uPA、uPAR在上皮性卵巢癌的表达及与MMPs相关性研究

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)在上皮性卵巢癌组织中的表达意义,研究uPA、uPAR与MMPs在肿瘤侵袭、转移中的相互关系。方法:采用免疫组化S-P法检测100例上皮性卵巢癌原发灶、30例相应的转移灶和20例正常卵巢组织中uPA、uPAR的表达;采用免疫荧光双染法检测uPA、uPAR与MMP-2、MMP-9在上皮性卵巢癌组织中的联合表达。结果:①uPA、uPAR在大多数上皮性卵巢癌原发灶及转移灶组织中均高表达,而在正常卵巢组织中不表达。②uPA和uPAR的高表达与肿瘤分化程度、临床分期、腹水及肿瘤复发显著相关(P<0.01),而与组织学类型及术后残留肿瘤无关(P>0.05)。③uPA、uPAR与MMPs在上皮性卵巢癌原发灶及转移灶组织中均联合表达。结论:uPA和uPAR在上皮性卵巢癌的发展和转移过程中起重要作用;uPA、uPAR与MMPs的相互作用可以促进肿瘤的生长与侵袭;uPA、uPAR可成为晚期、复发卵巢癌治疗的靶向目标。     

uPA、uPAR在前列腺癌组织和血清中的表达及临床意义

目的：探讨前列腺癌患者血清和组织中尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）的表达与临床意义.方法：应用酶联免疫法（ELISA）和免疫组织化学（SP）方法检测良性前列腺增生（BPH）患者、非骨转移前列腺癌（non-BM PCa）患者及骨转移前列腺癌（BM PCa）患者血清和组织中uPA及uPAR表达.结果：BPH患者、non-BM PCa患者和BM PCa患者血清uPA及uPAR浓度差异有统计学意义（P＜0.01）.non-BM PCa患者血清uPA及uPAR浓度高于BPH患者（P＜0.01）,BM PCa患者高于non-BM PCa患者（P＜0.01）.前列腺癌组织uPA表达阳性率83.34％,uPAR表达阳性率77.78％,良性前列腺增生组织表达阳性率为0,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论：uPA、uPA表达与PCa的发生与转移密切相关.     

上皮性卵巢癌组织uPA、uPAR及PAI-1表达及意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、uPA受体(uPAR)及其抑制剂(PAI-1)在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学PV-9000法检测60例上皮性卵巢癌、30例良性卵巢肿瘤及30例正常卵巢组织中uPA、uPAR及PAI-1蛋白表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达率(75.0%、65.0%、66.7%)明显高于良性肿瘤(40.0%、33.3%、30.0%)及正常组织(30.0%、26.7%、33.3%),差异均有显著性(χ2=11.779～19.510,P<0.05),而良性肿瘤与正常组织比较无明显差异.uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织表达与手术病理分期、组织分级和有无淋巴结转移有关(χ2=8.242～36.906,P<0.05).结论 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织高表达,可能与卵巢癌发生、发展及浸润有关.     

探讨肝细胞生长因子和尿激酶型纤溶酶原激活剂在卵巢癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）和尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测HGF和uPA在正常卵巢组织、良性肿瘤和卵巢癌中的表达。结果（1）HGF和uPA在卵巢癌中的表达水平显著高于正常卵巢组织和良性肿瘤（P〈0．05）,良性肿瘤和正常卵巢组织表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。②HGF和uPA的表达随卵巢癌的临床分期、组织分级（恶性程度）的增加,表达水平均相应增加（P〈0．05）;淋巴结转移组HGF和uPA的表达水平均显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论①HGF高表达可能与卵巢癌细胞的恶性增殖及浸润转移有关。②uPA的高表达可能与卵巢癌的浸润转移有关     

