雷帕霉素对克罗恩病小鼠模型的治疗作用及机制研究

目的考察雷帕霉素对克罗恩病小鼠模型的治疗作用及相关机制研究。方法 30只小鼠,采用随机数字表法分为3组:M1组(正常对照组,n=10),M2组(TNBS造模组,n=10),M3组(TNBS+雷帕霉素治疗组,n=10)。M1组以生理盐水灌肠予以对照;M2组建立克罗恩小鼠疾病模型,以生理盐水腹腔注射;M3组建立克罗恩小鼠疾病模型,并给予雷帕霉素腹腔注射。各组于造模后7d取小鼠结肠切片后行HE染色,并取病灶结肠组织和心脏取血,提取RNA反转录并进行PCR,检测Tim-1、Tim-3、Foxp3的基因表达情况,了解各指标之间的关联性。结果成功构建小鼠的CD模型,M3组相较M2组,病理学评分较低,病情较轻,各组间差异有统计学意义(P0.05)。结肠组织和外周血中:Tim-1mRNA各组比较,差异无统计学意义(P0.05)。Tim-3mRNA,Foxp3mRNA各组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结肠组织中还发现Tim-3mRNA表达量与Foxp3mRNA表达量呈负相关(r=-1.6275,P0.05)。结论雷帕霉素可通过促进调节性T细胞分化,增加Foxp3表达量,来抑制Tim-3的表达,减少Th1细胞的分化,减轻结肠病灶区的炎症浸润,缓解克罗恩病病情进展。     

阿司匹林对表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂诱导小鼠皮疹的改善作用及其机制

目的 探讨阿司匹林对表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂（EGFR-TKI）诱导的小鼠皮疹的改善作用,并探讨其可能的机制。方法 将给予EGFR-TKI靶向药物厄洛替尼成功建立皮疹模型的40只雄性Balb/c小鼠随机分为模型组及阿司匹林高、中、低剂量组,每组10只,另取正常雄性Balb/c小鼠10只作为对照组。阿司匹林高、中、低剂量组分别灌胃给予阿司匹林1.13、0.75、0.38 mg,对照组灌胃给予100 mg/kg蒸馏水,1次/天,共30 d。记录各组小鼠皮肤情况及饮食、饮水、排尿、排便、精神状态、瘙痒等情况,皮肤水分测试分析仪检测皮肤水分,并进行皮肤炎症情况评分。处死后取背部皮肤,HE染色后观察皮肤病理改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果 对照组小鼠皮肤及一般情况均正常;模型组、阿司匹林低剂量组小鼠背部皮肤出现皮疹、结痂、脱屑,从第1周开始出现饮食减少、饮水增多、排尿增多、排便减少等情况,伴随焦躁不安、抓挠背部等行为;阿司匹林高、中剂量组小鼠皮肤皮疹、结痂、脱屑等均较模型组好转,从第2周开始饮食慢慢恢复正常。仅模型组小鼠出现轻度...     

γ干扰素转基因表达对过敏小鼠模型的治疗作用及其机制研究

目的通过腺病毒载体介导小鼠γ干扰素(mIFNγ)在小鼠肺脏转基因表达,探讨其对卵白蛋白(OVA)诱导过敏小鼠模型的治疗作用及其机制。方法48只BALB/c小鼠,按随机数字表法分为7组,即阴性对照组(A组)、过敏模型组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(B、D和F组)、转基因治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(C、E和G组)。除A组外,B、C、D、E、F、G各组在第0天和第5天经腹腔给予OVA(每只15μg)致敏,第12～14天经气道吸入0.5%的OVA雾化液激发(20ml/次),建立过敏模型。第15天C、E、G组小鼠经鼻滴入50μl带有mIFNγ基因的复制缺陷型腺病毒(AdCMVmIFNγ)悬液[每只5×109/空斑形成单位(PFU)],A、B、D、F组小鼠经鼻滴入50μl生理盐水作为对照。第18天处死A、B、C组小鼠,第21天处死D和E组小鼠,第25天处死F和G组小鼠,获取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数,其上清液用酶联免疫吸附法测定mIFNγ的浓度,右肺用4%多聚甲醛固定及苏木精伊红(HE)染色,左肺组织提取总RNA,用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)了解肺组织中白细胞介素4(IL4)、IL-5、IL-6、IL-10、IL1-2、IL13和IL18的表达。结果(1)经鼻给予AdCMVmIFN-γ后,BALF中可测得mIFNγ的高效表达,C组第3天为(729.0±104.7)pg/ml,E组第6天为(984.5±119.1)pg/ml,G组第10天为(310.6±59.7)pg/ml。(2)B、C、D、     

