人脑胶质瘤尿激酶型纤溶酶原少许活因子及其抑制因子表达的研究

目的：研究５３例人脑胶质瘤和８例正常脑组织ｕＰＡ、ＰＡＩ１、ＰＡＩ２表达水平。方法：采用免疫组化方法。结果：在８例正常脑组织中，ｕＰＡ、ＰＡＩ１、和ＰＡＩ２表达阴性，低级别（Ⅰ、Ⅱ）胶质瘤ｕＰＡ、ＰＡＩ１表达水平较低，同级别（Ⅲ、Ⅳ）胶质瘤ｕＰＡ、ＰＡＩ１表达水平显著升高（Ｐ〈０．０５），且ｕＰＡＧ与ＰＡＩ１表达水平呈显著正相关（ｒ＝０．５１，Ｐ〈０．０１）；５３例胶质瘤中公３例ＰＡＩ２呈低表达。     

人脑胶质瘤尿激酶型纤溶酶原激活因子及其抑制因子表达的研究

目的：研究５３ 例人脑胶质瘤和８ 例正常脑组织ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 、ＰＡＩ２ 表达水平。方法：采用免疫组化方法。结果：在８ 例正常脑组织中,ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 和ＰＡＩ２ 表达阴性,低级别（ Ⅰ、Ⅱ） 胶质瘤ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 表达水平较低,而高级别（Ⅲ、Ⅳ） 胶质瘤ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 表达水平显著升高（ Ｐ＜ ０．０５） ,且ｕＰＡ 与ＰＡＩ１ 表达水平呈显著正相关（ ｒ ＝ ０．５１,Ｐ＜ ０．０１） ;５３ 例胶质瘤中仅３ 例ＰＡＩ２ 呈低表达。结论：胶质瘤可合成ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 和ＰＡＩ２ ,在胶质瘤的发生和发展过程中,ｕＰＡ、ＰＡＩ１ 可能参与或促进了其恶性演进。     

癌基因表达变化与脑胶质瘤细胞辐射性凋亡的关系

为了进一步探讨癌基因表达的变化与辐射诱导肿瘤细胞凋亡的关系，作者采用免疫组化技术，检测了人脑星形细胞瘤细胞系经过Ｘ射线处理前后ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２基因表达的变化；采用原位杂交方法检测ｐ５３基因在ｍＲＮＡ水平表达的变化。结果表明：①凋亡组内ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因表达率明显高于对照组（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５），ｂｃｌ－２表达显著减弱（Ｐ＜０．０５），ｐ５３或ｃ－ｍｙｃ与Ｂｃｌ－２基因表达呈显著性负相关（Ｐ＜０．０５）。②凋亡组内ｐ５３在ｍＲＮＡ水平表达量明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），ｐ５３基因在蛋白水平与ｍＲＮＡ水平表达呈显著性正相关（Ｐ＜０．０５）。③ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因对细胞凋亡具有增殖和凋亡双向调节作用，ｂｃｌ－２基因抑制细胞凋亡，三者在细胞凋亡过程中存在着协同或拮抗作用的关系。本研究结果为脑胶质瘤的基因治疗提供了一条新线索。     

Bcl-2基因及其家族Bax,Bcl-Xl和Fas/Apo-l,P16的检测在急性白血病中的临床意义

目的：为了解白血病凋亡正、负反馈网络中的问题与临床的关系，研究了抑制凋亡的基因Ｂｃｌ２及其家族Ｂａｘ，ＢｃｌＸｌ以及诱导凋亡的基因Ｆａｓ／Ａｐｏ１，Ｐ１６。方法：采用细胞免疫组化，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ，以及ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ的方法。结果：发现在ＡＭＬ组和ＡＬＬ组，Ｂｃｌ２抗原表达均明显高于正常（Ｐ＜００１），回顾性分析ＡＭＬＣＲ组其明显低于ＮＲ组（Ｐ＜００１）。蛋白印迹ＣＲ组Ｂｃｌ２表达虽然降低，但和ＮＲ组比较无统计学意义（Ｐ＞００５）。Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ的表达ＣＲ组明显低于ＮＲ组（Ｐ＜０．０１）。Ｂａｘ的表达在免疫组化中白血病明显低于正常（Ｐ＜００１），但在ＣＲ组与ＮＲ组，免疫组化，蛋白印迹，ＢａｘｍＲＮＡ的表达，均无差异（Ｐ＞００５）。但ＢｃｌＸｌｍＲＮＡ的表达两组间有明显差异（Ｐ＜００１）。Ｆａｓ／Ａｐｏ１的表达为白血病组低于正常（Ｐ＜００１），但在ＣＲ与ＮＲ组中，免疫组化与蛋白印迹分析均无统计差异（Ｐ＞００５）。Ｐ１６的表达为白血病组低于正常组（Ｐ＜００１），但在ＣＲ组与ＮＲ组中无统计学意义（Ｐ＞００５）。结论：Ｂｃｌ２抗原以及Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ，Ｂｃｌ     

