缺血及再灌注损伤中心肌组织钙调蛋白及环磷酸腺苷的变化

心肌细胞内大量Ca~(2+)聚集是心肌缺血及再灌注损伤的共同途径,是造成细胞不可逆性损伤的主要原因。钙调蛋白(CaM)和环磷酸腺苷(cAMP)均可通过增强肌浆网(SR)的Ca~(2+)摄取及加强肌膜的Ca~(2+)内流等方式调节     

癫痫与血液中钙镁含量关系的研究

用原子吸收分光光度法对未经抗癫痫治疗的10例原发性癫痫小儿患者血清 Ca~(2+),Mg~(2+)的含量进行测定;通过动物实验观察家兔血液 Ca~(2+),Mg~(2+)浓度变化对青霉素引起的癫痫样放电的影响。结果是癫痫患儿组血清 Ca~(2+)含量明显低于对照组(P<0.01),而两组 Mg~(2+)含量差异无显著性(P>0.05);当提高家兔血钙浓度时,能延长青霉素致痫的潜伏期,抑制癫痫发放的频率和振幅,而提高血镁浓度时无明显变化。动物实验结果证明了癫痫患儿血清 Ca~(2+)含量低的测定结果是合理的,当血液中 Ca~(2+)含量降低时,神经肌肉的兴奋性增高,由此可诱发痫样放电或癫痫发作。     

缺血及缺血/再灌心律失常大鼠心肌~(45)Ca~(2+)内流变化

本实验采用麻醉大鼠缺血、及缺血再灌心律失常法以及同位素示踪法,对大鼠心肌缺血40mm和缺血10mm再灌30mm心律失常发生与心肌损伤致~(45)Ca~(2+)内流的变化进行了观察。结果表明,心肌缺血40mm心律失常发生较轻VF(53％),~(45)Ca~(2+)内流不明显(与正常心肌组比P>0.05)。缺血10mm再灌30mm心律失常发生严重(91％),室颤发生率较高(80％),~(45)Ca~(2+)内流量明显增加(与正常,缺血心肌组比P<0.01)。证实缺血性心律失常与心肌损伤引起Ca~(2+)内流关系不明显,而再灌心律失常的发生则与心肌损伤引起Ca~(2+)内流增加有关。     

骨骼肌胞浆Ca2+稳态与肌疾病

骨骼肌胞浆内Ca~(2+)稳态是Ca~(2+)转运系统对Ca~(2+)释放和Ca~(2+)摄取保持动态平衡的结果。本文将从细胞和分子水平 讨论肌浆网(SR)钙转运系统的分子基础以及某些肌疾病的发病机制。1 胞浆Ca~(2+)的来源 骨骼肌兴奋-收缩偶联过程中有两个因素,即肌膜的去极化和胞浆内大量的Ca~(2+)快速聚集。前者通过二氢吡啶受     

家兔心肌组织α_1受体和细胞膜Ca~(2+)在心肌缺血/再灌注损伤时的变化

本研究以~3H哌唑嗪为特异的标记配基定量地检测了家兔心脏α_1受体及其在心脏缺血/再灌注损伤时的变化,并结合细胞膜内Ca~(2+)含量的变化及丹参对缺血心肌的保护作用,探讨了心肌/再灌注损伤的机理。结果表明,α_1受体随心肌缺血时间的延长而明显升高,40分钟时达正常对照的2倍以上,在此基础上再灌注4分钟,受体数目稍降,但仍保持在高水平。细胞膜的Ca~(2+)在缺血时的变化与α_1受体的变化平行(随时间而增高),但缺血40分钟再灌注4分钟时明显下降。预先耳缘静脉注射丹参制剂后,缺血40分钟再灌注4分钟,上述两种指标均与对照组无差异。提示丹参对心肌细胞膜具有明显保护作用。     