uPAR在肝细胞癌中的表达及其和肝癌侵袭、转移的关系

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活受体（uPAR）在肝癌组织及细胞系中的表达,探讨其与肝细胞癌侵袭、转移的关系。方法利用免疫组化方法检测50例肝癌组织中uPAR的表达,分析其与肝癌的临床病理分级、包膜侵犯、门脉癌栓等的关系;利用流式细胞术检测肝癌细胞系Hep-3B和SMMC-7721中uPAR的表达,通过Boyden小室侵袭实验比较两种细胞系体外侵袭能力的差别;从SMMC-7721中通过流式细胞术分选出uPAR阳性及阴性的细胞,比较两者体外侵袭能力的差别,并通过裸鼠体内成瘤及转移模型,比较两者体内侵袭和转移的能力。结果肝癌中uPAR的表达和肿瘤的包膜侵犯、门脉癌栓有显著的相关性（P〈0.01）;肝癌细胞系Hep-3B和SMMC-7721中uPAR的表达和其体外侵袭能力相关;而在SMMC-7721中,uPAR阳性组较阴性组有更强的体外及体内侵袭及转移能力。结论uPAR蛋白的表达在肝癌细胞的侵袭和转移中起重要作用,和肿瘤的临床病理分期及预后相关。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子在上皮性卵巢癌中的表达及其与临床预后的关系

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在不同类型的上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与临床预后的关系. 方法 应用SP法,对85例上皮性卵巢癌、16例上皮性卵巢交界性肿瘤、39例上皮性卵巢良性肿瘤、24例正常卵巢组织的手术标本进行uPA表达的检测,并对uPA的表达与肿瘤分化程度、临床分期、有无淋巴转移、有无大网膜转移以及生存期的关系进行统计分析. 结果 uPA在上皮性卵巢癌中的阳性表达率为75.3%,明显高于上皮性卵巢交界性肿瘤(43.8%)、上皮性卵巢良性肿瘤(35.9%)及卵巢正常组织(12.5%).高、中分化的上皮性卵巢癌中uPA的表达率为45.5%,明显低于低分化的上皮性卵巢癌(84.6%).uPA在Ⅲ-Ⅳ期的上皮性卵巢癌的表达率(85.5%)高于Ⅰ-Ⅱ期的上皮性卵巢癌(26.7%).有淋巴转移、有大网膜转移、生存期＜5年的上皮性卵巢癌中uPA的阳性表达率分别高于无淋巴转移、无大网膜转移、生存期≥5年的上皮性卵巢癌中uPA的阳性表达率,其间存在统计学差异(P＜0.05). 结论 uPA的高表达与上皮性卵巢癌的发生、发展、侵袭、转移以及预后密切相关.     

PKD3上调HEK293中uPAR的表达及机制

目的 研究蛋白激酶D 3(PKD3)对人胚肾上皮细胞系HEK293细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)表达水平的影响及其机制,以阐明PKD3调控uPAR表达的重要作用.方法 首先在HEK293细胞中过表达PKD3,并以佛波酯(PMA)刺激24 h,而后采用实时定量PCR扩增PKD3、uPAR cDNA,并使用2-△△Ct方法比较其相对表达量的变化.然后在HEK293细胞中转染β-连环蛋白野生型质粒,并以PMA刺激1 h,用免疫沉淀法检测PKD3与β-连环蛋白之间的相互作用.结果 在转染的HEK293细胞中PKD3过表达,而且过表达PKD3可明显上调PMA诱导的uPAR mRNA表达水平.同时在PMA刺激作用下,可明显增强HEK293细胞中PKD3与β-连环蛋白之间的相互作用.结论 PKD3可能通过与β-连环蛋白的相互作用上调uPAR表达.     