癌基因表达变化与脑胶质细胞辐射性凋亡的关系

为了进一步探讨癌基因表达的变化与辐射诱导肿瘤凋亡的关系，作者采用免疫组化技术，检测了人脑星形细胞瘤细胞系经过Ｘ射线前后ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ和ｂｃｌ－２基因表达的变化；采用原位杂交方法检测ｐ５３基因在ｍＲＮＡ水平表达的变化。结果表明：（１）凋亡组内ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因表达率明显高于对照组（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）ｂｃｌ－２表达显著减弱（Ｐ〈０．０５），ｐ５３或ｃ－ｍｙｃ与Ｂｃｌ－２基因表达呈显著     

肝门部胆管癌组织中VEGF和血管生成相关性的研究

目的：探讨肝门部胆管癌组织中血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和血管生成的相关性。方法：应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和免疫组化技术对２６例肝门部胆管癌、癌周组织及１２例正常组织中ＶＥＧＦｍＲＮＡ和蛋白及微血管密度（ＭＶＤ）进行了检测。结果：２６例肝门部胆管癌组织中ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性表达率为７６．９％（２０／２６）;癌周组织阳性表达率为２８．９％（７／２６）;正常组织表达率为８．３％（１／１２）,三者差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性表达与ＶＥＧＦ蛋白表达具有一致性;ＶＥＧＦｍＲＮＡ阳性者ＭＶＤ值显著高于阴性者（Ｐ＜０．０１）;ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达和ＭＶＤ与肝门部胆管癌的分化程度、浸润转移密切相关（Ｐ＜０．０５）;而与发生部位、病理类型、肿瘤大小、临床分型无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ＶＥＧＦ在肝门部胆管癌发生和浸润转移过程中发挥重要作用,肿瘤血管生成与肝门部胆管癌浸润转移密切相关。     

胃癌组织大肠癌丢失基因杂合性丢失及表达缺失的研究

为探讨大肠癌丢失基因（ＤＣＣ）改变在胃癌发生发展中的作用，应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ及ＲＴ－ＰＣＲ技术对手术切除胃癌组织ＤＣＣ基因的杂合性丢失及ｍＲＮＡ表达进行分析。５１例胃癌中发现杂合丢失１８例，占３５．３％。临床Ⅲ～Ⅳ期组杂合丢失率（５０．０％）显著高于Ⅰ～Ⅱ期组（１４．３％，Ｐ值＜０．０５）。杂合丢失与组织学类型、肿瘤大小、侵袭深度、淋巴转移无显著相关（Ｐ＞０．０５）。５１例胃癌中有２６例检测了ＤＣＣ基因ｍＲＮＡ表达，发现表达缺失８例，占３０．７％。表达缺失与杂合丢失及临床病理参数无关（Ｐ＞０．０５）。胃癌组织中存在着ＤＣＣ基因杂合丢失和ｍＲＮＡ表达缺失。杂合丢失是胃癌的晚期改变     

