乐卡地平对老年大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)发生衰老过程中,乐卡地平对细胞增殖和凋亡的影响和作用机制。方法取原代培养的4月龄和24月龄Wistar大鼠VSMCs分别为青年组、老年组,青年和老年大鼠加乐卡地平10μmol/L处理24 h分为青年实验组和老年实验组。采用免疫荧光染色、Western blot法、流式细胞分析仪和Real-time共聚焦等技术检测各组细胞核内p21蛋白结构含量的变化、细胞的增殖及凋亡指数和凋亡率。结果与青年组比较,青年实验组大鼠VSMCs分裂指数明显下降,相差13倍(P<0.05)。与青年组大鼠比较,乐卡地平对老年组大鼠的细胞内钙的抑制作用更强。与老年组比较,老年实验组大鼠细胞分裂指数和凋亡指数降低,差异有统计学意义[(2.08±0.22)%vs(0.7±0.06)%,P<0.05],凋亡率明显下降,差异有统计学意义[(16.1±2.04)%vs(2.3±0.88)%,P<0.01]。与青年组和老年组比较,老年实验组大鼠细胞核内p21蛋白随乐卡地平剂量增加而增强,蛋白结构发生变化,增殖性核抗原表达减少。结论乐卡地平通过改变p21蛋白的结构和含量表达,从而抑制增殖性核抗原表达,抑制VSMCs的增殖,降低老年大鼠VSMCs凋亡,减缓衰老。     

健康大鼠血管衰老性重塑与血管衰老相关基因的关系

目的通过研究健康大鼠血管衰老性重塑形态学变化及衰老相关基因表达,探讨血管衰老性重塑可能的分子调控机制,为临床有效干预血管衰老提供分子靶点。方法观察主动脉组织形态及内皮细胞显微结构变化,应用Western blotting分析4、10、16月和24月龄大鼠血管重塑p16INK4a和p21cip1蛋白表达变化。结果随增龄,大鼠主动脉管壁增厚,纤维化程度增高,内皮细胞形态呈现衰老改变,p16INK4a和p21cip1蛋白表达呈时间依赖性上调。结论血管衰老性重塑的分子机制之一可能与上调细胞周期蛋白p16INK4a和p21cip1的表达有关。进一步阐明其调控机制可为延缓血管衰老,防治动脉粥样硬化提供理论依据。     

增龄对大鼠心脏组织炎症小体信号通路的改变

目的观察衰老所致的心脏纤维化和炎症小体活化的变化,研究增龄对大鼠心脏形态学变化的影响及机制。方法老年组为正常饲养20月龄的SD大鼠,青年组为正常饲养8周龄的SD大鼠,每组5只。取大鼠心脏组织,通过Masson染色法检测心脏组织胶原沉积,通过免疫组织化学法评价心脏组织衰老标志物p16和p21的表达,通过免疫组织化学和免疫荧光法评价心脏组织炎症小体相关蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白介素-1β(IL-1β)的表达。采用Image-pro plus 6.0软件对图像进行分析,SPSS 13.0软件进行数据处理,组间比较采用单因素方差分析。结果与青年组相比,老年组大鼠心脏组织胶原沉积增加[(12.54±2.8)%和(45.12±7.63)%]、衰老标志物p16[(21.45±5.21)%和(38.71±6.89)%]和p21[(19.23±7.32)%和(41.01±10.21)%]表达增加,NLRP3炎症小体相关蛋白Caspase-1[(10.23±7.12)%和(42.01±8.91)%]和IL-1β[(5.27±1.02)%和(14.62±3.87)%]表达上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论老年大鼠心脏组织纤维化反应发生与炎症小体信号通路激活密切相关。     

