骨髓增生异常综合征骨髓细胞的体外培养及其临床意义

骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome MDS)又称白前综合征,是以骨髓无效造血、成熟障碍、外周血中一系或数系血细胞减少以及形态和功能异常为主要特征的一组血液病。1982年,FAB协作组将MDS分为五型:1)难治性贫血(RA);2)环状铁粒幼细胞性贫血(RSA);3)原始细胞过多性难治性贫血(RAEB);4)慢性粒-单细胞性白血病(CMML);5)转化中的RAEB(RAEB-t)。该分类对统一对MDS的认识有一定的意义,但由于分类主要依据形态学特征,而本综合征的临床表现和病程变化较为复杂,因而尚不能满意地指导临床。近年来,由于造血细胞培养技术的发展,不少学者通过研究MDS患者粒单系祖细胞(CFU-GM)的体外生长,试图进一步了解     

脐血混合培养对粒-巨噬细胞系祖细胞产率的影响

利用粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU-GM)体外培养技术,观察了2份脐血混合后CFU-GM集落和集簇的产率。结果表明:混合培养组造血祖细胞的集落和集簇的产率不低于单一培养组。该研究为混合脐血造血细胞移植提供了一定的理论依据。     

骨髓基质细胞对粒系祖细胞增殖的影响

本文研究了培养不同时间的骨髓基质细胞对粒系祖细胞体外培养生长的影响,并分析其细胞成分及培养上清液的作用。结果表明:在含上清的基质细胞贴壁层上种植骨髓细胞,除第14天外,均可见对CFU-GM的形成有刺激作用。而单纯无上清贴壁细胞层,或单纯基质贴壁细胞培养上清液,均无此刺激作用。说明基质细胞对粒系造血祖细胞生长的调控必须在一个结构功能完整的体系中才能发挥作用。在无外源性CSF作用的情况下,基质细胞仍能使少量CFU-GM生长,也说明基质细胞有刺激粒细胞生长的作用。14天以前,无琼脂间隔层的粒系祖细胞数较高,而21天后,有琼脂间隔层的粒系祖细胞数较高。说明造血基质细胞对粒系细胞生长的调控受着多方面因素的影响,体外培养时间不同有不同表现。基质细胞一方面通过与粒系造血祖细胞相互作用,近距离调节,另方面通过分泌粒系刺激因子和抑制因子,从正、负两方面调节粒系造血,以维持粒系造血的动态平衡。     

骨髓增生异常综合征的免疫治疗进展

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome, MDS)是一组起源于骨髓造血干或祖细胞的恶性克隆性疾病.造血细胞发育异常导致髓内无效造血,患者骨髓增生而外周血细胞减少.近年来研究发现多种免疫机制异常在其发病中起重要作用,免疫治疗MDS取得一定的疗效.该文综述了近年来MDS的免疫治疗研究进展.     

骨髓增生异常综合征的鉴别

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干/祖细胞的克隆性疾病,造血细胞发育异常导致骨髓内无效造血.患者骨髓增生活跃而外周血细胞减少,有高度转化急性白血病倾向.随着MDS发病率的上升,对MDS的研究和认识也在不断进展和深化.     

人脐血红系祖细胞体外培养观察

<正>脐血代替骨髓移植重建造血的成功,已引起人们对脐血造血功能研究的兴趣。笔者等曾在国内首先报告了脐血粒—单核系祖细胞(CFU-GM)体外培养观察,证实人脐血富含粒单核细胞系造血干/祖细胞。通过进一步以体外甲基纤维素法培养人脐血的红系祖细胞,包括红系集落形成单位(CFU-E)和爆式红系形成单位(BFU-E),笔者观察了人脐血红系祖细胞造血情况,现将结果报告如下。     

药物改善骨髓增生异常综合征细胞无效造血的体外研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)和全反式维甲酸(ATRA)对骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞粒-单系祖细胞集落数(CFU-GM)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度的体外影响。方法:应用甲基纤维素半固体培养法,观察不同浓度NAC和ATRA联用及单用与患者及正常人骨髓细胞体外培养后CFU-GM的变化,应用ELISA方法,观察不同浓度NAC与患者及正常人体外培养后上清液TNF-α浓度的变化。结果:0.3mMNAC浓度使MDS患者CFU-GM增高、TNF-α浓度降低(P<0.01),3μMATRA使MDS患者集落数明显增加(P<0.01),而对正常人无明显影响(P>0.05),NAC与ATRA联用较单用NAC集落数明显增高(P<0.01)。结论:NAC、ATRA可改善MDS无效造血,可试用于MDS的治疗。     