ＰＴＫ７基因在脑胶质瘤中表达和临床预后的生物信息数据集分析

目的：研究 ＰＴＫ７基因在脑胶质瘤中的表达并分析其与临床病理参数及预后的关系。方法：通过生物信息 数据库和分析工具,分析 ＰＴＫ７基因 ｍＲＮＡ在泛癌组织中的表达,并比较其在脑胶质瘤组织和正常脑组织的表达水 平差异,解析 ＰＴＫ７基因突变及甲基化情况,构建蛋白质相互作用网络,进行 ＧＯ和 ＫＥＧＧ富集,探讨其 ｍＲＮＡ表达 水平与脑胶质瘤相关临床参数和预后的相关性。结果：ＰＴＫ７基因 ｍＲＮＡ在多种肿瘤中表达,在脑胶质瘤中表达水 平中等。ＰＴＫ７基因 ｍＲＮＡ在脑胶质瘤组织表达水平较对照正常脑组织高,且随着脑胶质瘤分级升高而升高。ＰＴＫ７ 在脑胶质瘤中存在突变,还存在基因融合、扩增,ＰＴＫ７表达与脑胶质瘤的 ＷＨＯ分级、异柠檬酸脱氢酶状态和病理类 型相关（Ｐ＜０．００１）。基于 ＣＧＧＡ数据的生存分析显示,在脑胶质瘤中 ＰＴＫ７基因 ｍＲＮＡ低表达组预后优于高表达组 （Ｐ＜０．００１）,在复发脑胶质瘤中存在同样差异（Ｐ＝０．０１３）。基于 ＴＣＧＡ脑胶质瘤数据分析显示 ＰＴＫ７低表达者预 后均优于高表达组,总生存和无病生存差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．００１）。结论：ＰＴＫ７可能发挥癌基因作用参与脑 胶质瘤发生和发展过程,针对 ＰＴＫ７基因的靶向治疗可能是未来的研究方向。     

乳腺癌 nm23-H_1 蛋白表达的研究

应用ＳＰ免疫组化法检测８４例乳腺浸润性导管癌中ｎｍ２３－Ｈ１蛋白的表达，结果显示ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在７２例（８７．５％）有表达。研究表明ｎｍ２３－Ｈ１蛋白的表达水平与淋巴结转移呈负相关（Ｐ＜０．０１），与ＥＲ、ＰＲ水平呈正相关（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），而与组织学分级ＰＣＮＡ指数及ＭＤＲ１－Ｐｇｐ的表达无关（Ｐ＞０．０５）。     

原位微环境与nm23-H1、H-rasmRNA量及肝癌肝内转移的关系

目的研究原发性肝癌原位微环境与转移相关基因ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量及肝癌肝内转移的关系。方法对２５例肝细胞肝癌患者手术切除标本,采用ＲＴ－ＰＣＲ法定量检测其ｎｍ２３－Ｈ１、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量;用免疫组化方法分析微环境之重要因素微血管密度（ＭＤＶ）及癌细胞增殖情况指标－增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。结果伴肝内转移癌组织其ＭＤＶ（Ｐ＝０．００５）、ＰＣＮＡ（Ｐ＜０．０１）指标明显高于不伴肝内转移组,其ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量则相反（Ｐ＜０．０１）,Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ量相差不显著（Ｐ＞０．０５）;ＭＤＶ与ＰＣＮＡ指数呈正相关（Ｐ＜０．０１）,ｎｍ２３Ｈ１ｍＲＮＡ量与ＰＣＮＡ指数呈负相关（Ｐ＜０．０５）。结论肝癌转移前有一明显的微环境不佳及癌细胞增生受抑制的过程。提示肝癌生长中其原位微环境不良在转移发生中起重要的选择性作用;ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ量可反映高转移潜能癌细胞的优势化生长情况。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在边缘系统胶质瘤侵袭中的作用

 目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制因子(TIMP-2)在边缘系统胶质瘤侵袭中的作用。方法 利用免疫组织化学技术SP法检测MMP-2、MMP-9及TIMP-2在35例高、低级别胶质瘤和20例脑良性肿瘤(脑膜瘤)中的表达。结果 ①Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤MMP-2、MMP-9蛋白的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ级，Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤MMP-2、MMP-9蛋白的表达明显高于脑膜瘤，其两两之间比较具有显著性差异。②高级别胶质瘤组TIMP-2蛋白表达明显低于低级别组，低级别组TIMP-2蛋白表达明显低于脑膜瘤组，其两两之间比较具有显著性差异。③35例胶质瘤和20例脑膜瘤中MMP-2与MMP-9呈正相关(y=0．86，P<0．01)，MMP-2与TIMP-2呈负相关(γ=-0．65，P<0．01)，MMP-9与TIMP-2呈负相关(γ=-0．58，P<0．01)。结论 ①MMP-2、MMP-9蛋白的表达与胶质瘤的恶性程度有关，可能成为胶质瘤恶性程度、侵袭能力和预后的判断指标。②TIMP-2是MMP-2的抑制因子，两者之间失衡是促进胶质瘤侵袭的重要因素之一。     

