,应用流式细胞仪检测炎症相关因子ICAM-1、IL-1β、IL-10的含量.结果:与空白对照组比较,模型对照组TG.变化并不明显(p0.05),而总胆固醇(total chole sterol,TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(loW density lipoprotein cholesterol,LDL-C)明显上升(P0.01),高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C).明显下降(P0.01);与模型对照组比较,电.针l组及电针2组的TG和HDL-C变化并不明显(P0.05),大鼠血清TC、LDL-C均有显著下降(P0.01);与电针1组比较,电针2组TC、LDL-C均有降低(P0.01,P0.05).与空白对照组比较,除了电针2组外,其余两组SR-BI、PPAR7均有显著降低(P0.05,P0.01);与模型对照组比较,电针1组和电针2组的SR-BI、PPARγ均有显著升高(P0.05,P0.01),其中电针2组更为显著(P0.01).与空白对照组比较,除电针2组外,模型对照组和电针1组的炎症因子ICAM-1、IL-1β均有显著性升高(P0.05,P0.01),而模型对照组的抗炎因子IL-10有显著下降(P0.01);与模型对照组比较,电针1组和电针2组的炎症因子ICAM-1、IL-1β均有非常显著性减少(P0.01),而抗炎因子IL-10的含量有非常显著性升高(p0.01).结论:通过电针丰隆穴治疗能降低高脂血症模型大鼠的TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,增加肝脏SR-BI、PPARγmRNA相对表达量,减少大鼠巨噬细胞内炎症因子ICAM-1、IL-1β并增加抗炎因子IL-10的含量,达到治疗高脂血症的目的.     

高脂血症大鼠肝脏内C-反应蛋白的基因表达

目的研究高脂血症大鼠血清中C-反应蛋白（CRP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）的含量变化和血清CRP水平与肝组织CRP mRNA及蛋白的表达的相关性。方法将体重200g左右SD大鼠随机分成：对照组、高脂血症模型组2组,每组6只,对照组给予普通饮食,高脂血症模型组喂饲高脂饮食。在喂饲6、12w时分别采取各组大鼠的尾静脉血检测血清CRP与TC、TG的含量。12w后采用Realtime-PCR法、Western印迹法检测大鼠肝脏CRP mRNA及蛋白的表达水平。结果在饲养6w时模型组大鼠血清CRP、TC、TG含量明显高于对照组（P〈0.01）;模型组随着建模时间的延长各指标持续增高,12w后显著高于对照组（P〈0.01）;12w后大鼠肝脏CRP mRNA及蛋白表达量,模型组均较对照组明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。结论高脂血症大鼠血清中CRP含量升高,其机制与大鼠肝脏CRP mRNA及蛋白表达量升高有关。     

肝脏杀菌素表达在烧伤性贫血发生中的作用及机制

目的进一步探讨烧伤性贫血发生的机制。方法使用90℃水蒸汽制备烧伤小鼠模型（烧伤组）,测定其红细胞计数、血红蛋白含量、血清铁、铁总结合力（TIBC）及肝脏杀菌素（hepcidin）mRNA表达,以正常小鼠为对照组。结果与对照组比较,烧伤组血清铁水平显著下降、TIBC升高（P〈0．05）,hepcidin mRNA表达升高（P〈0．05）。结论认为hepcidin表达增加在烧伤性贫血发病中可能起重要作用,机制为调节血清铁水平及TIBC。     

甲泼尼龙对急性坏死性胰腺炎大鼠肾功能的保护作用

目的 探讨甲泼尼龙对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肾功能的保护作用.方法 将SD大鼠36只随机分为3组,假手术组(SO)、ANP组、甲泼尼龙治疗组(MP)各12只.以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立ANP模型,观察各组血清淀粉酶、白介素6(IL-6)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,以及腹水量、胰腺和肾脏的病理改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达水平.结果 ANP组制模后血清IL-6升高,肾脏ICAM-1 mRNA表达上调(P ＜ 0.01),血清淀粉酶、BUN、Cr分别在制模6 h、12 h后显著升高.与ANP组比较,MP组血清IL-6、BUN、Cr水平明显下降,ICAM-1mRNA表达下调(P ＜ 0.01),肾脏病理改变得到改善.结论 甲泼尼龙可抑制血清IL-6水平,下调肾脏ICAM-1基因表达,改善ANP的肾功能障碍.     

