实验性糖尿病大鼠胸腺的免疫组化研究

胰岛素依赖型糖尿病的发病与胸腺 T细胞亚群分化异常有关 ,但对其在发病过程中的分化规律和作用机理尚未完全清楚。本实验给予 SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素 (STZ,6 5 mg/kg)以诱导实验性糖尿病 ,做常规形态学及免疫组织化学染色 ,观察实验性糖尿病状态下大鼠胸腺的形态结构、胸腺上皮细胞角蛋白 (CK )表达及胸腺细胞表面CD4、CD8分子表达的变化。结果表明 :本实验所诱导的实验性糖尿病大鼠均出现典型的糖尿病症状 ,血糖值均在 2 0 .2 5mm ol/L以上 ,远高于糖尿病大鼠的血糖标准值 16 .0 mmol/L ,说明本实验所用的建模方法效果较好…     

自身免疫调节因子在小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化中的表达

文题释义：自身免疫调节因子：基因分析显示由于单基因突变引起一种自身免疫病,此基因则被命名为自身免疫调节因子即AIRE基因。AIRE基因的突变或者缺失会造成胸腺内自身组织特异性抗原转录缺失,影响阴性选择,从而致使自身反应性T细胞逃逸外周,引起自身免疫反应。AIRE基因一直是免疫学相关研究中的热点。胸腺上皮细胞：胸腺上皮细胞分为髓质胸腺上皮细胞和皮质胸腺上皮细胞,二者均来源于胸腺上皮祖细胞,据研究报道髓质胸腺上皮细胞表达的AIRE基因调控着胸腺内的阴性选择,但是由于胸腺上皮祖细胞和胸腺上皮细胞不易分离且数量少,其应用和研究一直受限。该实验在体外将胚胎干细胞分化为胸腺上皮祖细胞,可以为相关研究提供细胞来源。  摘要背景：自身免疫性疾病主要是由于胸腺内自身组织特异性抗原持续表达缺失而引起强烈免疫应答的一类疾病,而胸腺功能减退和胸腺内组织特异性抗原的不稳定表达会限制治疗效果。胸腺组织主要由胸腺上皮细胞组成,但胸腺内成熟胸腺上皮细胞和胸腺上皮祖细胞有限的数量来源极大限制了相关研究。目的：研究小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞分化过程中自身免疫调节因子的表达变化。方法：采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,分别收集定向诱导分化第0,3,13天细胞,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time PCR 检测相关基因及蛋白的表达变化。结果与结论：①诱导分化第0天,免疫荧光检测OCT4、SSEA1表达阳性;诱导分化第3天,免疫荧光检测SOX17、FoxA2呈双阳性表达;诱导分化第13天,流式细胞术检测EpCAM1、K5、K8表达阳性;②Real-time PCR检测小鼠胚胎干细胞定向分化过程中PAX1、PAX9、FOXN1、PLET1基因表达逐渐增高;③Real-time PCR检测分化第0,3,13天AIRE基因表达升高,INS2、GAD67基因表达也升高;④Western blot检测分化第0,3,13天AIRE蛋白表达降低,胰岛素蛋白、GAD67蛋白均无表达;⑤结果表明,小鼠胚胎干细胞成功分化为胸腺上皮祖细胞,且分化而来的胸腺上皮祖细胞中AIRE基因表达很高,促进了INS2、GAD67基因的表达,为细胞移植治疗自身免疫性疾病提供评价依据。ORCID: 0000-0001-5253-3085(胡蓉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

Foxn1在胸腺上皮细胞发育分化中的关键调控作用

胸腺是哺乳动物T细胞发育成熟的关键中枢免疫器官,并可分泌多种胸腺激素及激素类物质.胸腺上皮包括皮质和髓质,提供T细胞发育所必需的胸腺微环境.通常,造血干细胞首先在皮髓交界处进入胸腺,在皮质中增殖,表达TCR基因,产生具有功能的TCRαB链,然后迁出皮质,发育为CD4+CD8+T细胞后再迁入皮质进行阳性选择.随后T细胞经趋化因子CCR7介导进入髓质,剔除自身反应性T细胞,即进行阴性选择,成熟的T细胞移出胸腺至外周.TECs不仅提供肽段/MHC配体支持T细胞选择,还分泌支持T细胞扩增的各种可溶性因子如Wnt、IL-7和干细胞因子,表达各种趋化因子和促进T细胞定向和分化的Notch配体等.TECs的发育依赖于Foxn1的表达,人类和小鼠Foxn1基因突变或缺失可以引起胸腺发育严重障碍或缺失.现主要就Foxn1对TECs发育分化调控的研究进展进行简要综述.     