干扰素诱导蛋白p204在大鼠血管壁成分细胞的表达

目的 研究干扰素诱导蛋白p204在鼠血管壁各成分细胞的基础表达及干扰素诱导性.方法 通过免疫组织化学染色及Western blot观察p204蛋白在成年昆明小鼠及Wistar大鼠或SD大鼠血管壁的表达;免疫细胞化学法及Western blot观察p204在培养的SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)和血管外膜成纤维细胞(VAF)的表达及分布;逆转录-聚合酶链反应观察干扰素诱导VSMC上p204 mRNA(Ifi204)表达特点.结果 免疫组织化学染色表明p204抗原在成年昆明小鼠心内小静脉及小动脉血管壁内皮细胞、内膜、中膜及外膜的细胞胞浆中呈阳性反应,p204在成年Wistar大鼠主动脉内皮、VSMC及外膜均染色阳性,弹性纤维膜未着色.Western blot表明p204在SD大鼠主动脉有基础表达,其在VAF的基础表达量明显高于VSMC,免疫细胞化学法表明p204在鼠主动脉VSMC细胞同时表达于细胞质及细胞核.应用干扰素α1.0×106 IU/L刺激VSMC细胞8h即诱导Ifi04大量表达,干扰素α作用24h时表达更强烈.结论 p204在小鼠及大鼠血管壁全层和培养的VSMC及VAF均存在基础表达,p204在VSMC上表达并不局限于细胞核,且易被干扰素α诱导其mRNA表达上调.p204在鼠血管壁细胞存在表达提示其在血管生理及血管增殖性疾病的发生发展中可能有着潜在的重要作用.     

运动缓解老年高血压大鼠脑动脉CaL通道的功能重构

目的探讨运动对衰老高血压大鼠脑动脉平滑肌Ca_L通道功能的影响。方法雄性3月龄正常血压(WKY)大鼠、自发性高血压大鼠(SHR)各18只;16月龄WKY大鼠和SHR各36只,再随机分成安静组和运动组,各18只。运动组以16~18 m/min进行8周跑台运动(每天60 min,每周5天)。8周后,测定各组大鼠体重、心脏重量,采用全细胞膜片钳技术和Western blot测定大鼠脑动脉Ca_L通道功能和Ca_L通道α1C亚基蛋白的表达。结果(1)SHR心率和收缩压均显著高于同龄WKY大鼠,老年大鼠收缩压较同类别青年组均显著增高;青年组SHR脑动脉Ca_L通道电流密度及其α1C亚基蛋白表达均显著高于WKY大鼠,在老年组差异无显著性,且均低于同类别青年组。(2)运动后衰老大鼠心重指数(心脏重量/体重)较同类别安静组均显著增加;运动显著降低衰老SHR收缩压,增加衰老SHR脑动脉Ca_L通道电流密度及其α1C亚基蛋白表达。结论衰老SHR脑动脉Ca_L通道功能下调,运动缓解衰老引起的Ca_L通道功能重构。     

增龄和高血压经PI3K/Akt和MAPK信号通路间平衡介导调控血管平滑肌细胞的表型转换

目的探究增龄和高血压对胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)表型转换的影响及磷脂酰肌醇激酶(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对VSMC表型的调控。方法选取1、3、9、16月龄的雄性Wistar Kyoto大鼠(WKY)和自发性高血压大鼠(SHR)各12只,尾动脉无创测定血压,取各组大鼠的胸主动脉进行实验。HE染色测量胸主动脉的管壁厚度;免疫组织化学染色检测VSMC表型标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMactin)、调宁蛋白、骨桥蛋白(OPN)的表达和分布;Western blot检测VSMC表型标志蛋白α-SM-actin、调宁蛋白、OPN及信号蛋白p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-42/44ERK、p-p38MAPK的表达量。结果 HE染色结果显示,增龄导致管壁厚度增加,且在9月龄时WKY和SHR出现显著差异(P0.01)。免疫组织化学染色和Western blot结果表明,3月龄后,WKY和SHR的α-SM-actin、调宁蛋白表达量随月龄增加出现下调,而OPN出现上调;p-Akt、eNOS的蛋白表达量随月龄增加逐渐下调,p-42/44ERK、p-p38MAPK蛋白表达量随月龄增长逐渐上调,且3月龄时两组已有显著差异(P0.01)。结论增龄和高血压均导致大鼠胸主动脉VSMC收缩表型标志蛋白α-SM-actin、调宁蛋白的表达下调,合成表型标志蛋白OPN的表达上调,二者的交互作用更显著。VSMC的表型转换可能是通过PI3K/Akt和MAPK信号通路间的平衡作用进行调控的。     