INPP4B和PTEN在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:检测磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型（inositol polyphosphate 4-phosphatase type Ⅱ,INPP4B)和磷酸酯酶与张力蛋白同源物（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)在人脑胶质瘤中的表达情况及二者的相关性,希望对胶质瘤的诊断分级、预后判断及治疗等方面提供理论依据。方法:采用免疫组织化学法（IHC）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法分别测定25例正常脑组织和60例不同级别胶质瘤中INPP4B和PTEN蛋白及mRNA的表达情况。结果:在IHC、qRT-PCR中显示:INPP4B、PTEN在正常脑组织组和低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组三组间表达差异均有统计学意义（P＜0.05）;低级别胶质瘤组中 INPP4B、PTEN表达均高于高级别胶质瘤组（P＜0.05）,正常脑组织组中 INPP4B、PTEN表达均高于低级别胶质瘤组和高级别胶质瘤组（P＜0.05）。INPP4B与PTEN mRNA在正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤三组中表达呈正相关（P=0.000）。结论:INPP4B与PTEN的表达水平均与胶质瘤的恶性级别呈负相关,随着胶质瘤恶性程度的增高二者的表达水平下降。INPP4B与PTEN在胶质瘤中的表达水平具有正相关性,推测其可能在抑制胶质瘤的发生、发展、侵袭增殖等方面具有协同作用。     

IMP3和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及其相关性

目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3（insulin-like growth factor-Ⅱ mRNA-binding protein 3,IMP3）和Ki-67在脑胶质瘤组织中的表达及意义。方法:收集神经外科手术切除后经病理证实的胶质瘤标本126例,另收集脑外伤行内减压术患者的正常脑组织20例作为对照组,采用免疫组化SP法检测IMP3、Ki-67在不同级别胶质瘤组织和正常脑组织中的表达水平;应用Spearman秩相关分析IMP3和Ki-67在胶质瘤组织中表达水平的相关性。结果:IMP3、Ki-67在胶质瘤组织中阳性率为53.17%、56.35%;IMP3、Ki-67在Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性率均高于Ⅱ级(P＜0.05)。免疫组化半定量评分结果显示:正常脑组织和Ⅰ级胶质瘤中IMP3、Ki-67均为阴性表达;Ⅱ级胶质瘤中IMP3、Ki-67阳性表达多为弱阳性;Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中IMP3、Ki-67多数表达为弱阳性、中度阳性和强阳性;Ⅲ 级与Ⅱ级、Ⅳ级与Ⅱ级胶质瘤中IMP3、Ki-67阳性表达率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);IMP3、Ki-67阳性表达均与胶质瘤的病变程度密切相关(P＜0.05)。胶质瘤组织中IMP3、Ki-67阳性表达率在不同性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置和病理类型之间差异均无统计学意义(P＞0.05);IMP3和Ki-67在胶质瘤组织中阳性表达率呈正相关(P＜0.05)。结论:IMP3、Ki-67分别可以有效地反映胶质瘤的病变程度,两者联合诊断可以客观反映胶质瘤病变程度,两者联合检测可能成为胶质瘤生物标记的新指标。     

ITGA5在胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的:探究整合素α5（integrinα5,ITGA5）在脑胶质瘤组织中的表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法:比较TCGA数据库中胶质瘤和正常脑组织ITGA5的表达差异和临床预后的生物学信息。收集临沂市人民医院54例脑胶质瘤手术患者的脑胶质瘤组织标本和临床资料,以及20例脑外伤患者颅内减压后的脑组织标本。以外伤后的脑组织为对照,采用免疫组织化学染色法与蛋白质印迹法检测ITGA5蛋白在胶质瘤中的表达。采用统计学方法研究ITGA5表达水平与临床病理参数的相关性。通过绘制生存曲线,比较ITGA5高表达和低表达患者的预后差异。结果:TCGA数据库中ITGA5在LGG与GBM中的表达均有显著差异（P＜0.001）,表达量随着胶质瘤WHO病理分级的升高而增加,且与患者的不良预后相关。ITGA5在胶质瘤组织中的高表达率为59.2%（32/54）,外伤后脑组织中的高表达率为5.0%（1/20）,两者之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。ITGA5在胶质瘤组织中的表达与WHO分级、Ki-67和p53基因型相关（P＜0.05）,而与年龄、性别和肿瘤部位无关（P＞0.05）。ITGA5高表达胶质瘤患者的生存时间显著低于ITGA5低表达胶质瘤患者（P＜0.05）。结论:ITGA5在胶质瘤组织中的表达增加,且ITGA5的表达与胶质瘤病理分级和患者生存密切相关。     