人CK8&18阳性胸腺上皮细胞对脐血CD34~+细胞向T细胞分化的影响

目的:通过CK8/18阳性胸腺上皮细胞与人脐血单个核细胞在Transwell板的共培养,探讨CK8/18阳性TEC对T细胞增殖分化的影响。方法:用胶原酶消化法分离纯化胸腺上皮细胞、免疫组化鉴定分离纯化的TEC,采用密度梯度离心法分离获得脐血单个核细胞,并采用免疫磁珠分选CD34+细胞,将TEC种植培养于Transwell双层培养板上层,使其均匀平铺于上层板底部,再将分选后的细胞加入上层小室,经过48小时的共培养,流式细胞术检测进入下室细胞的表型变化。结果:分离纯化的TEC经免疫组化鉴定CK8/18阳性。TEC与脐血单个核细胞共培养后,CD3+CD4-CD8-双阴性、CD3+CD4+CD8-单阳性细胞显著增加,CD3+CD4+CD8+双阳性细胞亚群细胞减少,CD8单阳性细胞增加不明显;CD45RA阳性细胞比率无显著变化,CD45RO阳性细胞比率显著增加。结论:CK8/18阳性TEC能选择促进脐血单个核细胞CD4+T细胞和CD45RO+细胞增殖。     

实验性糖尿病大鼠胸腺的形态学研究

用四氧嘧啶诱导复制的大鼠实验性糖尿病动物模型，在光，电镜下，观察了糖尿病大鼠胸腺的形态学变化。结果表明：糖尿病大鼠胸皮质明显就薄，皮质淋巴细胞大量减少，细胞分裂盯计数显著降低。细胞退化。明上皮细胞呈明显的退行性变，其胞质内张力细丝束和溶酶体样致密颗粒明显增多，出现空泡化，自噬体及较多的含颗粒状物质的囊泡。     

实验性糖尿病对大鼠胸腺皮质上皮细胞的影响

目的　探讨糖尿病对大鼠胸腺皮质上皮细胞影响的形态学变化 ,了解其引起胸腺细胞凋亡及胸腺萎缩的可能机制。　方法　采用四氧嘧啶型糖尿病动物模型 ,电镜下观察了糖尿病大鼠胸腺皮质上皮细胞的超微结构变化。　结果　 2型上皮细胞发生 4种变化 :1 内分泌功能紊乱样变 ,以大量变性的空泡与囊泡为特征 ;2 退化样变 ,以大量的变性分泌泡、髓样小体和粗大张力细丝束为特征 ;3 吞噬细胞样变 ,以大量的溶酶体样致密颗粒及吞噬的凋亡细胞与小体为特征 ;4 细胞凋亡样变 ,以细胞凋亡的早期形态学变化为特征。 3型上皮细胞发生两种变化 :1 退化样变 ,伴有大量分泌肽类激素样的致密颗粒群。 2 增生样变 ,在其胞体周伴有大量的胶原原纤维。此外 ,在胸腺皮质中还发现大量的胸腺细胞凋亡及胸腺细胞数量减少。　结论　糖尿病可导致大鼠胸腺皮质上皮细胞发生多样性的超微结构变化 ,可能是影响胸腺细胞发育 ,并导致其凋亡及胸腺萎缩的主要机制之一。     

小鼠胸腺雄激素受体的定位及其与新分子Rwdd1的关系

目的 研究雄激素受体(AR)在胸腺萎缩中的作用机制.方法 用免疫组化和RT-PCR观察AR在小鼠胸腺内的分布;用刀豆蛋白A(ConA)诱导胸腺细胞增殖,观察睾酮对细胞增殖的影响;构建AR和Rwdd1的真核表达载体pcDNA3.1-AR和pcDNA3.1-Rwdd1-V5,共转染293T细胞,通过免疫共沉淀(CoIP)法观察二者之间在细胞内是否存在相互作用.结果 AR广泛分布在胸腺皮质和髓质,且主要定位于胞核.在不同胸腺细胞亚群中均有AR表达,其中以CD4-CD8-(DN)细胞表达水平最高.3种胸腺上皮细胞系中仅皮质来源的427.1细胞系存在AR表达.胸腺细胞中存在功能性AR.AR与Rwdd1之间不存在直接相互作用.结论 小鼠胸腺细胞中存在AR的表达,目前尚不能证明AR与Rwdd1存在直接的相互作用.     