CD151及整合素α3β1在卵巢上皮性瘤中的表达及意义

目的探究CD151及整合素α3β1在卵巢上皮性瘤中的表达及其临床意义,为卵巢上皮性瘤诊断提供参考依据。方法采用组织化学方法检测30例卵巢上皮性瘤患者CD151及整合素α3β1表达情况,并以20例卵巢上皮性良性肿瘤患者、15例健康女性的卵巢组织作为对照,评价CD151及整合素α3β1在卵巢上皮性瘤中的表达及临床意义。结果卵巢上皮性瘤患者的CD151及整合素α3β1均高于卵巢上皮性良性肿瘤患者（P〈0.01）和正常卵巢组织者（P〈0.01）;卵巢上皮性良性肿瘤和正常卵巢组织的CD151及整合素α3β1表达水平差异无统计学意义（P〉0.05）。在卵巢上皮性瘤中,整合素α3β1与CD151的表达水平在Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0.01）;整合素α3β1与CD151的表达水平在低分化中高于中～高分化（P〈0.05）。结论 CD151及整合素α3β1在卵巢上皮性瘤卵巢组织中表达,且其表达量与卵巢上皮性瘤的分期及疾病的预后密切相关。     

FAP蛋白在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activationprotein,FAP)在卵巢癌组织中的表达及与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系.方法 通过体外实验研究,用免疫组化法检测FAP在卵巢正常组织、卵巢交界性肿瘤和卵巢癌组织中的表达并分析FAP与卵巢癌的分化程度、侵袭程度的相关性.结果 FAP在卵巢癌间质成纤维细胞中有表达,而在卵巢癌细胞和正常卵巢组织及卵巢交界性肿瘤中未见表达,且FAP表达与卵巢癌的分化程度和侵袭程度有关.间质中的MVD与卵巢癌的分化程度有关,且随着FAP表达水平的增加、MVD表达阳性率则逐渐上升,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FAP的异常表达可能与卵巢癌(浆液性囊腺癌)的发生、发展有关,其可通过促进肿瘤微血管的生成,诱导癌组织产生反应性间质,加快肿瘤的演进.     

甲基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞整合素β1和整合素α3亚型mRNA表达的影响

目的探讨甲基莲心碱（Nef）对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞（HSFBs）整合素（integrin）β1和integrinα3亚型mRNA表达的影响。方法进行HSFBs体外培养,选取3～6代对数生长期的HSFBs,以2×10^6个/瓶分别接种于细胞培养瓶中,随机分为5μg/mLNef组、10μg/mL Nef组、20μg/mLNef组、20μg/mL盐酸维拉帕米注射液（Ver）组和对照组共5组,每组各6瓶细胞。进行条件培养基培养24h后,收集各组细胞,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定各组HSFBs integrin β1和integrin α3亚型mRNA的表达。结果10μg/mLNef组、20μg/mLNef组和20μg/mLVer组HSFBsintegrinβ1 mRNA表达水平均明显低于对照组（均P〈0.01）,20μg/mLVer组HSFBsintegrinβ1 mRNA表达水平与10μg/mLNef组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,5μg/mLNef组HSFBsintegrinβ1mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。10μg/mLNef组、20μg/mLNef组HSFBs integrinα3 mRNA表达水平均明显低于对照组（均P〈0.01）,5μg/mLNef组、20μg/mLVer组HSFBs integrinα3 mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）,10μg/mLNef组HSFBs integrinα3 mRNA表达水平与20μg/mLNef组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论Nef以浓度依赖方式抑制HSFBs integrinβ1 mRNA和integrinα3 mRNA的表达。     

应用组织芯片技术研究uPA和uPAR在胰腺癌中的表达

目的　探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinaseplasminogenactivator ,uPA)及其受体 (urokinaseplasminogenactivatorreceptor,uPAR)在胰腺癌中表达的临床意义和诊断价值。 方法　用组织芯片技术及免疫组化方法 (SP法 )检测 85例胰腺癌手术切除组织中uPA和uPAR的表达。结果　①uPA、uPAR表达阳性率在有淋巴结转移者中明显高于无淋巴转移者 ,P <0 0 5。②uPA、uPAR在有浸润转移表达率高于无浸润转移 ,P <0 0 5。③uPA、uPAR表达与病人年龄、性别、肿瘤大小、部位、病理分型、组织分化无相关性。结论　uPA、uPAR表达与胰腺癌淋巴结转移、浸润转移相关 ,是反映胰腺癌发展和转移潜能的生物学指标。     