老年大鼠主动脉对胰岛素敏感性的改变及其机制

目的观察大鼠主动脉对胰岛素敏感性的增龄改变并分析其可能机制。方法老年组采用老年（18月龄）SD大鼠20只,随机选取成年（15周龄）SD大鼠20只为对照组。采用离体血管灌流技术,观察胸主动脉对胰岛素反应性的变化,并同时测定两组主动脉血管一氧化氮（NO）释放量及血管一氧化氮合酶（eNOS）活性;免疫组织化学法及Western Blot法检测老年组及成年组胸主动脉eNOS的蛋白表达变化。结果胰岛素可以浓度依赖性舒张成年大鼠胸主动脉,舒血管作用具有内皮依赖性。与之相比,老年大鼠主动脉对胰岛素的舒张反应显著下降（P<0.05）。同时发现,与成年组相比,老年组NO释放量以及eNOS活性显著降低（P<0.05）,免疫组织化学染色显示老年组主动脉eNOS的蛋白表达显著降低;而Western Blot检测发现老年组血管eNOS磷酸化水平显著降低（P<0.05）。结论血管组织内源性eNOS-NO系统活性下降可能是衰老导致的血管胰岛素敏感性下降的重要机制。     

人参皂甙Rg3对血管平滑肌细胞衰老的影响及机制

目的探讨人参皂甙Rg3对D-半乳糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)衰老的影响及机制。方法取SD大鼠胸主动脉中层,分离并原代培养VSMC,选取3~6代VSMC,通过D-半乳糖共孵育的方法诱导细胞衰老,β-半乳糖苷酶染色和透射电镜鉴定衰老VSMC;VSMC随机分成对照组、D-半乳糖组、Rg3高浓度组、Rg3低浓度组,Western blot方法检测p16、p21和p53蛋白的表达水平,流式细胞术检测细胞周期。结果与对照组比较,D-半乳糖组β-半乳糖苷酶阳性细胞明显升高[(58.67±2.52)%vs(4.67±0.58)%,P<0.05]。电镜下表现为细胞核膜内折,细胞线粒体肿胀,脂褐素堆积;p16、p21和p53蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞周期停滞在G0/G1期。与D-半乳糖组比较,Rg3低浓度组和Rg3高浓度组β-半乳糖苷酶阳性细胞明显减少,p16、p21和p53蛋白表达水平明显降低,G0/G1期细胞数明显减少(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3可抑制VSMC衰老,其机制可能部分通过抑制细胞生长周期p16INK4a/Rb、p53-p21Cip1/Waf1信号通路来实现。     

p21~(WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏组织的增龄性变化及意义

目的 研究p21野生型p53活化片段1/细胞周期蛋白依赖性激酶影响蛋白1/衰老细胞衍生抑制剂1(p21WAF1/CIP1/SDI1)在大鼠肾脏中随年龄增长的表达变化规律. 方法 取3月龄、12月龄及24月龄健康雄性Wistar大鼠肾组织进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性染色,TUNEL法检测细胞凋亡,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法(Western blot assay)分别在基因及蛋白质表达水平上检测肾脏组织中p21WAF1/CIP1/SDI1的表达变化,并用免疫组化法检测p21WAF1/CIP1/SDI1在肾脏组织中的表达与定位. 结果 大鼠肾脏组织SA-β-gal活性随年龄增长逐渐增强,凋亡细胞也随年龄增长逐渐增加(P＜0.05);p21WAF1/CIP1/SDI1 mRNA表达随年龄增长逐渐增强,不同月龄比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western印迹亦显示p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达随鼠龄增加逐渐增强(P＜0.05).免疫组化结果显示,p21WAF1/CIP1/SDI1蛋白表达于大鼠肾小球足细胞,其在肾小管与间质细胞中也有表达,且随年龄增长表达增加(P＜0.05). 结论 p21WAF1/CIP1/SDI1在大鼠肾脏组织中的表达随年龄增加而增强,可作为肾脏组织中重要的衰老指标.     