化生性胸腺瘤2例临床病理分析

目的：探讨化生性胸腺瘤的临床及病理学特征。方法：应用光镜及免疫组织化学方法观察2例化生性胸腺瘤的组织学特点及免疫学表型,并复习相关文献。结果：2例均为男性,年龄55岁及56岁。组织学肿瘤显示双相分化特点,上皮细胞区域与梭形细胞区域交错分布并相互移行。上皮细胞呈相互吻合的束状、岛状及宽大的梁状排列,细胞轻度异型,可见核沟及核内假包涵体,偶见核分裂像;梭形细胞呈短束状或席纹状排列,细胞温和,未见核分裂像。免疫表型：上皮细胞区域CK19和AE1/AE3呈强阳性表达,上皮膜抗原（epithelial membrane antigen,EMA）弱阳性;梭形细胞区域表达Vimentin、Bcl-2及CD99,AE1/AE3局灶阳性,EMA弱阳性。两种区域中Ki67指数均〈5%。间质淋巴细胞CD3、CD5、CD20阳性,不表达Td T和CD99。结论：化生性胸腺瘤是一种罕见的良性或低度恶性胸腺肿瘤,诊断依靠病理组织学和免疫组织化学标记,完整切除预后良好。     

异位错构瘤性胸腺瘤的临床病理学观察和免疫组织化学研究

目的探讨异位错构瘤性胸腺瘤的临床病理学特征、免疫学表型和组织发生。方法对2例异位错构瘤性胸腺瘤进行临床病理学分析,采用免疫组织化学LSAB法行AE1/AE3、细胞角蛋白(CK)5、CK7、CK8、CK20、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白、CD5、CD10、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、calponin、结蛋白、CD34、S-100蛋白、CD57、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲状腺转录因子(TTF)-1和CD99标记。结果两例均发生于男性,年龄分别为20岁和40岁,因发现胸骨柄上缘肿块6个月和左锁骨上肿块2个多月就诊。肿块呈球形和卵圆形,边界清楚,最大直径分别为5cm和3cm,切面呈灰白色,质地柔软。组织学上,肿瘤由梭形细胞、上皮细胞和成熟的脂肪细胞3种成分混合组成。梭形细胞成分在2例中分别占到85%和70%,形态上类似纤维母细胞,多呈束状、编织状或席纹状排列。上皮细胞成分在两例中均占10%左右,形态上以非角化性鳞状上皮为主,可呈实性的小岛屿状、类似造釉细胞瘤的条索状和扩张的囊肿样排列,部分区域显示腺样分化,可见腺管形成。上皮细胞和梭形细胞在形态上有移行。成熟的脂肪组织呈不规则性分布,在两例肿瘤中所占的比例分别为<5%和20%。免疫组织化学标记显示,上皮细胞表达AE1/AE3、CK5、CK7、CK8和EMA,梭形细胞除CK外还表达波形蛋白、CD10和CD34,并部分表达α-SMA和calponin。两种细胞成分均不表达CK20、CD5、TTF-1、结蛋白、S-100蛋白、CD57、GFAP和CD99。结论异位错构瘤性胸腺瘤是一种好发于中青年男性锁骨上和胸锁关节附近软组织内的良性肿瘤,是一种由上皮和肌上皮组成的混合性肿瘤,可能起自于His颈窦,采用鳃原基混合瘤来命名或许更为合适。     

脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病

背景：脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞可以向胰岛样细胞诱导分化。 目的：验证脐带源间充质干细胞与大鼠胰腺细胞共培养向胰岛样细胞诱导分化的可能性,并观察移植后对糖尿病大鼠血糖的影响。 方法：分离、诱导、传代脐带Wharton’s Jelly中间充质干细胞,再与大鼠胰腺细胞共培养,诱导成胰岛细胞团样组织。将大鼠分为3组,正常对照组不进行移植及造模;模型组仅制备糖尿病大鼠模型;实验组造模后将胰岛样细胞移植入糖尿病大鼠肾脏包膜。 结果与结论：脐带Wharton’s Jelly细胞培养中有细胞从组织块中爬出,第7天形态发生变化,贴壁细胞部分变成梭形。分离培养的细胞表达具有间充质干细胞表面特有标志CD44、CD29、CD105,不表达CD34、CD45、CD14。诱导第7,10天PDX-1及人胰岛素强染色;胰岛素及C-肽浓度较单纯培养组明显升高;PDX-1及人胰岛素mRNA诱导第7、10天较高表达。移植第1周大鼠尾尖血糖链脲佐菌素实验组明显低于模型组(P < 0.01),但明显高于正常照组(P < 0.01)。8周链脲佐菌素实验组肾脏被膜下发现胞核染棕色染色的Brdu阳性、胞浆棕色染色的胰岛素阳性细胞。结果表明,脐带Wharton’s Jelly中存在脐带源间充质干细胞,与大鼠胰腺细胞共培养可促进间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化,移植入糖尿病大鼠肾脏被膜下,可显著降低糖尿病大鼠血糖。     

EAE小鼠胸腺主要凋亡细胞群及其细胞凋亡机制的初步探讨

目的初步探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠胸腺主要凋亡细胞群及其胸腺细胞的凋亡机制。方法用MOG35-55/CFA乳化剂背部皮下免疫C57BL/6小鼠,诱导EAE。观察实验动物的临床症状和脊髓病理改变;计数2组小鼠胸腺细胞总数;应用流式细胞仪分析2组小鼠胸腺CD4+CD8+双阳性(DP),CD4+/CD8+单阳性(SP)和CD4+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的比例变化。结果 EAE组模型诱导成功,HE染色发现脊髓组织炎症细胞浸润;EAE小鼠发病高峰期胸腺细胞总数和胸腺DP细胞显著低于对照组(P0.01);SP细胞的比例高于对照组(P0.05),但是其绝对值低于对照组(P0.01)。结论 EAE小鼠胸腺细胞的主要凋亡细胞群是CD4+CD8+DP细胞,其可能凋亡机制是通过加速DP细胞向SP细胞的分化,从而加快DP细胞凋亡和SP细胞释放入外周并浸润中枢神经系统。     

松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素-7表达的影响

目的 探讨松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素7(IL-7)表达的影响及其意义.方法 1.培养大鼠胸腺上皮细胞,应用广谱角蛋白抗体进行免疫细胞化学显色鉴定;MTT法观察褪黑素(1×10-3～10-9mol/L)干预对细胞生长的影响;细胞分空白对照组、褪黑素10-8mol/L处理组和褪黑素10-6mol/L处理组,RT-PCR法观察细胞IL-7 mRNA的表达;2.选用清洁级雄性SD大鼠110只,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素7.5ms/(kg·d)腹腔注射组和松果体摘除+褪黑素15mg/(kg·d)腹腔注射组.术后4周和8周取材,运用免疫组织化学和RT-PCR方法 观察胸腺上皮细胞IL-7表达的变化. 结果 褪黑素干预对大鼠胸腺上皮细胞的生长无显著影响,但能使IL-7 mRNA的表达水平呈剂量依赖性升高;松果体摘除对大鼠胸腺上皮细胞表达IL-7无显著影响,补充褪黑素15mg/(kg·d)4周后IL-7表达显著增高,8周后均下降至正常水平. 结论 松果体及褪黑素可能通过影响大鼠胸腺上皮细胞IL-7的表达,从而调节胸腺细胞的分化发育.     

鲑鱼鱼白DNA对老龄小鼠胸腺淋巴细胞构成的影响

目的：探讨外源性核酸对自然衰老小鼠CD3^ 、CD3^ CD4^ 和CD3^ CD8^ 胸腺淋巴细胞构成的影响。方法：10月龄雌性Balb/c小鼠按体质量随机分为高剂量组、低剂量组和对照组。5周后，测定胸腺脏器指数；胸腺组织切片后以Image-pro Plus专业图像分析系统（4.0版）计数胸腺细胞；采用直接免疫荧光流式细胞术检测老龄小鼠胸腺细胞CD3^ 、CD3^ CD4^ 和CD3^ CD8^ 的表达情况。结果：鲑鱼鱼白DNA提取物对小鼠的体质量、胸腺质量和胸腺指数均没有影响，但可增加小鼠的胸腺皮质和髓质细胞数量，并提高CD3^ 、CD3^ CD4^ 和CD3^ CD8^ 淋巴细胞的比例，而对CD3^ CD4^ 和CD3^ CD8^ 淋巴细胞的比值没有影响。结论：补充鲑鱼鱼白DNA可能改变自然衰老Balb/c小鼠胸腺细胞的构成，使胸腺有效细胞数量增加，从而可能延缓胸腺的退化萎缩。     