缺血(氧)鼠心肌肌质网和线粒体内钙离子变化的研究

用液体闪烁计数法测定离体再灌注鼠心肌肌质网(SR)和线粒体(Mit)内~(45)Ca~(2+)放射性强度(cpm),比较能量制剂ATP-氯化镁,活性氧自由基清除剂SOD和钙阻滞剂Verapamil对离体缺血(氧)再灌注鼠心肌细胞SR和Mit钙离子浓度的影响。结果表明,ATP-氯化镁,SOD和Verapamil组SR内~(45)Ca~(2+)的cpm均高于对照组cpm(P<0.01或P<0.05),而Mit内均低于对照组cpm(P<0.01)。此3种药物均能增高离体大鼠心肌细胞内SR~(45)Ca~(2+)和降低Mit~(45)Ca~(2+)积聚,从而保护心肌细胞缺血再灌注损伤。     

过表达Junctate蛋白对小鼠心肌细胞肌浆网Ca~(2+)浓度调节的影响

目的:探讨过表达junctate蛋白后,小鼠心肌细胞肌浆网上钙通道对细胞内钙离子浓度调节的影响。方法:以正常表达junctate蛋白的小鼠(wild-type mice,WT)心肌细胞为WT组,以过表达junctate蛋白的转基因小鼠(transgenic mice,TG)心肌细胞为TG组,用离子荧光测定仪测定两组小鼠心肌细胞静息状态下的钙离子浓度,后再分别测定两组小鼠在给予咖啡因及氯化钾刺激后,心肌细胞内的钙离子浓度的变化情况,并测定咖啡因引起钙瞬变后的恢复时间。结果:静息状态下,TG组心肌细胞[Ca~(2+)]i为(77.6!8.8)nmol·L-1,显著低于WT组(144.2!10.6)nmol·L-1,(P<0.01);加入咖啡因后,TG组细胞内钙瞬变幅度显著低于WT组,且TG组钙瞬变后自峰值恢复到基础水平的时间较WT组明显延长(P<0.01);加入KCl后,两组细胞内[Ca~(2+)]i均瞬间增高,TG组心肌细胞内钙瞬变幅度明显大于WT组(P<0.01)。结论:过表达junctate蛋白会影响肌浆网对细胞内钙离子浓度的调节,其机制可能是过表达junctate蛋白会导致兰尼碱受体(Ryanodine receptor,RyR)功能上调、肌浆网Ca~(2+)-ATP酶(Sarcoplasmic-endoplasmic-reticulum Ca~(2+)-ATPase,SERCA)功能下调,并使肌浆网钙库储存量减少,最终导致静息状态及去极化状态下细胞内钙离子浓度异常。     

参附注射液保护阿霉素心肌毒性机理研究

目的:观察参附注射液保护阿霉素心脏毒性的作用机理.方法:急性分离单个心肌细胞,运用TILLVISION钙离子荧光成像及分析系统,观察不同组间单个心肌细胞内游离钙离子的浓度变化.结果:阿霉素可引起心肌细胞内钙离子水平显著升高(P＜0.01),参附注射液干预可显著降低异常心肌细胞内游离钙离子浓度;同时,参附注射液还可抑制咖啡因诱导的内钙释放.结论:参附注射液对阿霉素心脏毒性的保护作用可能是通过抑制肌浆网的内钙释放,避免心肌细胞内钙超载,从而维持细胞内钙离子水平,达到保护心肌的作用.     

再灌液中Ca~(2+)浓度的变化对心肌缺血再灌注损伤的影响

在大鼠Langendorff灌流模型上观察灌流液含不同浓度Ca~(2+)对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果表明:随再灌液中Ca~(2+)浓度的增加(分别为0、1.5、3.0、5.0mmol/L),以心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶活力下降、脂质过氧化物(MDA)含量、Ca含量及乳酸脱氢酶(LDH)漏出量增加为指标的组织损伤进行性加重。     

