改进的核糖基化试验检测疫苗中残余的百日咳毒素

脱毒的百日咳毒素 ( PT)是全细胞和无细胞百日咳疫苗 DTP( DTPa)的重要组分。出于安全原因 ,必须保证疫苗中 PT残余量不超过容许范围。最近报道 ,与鸟嘌呤核苷酸结合蛋白 ( G蛋白 )α亚单位 C端 2 0个氨基酸序列同源的合成肽 Gαi3C2 0是 PT核糖基化反应的良好底物。Cyr等据此建立的酶促反应 -高压液相层析 ( HPLC)双重测定法可测定 PT含量。作者对该法作了改进和简化 ,并与组氨酸敏感试验 ( HIST)进行了比较。　　将 PT与荧光素己酸标记的 Gαi3C2 0肽底物 ( HCAM- 1 )共同培养 ,然后用 HPLC进行定量分析 ,但对 Cyr法中的…     

无细胞百日咳疫苗特异性毒性检测方法现状及展望

 百日咳毒素是百日咳杆菌重要的保护性抗原,经化学方法脱毒成为百日咳类毒素后制成的无细胞百日咳疫苗（acellular pertussis vaccine,APV）具有残余毒性和毒性逆转的可能性,所以建立特异性毒性检测方法对于保证APV的安全性是十分必要的。此文就国内外APV特异性毒性检测方法的现状做一综述,并结合近几年国外研究的毒性检测新方法进行展望。     

百日咳毒素在疫苗中的研究现状及应用

百日咳毒素(PT)是百日咳杆菌所产生的主要毒力因子,具有多种生物学活性,是无细胞百日咳疫苗中唯一不受争议的抗原成分.随着分子生物学技术的发展,研究者试图开发与PT有关的重组亚单位疫苗、重组细菌疫苗和DNA疫苗.本文对近年来的研究进展作一综述.     

抗百日咳毒素单克隆抗体的纯化及应用研究

目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(M cAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法。方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的M cAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法。结果经SDS-PAGE分析,纯化M cAb的纯度均在90%以上,选择二株识别不同抗原位点M cAbs,应用于检测PT的双抗夹心ELISA方法,灵敏度为2.14μg/L,批内变异系数5.85%,批间变异系数9.27%,平均回收率为108.12%,应用该法测定了国内几大生产厂家送检的无细胞百日咳疫苗原液中PT含量。结论获得了纯度高的抗PT M cAb,建立了一种特异、准确的定量检测PT的ELISA方法,并用于无细胞百日咳疫苗原液中PT含量的检测,为无细胞百日咳疫苗的质量控制提供了有力的手段。     

无细胞百日咳疫苗的质量控制

2003年5月6日～7日，世界卫生组织(WHO)百日咳疫苗标准化和质量控制工作组在法国费内-伏尔泰召开会议，对无细胞百日咳疫苗质量控制方法的国际协作研究结果进行了讨论，并提出了相关建议。     

WHO关于百日咳疫苗的意见书

本文介绍了百日咳疫苗（全菌体疫苗和无细胞疫苗）的背景资料、免疫效果、不良反应以及WHO对该疫苗的意见.     

我国百日咳疫苗现状及展望

1906年Bordet和 Gengou两人从患儿痰液中成功地分离出百日咳杆菌,从而确定了百日咳(Pertussis)是由百日咳杆菌引起的.百日咳是一种急性呼吸道传染病,传染性较强,人类是百日咳杆菌的唯一宿主,人群普遍易感,其中尤以婴幼儿多见,是严重威胁人类健康的主要传染病之一.该菌是一种专性需氧的革兰氏阴性小杆菌.     

无细胞百日咳疫苗的质量控制

20 0 3年 5月 6日～ 7日 ,世界卫生组织 (WHO)百日咳疫苗标准化和质量控制工作组在法国费内 -伏尔泰召开会议 ,对无细胞百日咳疫苗质量控制方法的国际协作研究结果进行了讨论 ,并提出了相关建议     

WHO关于百日咳疫苗的意见书

本文介绍了百日咳疫苗(全菌体疫苗和无细胞疫苗)的背景资料、免疫效果、不良反应以及WHO对该疫苗的意见.     

抗百日咳杆菌免疫力的血清学相关物

本文介绍了两项百日咳无细胞菌苗试验的血清学数据的分析结果，认为粘附素，菌毛和百日咳毒素抗体水平高与百日咳感染的可能性较低有关，与仅含有百日咳毒素或百日咳毒素和丝状血凝系组分的菌苗相比，含有百日咳抗原成分越多，百日咳无细菌菌苗就越有效。     

百日咳杆菌毒素S1亚单位突变体的研究进展

百日咳杆菌毒素(PT)是目前无细胞百日咳疫苗中的主要保护性成分,其中PT的S1亚单位又是其主要的功能性亚基,具有免疫保护活性和多种毒性。在对多个S1突变体的生物学及免疫学研究后发现,其中的一个S1的双位点突变体(PTX-9K/129G)在保持有良好的免疫原性和免疫保护作用的基础上,大大降低了PT的毒性,有望成为理想的百日咳疫苗候补抗原。     

编码百日咳毒素S1亚单位的DNA疫苗诱导的抗百日咳杆菌的保护作用[英]／Kamachi K，Konda T，Arakawa Y／／Vaccine.

百日咳毒素(PT)是百日咳杆菌的主要致病因子，由5个亚单位组成，S1亚单位具有酶活性，而S2～S5亚单位参与靶细胞的结合。研究发现抗S1亚单位的单克隆抗体可以预防百日咳杆菌感染，源自S1亚单位的重组蛋白和合成肽能诱导机体产生抗PT的保护性免疫应答，提示S1亚单位能用于百日咳疫苗的研制。     

无细胞百日咳疫苗加强接种对百日咳流行病学的影响

百日咳仍是某些国家重要的公共卫生问题.儿童接种百日咳疫苗后发病率有所降低,但在某些国家仍未得到有效控制.为了进一步降低百日咳发病率,许多国家实施了学龄前无细胞百日咳疫苗加强接种.此文综述了学龄前加强接种百日咳疫苗的效果以及对百日咳流行病学的影响,并讨论了青少年和成年人加强接种对百日咳流行病学的影响.     

检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA法的建立

目的  建立白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产中百日咳毒素（pertussis toxin, PT）含量的测定方法。方法  免疫家兔制备高效价抗PT血清,纯化抗PT多克隆抗体并进行酶标记,建立双抗体夹心ELISA法并对其进行验证。结果  建立的方法在0~20 ng/ml PT测量区间呈现最佳线性,相关系数＞0.99,且重复性好。检测百日咳丝状血凝素和黏着素,结果均为阴性,说明该法特异性良好。试验内10次、不同试验间3次测定16.0、8.0、4.0、3.0 ng/ml PT,变异系数为2.8%~9.7%,回收率为95.7%~106.0%,精密度和准确度验证均符合常规质量控制要求,定量限度为3.0 ng/ml。结论  该方法能有效检测百日咳杆菌大罐发酵过程中分泌的PT,为PT质量控制奠定了重要基础。