神经再生室与微环境研究的新模型

目的 建立神经再生室与微环境研究模型,并介绍操作要点,对其科学性、可行性进行评估。方法 将大鼠的坐骨神经于股中部切断,推剥神经外膜于远近端,使近远端的神经束露出2mm将其切除,使断端的神经束回缩至外噗内,间断缝合外膜,使断伤的神经束间留有2mm～3mm微小间室。结果 术后4周见再生的神经通过微小间室,吻合处神经束排列规律连续,没有神经瘤形成。结论 神经外膜再生室模型是一个自由自然的神经再生内环境,符合神经生长规律,是对以往外设的“再生室”研究神经再生的一个改进,对传统的神经吻合方法是一个完善,具有实用性和重复性。     

周围神经外膜吻合方法的改进性临床研究

目的应用改良的周围神经外膜吻合方法以使损伤后的神经功能得到最大限度的恢复。方法在清创修整神经断端时,推剥神经外膜于远近端,使断端的神经束露出,并各将其切除2mm左右,使断端的神经束回缩至外膜内,使断伤的神经束间留有微小间室进行吻合。结果应用神经改进缝合法修复周围神经86例,103条神经,均经1年以上随访,优34例,良45例,可5例,差2例。临床优良率达到91.86%。结论短缩神经束,创造一个自然的神经再生内环境室,利用趋化再生原理进行修复神经,是对以往研究神经再生的一个改进,具有实用性和可行性,临床应用可获得较好疗效。     

神经外膜逆行剪开套接吻合周围神经损伤临床研究初步结果

目的提出一种新的周围神经损伤吻合的方法,期望提高神经吻合的质量,以加快神经功能的恢复.方法于神经的远侧断端神经外膜做一纵行切口,长度与神经的直径相同,将该段神经束切除,剥离的神经外膜将近端神经断端套入缝合.临床上应用9例,其中正中神经2例,尺神经3例,桡神经3例,腓总神经1例.结果本组随访时间6～14个月,平均8个月;优3例,良3例,可2例,差0例,优良率75%.结论神经外膜逆行剪开套接吻合断伤神经符合神经微环境,为神经再生提供再生室,是提高神经功能恢复的有效方法.     

端侧吻合修复臂丛损伤实验模型的建立

目的建立端侧吻合修复臂丛神经损伤的实验模型.方法选用体重为180g～200g的Wister大白鼠36只,随机分为三组,每组12只,每只右侧神经外膜开窗(0.2cm×0.2cm),左侧外膜未开窗.将臂丛后束损伤后的桡神经远断端端侧吻合于外膜开窗的内侧束远端0.5cm部位,分别于术后1月、2月、3月在麻醉下行电生理、肌纤维截面积、肌肉湿重的检测.术后3月同时行内侧束吻合口远、近端神经纤维数目及神经束截面积测定.结果桡神经端侧吻合后,随时间的延长,运动神经诱发电位潜伏期缩短,波幅增高,传导速度加快,肱三头肌肌湿重及肌纤维截面积值逐渐加大,但开窗组优于未开窗组(P＜0.05).端侧吻合对主干神经无影响.结论后束损伤的桡神经端侧吻合于外膜开窗的内侧束的模型简便易行、可靠,有较好的实用价值.该模型的建立为研究端侧吻合技术在臂丛神经损伤的临床运用提供了一条直接途径.     

终末器官对端侧神经吻合后轴突再生影响的实验研究

目的探讨受神经远端终末器官对端侧吻合后神经再生的影响.方法 SD雌性大鼠10只,动物随机分为A、B2组.A组在近端切断腓总神经,其远断端与胫神经外膜开窗处进行端侧吻合; B组同 A组两神经端侧吻合后,在距吻合口1.5cm处切断其与终末器官的联系,并将连接肌肉的腓总神经远端反折固定在邻近的肌肉组织.术后12周取吻合口处的神经标本,甲苯胺蓝和抗神经微丝抗体免疫组化染色、光镜检查及图像分析.结果甲苯胺蓝染色及神经微丝免疫组化染色结果说明 A、B2组再生神经纤维数目、髓鞘厚度、纤维结缔组织含量及神经纤维丝排列,均有明显差异.结论终末器官对促进端侧神经吻合后神经再生具有重要作用.     