黄芪甲苷对糖尿病心肌病小鼠的治疗作用及其机制

目的 观察黄芪甲苷对糖尿病心肌病（DCM）小鼠的治疗作用,并探讨其可能的分子机制。方法 将60只C57BL/6小鼠随机均分为Sham组、DCM组、AS-Ⅳ组和AS-Ⅳ+LY组,每组15只。Sham组正常喂养,除Sham组外均采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法诱导建立DCM模型;建模后DCM组小鼠继续给予高脂饮食喂养,AS-Ⅳ组小鼠高脂饮食喂养的同时给予黄芪甲苷50 mg/（kg·d）灌胃,AS-Ⅳ+LY组小鼠高脂饮食喂养的同时给予黄芪甲苷50 mg/（kg·d）+PI3K抑制剂LY294002 0.3 mg/（kg·d）灌胃,共8周。各组分组处理8周后行心脏超声检查,比较各组左心室射血分数（LVEF）、左心室缩短分数（LVFS）和左心室收缩末期内径（LVIDs）;处死后取血清和心脏组织,比较各组血清心脏损伤标志物乳酸盐脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK-MB）和肌钙蛋白T(cTnT)水平,心肌组织纤维化面积百分比、心肌细胞凋亡百分比,心肌组织活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）表达,心肌组织促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白...     

丙种球蛋白对不完全川崎病与典型川崎病治疗的效果差异

目的探讨丙种球蛋白对不完全川崎病与典型川崎病治疗的临床效果。方法抽取2015年3月到2017年9月90例川崎病患儿,运用随机数字表法将其分为对照组(n=45)与实验组(n=45),对照组为典型川崎病患儿组,实验组为不完全川崎病患儿组,对两组患儿予以阿司匹林与静脉丙种球蛋白的治疗方式,观察两组患儿的临床症状好转情况与各项血液指标的检测情况。结果实验组患儿的临床症状好转情况明显优于对照组,各项血液指标检测结果明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论静脉丙种球蛋白对不完全川崎病治疗具有显著效果,可有效的缓解患儿的临床症状,治疗效果优于典型川崎病,具有较高的临床推广价值。     

益生菌治疗炎症性肠病及其作用机制

炎症性肠病是慢性反复发作性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,传统的药物治疗疗效并不令人满意,且副作用较大。益生菌是对健康有益的活菌或活菌性膳食补充剂,利用益生菌的内源性防御屏障和免疫性防御屏障作用拮抗致病菌达到治疗炎症性肠病的目的,是近年来在该研究领域中的新思路。     

川崎病的治疗现状

川崎病是目前儿童后天性心脏病的主要原因之一,病因不明,因此使治疗面临巨大的挑战,现就目前川崎病治疗方面的情况做一综述。     

低分子量肝素对实验性小鼠结肠炎的治疗作用及其机制初探

背景:肝素具有抗凝和抗炎的双重作用,但其抗炎机制仍不明确。目的:通过观察低分子量肝素对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎结肠黏膜Syndecan-1(Sdc-1)mRNA和蛋白表达以及白细胞介素(IL)-1β mRNA表达的影响,在一定程度上阐明低分子量肝素抗炎的分子机制。方法:54只C57BL/6小鼠分为正常对照组、模型组和治疗组。小鼠饮用3%DSS溶液5d后改饮用蒸馏水2周,建立急性结肠炎慢性化模型,治疗组皮下注射低分子量肝素。实验第5、12、19d分别处死6只小鼠。行组织学评分,以RT-PCR法检测结肠黏膜Sdc-1、IL-1β mRNA表达,以免疫组化法检测结肠黏膜Sdc-1蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组各时间点组织学评分、IL-1β mRNA表达显著升高(P0.05),Sdc-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.05)。经低分子量肝素治疗后,上述各指标明显改善。结论:在DSS诱导的小鼠急性结肠炎慢性化过程中,低分子量肝素可能通过下调炎症介质IL-1β表达而起抗炎作用,并可能通过替代从细胞表面丢失的Sdc-1而加速修复过程,促进结肠炎的愈合。     