生长抑素对急性坏死性胰腺炎大鼠胆碱能抗炎通路的影响

目的 探讨生长抑素(SS)对ANP大鼠血清乙酰胆碱酯酶(true choline esterase,TChE)和乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)及IL-6和TNF-α水平的影响.方法 将30只SD大鼠随机分成对照组、ANP组和SS组,每组10只.以胆胰管注入牛胆酸制备ANP模型,SS组于制模后即刻皮下注射SS 34μg/kg体重.检测各组血WBC、血糖及血清ALT、AST、LDH、淀粉酶、TNF-α、IL-6、TChE、ChAT含量.结果 ANP组血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较对照组明显升高,而血清ChAT则明显降低(P＜0.01);血清IL-6、TNF-α与ChAT呈负相关(r=-0.87,P=0.007;r=-0.96,P=0.000),与TChE呈正相关(r=0.98,P=0.000;r=0.89,P=0.004).SS组的血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较ANP组显著降低,而血清ChAT则显著升高(P＜0.01).3组血糖含量无显著差异.对照组、SS治疗组和ANP组血WBC、ALT、AST及LDH依次升高(P＜0.01).结论 SS可能通过增加ANP大鼠ChAT活性和降低TChE活性,减少IL-6、TNF-α分泌,从而减轻SIRS和脏器功能受损的程度.     

益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠脂联素及肝脏瘦素受体mRNA的影响

[目的]探讨益气化痰解毒中药治疗脂肪肝分子生物学机制.[方法]将60只大鼠随机分为正常组与模型组(采用高脂饮食加白酒灌胃建立大鼠脂肪性肝炎模型),模型组所有大鼠再随机分为对照亚组、中药亚组、东宝肝泰亚组.用药4周后,观察并比较模型组及其各亚组与正常组对血清脂联素(APN)、瘦素(leptin)及肝脏瘦素受体(OB-R) mRNA、肿瘤坏死因子-α的影响.[结果]模型组与正常组比较血清leptin浓度升高,APN及肝脏OB-RmRNA表达显著下降(P＜0.01),治疗后中药亚组APN水平明显升高,肝脏OB-R mRNA表达上调,同时血清leptin、肝组织肿瘤坏死因子-α含量下降,明显优于东宝肝泰亚组(P＜0.01).[结论]益气化痰解毒中药通过提高APN,上调肝脏OB-RmRNA的表达,以调节leptin水平达到有效治疗脂肪性肝炎的作用.     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法选用SPF级SD大鼠120只,随机分为8组。采用高脂饲料喂养建立大鼠NASH模型,26 w后对肝组织进行HE染色,油红O染色,全自动生化分析肝功血脂改变,ELISA检测血清白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法分离肝细胞,流式细胞术(FCM)对肝细胞纯度进行活性和纯度鉴定。荧光定量PCR检测肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达量;Western印迹法检测肝细胞蛋白TLR4、p38MAPK及磷酸化蛋白p38MAPK表达水平。结果 26 w高脂饮食成功建立了NASH大鼠模型,HE染色和油红O染色证实大鼠模型存在典型的NASH病理改变。与正常组比较,模型组血清IL-1、IL-6、TNF-α含量显著升高(P0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组IL-1、IL-6、TNF-α含量显著降低(P0.05,P0.01),健脾高剂量组IL-1、IL-6含量降低有统计学差异(P0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著增加(P0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组,健脾高剂量组TLR4、p38MAPK mRNA蛋白及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论疏肝健脾方药能够降低NASH大鼠血清炎症因子水平,改善NASH大鼠肝脏的病理变化,TLR4/p38MAPK可能是疏肝健脾方药发挥抗NASH作用的药物靶点。     