周围神经端侧动脉套接后神经再生的研究

目的研究周围神经端侧动脉套接后神经再生的可能性及其特点. 方法取SD大鼠75只,在股骨中下段切断腓神经,将近断端逆转90度包埋于肌肉中.随机分为5组.A组:将截取的左颈总动脉套接于右侧正常胫神经侧方与腓总神经远端2 mm距离之间,缝合部胫神经外膜不予切除;B组:在胫神经套接部外膜开窗1.0 mm;C组:腓总神经切断14天后再予动脉套接,余同B组;D组:同B组,且于动脉套接部注入神经生长因子(neural growth factor, NGF)1 ml;E组:将腓总神经远端以端侧缝合形式直接缝合于胫神经的一侧,外膜开窗1.0 mm.术后4、8和12周分别行组织学、电镜和神经纤维计数等检查. 结果 4周时C、D及E组周边区域有神经纤维轴突和髓鞘再生,A组则无神经纤维生长; 8周时C、D及E组再生神经纤维较B组多,E组神经纤维较C、D组多,差异有统计学意义(P<0.05); 12周时C、D及E组神经纤维多于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组及D组有较丰富的神经再生,与神经端侧直接吻合的E组差异无统计学意义(P>0.05). 结论神经端侧2 mm距离动脉套接可作为修复周围神经损伤的一种可行方法.     

坐骨神经不等径小间隙动脉套接吻合后再生时相的组织学观察

目的 观察大鼠坐骨神经不等径小间隙动脉套接吻合后神经再生的时相变化,探讨其神经再生的机制. 方法 选用Wistar大鼠20只,4只作为套接动脉供体,其余16只切断其右下肢坐骨神经作为实验模型,随机分成坐骨神经等径外膜吻合组和不等径小间隙动脉套接吻合组,每组各8只,分别于术后7、14、21、28 d取材,苏木精-伊红(HE)染色,观察两组神经再生时相的变化. 结果 不等径小间隙动脉套接组再生神经术后21d通过小间隙;手术后28 d,不等径小间隙动脉套接组再生的神经较近端数量增加,再生神经是成熟的,排列规整.结论 近端较细小与远端较粗大的神经通过小间隙动脉套接吻合,神经再生出现放大效应,具有储备功能;小间隙动脉套接吻合是发挥神经再生储备功能的有效手段.     

周围神经小间隙动脉套接的免疫组织化学观察

目的:观察周围神经在动脉套管内的再生机制,比较小间隙套接法和外膜直接缝合的再生时相差别。方法:在大鼠腓总神经上分别做成2mm 间隙动脉套接和原位外膜缝合两组模型,于7、14、21及28天取材。采用免疫组化 ABC 法观察雪旺细胞及新生轴索的增殖和生长。结果:雪旺细胞沿动脉套管壁大量增殖,新生索轴沿雪旺细胞通过动脉套管达远侧神经断端;套接组新生纤维到达远端神经的时间比直接缝合组迟约2周;3周后远端神经断面的新生轴索数两组相近。结论:小间隙套接法有可能成为解决神经断端定位难及提高神经再生效果的有效手段。     

自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂的实验研究

目的 探讨应用自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂的可行性和优越性.方法 取SD大鼠40只,体质量250～350g,随机分成2组,每组20只.实验组:坐骨神经切断后采用自体神经外膜小间隙桥接法缝合;对照组:坐骨神经切断后采用神经外膜原位缝合.术后2、4、6、8、10、12、14及16周时,分别从2组中各取出2只大鼠,大体观察实验动物肢体恢复自主活动的时间,显微镜视下观察神经再生室及缝合口的大体形态,光镜及电镜下对2组再生神经纤维进行观察.结果 实验组大鼠恢复肢体自主活动快,缝合口与周围组织粘连轻.形态学观察发现小间隙神经纤维排列有序,结缔组织增生明显减少.电镜观察显示神经间隙远端再生神经髓鞘板层呈同心圆状排列致密、整齐,雪旺细胞增生明显.而对照组没有上述改变.结论 自体神经外膜小间隙桥接法构建神经再生室修复周围神经断裂是可行的,优于神经外膜原位缝合法,是修复周围神经断裂的一种新方法.     