TNP-470对小鼠Lewis肺癌的作用及其机制

TNP 4 70是烟曲霉素的衍生物O (氯乙酰 氨酰基 )烟曲霉醇 ,有高选择性抗血管新生作用。近年研究表明 ,应用血管新生抑制剂治疗肿瘤取得了明显的疗效 ,从而为肿瘤的治疗开辟了一条新的途径。我们利用复制荷Lewis肺癌小鼠模型 ,应用TNP 4 70 ,与常规化疗药物阿霉素 (ADM)联合或对照 ,观察其对原发和转移性肺癌的疗效。材料与方法　TNP 4 70由日本武田制药株式会社惠赠。ADM为汕头经济特区明治医药有限公司制造 ,批号 990 4 0 1。1.动物模型的复制及分组 :雄性纯系C5 7BL/ 6小鼠 (中国医科大学实验动物部提供 ) 4 0只 ,皮下接种Lewis…     

灵芝多糖对卵巢癌小鼠的保护作用及其机制

目的 研究灵芝多糖在体内对卵巢癌小鼠的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 ①采用超低吸附法建立SKOV-3/DDP肿瘤球模型.②建立小鼠免疫抑制模型.③建立小鼠腹腔种植瘤模型.④构建小鼠卵巢原位种植瘤模型.⑤采用半自动生化分析仪检测血清SOD、GSH-Px和CAT含量的变化,观察灵芝多糖对SKOV-3/DDP肿瘤球卵巢癌原位移植瘤的治疗效果.结果 注射CTX后,免疫抑制组小鼠第1、2、3、4、5天白细胞总数与非免疫抑制组比较有显著差异(P＜0.05).非免疫抑制组小鼠白细胞数未见波动.GPL对照组和GPL中、低剂量组及DDP组SOD、GSH-Px、CAT含量较空白组均一定程度升高,但无统计学差异(P＞0.05);高剂量组各指标含量升高明显,与空白组相比有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论 通过免疫抑制小鼠成功建立了小鼠腹腔种植瘤模型和卵巢原位种植瘤模型.灵芝多糖通过增加卵巢原位种植瘤小鼠血清SOD、GSH-Px和CAT的水平,即通过氧化应激途径发挥对小鼠的保护作用.     

烟碱对小鼠中枢神经炎症的改善作用及其机制

目的 探讨α7亚基N型乙酰胆碱受体（α7nAchRs）激动剂烟碱对小鼠中枢神经炎症和认知行为的改善作用及其机制。方法 取雌性C57BL/6J小鼠60只,采用随机数字表法分为正常组、模型组、烟碱组、甲基牛扁亭柠檬酸盐（MLA）组,每组各15只。模型组、烟碱组和MLA组腹腔注射多聚肌苷酸—多聚胞苷酸[Poly(I∶C)]12 mg/kg制备中枢神经炎症模型,正常组腹腔注射等量生理盐水。烟碱组于造模前30 min腹腔注射烟碱1 mg/kg;MLA组于造模前1 h腹腔注射α7nAchR拮抗剂MLA 5 mg/kg,造模前30 min腹腔注射烟碱1 mg/kg;模型组和正常对照组在同一时间点注射等量生理盐水。造模后3 h,采用水迷宫实验观察小鼠空间学习记忆能力,记录小鼠穿越原平台次数和逃避潜伏期;采用旷场实验观察小鼠自主运动能力,记录小鼠平均运动速度和运动距离;小鼠处死,取脑组织,采用免疫组化法观察海马及前额叶小胶质细胞激活度,评价中枢神经炎症改变程度;采用qPCR法检测脑组织炎症因子IL-6、TNF-α、INF-β、INF-α、IL-1β mRNA,Western blotting法检测脑组织...     