烟酰胺单核苷酸对D-半乳糖诱导肾脏衰老的作用研究

目的 探讨烟酰胺单核苷酸(NMN)对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠肾脏衰老的作用及其可能的抗炎机制。方法 将24只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、NMN组、D-gal组与D-gal+NMN组。采用皮下注射D-gal的方法构建肾脏衰老模型。记录各组小鼠体质量；采用苏木精-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察小鼠肾脏病理损伤和纤维化；应用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估组织衰老水平；使用免疫组化法(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察衰老指标p16、p21的定位及表达；使用Western blot测定抗衰老蛋白沉默信息调节因子1(SIRT1)及炎症指标肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)的表达水平。采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析。根据数据类型,分别采用单因素方差分析、LSD-t检验或Kruskal-Wallis检验进行组间比较。结果 NMN对D-gal组小鼠体质量未产生显著影响(P>0.05)。与对照组比较,D-gal组肾脏出现肾小球萎缩,肾小管肿胀、扩张和间质纤维化改变。IHC结果示p16、p21表达增加,并且主要位于肾小管,同时可见SA-β-gal阳性率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果示D-gal组肾脏衰老蛋白p16、p21及炎症指标TNF-α、IL-1β、NF-κB表达上调,而抗衰老蛋白SIRT1表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。NMN处理后,D-gal组肾小球萎缩,肾小管肿胀、扩张及间质纤维化程度明显降低,衰老及炎症指标显著下降,此外,SIRT1下调及SA-β-gal阳性率增加均得到缓解,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NMN可能通过促进SIRT1表达和抑制NF-κB途径介导的炎症反应,延缓D-gal诱导的肾脏衰老。     

衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ表达水平的影响

目的观察衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxlsome proliferator activated receptor γ,PPARγ)表达水平的影响及阿托伐他汀的干预作用。方法选择30只20月龄的Wistar大鼠,随机分为老年组、大剂量阿托伐他汀处理组(大剂量组,10 mg·kg~(-1)·d~(-1))和小剂量阿托伐他汀处理组(小剂量组,1mg·kg~(-1)·d~(-1),每组10只;另选10只3月龄Wistar大鼠为青年组。小剂量组和大剂量组大鼠每天给予相应剂量的阿托伐他汀灌胃,共4个月。老年组给予相同体积的生理盐水灌胃,共4个月,青年组未灌胃。采用RT-PCR方法检测大鼠心肌PPARγ mRNA含量,用Western blot方法检测大鼠心肌PPARγ蛋白表达水平。结果与青年组比较;老年组大鼠心肌PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与老年组比较,小剂量组和大剂量组大鼠PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论衰老大鼠心肌PPARγ表达水平显著降低,阿托伐他汀可显著上调老年大鼠心肌PPARγ的表达。     