周围神经端侧吻合后神经再生的研究

目的研究周围神经端侧吻合后远端神经的再生及其临床应用价值。方法选用３７只Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分成Ａ、Ｂ两组。Ａ组：切断腓神经，在邻近的胫神经干外膜上开一１ｍｍ小窗，将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。Ｂ组：切断腓神经后，在胫神经干和远侧腓神经干外膜上各开一小窗，取对侧相应的腓神经以端侧吻合的方式桥接于胫、腓神经干两窗之间。两组分别于术后４、８、１２周取材，作神经组织学、电镜及图像分析仪检测：（１）神经再生的数量和质量；（２）定性定量观察神经再生情况；（３）再生神经的数目、密度及截面积。结果直接端侧吻合或神经桥接移植的端侧吻合，均可使神经再生，且再生纤维的质量与端端吻合组（对照组）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；对被吻合神经－胫神经的功能亦无影响。结论神经端侧吻合可作为神经损伤后一种新的修复方法     

神经再生室中神经再生过程和微环境的研究

目的 探讨再生室中神经再生过程、微环境成份及作用。方法 取SD大鼠70只,坐骨神经于股中部切断,用硅胶管套接,神经断端间间距10mm。于术后3d,1、2、3、4、5、6周取材,将10mm再生段由近向远分为S1,S2,S3,S4,S5,共5段,每段2mm,行组织学和电镜观察。结果 术后3d,再生充满棕黄色浑浊液体。术后1周,再生室中央形成条状连接,巨嗜细胞迁移至S3会合。术后2周成纤维细胞、雪旺细胞、内皮细胞迁移到S3会合。有髓神经纤维长入S1,无髓神经纤维长入S3。术后3周无髓纤维通过再生室,有髓纤维长入S3。术后4周有髓纤维通过再生聚集成束。术后5、6周神经纤维数量增多,髓鞘增厚,束膜形成。结论 再生室中再生过程可分为：（1）液体育孕期（1周内）。（2）纤维连接期（1－2周）。（3）神经连接期（2－4周）。（4）神经成熟期（术后4周以上）。神经再生微环境包括再生条件液、纤维基质带和巨嗜细胞、成纤维细胞、雪旺细胞、内皮细胞等成份。     

神经高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合提高神经修复能力的实验研究

目的对无缺损的周围神经高位损伤，提出高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合的新方法，观察神经再生和靶器官的恢复情况。方法SD大鼠80只，高位切断左侧胫神经。随机分为5组：A组：胫神经两断端行端端缝合，远端于膝关节水平与腓神经干行侧侧缝合。B组：断端处理同A组，远端移植正中神经作胫腓神经干之间的端侧桥接缝合。C组：单纯作断端的端端吻合。D组：胫神经干近端结扎并固定，远端与腓神经干行侧侧缝合。E组：近端处理同D组，远端切除部分神经段后，与腓神经干行端侧缝合。术后行肌电图检查及组织学观察并作统计学分析。结果术后早期（4周）D、E组有神经再生，术后12周A、B组的神经再生、传导功能及靶肌肉和运动终板的恢复情况均优于C、D、E组。结论高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合的方法，可尽早恢复对靶组织的营养和神经再支配，为高位缝合处高质量神经的长入赢得时间，提高了有效功能的恢复。     