热性惊厥患儿血清Ca~(2+)水平与神经损伤、心肌损伤程度的关系

目的:探讨热性惊厥患儿血清Ca~(2+)水平与神经损伤、心肌损伤程度的关系。方法:选取在本院接受治疗的热性惊厥患儿32例作为观察组,另取同期在本院进行疫苗接种的健康小儿30例作为正常对照组。检测两组小儿血钙水平,根据观察组血钙水平中位数进一步分为高血Ca~(2+)组16例、低血Ca~(2+)组16例。对比观察组不同血钙患儿神经损伤、心肌损伤程度的差异。结果:观察组血清Ca~(2+)水平低于正常对照组(P<0.05);低血Ca~(2+)组外周血兴奋性氨基酸Glu、Asp、Lys、Ser含量高于高血Ca~(2+)组,抑制性氨基酸Gly、GABA含量低于高血Ca~(2+)组(P<0.05);低血Ca~(2+)组患儿心功能参数SV、CI、Vpk水平低于高血Ca~(2+)组,SVR水平高于高血Ca~(2+)组(P<0.05);低血Ca~(2+)组外周血心肌酶谱指标CK-MB、LDH、α-HBDH含量高于高血Ca~(2+)组(P<0.05)。结论:热性惊厥患儿血清Ca~(2+)水平较低,且Ca~(2+)水平与神经损伤、心肌损伤程度呈负相关。     

镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca~(2+)及钙调素影响的研究

采用体外实验方法，观察CdCl2对培养24h的人外周血淋巴细胞内游离Ga2+浓度及CaM活性的影响。结果表明：细胞内游离Ca2+浓度与镉浓度（≤100μmol／L）及染毒时间（≤60min）存在明显的剂量及时相相关，在≤50μmol／LCdCl2作用下，CaM活性随染毒剂量增加而升高，50μmol／LCdCl2使CaM活性增至0μmol／L组的190．22％（P＜0．05），但100μmol／LCaCl2则对CaM无激活作用。在一定镉浓度（0～50μmol／LCdCl2）及染毒时间（0～40min）内，细胞内游离Ca2+浓度与CaM活性呈*一致性变化，提示镉的免疫毒作用机制与Ca2+、CaM系统有关。     

缺氧复合梭曼中毒PC12细胞中［Ca2+］、cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PK Ⅱ的变化

目的 观察缺氧复合梭曼中毒的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞内游离钙的浓度［Ca∧2 ］、cAMP、钙调蛋白（CaM）和钙调蛋白Ⅱ（Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ）的变化。方法 采用放免技术,从细胞水平进一步观察缺氧复合梭曼中毒对PC12细胞的毒性、细胞内［Ca∧2 ］变化、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ的变化。结果 缺氧中毒组PC12细胞cAMP、CaM含量在中毒后24h明显高于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组;缺氧中毒组PC12细胞Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ活性在中毒后24h明显低于单纯中毒组、缺氧对照组和正常对照组。结论 ［Ca∧2 ］、cAMP、CaM和Ca∧2 /CaM-PK Ⅱ在缺氧复合梭曼中毒PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。     

低温海水浸泡对失血性休克大鼠血流动力学的影响及机制研究

目的 研究海水浸泡对失血性休克大鼠血流动力学的影响,并探讨其改变机制。方法 采用雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,分为３组;正常对照组（ｎ＝８）,平原休克组（ｎ＝８）,海水浸泡失血性休克组（ｎ＝８）。测定血流动力学指标,血浆磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性,心肌和心肌线粒体钙含量,心肌线粒体Ｃａ＾２＋、ｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活笥变化,血浆和心肌ＭＤＡ的变化。结果 海水浸泡失血性休克动物血流动力学明显低于平原失血性休     

维生素D_3与心肌细胞电活动关系的实验研究

本实验利用标准玻璃微电极技术和微机系统的实时应用,在离体豚鼠右心室乳头肌上观察维生素D_3对其细胞电活动的影响。结果表明维生素D_3可使心肌细胞动作电位和零相最大去极化速率发生明显改变,其变化主要是由于通过细胞膜慢通道有大量的Ca~(2+)内流,使细胞内Ca~(2+)超负荷来实现的。     