艾塞那肽通过下调p22phox、NOX4和TGF-β1减轻1型糖尿病大鼠主动脉的氧化应激损伤

目的观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂艾塞那肽对1型糖尿病大鼠主动脉NADPH氧化酶亚单位表达及其氧化应激损伤作用的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=7)和造模组(n=23)。采用链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病大鼠模型。将造模成功的19只1型糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组(n=10)和艾塞那肽治疗组(n=9)。艾塞那肽治疗组给予艾塞那肽5μg/kg皮下注射,2次/天;正常对照组和糖尿病对照组给予等量的生理盐水皮下注射。药物干预8周后,处死动物。用实时荧光定量聚合酶链反应法(RTPCR)检测主动脉p22phox和NOX4 mRNA的表达,用免疫组织化学法检测主动脉的转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。标本切片用HE染色后,行组织形态学检查。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组大鼠主动脉p22phox和NOX4 mRNA表达显著升高,TGF-β1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与糖尿病对照组比较,艾塞那肽治疗组大鼠主动脉p22phox和NOX4 mRNA表达降低(P<0.05),主动脉TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05)。与正常对照组比较,糖尿病对照组大鼠主动脉内膜和中膜明显增厚,内膜不光滑,内皮细胞突起,形态不规则,平滑肌细胞排列紊乱;与糖尿病对照组比较,艾塞那肽治疗组大鼠主动脉内膜仅局限性增厚不光滑,内皮细胞与平滑肌细胞排列较整齐,中膜轻度增厚。结论艾塞那肽通过下调1型糖尿病大鼠主动脉p22phox、NOX4和TGF-β1的表达,减轻氧化应激对主动脉的损伤,对糖尿病大鼠血管产生保护作用。     

p21在小鼠急性呼吸窘迫综合征后肺纤维化中的作用

目的探讨p21在脂多糖(LPS)所致小鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)后肺纤维化中的作用。方法本研究为实验研究。SPF级C57BL/6J小鼠共36只, 采用完全随机设计将小鼠分为生理盐水对照组、LPS-0 h组、LPS-6 h组、LPS-24 h组、LPS-48 h组和LPS-72 h组, 每组6只。HE染色观察纤维化程度, Masson染色评估纤维性增生的分布, 免疫组织化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原及p21蛋白的表达, 蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中α-SMA、p21蛋白的表达。用10 mg/kg LPS气管滴药作用小鼠24 h后提取肺成纤维细胞, 使用Lipofectamine 2000转染试剂转染细胞, 敲低p21表达, 分为对照组(si-control)、si-control+LPS组(si-control+LPS-24 h)、LPS组(LPS-24 h)和si-p21+LPS组(siRNA-p21+LPS-24 h)。Western blot检测肺成纤维细胞中α-SMA、p21、p-IκBα及p-p38蛋白的表达。结果 LPS-24...     

MicroRNA-124抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及分子机制研究

目的探讨MicroRNA-124(miR-124)对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用及可能的调控机制。方法选择10只11周龄雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)作为实验组及同龄的10只SPF级Wistar大鼠(WKY)为对照组。采用组织贴片法原代培养SHR和WKY主动脉平滑肌细胞。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-124在两组主动脉平滑肌细胞间的表达差异。将miR-124模拟物或模拟物阴性对照转染SHR主动脉平滑肌细胞,分析过表达miR-124对血管平滑肌细胞增殖的影响。通过数据库及生物信息学软件预测miR-124的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因系统进行验证。通过qRT-PCR和Western blot检测靶基因Meox2 mRNA及蛋白表达变化。采用RNA干扰技术,观察敲低Meox2表达对血管平滑肌细胞增殖的影响。结果 MiR-124在SHR主动脉平滑肌细胞中的表达为WKY主动脉平滑肌细胞的0.22倍(P0.01)。体外过表达miR-124可明显抑制SHR主动脉平滑肌细胞的增殖。经生物信息学分析及体外双荧光素酶报告基因系统检测,证实Meox2是miR-124的靶基因。过表达miR-124后SHR主动脉平滑肌细胞中Meox2 mRNA的表达为阴性对照组的0.29倍(P0.01);Western blot结果显示,Meox2蛋白表达水平亦明显降低。干扰Meox2的表达亦可降低SHR主动脉平滑肌细胞的增殖。结论 MiR-124在SHR中表达下调,其可能通过介导Meox2调控主动脉平滑肌细胞的增殖进而抑制高血压病变的发生过程。     