神经再生室中神经修复过程的超微结构研究

目的 研究神经再生室中周围神经修复过程各组成份的变化过程。方法 将大鼠坐骨神经于股中部切断后分隔5mm,用硅胶管套接。术后7、14、21、28、35、42d在透射电镜下观察神经再生室（长5mm,分5个节段,每节段长约1mm)中各节段细胞的超微结构。结果 术后7d神经再生中主要为单核细胞、红细胞、纤维蛋白;于1mm和5mm处还可见到含髓样变性小体的巨噬细胞和新生的成纤维细胞;特别是1mm处可见雪旺细胞包裹的无髓神经纤维。术后14d有髓、无髓神经纤维已贯穿全室,神经再生室中段已有较多的含丰富内质网的新生成纤维细胞和新生毛细血管。术后21、28、35、42d神经再生室中各段组织皆为不同成熟程度的有髓和无髓神经纤维,并被成纤维细胞突起包裹成小束,束间有不少胶原纤维。结论 术后7d神经再生室近端已见再生轴突,术后14d再生的神经已贯穿全管。神经再生中成份的变化提示,神经再生需要有利的微环境。     

几丁糖胶原复合膜及激活态雪旺细胞修复周围神经缺损的实验研究

目的研究几丁糖胶原复合膜、激活态雪旺细胞(activatedSchwanncell,ASC)促进周围神经再生的作用。方法将激活态雪旺细胞培养于几丁糖胶原复合膜后,将膜缝制成导管修复大鼠坐骨神经10mm的缺损(D组);并以自体神经移植(A组)、几丁糖胶原复合膜管(B组)及几丁糖胶原复合膜加脑源性神经营养因子[(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)C组]为对照。术后4、8、12周观察肢体运动,复合肌肉动作电位(CMAP)的波幅、潜伏期和运动神经传导速度(MNCV)。术后12周取材,样本染色观察神经轴突再生情况。结果几丁糖胶原复合膜加激活态雪旺细胞修复10mm神经缺损的效果优于几丁糖胶原复合膜加BDNF,与自体神经相似。结论几丁糖胶原复合膜加激活态雪旺细胞能有效地促进周围神经再生。     

胶质细胞源性神经营养因子对周围神经再生的作用

目的研究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对周围神经再生的作用.方法硅管套接大鼠坐骨神经,术中一次性将GDNF、生理盐水(nor-mal saline solution,SAL)分别加入硅管中.术后4周,应用溃变神经纤维染色法、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)逆行追踪技术观察GDNF对轴突再生的影响.结果与SAL组相比,GDNF组渍变神经纤维面积明显减少,溃变神经纤维面积百分率由17.3%降低到1.9%(P＜0.01);GDNF组脊髓标记胞体显著增加,HRP标记胞体数的百分率由43.5%上升到68.3%(P＜0.01).结论外源性GDNF能明显促进周围神经再生.     

An experimental study on the regeneration of the peripheral nerve--adaptation of the funiculus at the sutured site (author's transl)]

We consider it necessary to investigate the passage of axon through the sutured site, besides problems of misdirection, in order to understand the factors which affect the regeneration of the peripheral nerve. We performed the following experiments assuming that different situations occurring at sutured site is to be considered as mono-funiculus situation, and studied them mainly from the histological point of view. Method: Twenty-five adult hybrid dogs were used. We performed several different experiments, mentioned below, on the sciatic nerve, at about 3 cm below the greater trochanter with 9-0 monofilament nylon by microsurgical technique. The sciatic nerve was separated 4 cm away from the surrounding tissue, and only the peroneal nerve funiculus was isolated 2 cm away from the other funiculus and was cut at the center. Models of experiment. 1. Proper suture of both cut end...Optimum. 2. Suture by tension after excision of 1 cm in length...Tension, 3. Suture by compression...Compression, 4. Suture by shifting both cut ends about 1/2 of their surface...Offset, 5. Suture by buckling...Buckling, 6. Suture with gap of 5 mm after excision of 5 mm in length...Gap. Five weeks and ten weeks after the operation, the nerves were examined electrophysiologically and histologically. The nerve was stimulated at about 1 cm proximal to the sutured site directly using needle electrode, and the most distal part was searched for, where the nerve action potential was recorded. For the histological study, the nerve was sectioned longitudinally and transversely. These specimens were stained by H. E., Holmes' (for the axon), and L. F. B. method (for the myelin sheath). The regeneration of the nerve was classified into four grades, according to the number and the size of the axon passing through the sutured site, namely poor, fair, good, excellent. Results: 1) The offset of the funiculus at the sutured site is the most important factor which disturbs the regeneration of the axon. 2) The influence of about 5 mm gap is not so big for the regeneration of the axon, compared to the severe offset. 3) The moderate tension which can be produced by the ordinary microsurgical suture does not much influence the regeneration of the axon, and the compression at the sutured site has not much influence to the nerve regeneration as long as the adaptation is good.     