不同起始剂量阿司匹林及减量方案对川崎病临床疗效的影响

目的研究不同起始剂量阿司匹林及减量方案运用于川崎病中的价值。方法选择海南省妇女儿童医学中心2018年2月至2019年3月纳入的96例川崎病患儿作为研究对象,遵照数字表法随机分为两组,各48例。研究组患儿采取逐渐减量阿司匹林方式,对照组患儿采取直接减量方式,对比两组治疗结果。结果治疗前两组患儿的白细胞(white blood cell,WBC)计数、血小板(blood platelet,PLT)计数、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及C反应蛋白(c-reactive protein,CRP)浓度比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组上述各项指标均比治疗前明显改善,差异有统计学意义(P0.05);但两组治疗后各项指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗前两组患儿的天门冬氨酸氨氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)浓度比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后两组患儿AST、ALT浓度均比治疗前明显改善,差异有统计学意义(P0.05);但两组治疗后各项指标比较,差异无统计学意义(P0.05)。研究组再次发热率为2.08%、再次静脉注射丙种球蛋白率为4.17%,明显低于对照组的14.58%、18.75%,差异有统计学意义(P0.05)。结论不同起始剂量阿司匹林及减量方案应用于川崎病患儿中均具有重要意义,但逐渐减量方案效果更好,可防止发热现象再次发生,减少丙种球蛋白使用剂量,安全性高,值得临床推广使用。     

银耳多糖对小鼠移植性肝癌治疗作用及机制的实验研究

目的研究银耳多糖(Trem ella Polysaccharide,TP)对荷HAC小鼠T细胞表面分化抗原、细胞因子、体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的影响。方法用环磷酰胺和TP分别作用于荷HAC肝癌小鼠,采用免疫荧光法、流式细胞仪及酶标仪观察各组免疫功能的变化及细胞因子的表达,并分离其脾细胞,将诱导的细胞毒性T细胞(CTL细胞)分别作用于体外培养的3H-TdR标记的肿瘤细胞P815、HAC和B16,4 h后用γ-闪烁记数仪进行检测,并记算杀伤程度。检测各组肿瘤重量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变。结果TP实验组总T细胞、T杀伤细胞及肿瘤坏死因子(TNF)分别为(62.3±1.06)、(25.6±0.87)及(87.5±0.5),高于对照组,其中对总T细胞及TNF上调明显。在对HAC、P815、B16肿瘤细胞的杀伤作用中,TP实验组的杀伤活性明显高于对照组,分别为23.85%、20.81%、25.43%(P<0.01),其中对B16杀伤作用最强,HAC次之,P815最弱。环磷酰胺+TP实验组上述指标与TP实验组相比有所下降,但与对照组相比则明显增高(P<0.05)。治疗组肝肿瘤重量、体积均低于模型组。组织学上肿瘤坏死程度重且范围广,淋巴细胞、巨噬细胞浸润明显,纤维组织增生显著。环磷酰胺组较实验组表现的更为明显。TP实验组除脾脏外,其他主要脏器无明显形态学变化。结论TP具有激活和提高特异性和非特异性杀伤细胞的抗肿瘤作用。     

川崎病抗血栓治疗研究进展

川崎病(Kawasaki disease)易并发冠状动脉损害,根据冠状动脉损害程度不同,选择相应抗血栓药物治疗。目前,川崎病抗血栓治疗的用药时机、用药种类及用药时间意见不一,该文简介相关研究进展。     

川崎病的诊断与治疗

川崎病(KD)又称皮肤粘膜淋巴结综合征(MCLS)，是一种以全身血管炎病变为主要病理改变的急性发热出疹性儿童疾病。部分患儿可侵犯冠状动脉，甚至形成冠状动脉瘤；部分患儿冠状动脉可发生狭窄或血栓，甚至导致心肌梗死。现将近年来KD的诊治介绍如下。     