低分子肝素对急性坏死性胰腺炎并肝损伤P-选择素和E-选择素表达的影响

目的研究低分子肝素(LWMH)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)并肝损伤中P-选择素和E-选择素表达的影响及其对急性坏死性胰腺炎的保护作用。方法将96只雄性SD大鼠随机分为三个组:对照组(C组,n=32)、急性坏死性胰腺炎组(A组,n=32)、低分子肝素干预组(G组,n=32)。A组以1.5%脱氧胆酸钠溶液逆行注入胰胆管建立急性坏死性胰腺炎模型(1 ml/kg),G组于造模后给予皮下注射低分子肝素(10 U/100 g),C组仅翻动胰腺后关腹。各组分别于造模后6、12、24、48 h四个时点分批处死大鼠,测定血清淀粉酶水平;E LISA检测血清TNF-α、IL-6水平,取胰腺及肝脏组织光镜下进行病理学评分;RT-PCR检测肝脏P-选择素和E-选择素mRNA表达。结果三组间和不同时点之间各项观察指标比较均有统计学意义(P0.01),A组6、12、24、48 h各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF-oα、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较C组相应时点显著升高(P0.05);G组各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF-oα、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较A组对应时点显著降低(P0.05)。结论 P-选择素和E-选择素在急性坏死性胰腺炎并肝损伤时的表达可能与病变严重程度有关;LWMH可能是通过下调P-选择素和E-选择素表达减轻急性坏死性胰腺炎的胰腺和肝脏病变。     

高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠血清脂肪甘油三酯脂酶的活性变化

目的探讨在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发生发展的过程中脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)mRNA的表达及血清ATGL酶活性、TNF-α水平的变化。方法 28只雄性SD大鼠随机分为对照组13只和NAFLD模型组15只。模型组饲以高脂饲料,对照组给予普通维持饲料。于喂养16周末处死所有动物,提取肝组织,计算肝指数,RT-PCR法半定量测定肝脏ATGL mRNA表达,观察肝脏病理变化;检测大鼠血清TG、TC、空腹血糖(FBG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、ATGL、TNF-α等指标。结果模型组大鼠血清TG、TC、FBG、ALT、AST、TNF-α等较对照组显著升高(P均<0.05),肝脏ATGL mRNA表达和血清ATGL酶水平显著降低(P均<0.01),且肝脏出现严重的脂肪变性伴大量炎性细胞浸润。血清ATGL与TNF-α呈高度负相关(r=-0.983,P<0.01)。结论 ATGL可能在NAFLD的发生发展中发挥重要作用,并与TNF-α密切相关。     

多发性骨髓瘤患者血清IL-16水平的检测和意义

目的:检测初诊多发性骨髓瘤(MM)患者血清白细胞介素-16(IL-16)的表达水平,探讨IL-16在MM发生发展中的作用及临床意义。方法:采用ELISA法检测MM患者治疗前后血清IL-16和IL-6的水平。结果:MM初诊未治疗组血清IL-16、IL-6水平明显高于对照组(P0.05),且随临床分期增加而依次增高,差异有统计学意义(P0.05),血清IL-16水平与IL-6水平呈正相关(r=0.784,P0.01)。与治疗前相比,治疗有效组(CR+PR)血清IL-16、IL-6水平明显下降(P0.01,t=21.036,19.367),而治疗无效组(无效或死亡)差异无统计学意义(P0.05)。结论:MM患者血清IL-16高表达,与MM的发生、发展有关,有可能成为潜在的治疗靶点。     

降脂益肝冲剂对NASH大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响

目的:观察降脂益肝冲剂对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝脏抵抗素mRNA表达的影响,并探讨抵抗素在大鼠NASH发病机制中的作用.方法:24只♂Wistar大鼠随机分为3组:正常组普通饲料喂养,模型组和治疗组高脂饮食喂养.治疗组在高脂饮食12 wk后给予降脂益肝冲剂,同时模型组和正常组给予等量的生活饮用水灌胃,17 wk末处死各组大鼠.观察动物一般情况,肝组织脂肪变性及炎症活动程度,测定血清TNF-α、ALT、AST,空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI);RT-PCR法检测肝组织抵抗素mRNA相对含量.结果:在正常肝脏组织探测到抵抗素mRNA的微量表达(0.42±0.08),模型组其表达量显著升高(2.14±0.11,P<0.01),与模型组相比治疗组则显著下降(0.90±0.06,P<0.01).模型组抵抗素水平与血清TNF-α、ALT、AST水平、肝脏炎症活动度计分成显著正相关(r=0.873,0.772,0.716,0.892,P<0.05),与ISI无相关.治疗组上述各项指标均得到显著改善.结论:抵抗素与反映肝脏炎症程度及肝功能的指标密切相关,可能在NASH的发病中起重要作用.降脂益肝冲剂对NASH有很好的疗效,抵抗素是其可能的作用靶点.     