甲基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞整合素β_1和整合素α_3亚型mRNA表达的影响

目的探讨甲基莲心碱(Nef)对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs)整合素(integrin)β1和integrinα3亚型mRNA表达的影响。方法进行HSFBs体外培养,选取3～6代对数生长期的HSFBs,以2×106个/瓶分别接种于细胞培养瓶中,随机分为5μg/mLNef组、10μg/mL Nef组、20μg/mLNef组、20     

CD151及整合素α3β1在胃癌中的表达及意义

目的　通过对CD151及整合素α3β1 在胃癌组织中的表达的研究,将有助于加深对胃癌发生、发展及转移机制的了解,以及为防治和评估找到新方法。方法　 采用免疫组化S-P 方法检测了23 例正常胃组织、46 例胃癌原发灶及21 例淋巴结转移灶中CD151及整合素α3β1的表达, 并分析比较它们分化程度、特别是原发灶与转移灶分组中表达差异。结果　胃癌中CD151及整合素α3β1表达阳性率分别为66.0%和48.5%,在淋巴道转移中的阳性率为81%和72%,二者差别都有统计学意义(P<0.05);CD151及整合素α3β1在胃癌原发灶及淋巴结转移灶中表达强度呈正相关关系。结论　CD151和整合素α3β1 在胃癌组织中存在异常高表达,检测CD151及整合素α3β1的表达可望成为与胃癌发生、发展、转移有关并提示预后不良的指标。     

整合素αvβ3在乳腺癌中的表达及与骨髓微转移的关系

目的：研究整合素αvβ3在乳腺癌中的表达及抗整合素αvβ3抗体LM 609在乳腺癌骨髓微转移中的作用.方法：免疫组织化学SABC法检测69例女性乳腺癌患者肿瘤组织整合素αvβ3表达及RT-PCR法检测乳腺癌骨髓微转移状况.流式细胞仪检测人乳腺癌细胞株MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s整合素αvβ3的表达.建立BALB/c裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型.实时荧光定量RT-PCR检测抗整合素αvβ3抗体LM609对裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型的影响.结果：乳腺癌标本免疫组化结果,整合素αvβ3阳性患者30例,占43.5%;阴性患者39例,占56.5%.乳腺癌骨髓微转移RT-PCR检测阳性患者22例,占31.9%,阴性患者占68.1%.卡方检验,χ^2=9.564,P＜0.05.两者有显著相关关系.MCF-7细胞膜上整合素αvβ3受体为阴性,MDA-MB-231、MDA-MB-435s细胞膜上整合素αvβ3受体阳性.在由整合素αvβ3受体阳性细胞制作的裸鼠乳腺癌骨髓微转移模型中,经LM609处理后,可显著减少乳腺癌骨髓微转移的肿瘤细胞（P＜0.05）.结论：整合素αvβ3在乳腺癌中高表达与骨髓微转移有显著相关关系,用抗整合素αvβ3抗体可抑制乳腺癌的骨髓微转移.     

nm23-H1与整合素α3、β1在子宫内膜异位症中的表达及其临床意义

目的:探讨nm23-H1与整合素α3、β1在子宫内膜异位症(EMS)中的表达及其临床意义.方法:收集35例正常子宫内膜组织和32例EMS患者的异位子宫内膜组织.采用qRT-PCR技术检测nm23-H1与整合素α3、β1的mRNA表达水平;同时采用Western blot技术检测nm23-H1与整合素α3、β1的蛋白表达...     