骨髓增生异常综合征的诊断及疗效评定新标准

骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromes,MDS）是一组起源于造血干／祖细胞的获得性克隆性疾病,其特征性病理生理改变是克隆性造血干／祖细胞发育异常和无效造血,其基本临床特征是骨髓中造血细胞有发育异常的形态学表现和外周血血细胞减少,以及转变为急性髓系白血病（AML）的危险性很高。下面就MDS的诊断和疗效标准作一综述。1MDS的发病机制1．1造血单克隆性1．1．1造血细胞成分MDS患者的造血细胞有胞膜、胞质及胞核异常。     

FAB分类的原发性MDS患者的骨髓体外培养及细胞遗传学研究

作者研究了38例FAB分类为原发性骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓粒单系祖细胞集落形成单位(CFU-GM)的体外生长模式并进行细胞遗传学分析,以评价随机的原发性MDS患者的骨髓CFU-GM生长模式和染色体核型联在一起看其临床意义。结果:骨髓细胞培养第10天,集落生长正常者(集落数≥16)8例;集落生长减低者(1—15)13例;无集落形成者17例。14例小簇形成正常或增加,其中5例形成集落正常,7例形成减少,2例无集落形成。有克隆性染色体异常者13例。其中5号染色体     

骨髓增生异常综合征患者血清造血抑制活性的研究

目的　探讨骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ） 患者血清对正常骨髓粒系及红系造血祖细胞的抑制作用。方法　应用甲基纤维素体外培养法,以ＤＮＡ 末端标记及流式细胞术分析观察患者血清体外抑制正常人骨髓造血祖细胞增殖及对正常人造血细胞凋亡的作用。结果　２３ 例患者中有３ 例的血清具有抑制正常骨髓粒系祖细胞生长的作用,４ 例血清具有抑制正常骨髓红系祖细胞生长的作用。４例对正常骨髓红系祖细胞生长有抑制作用的患者中有３ 例患者血清的抑制活性可被抗肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）单克隆抗体中和。２ 例具有抑制正常骨髓红系祖细胞生长活性的血清在体外可促进正常骨髓造血细胞凋亡。结论　部分ＭＤＳ患者血清中存在造血抑制因子,这种抑制因子主要是ＴＮＦα,ＴＮＦα诱导造血细胞凋亡是致部分ＭＤＳ患者无效造血的重要原因     

当归多糖对小鼠粒单系细胞发生的影响

采用造血祖细胞体外培养等实验血液学技术,研究当归多糖对小鼠粒单系统细胞发生的影响及其机理。结果表明,当归多糖对正常或骨髓抑制、溶血性贫血小鼠的CFU-GM增殖均显示刺激作用;对骨髓粒单系造血有明显促进;并能增高外周血白细胞。当归多糖可能通过直接和/或间接途径作用于造血诱导微环境等,从而促进多能造血于细胞和粗单系祖细胞增殖和分化而发挥“补血”功效。     

骨髓基质细胞系QXMSC_1体外促进造血及其作用机理的研究

本实验研究了骨髓基质细胞系QXMSC_1体外对CFU-F,CFU-GM,BFU-E及CFU-E集落形成的影响,并通过建立QXMSC_1基质细胞与骨髓造血细胞的长期共培养体系,研究了QXMSC-1在体外促进造血的机理。结果表明,QXMSC_1基质细胞条件培养上清液可促进小鼠CFU-F,CFU-GM,BFU-E及CFU-E集落的生长。在无GM-CSF和Epo存在的情况下,QXMSC_1细胞能维持CFU-GM,BFU-E和CFU-E集落生长。表明QXMSC_1细胞本身可分泌GM-CSF和Epo。QXMSC_1细胞与骨髓造血细胞共培养时,可明显提高CFU-GM集落数。共培养体系中,用微孔滤膜隔断QXMSC_1与造血细胞的直接接触,也能促进CFU-GM集落生成,但比混合培养时低,说明QXMSC_1通过直接接触和分泌细胞因子促进造血的过程。     

重组人干细胞因子对骨髓增生异常综合征长期骨髓培养和集落形成的影响

骨髓增生异常综合征(MDS)是造血干细胞异质性克隆性疾病,有报道MDS祖细胞对细胞因子刺激的反应能力有缺陷,其骨髓培养中细胞集落形成明显低于正常人。而干细胞因子(SCF)尤其是与GM-CSF、G-CSF及IL-3联合应用可显著地增加MDS病人CFU-GM的体积和集落数。尤以对红细     