阿司匹林对肠上皮细胞的损伤作用及机制

目的:探讨阿司匹林对肠上皮细胞增殖的影响及作用机制.方法:将不同浓度的阿司匹林溶液与肠上皮细胞株Caco-2细胞共同培养24 h及48 h, 采用MTT法检测阿司匹林对Caco-2细胞的增殖作用. 建立Caco-2单层细胞模型, 采用不同浓度阿司匹林溶液处理后, 用EVOM电压电阻仪测定细胞跨膜电阻抗(TER)变化.结果:在不同浓度的阿司匹林(0、0.1、1、10 mmol/L)作用下, 24 h细胞存活率分别为96.67%±1.13%、84.32%±1.29%、62.33%±2.02%和42.99%±2.09%; 48 h细胞存活率分别为96.45%±1.21%、76.89±2.28%、50.28%±0.98%和32.66%±1.99%, 阿司匹林对Caco-2细胞的增殖作用呈现剂量-时间依赖性( P<0.05). 与对照组相比, 阿司匹林作用组TER明显降低, 至10 mmol/L组作用72 h时, TER值降低至50.1%.结论:阿司匹林可抑制肠上皮细胞的增殖, 同时损伤细胞屏障功能, 损伤紧密连接, 且以上两种作用呈剂量和时间依赖性.     

川崎病的血液学研究

川崎氏病,又称皮肤粘膜淋巴结综合征,是病因不明的急性发热性疾病,主要累及全身血管特别是冠状动脉。造成冠状动脉瘤,是川崎病患儿死亡的主要病因。川崎病存在多样的血液学异常,其改变同心脏损害有较明显的关系。现将有关进展综述如下。川崎病和血小板的关系川崎病的尸解证实血小板参与了动脉内血栓的形成过程。血小板增多本身是非特异性的表现,在伴有或不伴有血管炎的炎性疾病,血小板计数增加是一个常见的实验检查发现。因此,川崎病血小板计数增加是全身性炎症的一种表现,而血小板计数增高对冠状动脉损害无预测作用。继发于冠状动脉瘤的心肌梗塞是川崎病儿死亡的主要原因,故冠状动脉瘤的形成同血小板的关     

阿司匹林不同减量方案的预测指标及在川崎病患儿治疗中的应用

目的 研究阿司匹林不同减量方案的预测指标及对川崎病患儿的临床效果。方法 纳入2020年6月至2021年6月海南省妇女儿童医学中心收治的94例川崎病患儿作为研究对象。所有患儿均进行阿司匹林+人免疫球蛋白治疗,并在72 h后复查血常规和C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）浓度。将CRP浓度恢复正常的患儿作为A组（n=44）,CRP浓度异常的患儿作为B组（n=50）。按随机数字表法将A、B两组患儿分为A1、A2组各22例和B1、B2组各25例。A1和B1组采用阿司匹林逐渐减量治疗,A2和B2组采用阿司匹林直接减量治疗。观察阿司匹林不同减量方案对A、B两组患儿血常规、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）和丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）浓度的影响,分析A、B两组患儿冠状动脉并发症发生率以及再次使用人免疫球蛋白的概率。结果 治疗前A1、A2组患儿白细胞计数（white blood cell count,WBC）、血小板计数（platelet count,PLT）、红细胞沉降率（ery...     

升血小板胶囊对小鼠免疫性血小板减少症的治疗作用及其机制

目的 探讨升血小板胶囊对小鼠免疫性血小板减少症（ITP）的治疗作用及免疫调控机制。方法 将40只小鼠随机分为对照组、模型组、强的松组、胶囊组各10只。除对照组外,其余三组均用抗血小板抗体于小鼠腹腔内注射,诱导持续性血小板减少成功建立ITP模型。对照组、模型组给予生理盐水灌胃,强的松组、胶囊组分别给予相同体积的强的松溶液、升血小板胶囊溶液灌胃,每日1次,连续8 d。模型维持4周处死动物,计数小鼠外周血小板、骨髓涂片产板巨核细胞,检测小鼠脾脏Tregs细胞构成比、Tregs/CD4值以及小鼠脾脏Tregs细胞Foxp3mRNA表达、Teff细胞IL-2 mRNA表达。结果 对照组、模型组、强的松组、胶囊组小鼠外周血小板计数分别为（600.35±145.39）、（123.33±16.24）、（327.66±73.20）、（577.35±76.94）×109/L,骨髓产板巨核细胞计数分别为（55.05±5.83）、（26.90±2.49）、（66.27±3.58）、（63.45±3.44）个;与模型组比较,胶囊组、强的松组ITP小鼠外周血小板水平升高、产板巨核细胞数增加（P均<0.05）...