抗整合素αⅤβ3单抗抑制上皮性卵巢癌血管及肿瘤生成的实验研究

目的探讨抗整合素αⅤβ3单抗诱导血管内皮细胞凋亡,抑制上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)血管及肿瘤生长的作用效应.方法将EOC细胞株TYK细胞接种于鸡胚尿囊膜(chickchorioallantcic member,CAM)建立EOC CAM模型,细胞接种后12 h,分别加入抗整合素αⅤβ3抗体(实验组)和生理盐水(对照组).5 d后,应用图像分析系统检测2组CAM血管数目(number,N)、血管面积(area,A)、血管面积比(vessel area,VA/A)及肿瘤组织面积(tissue,T).脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)ECV304接种于玻连蛋白(vitronectin,Vn)表面,2 h后加入抗αⅤβ3抗体,计数0、12 h、24 h、48 h、72 h细胞凋亡率.结果实验组N、A、VA/A及T分别为(16.80±0.71)根;(10.02±4.48)mm2;25.50±11.41;(8.25±4.15)mm2,显著小于对照组的(42.20±15.32)根;(26.15±8.35)mm2;66.62±17.64;(34.26±15.83)mm2(P<0.05).抗αⅤβ3单克隆抗体诱导HUVEC时间依赖性细胞凋亡,其24 h、48h和72 h的凋亡率显著高于IgG对照组.结论抗整合素αⅤβ3单抗通过诱导血管内皮细胞凋亡而抑制卵巢癌血管及肿瘤生长,整合素αⅤβ3可作为卵巢癌治疗的一个有效靶点.     

尿激酶型纤溶酶原激活剂mRNA在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA在卵巢癌组织中的表达及其意义.方法应用荧光定量RT-PCR方法,分别检测23例卵巢癌组织中uPA mRNA的表达,与卵巢良性肿瘤相比较.同时,分析uPA mRNA的表达与卵巢癌的临床分期之间的关系.结果 23例卵巢癌组织中uPA mRNA的表达阳性率为60.9%,卵巢良性肿瘤uPA mRNA表达阳性率为30.0%,且uPA mRNA表达卵巢癌的临床分期呈正相关.结论 uPA mRNA表达可作为判断卵巢癌恶性程度及预后的指标之一.     

整合素α5β1和PKCα在人脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨整合素α5β1和PKCα在人脑胶质瘤中的表达及临床意义,以及两者之间的相关性。方法采用免疫组织化学SP法,检测31例人脑胶质瘤和癌旁正常脑组织整合素α5β1和PKCα的表达情况。结果①人脑胶质瘤中整合素α5β1的阳性表达率与组织分化低密切相关;②人脑胶质瘤中PKGx的阳性表达率也与组织分化低密切相关;③人脑胶质瘤中整合素α5β1的表达水平与PKCα的表达水平呈正相关。结论整合素α5β1和PKCα的表达可作为早期识别具有高度恶性的人脑胶质瘤并判断其预后的有用指标。     

整合素α5β1和VEGF在乳腺癌中的表达及临床意义

目的　研究整合素α5β1 及 VEGF在乳腺癌中的表达及临床意义 ,以及两者之间的相关性。方法　采用免疫组织化学 S- P法 ,检测 5 1例乳腺癌和 10例正常乳腺组织的整合素α5β1 及 VEGF的表达情况。结果　乳腺癌中整合素α5β1 的低表达与淋巴结转移阳性、组织分化低密切相关 ;乳腺癌中 VEGF表达阳性与淋巴结转移阳性、组织分化低密切相关 ;乳腺癌中整合素α5β1 的低表达与 VEGF表达阳性密切相关。结论　整合素α5β1 的低表达 ,VEGF的阳性表达可作为早期识别具有高浸润和转移潜能的乳腺癌及判断其预后的有用指标。     

uPA/uPAR在骨关节中的表达及与软骨细胞凋亡的关系

目的探讨uPA/uPAR在骨关节炎软骨中的表达及与软骨细胞凋亡的关系。方法成年新西兰大白兔24只,根据文献采用石膏固定方法制作骨关节炎动物模型,用免疫组化、原位末端标记技术(TUNEL)等方法检测uPA/uPAR在兔膝关节软骨中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨中uPA/uPAR的表达实验组阳性率高于对照组(P<0.05);实验组软骨细胞凋亡程度与uPA/uPAR的表达均呈正相关(P<0.05)。结论uPA/uPAR与骨关节炎发生发展有密切关系。