人骨髓间充质干细胞体外分化为结膜上皮样细胞

目的 探讨体外诱导人骨髓基质干细胞(hMSCs)向结膜上皮样细胞(hCjEs)定向分化的可能性.方法 体外分离、培养hMSCs和人hCjEs,分别从细胞形态学和免疫细胞化学的方法对细胞进行鉴定;Transwell非接触共培养法诱导hMSCs向结膜上皮样细胞定向分化;倒置相差显微镜观察分化细胞的形态学改变;免疫细胞化学和反转录聚合酶链反应分别对分化细胞角蛋白13(CK13)的蛋白和mRNA表达进行检测;并用单独培养的hMSCs和hCjEs做对照.结果 实验获取的hMSCs以长梭形为主,融合呈漩涡状;hCjEs呈不规则圆形或多边形,融合的hCjEs成铺路石样;hMSCs阳性表达CD44和CD29,hCjEs阳性表达CK13;非接触共培养使hMSCs的形状由长梭形逐渐变为不规则多边形;免疫细胞化学和RT-PCR分别在蛋白和基因水平证实分化细胞表达CK13,与单独培养的结膜上皮细胞表达相似.结论 在一定条件下,可以诱导体外培养的hMSCs形态发生变化、向具有结膜上皮细胞表型的上皮样细胞定向分化.     

人胎儿胸腺内CD80和癌胚抗原的表达及定位

目的 探讨人胎儿胸腺内CD80和癌胚抗原(CEA)的表达水平及定位与胎儿发育的关系. 方法自附属医院妇产科收集流产死亡的胎儿12例,其中,小于4个月的4例列为早期,5个月的8例列为晚期.早晚期标本各分为两等份,一份制备冷冻切片进行HE染色、α-醋酸萘酯酶(ANAE)组织化学染色、CD80及CEA免疫组织化学染色,另一份以Trizol提取蛋白后进行CD80的免疫印迹和CEA的酶联免疫吸附测定(ELISA)检测. 结果 早期胎儿胸腺髓质发育差,晚期胎儿胸腺CD80阳性网状上皮细胞可分为6型:Ⅰ型扁平细胞分布于被膜内面和小梁表面;Ⅱ型呈小星形分布于皮质内;Ⅲ型及Ⅳ型呈扁平状,位于皮髓质交界处;Ⅴ型呈大星形状,突起多而细长相连成网状;Ⅵ型位于哈氏小体.在胎儿胸腺髓质网孔处可见ANAE点型(CD+CD8-)和散粒型(CD4-CD8+)细胞各呈丛状分布.早期组CEA阳性分布于髓质上皮细胞和哈氏小体,晚期组CEA阳性更集中于哈氏小体.CD80的免疫印迹和CEA的ELISA检测皆显示晚期组表达高于早期组. 结论 研究结果提示,人胎儿胸腺内CD80和CEA的表达及定位与胎儿胸腺细胞的发育及功能密切相关.     

CD28协同刺激分子对T细胞受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响

目的：分析anti-TCRαβmAb anti-CD28mAb诱导小鼠胸腺淋巴细胞不同亚群的凋亡及凋亡程度，分析CD28协同刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响。方法：新鲜分离胸腺细胞，加入anti-TCRαβmAb-anti-TCRαβmAb anti-CD28mAb等培养20h，进行多重染色，流式细胞仪分析。结果：与胸腺细胞自发凋亡的结果相比较；（1）双信号刺激可明显增加胸腺细胞凋亡的数目，尤其是CD4^ CD8^ 胸腺细胞的凋亡数目。（2）凋亡的CD4^ CD8^ 亚群，CD4^ CD8^-亚群细胞表面CD28的表达均增多。结论：CD28共刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响与细胞的成熟程度有关，CD28共刺激分子能明显增强不成熟皮质胸腺细胞的凋亡。     