模拟失重大鼠胸主动脉平滑肌细胞凋亡的变化及间断性人工重力对抗的影响

目的:观察模拟失重大鼠胸主动脉平滑肌细胞凋亡的变化及间断性人工重力对其影响。方法: 将27只SD大鼠随机分为3组（每组9只）,即对照组(CON)、模拟失重组(SUS)及站立对抗组(STD)。以尾部悬吊大鼠模拟失重3周,同期每天悬吊23 h、站立1 h模拟间断性人工重力对抗的效果。用TUNEL染色法检测SUS组、同步对照(CON)组及STD组大鼠胸主动脉平滑肌细胞的凋亡情况;用Western blot法检测各组大鼠胸主动脉组织中Bad、FasL及Caspase-3蛋白表达的变化。结果: 与CON组比较,SUS组大鼠胸主动脉平滑肌细胞TUNEL染色阳性的细胞明显减少(P<0.01);STD组TUNEL染色阳性的细胞较CON组及SUS组显著增加（P<0.01）。SUS组Bad的表达较CON组和STD组显著减少（P<0.05）,STD组Bad的表达较CON组有增加的趋势,但无统计学差异。SUS组FasL及Caspase-3的表达较CON组显著降低(P<0.05);STD组FasL及Caspase-3的表达较CON组及SUS组显著增高(P<0.01)。结论: 模拟失重可减少大鼠胸主动脉平滑肌细胞凋亡,每日1 h的-Gx对抗可使胸主动脉平滑肌细胞的凋亡增加,提示血管组织平滑肌细胞的凋亡在失重引起的动脉血管适应性重构中可能发挥重要作用。     

老年大鼠Clara细胞的分泌蛋白CC16 mRNA及CC16蛋白表达

目的探讨老年大鼠Clara细胞的分泌蛋白CC16 mRNA及CC16蛋白的表达。方法观察老年组大鼠(26月龄)及青年组大鼠(3月龄)光镜下肺组织结构、肺组织CC16 mRNA表达及细支气管CC16蛋白的表达。结果老年组大鼠细支气管上皮细胞排列欠规则,肺组织呈轻度肺气肿表现。老年组大鼠肺组织CC16 mRNA表达为3．08±1．71,较青年组的10．02±4．66下降,两组比较差异有统计学意义(P<0．05)。老年组大鼠终末细支气管CC16阳性的上皮细胞百分比[(35．00±7．58)％]较青年组[(55．20±6．10)％]降低(P<0．05),呼吸性细支气管CC16阳性的上皮细胞百分比[(47．20±8．01)％]较青年组[(63．00±7．11)％]也降低(P<0．05)。结论老年大鼠CC16 mRNA及蛋白表达下降,可能参与了肺老化过程。     

奥美沙坦酯对自发性高血压大鼠主动脉衰老的作用

目的探讨奥美沙坦酯对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉衰老的作用。方法实验大鼠分为对照组（WKY组）、SHR组和SHR奥美沙坦酯处理组（OLM组）。每2周测鼠尾动脉压,饲养6周后处死取主动脉组织,一部分制做冰冻切片后β-半乳糖苷酶（β-gal）染色,其余用Western blot法测定Ras、p53、p21及β-actin蛋白的表达。结果与WKY组相比,各检测时间点SHR组血压升高（P〈0.05）,给药后OLM组血压降低（P〈0.05）。WKY组主动脉β-gal染色未见蓝染颗粒;SHR组可见大量蓝染颗粒;OLM组也可见蓝染颗粒,但与SHR组相比明显减少。与WKY组相比,SHR组Ras、p53及p21的蛋白表达增加（P〈0.05）,OLM组上述指标降低（P〈0.05）。结论 SHR通过Ras-p53/p21途径导致主动脉衰老,奥美沙坦酯对其具有显著的抑制作用,在降低血压的同时抑制血管病变的发生。     