急性胰腺炎大鼠不同病情程度Notch-1信号表达特征探讨

目的探讨急性胰腺炎大鼠不同病情程度Notch-1信号表达特征。方法选取60只雄性成年SD大鼠进行研究,注射浓度不同的牛磺胆酸钠(浓度分别为3%与0. 5%),剂量为1 m L/kg,注射速度为0. 06 m L/min,建重症、轻型急性胰腺炎大鼠模型各30只,经PCR逆转录反应法测定Notch-1在重症、轻型急性胰腺炎大鼠中的表达水平,明确其表达量峰值。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析Notch-1 mRNA表达量峰值对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的预测价值。在建模成功后采集3 m L血样,测定血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平,分析SAP大鼠Notch-1mRNA表达量峰值与IL-6、IL-1β的相关性。结果重症组术后4 h、6 h、8 h、24 h、48 h的Notch-1 mRNA表达量显著高于轻型组(P 0. 05)。Notch-1 mRNA峰值预测SAP的曲线下面积为0. 674(标准误=0. 070,P=0. 021,95%CI=0. 536～0. 812)。重症组血清IL-6、IL-1β高于轻型组,差异有统计学意义(P 0. 05)。Pearson线性相关分析提示Notch-1 mRNA峰值与IL-6、IL-1β呈正相关(r=0. 588、0. 696,均P 0. 05)。结论与轻型急性胰腺炎相比,重症患者的Notch-1 mRNA表达量明显增高,且其峰值与SAP大鼠血清IL-6、IL-1β水平有相关性。     

橙皮甙抑制高脂血症大鼠肝脏C反应蛋白分泌

目的观察橙皮甙对高脂血症大鼠血清中C反应蛋白(CRP)含量、肝组织CRP mRNA及蛋白表达的影响。方法将42只SD大鼠随机分为7组(每组6只):对照组、模型组、低、中、高剂量橙皮甙组(低、中、高剂量组)、辛伐他汀组(他汀组)、橙皮甙+辛伐他汀联合组(联合组)。对照组予普通饮食,其他6组均喂饲高脂饮食,按分组灌胃1次/d,持续1 2周。实验6、12周时检测血清CRP、TC、TG的含量。1 2周处死大鼠,采用RT-PCR法、Westernblot法检测大鼠肝脏CRP mRNA及蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠6、1 2周CRP、TC和TG明显升高(P0.01),与模型组比较,低剂量组CRP、TC和TG无显著差异(P0.05);中、高剂量组、他汀组、联合组CRP、TC和TG显著降低(P0.01),联合组较他汀组和高剂量组差异更显著。与对照组比较,模型组大鼠肝脏CRP mRNA及蛋白表达量明显升高(P0.01);与模型组比较,中、高剂量组、他汀组、联合组肝脏CRPmRNA和蛋白显著降低(P0.05);联合组较高剂量组、他汀组更显著(P0.01)。结论橙皮甙降低高脂血症大鼠血清CRP的机制与其抑制肝脏CRP mRNA及蛋白的表达有关,且抑制效应呈剂量依赖性。     

甲泼尼龙对急性坏死性胰腺炎大鼠肾功能的保护作用

目的探讨甲泼尼龙对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肾功能的保护作用。方法将SD大鼠36只随机分为3组,假手术组(SO)、ANP组、甲泼尼龙治疗组(MP)各12只。以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立ANP模型,观察各组血清淀粉酶、白介素6(IL-6)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,以及腹水量、胰腺和肾脏的病理改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达水平。结果ANP组制模后血清IL-6升高,肾脏ICAM-1mRNA表达上调(P<0.01),血清淀粉酶、BUN、Cr分别在制模6h、12h后显著升高。与ANP组比较,MP组血清IL-6、BUN、Cr水平明显下降,ICAM-1mRNA表达下调(P<0.01),肾脏病理改变得到改善。结论甲泼尼龙可抑制血清IL-6水平,下调肾脏ICAM-1基因表达,改善ANP的肾功能障碍。