体外诱导人羊膜上皮细胞分化为结膜上皮样细胞

目的将人羊膜上皮细胞(HAEC)和兔结膜上皮细胞共培养,观察是否能将HAEC诱导分化为结膜样上皮细胞。方法分别采用酶消化法和组织块法获得HAEC和兔结膜上皮细胞,并对培养的细胞进行形态学观察;运用TranswellTM非接触共培养系统将HAEC和兔结膜上皮细胞共培养2周,诱导HAEC分化;通过免疫荧光组织化学染色法检测诱导后HAEC中细胞角蛋白4(CK4)、黏蛋白Muc4、Muc5AC的表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测分化细胞Muc4、Muc5AC mRNA的表达。结果体外培养的人羊膜上皮细胞和兔结膜上皮细胞形态较为相似,免疫荧光组织化学染色法检测到诱导后HAEC中CK4、Muc4、Muc5AC呈阳性表达,qRT-PCR检测分化细胞Muc4、Muc5AC mRNA表达阳性。结论 HAEC在与兔结膜上皮细胞共培养的诱导条件下,可以向结膜上皮样细胞和产黏蛋白细胞转分化。     

体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为T淋巴细胞

目的 体外诱导小鼠胚胎干细胞(ESC)分化为T淋巴细胞. 方法 借助小鼠胚胎干细胞体外自然分化形成的类胚体(EB)中含有=三胚层细胞的独特细胞环境,加入多种细胞因子和胸腺肽α1,体外诱导小鼠ESC向T淋巴细胞分化.利用流式细胞仪在不同时间点检测诱导细胞表面T淋巴细胞发育相关的表面标志CD25、CD44、CD3、CD4、CD8以及T细胞受体(TCR)αβ和TCRγδ分子的表达水平. 结果 诱导3 d后,出现CD44+细胞;第6天出现CD44+、CD44+CD25+和CD25+细胞群;第15天开始表达CD3分子;1周后开始出现CD4+CD8+双阳性细胞.随着诱导时间的延长,CD3+细胞和CD4+CD8+细胞的百分比不断升高.培养1个月后,出现少量的CD4+和CD8+的单阳性细胞.诱导细胞早期表达TCRαβ和TCRγδ.随着诱导时间的延长,T细胞进一步成熟,诱导细胞以TCRαβT细胞为主. 结论 细胞因子和胸腺肽α1的共同作用可以在体外诱导小鼠胚胎干细胞分化成具有T淋巴细胞表型的细胞,且细胞的表型变化与T细胞体内正常的胸腺发育过程中的表型变化一致.     

胸腺上皮细胞的起源与分化

胸腺提供复杂的微环境来调节T细胞的存活、分化、选择和迁移,是T细胞发育、分化和成熟的场所也是自身免疫耐受的中心。胸腺上皮细胞包括胸腺皮质上皮细胞和髓质上皮细胞,其来源于内胚层,并由胸腺上皮祖细胞分化而来。胸腺上皮细胞的分化空间结构的建立有赖于转录因子和信号通路分子在胸腺上皮细胞不同时段复杂的分子调控。胸腺上皮细胞成熟过程也是胸腺上皮细胞一系列特异性表面标记分子的变化过程,对胸腺上皮细胞特异标记分子的研究是分析胸腺上皮细胞复杂分化过程的重要工具。本文重点探讨胸腺上皮细胞起源发展模型及分化过程中分子调控作用,以期更好的理解胸腺上皮细胞如何成为能够支持T细胞分化的特异哺育者。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠胸腺中CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠胸腺中CD4 CD25 调节性T(Tr)细胞数的变化。方法将40只健康昆明小鼠随机分为4组,每组各10只。Ⅰ组小鼠腹腔注射枸橼酸钠缓冲液(0.2mL/只)作为对照;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠分别腹腔注射20、40、80mg/kg的STZ连续5d,每天1次。用尿糖试纸检测小鼠尿糖。用葡萄糖测定试剂盒检测小鼠血糖。用间接ELISA法检测小鼠自身抗体的水平。用流式细胞术检测胸腺中Tr细胞数的变化。结果Ⅱ、Ⅲ组小鼠血糖、自身抗体的水平明显高于对照组(P<0.05),胰岛中有淋巴细胞浸润,胸腺中Tr细胞数低于对照组。结论STZ可诱导小鼠产生糖尿病,但不同剂量的STZ所引起的胰腺和胸腺的病理变化不同。其中,中等剂量的STZ既可诱导小鼠发生糖尿病,又可使胸腺中Tr细胞数减少。后者可能与小鼠自身免疫性糖尿病的发生有关。