基于“方证相关”理论的治“痹”经方调控T细胞亚群比较研究

目的:在"方证相关"理论指导下,采用佐剂性关节炎模型平行比较乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤对外周T细胞亚群的影响。方法:采用流式细胞仪检测佐剂性关节炎大鼠外周血中CD3+,CD4+和CD8+T细胞的变化。结果:佐剂性关节炎大鼠外周CD3+和CD4+T细胞无明显变化,而CD8+T细胞显著减少,CD4+/CD8+显著升高,乌头汤和桂枝芍药知母汤均能显著提高异常降低的CD8+T细胞,白虎加桂枝汤仅高剂量能显著提高异常降低的CD8+T细胞,但三方均能使异常增高CD4+/CD8+显著降低;临床等效剂量时降低的CD4+/CD8+作用由强到弱依次是桂枝芍药知母汤、乌头汤和白虎加桂枝汤。结论:临床等效剂量下乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤均对佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞亚群紊乱具有显著的调节作用,提高CD8+T细胞和降低CD4+/CD8+作用依次是桂枝芍药知母汤乌头汤白虎加桂枝汤,与药效学的结果一致,初步提示对外周血T细胞亚群调节强度的差异是乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤3个经方主要药效学效能差异的原因之一。     

基于方证相关理论的治“痹”经方药效学比较研究

目的:比较治"痹"经方乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤主要药效学的差异,为临床合理应用提供依据.方法:采用耳片法、毛细血管通透性亢进法、佐剂性关节炎模型考察3个经方的抗炎作用;采用热板法和扭体法考察3个经方镇痛作用.结果:乌头汤和桂枝芍药知母汤对二甲苯所致的耳廓肿胀、醋酸所致的毛细血管通透性亢进以及佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀均有显著的拮抗作用,也能够显著提高热刺激和化学刺激所致小鼠的痛反应阈值,以乌头汤的作用为强;白虎加桂枝汤亦能明显对抗二甲苯所致的耳廓肿胀和醋酸所致的毛细血管通透性亢进,对佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀在完全弗氏佐剂注射后第3,5天表现出较好的拈抗效用,但抑制作用较乌头汤和桂枝芍药知母汤弱,同时对热刺激和化学刺激所致的小鼠疼痛反应均无抑制作用.结论:乌头汤、桂枝芍药知母汤具有显著的抗炎和镇痛作用,白虎加桂枝汤具有较好的拮抗急性炎症的作用,对完全弗氏佐剂所致的免疫性炎症模型早期有一定的拮抗效应,但无明显的镇痛作用.3个经方相比较,乌头汤抗炎作用最强,桂枝芍药知母汤次之,白虎加桂枝汤最弱.提示3个经方主要药效学的差异可能与其寒热药性有关.     

基于“方证相关”理论的治“痹”经方调控TLR/TRAF信号通路的比较研究

目的:在方证相关理论指导下,比较乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤调控佐剂性关节炎大鼠脾脏TLR2,TRAF6,Faslg基因表达的差异。方法:建立佐剂性关节炎大鼠模型,采用实时荧光定量PCR技术,以18 sRNA为内参基因,用SYBR G reen I染料法检测脾脏TLR2,TRAF6,Faslg基因相对表达,2-ΔΔCT法进行进行计算和数据分析。结果:佐剂性关节炎大鼠脾脏TLR2,TRAF6,Faslg基因均较空白组显著高表达,乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤各剂量均能显著抑制或降低模型TLR2,TRAF6,Faslg基因的异常高表达,临床等效剂量时降低的TLR2和Faslg基因表达作用由强到弱依次是乌头汤桂枝芍药知母汤白虎加桂枝汤,但降低TRAF6作用强度趋势刚好与TLR2和Faslg基因相反。结论:乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤均对佐剂性关节炎大鼠脾脏异常高表达TLR2,TRAF6,Faslg基因有下调作用,但强度存在差异,与药效学和调节T细胞亚群趋势较为一致,提示对TLR2/TRAF6信号通路和凋亡受体Faslg基因下调可能是3个经方药效学及对外周T细胞亚群的不同调节强度的原因之一。     

桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎治疗作用的实验研究

目的:观察桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:以弗氏完全佐剂诱导产生免疫性关节炎模型,用不同剂量桂枝芍药知母汤(GSZ汤20.6、10.3g.kg-1)给模型动物灌胃用药,观察用药后动物致炎对侧膝关节滑膜组织病理改变与RANKL表达。结果:桂枝芍药知母汤用药4周后,可明显减轻关节肿胀程度,使关节指数减小(P<0.05orP<0.01);病理镜检显示,大鼠膝关节滑膜细胞和纤维组织增生减轻,浸润细胞数减少;滑膜组织RANKL表达下降(P<0.01),本实验条件下,GSZ汤20.6g.kg-1剂量时的疗效与MTX相当。结论:桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠的关节损伤有治疗和保护作用,其机制可能与抑制炎症反应并降低RANKL表达有关。     

桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠TNF-α与Bcl-2表达的影响

目的:观察桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠血清中TNF-α与关节滑膜组织Bc l-2表达的影响,并初步探讨其治疗机制。方法:以弗氏完全佐剂诱导产生免疫性关节炎模型,用不同剂量桂枝芍药知母汤(GSZ汤20.6、10.3 g/kg)给模型动物灌胃用药,观察用药后动物血清TNF-α水平与致炎对侧膝关节滑膜组织Bc l-2表达。结果:桂枝芍药知母汤用药4w后,可明显使关节指数减小(P<0.05或P<0.01);使模型大鼠血清TNF-α水平降低(P<0.01);免疫组化染色镜检显示,大鼠膝关节滑膜组织Bc l-2阳性细胞数减少、阳性细胞着色强度减弱(P<0.05或P<0.01),本实验条件下,GSZ汤20.6 g/kg剂量时的疗效与MTX相当。结论:桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制TNF-α分泌,降低Bc l-2表达有关。     

桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎大鼠IL-6、TNF-α表达的影响

目的：观察桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎大鼠血清促炎因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响,探讨该方治疗急性痛风性关节炎的作用机制。方法：将40只大鼠随机分为4组,空白对照组、模型对照组、秋水仙碱对照组、桂枝芍药知母汤组各10只,在受试大鼠右侧踝关节腔内注入尿酸钠溶液,形成痛风性关节炎模型;空白对照组以同样方法注射0．2mL生理盐水;秋水仙碱对照组、桂枝芍药知母汤组分别在造模前予秋水仙碱、桂枝芍药知母汤灌胃,空白对照组、模型对照组分别以等剂量生理盐水灌胃。于造模72h后断尾采血,抽取关节液,观察各组血清IL-6、TNF-α含量的变化。结果：与空白对照组比较,模型对照组血清IL-6、TNF-α升高（P〈0．01）;与模型对照组比较,桂枝芍药知母汤组血清IL-6、TNF-α含量降低（P〈0．01）;与秋水仙碱对照组比较,桂枝芍药知母汤组血清IL-6、TNF-α含量降低（P〈0．05）。结论：桂枝芍药知母汤可能是通过抑制IL-6、TNF-α的表达来达到抑制急性痛风性关节炎。     

新世纪经方治疗专科专病回顾(七)——颈肩腰腿痛

经方备受古今医家推崇,其在颈肩腰腿痛的治疗有独特优势,如桂枝芍药知母汤、乌头汤、白虎加桂枝汤等至今仍在临床广泛使用。本文检索了2000年至今的文献,按其主要表现,分证对经方治疗颈肩腰腿痛进行归纳总结。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1β活性的影响

目的观察桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机理。方法以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度、关节炎指数观察桂枝芍药知母汤大、中剂量组的治疗效果;采用ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性,小鼠胸腺细胞法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)活性,探讨其作用机理。结果桂枝芍药知母汤大、中剂量组均可使大鼠踝关节肿胀程度和关节炎指数明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.01);同时发现模型组大鼠血清TNF-α含量及IL-1β活性明显升高,治疗组起下调作用,接近正常组水平,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论TNF-α、IL-1β异常增高,与RA发病密切相关。桂枝芍药知母汤可以降低CIA大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β浓度,从而抑制或控制RA病情发展。     