骨髓增生异常综合征的鉴别

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组起源于造血干／祖细胞的克隆性疾病．造血细胞发育异常导致骨髓内无效造血。患者骨髓增生活跃而外周血细胞减少．有高度转化急性白血病倾向。随着MDS发病率的上升，对MDS的研究和认识也在不断进展和深化。     

骨髓增生异常综合征患者源成骨细胞表达多种细胞因子并体外维持造血祖细胞存活

为了解骨髓增生异常综合征（MDS）患者成骨细胞的生物学特性,并探讨其对体外造血的支持能力,利用骨髓间充质干细胞多向分化潜能将其诱导分化为成骨细胞,在体外和造血细胞构建二维培养体系,研究其体外支持造血祖细胞生存的作用;同时采用RT-PCR的方法在mRNA水平上分析由骨髓间充质干细胞诱导分化的成骨细胞细胞因子的表达并与人成骨细胞系hFOB1.19比较。结果发现,来源于MDS患者的成骨细胞在无外源性细胞因子的条件下能够短期维持GM-CFC造血祖细胞的存活。经过RT-PCR证实,人成骨细胞系hFOB1.19表达SCF、IL-6、SDF-1α、G-CSF、GM-CSF等细胞因子,来源于MDS患者和正常人的成骨细胞也能表达上述细胞因子,但却不表达GM-CSF。结论：与正常人相比,MDS患者源的成骨细胞同样能够维持GM-CFC的存活,这可能和成骨细胞表达多种重要的造血相关的细胞因子有关。     

胎盘血造血细胞移植的基础与临床研究

骨髓、胎肝移植已广泛成功地应用于再生障碍性贫血、白血病以及其他恶性血液病、免疫缺陷性疾病,但其来源受一定限制,人们都在寻找其他造血干/祖细胞移植的新的组织来源。早已有人发现人胎盘血(下称脐血)含有一定量的粒系祖细胞(CFU-GM)。近年随着造血细胞培养和单克隆抗体检验技术的发展,国外研究发现脐血中富含各系造血干/祖细胞、基质细胞及造血刺激因子(CSF),可作为一种极有潜力的造血干/祖细胞移植的来源,并用于临床获得成功。本文拟就有关脐血造血功能及移植的基础与临床研究综述如下:     

微载体支持体外造血研究

为了探索体外维持造血干细胞自我更新潜能,抑制过度分化以及大量扩增造血细胞的技术,我们将小鼠骨髓基质细胞贴附于微载体上,再接种小鼠骨髓造血细胞共同培养(G2组).在此基础上,用海藻酸钠包埋微载体基质细胞和造血细胞制成凝胶珠进行培养(G1组);设置单纯微载体基质细胞(G3组)和单纯骨髓细胞(G4组)培养作为对照.对比观察,显微摄影,计数细胞总数、CFU-GM集落数和CD34阳性细胞百分率.培养2周观察到造血细胞粘附在微载体基质细胞上或龛在微载体基质细胞间并形成造血灶.3次实验结果显示,G2组CFU-GM集落总数显著高于G4组,同时也显著高于G3加G4组集落总数之和(t=6.553和t=5.494;P＜0.05);G2组CD34+细胞百分率高于其他各组,与CFU-GM测定结果趋向一致.实验表明,微载体基质细胞有较好的支持体外造血的效果,至少可维持4周,而海藻酸固定化造血细胞培养与对照组没有差异.     

地西他滨治疗高危骨髓增生异常综合征10例疗效观察

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是一组起源于造血干细胞的获得性克隆性疾病,其特征性病理生理改变是克隆性造血干、祖细胞发育异常和无效造血,其基本临床特征是骨髓中造血细胞有发育异常的形态学表现和外周血     

骨髓增生异常综合征模型小鼠研究进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组造血干细胞克隆异常疾病,其特征是无效造血导致的全血细胞减少,一系或多系细胞病态造血[1],总体预后较差,大多病例在其进展为急性白血病前后死于并发症。由于MDS的高度异质性,来自个体病例骨髓的克隆细胞与残存正常造血细胞比例有很大差异,且不同病例克隆细胞的生物学特征亦不同。因此对患者标本的研究常难取得一致且有说服力的结果。对不同亚型病例的骨髓细胞进行体外培养建立克隆细胞株,是较理想的研究手段,但由于MDS克隆细胞本身的生物学特征,体外培养的骨髓细胞多演变为有淋巴细胞表型的子代细胞[2]。…     

重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义

为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。