人脑胶质瘤组织中cyclin D1和cyclin E表达的研究

目的 :研究人脑胶质瘤中细胞周期素 (cyclin)D1和cyclinE的表达与肿瘤病理等级的关系。方法 :采用免疫组织化学法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常脑组织标本中cyclinD1和cyclinE的表达。结果 :人脑胶质瘤组中有 2 9例cyclinD1的表达。随着胶质瘤病理分级增高 ,高、低恶性度胶质瘤的阳性率和平均标记指数均显著升高 ,两者差异有统计学意义 ,P <0 0 5。cyclinD1与cyclinE的平均标记指数之间呈明显正相关 ,Pearson相关系数r =0 64 4,P <0 0 1。结论 :cyclinD1与cyclinE在胶质瘤中被异常表达 ,是肿瘤发生和恶性转化的重要促进因子。     

周期蛋白依赖性激酶1在胶质瘤组织中的表达及其沉默对胶质瘤细胞恶性表型的影响

目的探讨周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)在胶质瘤组织中的表达及其沉默对胶质瘤细胞恶性表型的影响。方法利用自建的人脑胶质瘤体外细胞系SHG44及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞、不同恶性程度的胶质瘤手术标本构建组织芯片,免疫组化染色检测其CDK1蛋白表达;应用RNA干扰技术使CDK1在SHG44细胞及其移植瘤组织中沉默,观察其随后发生的表型变化。结果CDK1在临床标本中随胶质瘤恶性程度升高表达强度增加,Ⅰ-Ⅳ级的阳性表达率分别为22.2%、40.0%、69.6%和78.6%(P=0.01)。体外培养的人脑胶质瘤SHG44细胞球体和裸小鼠皮下移植瘤CDK1表达强度均较高,而神经干细胞和脑肿瘤干细胞球体表达强度低,在细胞增殖活性高的人胚胎脑组织和裸小鼠骨髓中CDK1亦高表达,但在正常成人脑组织低表达。C1和C3体外转染SHG44细胞后,将细胞周期阻滞在G2/M期,而且诱导了凋亡,细胞凋亡率分别上升至27.8%和36.5%。CDK1沉默的裸鼠皮下移植瘤瘤重明显降低,细胞凋亡率为57.1%,明显高于对照组(8.5%)。结论CDK1的高表达呵促进胶质瘤的发生和发展,CDK1沉默后的肿瘤细胞恶性表型可得到控制,CDK1可作为胶质瘤病因分子行进一步研究。     

人脑胶质瘤中CD147的表达及其意义

背景与目的：以往研究发现CD147与某些恶性肿瘤存在相关性。本研究探讨CD147在人脑胶质瘤中的表达及其与病理分级的相关性。方法：收集61例星形细胞肿瘤及18例瘤旁脑组织标本．制作组织芯片。进行免疫组织化学染色,用半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）进行CD147mRNA检测。结果：（1）胶质瘤组织中CD147蛋白的阳性表达率为74．3％．正常脑组织中仅血管内皮细胞浆有阳性着色。（2）Ⅲ、Ⅳ级星形细胞肿瘤瘤细胞胞浆CD147着色显著强于Ⅰ、Ⅱ级低级别星形细胞肿瘤。（3）CD147mRNA在胶质瘤组织中阳性率为83．3％,明显高于正常脑组织中的阳性率25％（P〈0．05）。CD147mRNA在星形细胞肿瘤组织中的表达量为0．274±0．087,明显高于正常组织0．081±0．043,两者差异具有显著性（P〈0．05）。结论：CD147的表达可能在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用．     

脑胶质瘤中胰岛素样生长因子Ⅰ型受体的表达及意义

目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-IR）在正常脑组织和脑胶质瘤中的分布和表达,及其与核增殖指标MIB-1的相关性。方法：应用免疫组织化学S-P法,对55例胶质瘤组织和10例正常脑组织中IGF-IR、MIB-1表达情况进行检测分析。结果：脑胶质瘤组织中IGF-IR阳性率明显高于正常脑组织（P〈0.05）,并且随病理分级（WHO分级）的增高而增高,Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ-Ⅳ级的表达差异有显著性（P〈0.05）;胶质瘤组织中IGF-IR的表达与MIB-1的表达密切相关（P〈0.01,rs=0.735）。结论：IGF-IR在脑胶质瘤的发生发展起重要作用,能促进肿瘤细胞的增殖,有可能成为临床病理诊断脑胶质瘤和判断预后的一个重要指标。