经方治痛风性关节炎

本文通过研讨痛风性关节炎的病因病机,选取经方白虎加桂枝汤和桂枝芍药知母汤加减治疗该病,疗效真实有效,宜在临床广泛应用     

桂芍知母汤及其加味对佐剂性关节炎大鼠踝关节病理变化及TNF-α、IL-1β、IL-10的影响

目的:研究桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎大鼠的治疗效果,并探讨其作用机理。方法:采用佐剂性关节炎大鼠模型,测量足肿胀度,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平,并观察踝关节及周围组织病理。结果:与模型组相比,布洛芬组(63mg/kg)、桂芍知母汤组(17.325 g/kg)、桂芍知母加活血组(21g/kg)与桂芍知母加藤类组(25.2g/kg)足肿胀度均能明显下调,血清TNF-α和IL-1β水平均显著降低,IL-10水平显著升高,并对关节滑膜炎性细胞浸润、结缔组织增生等有不同程度改善。结论:桂芍知母汤及加味均能有效缓解佐剂性关节炎大鼠局部炎症反应,其机理可能与减少促炎因子TNF-α和IL-1β的合成,升高抑炎因子IL-10有关。     

桂枝芍药知母汤对转基因小鼠胶原诱导性关节炎CRP、IL-2的影响

目的:观察经方桂枝芍药知母汤对HLA-DR4转基因小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)C反应蛋白(CRP)、白细胞介素2(1L-2)表达水平的影响,以探讨桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机理.方法:采用HLA-DR4转基因小鼠CIA动物模型,评价造模后桂枝芍药知母汤早期给药对CRP、IL 2的影响.结果:与模型组比较,该方能明显降低RA转基因小鼠的CRP、IL-2(P＜0.05);同时,RA转基因阴性鼠中药组与转基因阳性鼠中药组比较,CRP明显降低(P＜0.05).结论:桂枝芍药知母汤有改善RA的病情和症状,抑制IL-2和CRP分泌的作用,这可能是本方治疗RA取得良好疗效的机理之一.     

寒湿环境对佐剂关节炎模型大鼠炎症反应的影响

目的:考察寒湿环境对佐剂性关节炎模型大鼠炎症反应的影响及乌头汤的干预回调作用,综合揭示"风寒湿三气杂至合而为痹"的科学内涵。方法:采用佐剂性关节炎模型复合寒湿环境制备寒痹动物模型,从造模第6天开始每隔4 d测定大鼠足容积并计算足肿胀率,第16天开始给予乌头汤干预治疗30 d,第45天观察踝关节病理形态学及检测大鼠血清白介素-6(IL-6)、类风湿因子(RF)、抗-环瓜氨酸多肽抗体(anti-CCP)的含量水平。结果给予大鼠寒湿环境刺激后,寒湿对照组与模型对照组比较,足肿胀率、病理损伤程度以及血清因子IL-6、RF、anti-CCP均无统计学意义,但均呈上升趋势;乌头汤治疗后与寒湿对照组比较,大鼠足肿胀率31 d后显著下降,大鼠踝关节损伤明显改善,血清因子IL-6、RF、anti-CCP水平明显降低。结论:寒湿环境通过加重完全弗氏佐剂性关节炎大鼠关节炎症反应,促进RA疾病的发展,且乌头汤具有较好的回调干预作用。     

桂芍知母汤及其加味对佐剂性关节炎大鼠Th1/Th2漂移的影响

目的:通过对桂芍知母汤及加味对佐剂性关节炎大鼠INF-γ、IL-4、T-bet、Gata-3表达影响的研究,分析其对Th漂移的影响。方法:以桂芍知母汤及桂芍知母加活血方、桂芍知母加藤类方为干预因素,采用佐剂性关节炎大鼠模型,检测大鼠足肿胀度的变化,ELISA法检测血清INF-γ、IL-4水平,Rt-QPCR检测足掌软组织T-bet、Gata-3mRNA表达;以INF-γ/IL-4、T-bet/Gata-3比值代表Th漂移方向。结果:桂芍知母组(17.325g/kg)、桂芍知母加活血组(21g/kg)与桂芍知母加藤类组(25.2 g/kg)均能显著降低足肿胀度,下调INF-γ,上调IL-4;使T-bet表达减弱,Gata-3表达增强(P<0.05或P<0.01),INF-γ/IL-4与T-bet/Gata-3比值趋势相同,相关性分析提示两者有密切关系。结论:桂芍知母汤及加味能有效缓解AA大鼠局部炎症反应,其免疫调控机理与促进Th细胞向左漂移有关。     

桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎大鼠抗炎作用机制的探讨

目的观察桂枝芍药知母汤对大鼠急性痛风性关节炎的疗效以及对炎性介质前列腺素(PGE2)和白三烯(LTB4)含量的影响,探讨其抗炎作用机制。方法踝关节注射法造模,雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,桂枝芍药知母汤高(2g·kg-1·d-1)、中(1mg·kg-1·d-1)、低(0.5mg·kg-1·d-1)剂量组,秋水仙碱组(0.1mg·kg-1·d-1),痛风舒组(0.3mg·kg-1·d-1)。在受试大鼠右侧踩关节腔内注入尿酸钠(每只0.01g)溶液,形成痛风模型。空白组以同样方法注射空白溶剂。造模12h后给药,连续给药5天后腹主动脉取血,取大鼠踝关节做病理切片,比较各组大鼠关节体积,观察各组血清中PGE2和LTB4的含量。结果桂枝芍药知母汤组大鼠踝关节体积变小,血清中PGE2和LTB4的含量明显低于模型对照组。结论桂枝芍药知母汤可抑制炎症因子PGE2和LTB4,并对大鼠急性痛风性关节炎有显著疗效。     

通痹灵对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方制剂通痹灵(以桂枝芍药知母汤为基础)对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法:采用半定量RT-PCR法测定佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA表达水平。结果:通痹灵明显抑制了佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MCP-1 mRNA的表达,提示通痹灵治疗类风湿性关节炎的分子机制与抑制MCP-1基因表达有关。     

桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎56例

目的 观察桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎的临床疗效.方法 类风湿性关节炎患者56例口服桂枝芍药知母汤,疗程30d.结果 患者服用1个月后总有效率92.86%.结论 桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎有较好的疗效.     

桂枝汤与桂枝加芍药汤量效关系的实验研究

建立小鼠消化性溃疡模型,并用桂枝汤与桂枝加芍药汤对两组消化性溃疡小鼠进行灌胃治疗,比较两组小鼠在一般情况、病理切片、免疫组化等方面的差异,进而从实验的角度揭示桂枝汤与桂枝加芍药汤的量效关系。桂枝汤与桂枝加芍药汤对于小鼠消化性溃疡具有一定的治疗作用,但二者的作用机制不同,桂枝汤侧重在免疫调节,桂枝加芍药汤侧重在缓解胃痉挛。     

桂枝芍药知母汤对急性痛风性关节炎患者血浆炎症因子的影响

目的 观察桂技芍药知母汤对急性痛风性关节炎患者血浆炎症因子的影响.方法 将患者随机分为两组,均予以低嘌呤饮食、多饮水,禁止饮酒、停用利尿剂和糖皮质激素等药物治疗,并口服秋水仙碱;观察组在此基础上加用桂枝芍药知母汤加减口服.疗程均为2周.比较两组疗效及血浆IL-1、IL-6、TNF-α水平变化.结果 观察组总有效率明显高于对照组,其血浆IL-1、IL-6、TNF-α水平下降幅度较对照组更明显.结论 桂枝芍药知母汤治疗急性痛风性关节炎的疗效确切,能明显改善患者的临床症状,作用机制与改善局部炎症反应有关.     

张仲景运用桂枝组方治疗痹证探析

痹证是以肢体关节肌肉酸胀、麻木、重着、屈伸不利或关节灼热、肿大等为主症的一类病症。仲景擅用桂枝组方治疗痹证,其中桂枝加葛根汤疏风解肌、散寒宣痹,桂枝芍药知母汤祛风除湿、通阳行痹,白虎加桂枝汤清热通络、宣痹止痛,黄芪桂枝五物汤益气温经、和血通痹。可见,仲景认为痹证和太阳病关系密切,湿邪为本病重要病理因素,亦多责之营卫不和。     

乌头汤及其配伍对AA大鼠血清IL-1β、TNF-α的影响

目的:探讨乌头汤及其各配伍组对佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量的影响。方法:用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型,并用乌头汤及其不同配伍的各组药物进行干预,采用放射免疫法测定大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕的水平明显升高;与模型组相比,经过乌头汤及其配伍各组、MTX组治疗干预后,大鼠血清中IL-1β、TNF-浕的水平明显下降;上述作用以乌头汤为强,各个配伍组与之相较有明显的差异。结论:乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠血清中细胞因子IL-1β、TNF-浕有抑制作用。