钙通道Na~+—Ca~(2+)交换与心肌缺血再灌注中的钙超负荷

在离体大鼠心脏灌流模型上,缺血25分钟后再灌注5分钟,实验各组在再灌注5分钟时冠脉流出液中的蛋白含量与缺血前相比无显著性变化,表明细胞膜无缺损。但是,和正常组相比,(1)K-H液再灌注导致心脏钙、钠含量显著增加,钾含量显著下降;(2)再灌液中加入异搏定使心脏各离子含量恢复正常;(3)再灌液中同时加入异搏定和Mn~(2+),又出现钙含量显著增加;(4)再灌液中加入异搏定的同时增加Na~+含量,出现钙含量显著下降。结果表明,在细胞膜缺损前,钙通道是钙超负荷发生的主要途径。Na~+-Ca~(2+)交换的作用,有助于减弱钙的超负荷。     

不同治则治法对大鼠心肌缺血再灌注损伤的心肌超微结构和Ca~(2+)分布的比较研究

用大鼠冠状动脉结扎──再通法制造缺血再灌注损伤模型，观察三组中药对此模型的心肌细胞保护作用，探索中药对心肌超微结构变化和Ca2+分布特点的作用机理。结果三组中药（尤其活血化瘀法）能使心肌超微结构明显改善，减轻心肌细胞钙的沉积，同时也降低了CPK的含量。提示：中药复方改善心功能，其中一个主要机理为减轻细胞内Ca2+的超载，增强了细胞的生理功能。     

BAPTA对去甲肾上腺素刺激的大鼠心肌细胞蛋白合成及c-fos和β-MHC表达的影响

目的观察去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）刺激导致的心肌细胞肥大中，钙信号通路和心肌细胞蛋白合成以及c—fos和β—MHC表达之间的关系。方法去甲。肾上腺素（10^-5mol／L）刺激原代培养的心肌细胞，细胞内钙离子络合剂BAPTA（20μmol／L）阻断钙信号通路，通过^3H—leucine掺入测定蛋白质合成，RT—PCR测定c—fos及β—MHCmRNA的表达．结果NE刺激组的心肌细胞^3H—leucine摄人量、c—fos及β—MHC的表达均显著高于正常对照组（P〈0．01），BAPTA阻断后明显降低（P〈0．01），单纯BAPTA阻断组的^3H—leucine摄入量和β-MHC的表达低于正常对照组（P〈0．01），在正常对照组及单纯BAPTA阻断组未见c—fos明显表达。结论Ca^2＋信号通路不但参与NE刺激引起的心肌细胞蛋白合成增加、c-fos及β—MHC的过度表达，且在正常心肌细胞蛋白质合成及β—MHC表达中也起重要作用。     

遗传性癫痫模型鼠与Ca~(2+)-ATP酶关系的研究

本研究分别观察了DBA/2J(简称D_2)和C_(57)B4/6(简称B_6)小鼠在噪声中癫痫样发作的诱发得分及脑干区Ca~(2+)-ATP酶的活性.结果发现,D_2组噪声诱发得分显著高于B_6组,而脑干区Ca~(2+)-ATP酶活性明显低于B_6组,D_2与B_6杂交后代的发作得分显著低于B_2,与B_6相似;Ca~(2+)-ATP酶活性介于D_2与B_6之间.说明癫痫样发作与遗传有关,其遗传方式符合多基因遗传.对D_2组内有癫痫样发作及无癫痫样发作小鼠Ca~(2+)-ATP酶活性的统计学处理表明两者差异有显著性.进一步证实Ca~(2+)-ATP酶对D_2小鼠的癫痫遗传易患性起决定性作用.     

原发性高血压患者红细胞膜Ca~(2+)—ATP酶活性的初步观察

细胞膜 Ca~(2+)—ATP 酶对细胞内 Ca~(2+)转运发挥泵的作用。本文观察了20例原发性高血压患者红细胞膜 Ca~(2+)-ATP 酶活性并与正常人比较,发现该酶话性明显低于正常人,提示高血压患者依赖 ATP 的 Ca~(2+)转运能力降低。并同时观察到高血压患者尿 Ca~(2+)排出量与正常人比较明显增加。