AngⅡ/NLRP3炎性小体信号通路介导高血压大鼠血管老化的机制

目的 通过观察自发性高血压大鼠(SHR)与对照组大鼠血管紧张素(Ang)Ⅱ/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白(NLRP)3炎性小体信号通路指标的不同表达，探讨高血压(HTN)对血管老化(VA)影响的可能机制。方法 实验分为Wistar对照组(4周龄)、SHR模型组(12周龄)和WKY对照组(12周龄),体质量180～200 g,正常饲料喂食，持续8 w。尾袖法记录血压；胸主动脉和主动脉弓取材，进行苏木素-伊红(HE)和Masson染色，光镜下观察主动脉病理形态和血管胶原纤维变化；取胸主动脉进行Ca²⁺/Mg²⁺ ATP、Na⁺/K⁺ ATP的酶活性检测；Western印迹检测各组血管组织AngⅡ、NLRP3、平滑肌(SM)22α、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP抑制因子(TIMP)-1、质膜Ca²⁺-ATP酶(PMCA)3的蛋白表达。结果 HE和Masson染色显示，Wistar对照组胸主动脉及主动脉弓外膜结构清楚，中膜平滑肌细胞排列规整，内膜较薄；WKY对照组胸主动脉及主动...     

过氧化物酶体增殖物激活受体在代谢综合征大鼠血管重构和功能改变中的作用

目的 研究代谢综合征(MS)大鼠主动脉过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)表达与血管重构和功能改变的关系.方法 健康8周龄雄性Wistar大鼠30只随机分为正常对照组(n=15)和MS组(n=15).MS组大鼠高脂饮食喂养24周建立MS模型.喂养连续期间检测鼠尾血压、血糖、胰岛素、血脂,24周喂养结束行葡萄糖耐量试验和高胰岛素-正常血糖钳夹试验,然后处死动物,取部分腹主动脉组织行HE染色和油红O染色,观察组织形态学改变,用图像分析系统测定内膜及中膜面积;应用多道生理仪测血管反应性,评价血管功能.取主动脉组织采用Western blot方法检测PPARγ、PPARδ和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达.结果 1)MS组体质量、内脏脂肪、血压、血浆三酰甘油(TG)显著增加(P<0.05或P<0.01),且存在严重的胰岛素抵抗[GIR(1.3±0.8) vs (7.0±1.7)mg/(kg·min),P<0.01]和糖耐量减退,表现为典型的MS特征;2)与对照组相比,MS组大鼠主动脉内皮依赖和非依赖舒张功能减退;3)与对照组相比,MS组大鼠主动脉内膜增厚,中膜层平滑肌细胞增殖明显,内膜面积/中膜面积值增高,油红染色显示动脉粥样硬化明显;4)MS组大鼠主动脉PPARγ蛋白表达明显高于对照组,而PPARδ和eNOS表达明显减低.结论 MS大鼠主动脉结构重构明显和舒张功能障碍,血管组织PPARγ蛋白表达增加,而PPARδ表达减低,可能致脂质积聚,加剧炎症反应,并抑制eNOS表达,这可能是MS血管结构和功能改变的机制之一.     

血管紧张素Ⅱ和NADPH氧化酶与血管衰老的相关性研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和NADPH氧化酶在血管衰老中的地位及作用机理.方法健康Wistar大鼠分为青年组、老龄组、Valsantan组,分析各组大鼠主动脉形态结构及功能;测定血浆和主动脉AngⅡ水平、主动脉活性氧水平;分别应用RT-PCR和Western bolt检测各组大鼠AngⅡ1型和2型受体（AT1R和AT2R）、NADPH氧化酶p22phox的mRNA及蛋白表达.结果随增龄大鼠主动脉管壁增厚,纤维化程度增高,内皮功能受损,活性氧产生增加;主动脉AngⅡ含量增高,AT2R、p22phox的mRNA及蛋白表达上调,AT1R表达下降;Valsantan（AngⅡ1型受体特异性阻断剂）干预后,p22phox表达下降,活性氧水平降低,衰老血管形态结构和功能异常有所改善.结论衰老血管有其特征性结构和功能改变;AngⅡ经由AT1R上调NADPH氧化酶的基因表达可能是血管衰老的重要机制之一.