靶肌肉注射甲状腺素促进周围神经再生的实验研究

目的研究在靶肌肉注射甲状腺素(T3)对周围神经再生的作用。方法将60只大鼠随机分为实验组和对照组,每组30只。硅胶管桥接大鼠坐骨神经,实验组于术后每周2次将甲状腺素注射于伤侧胫前肌和腓肠肌上,术后1个月和3个月,应用运动神经传导速度(MNCV)、光镜、透射电镜等方法分别从功能和形态方面测定各项指标;对照组注射等量的生理盐水。结果实验组再生神经在功能和形态方面均优于对照组。结论靶肌肉注射甲状腺素能有效促进周围神经再生。     

Bridging peripheral nerve defect with chitosan-collagen film

Objective: To seek new method for the treatment of peripheral nerve injury. Methods: In rat model with sciatic nerve defect,chitosan-collagen film was sutured into conduit to bridge 5 mm, 10 mm nerve defects. Rats that underwent end-to-end anastomosis were taken as controls. General observation, electrophysiological study, histological studyand image analysis were performed at 4, 8, 12 weeks postoperatively. Results： In 5 mm nerve defects, the quality of nerve regeneration was similar to that of the control group. For 10 mm nerve defect, nerve regeneration was inferior to that of the control group. Chitosan-collagen film obviously degraded at 12 weeks postoperatively. Conclusions: Chitosan-collagen rdm conduit can be used to bridge peripheral nerve defect.     

Axonal growth in mesothelial chambers. The role of the distal nerve segment

An experimental model is presented for studying nerve regeneration over gaps of various lengths between the both ends of a severed nerve. After transferring left and right sciatic nerves of rat to the back, the gap between the two nerve ends could be bridged by a preformed, tube-shaped mesothelial chamber of a desired length. When the gap length was 10 mm or less, a well developed nerve structure was generated in the chamber between the nerve ends, and axons from the left sciatic nerve reinnervated muscles in the right limb via the right sciatic nerve. When the gap length was extended to 15 mm or more no such regeneration occurred. When no distal nerve end was introduced into the chamber, there was a limited growth into this chamber over only 5-6 mm. This "limited growth phenomenon" is discussed with respect to a lack of "trophic" or cellular support from a distal nerve segment. It is also proposed that the termination of growth, seen under these circumstances, may suggest a new principle for avoiding the development of neuromas after nerve transections.     

神经端侧吻合术与侧侧吻合术再生能力比较的实验研究

目的比较周围神经端侧吻合与神经侧侧吻合术后神经再生的情况.方法Wistar大鼠22只,分成A、B两组,每组11只.A组左侧腓总神经切断并在胫神经干上外膜开窗后,与胫神经干作端侧吻合;B组左侧腓总神经切断后与胫神经作侧侧吻合.术后3月,行形态学、电生理检查,辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法评价神经再生情况.结果两组间神经纤维的数目、面积、神经传导速度以及背根神经节阳性神经元数目均无明显差异(P＞0.05).结论神经端侧吻合术与神经侧侧吻合术的再生能力无明显差异.