再生障碍性贫血红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性变化

用酶学比色法测定10例再生障碍性贫血慢性期患者红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性,结果为每小时2.577±0.86微克分子磷/毫克蛋白(均值±标准差),明显高于正常组。红细胞膜(Na~+·K~+)-ATP酶活性与糖酵解相偶联。再障慢性期(Na~+·K~+)-ATP酶活性升高,可作为病情变化的辅助指标。     

锌和维生素D_3对大鼠红细胞膜唾液酸含量及Na~＋、K~＋-ATP酶活性的影响

对大鼠红细胞膜唾液酸含量及Ｎａ＋、Ｋ＋ＡＴＰ酶活性进行了测定，并初步观察了微量元素锌和维生素Ｄ３（ＶＤ３）对大鼠红细胞膜唾液酸含量及Ｎａ＋、Ｋ＋ＡＴＰ酶活性的影响。结果表明，锌对ＶＤ３所引起的红细胞膜唾液酸含量降低及Ｎａ＋、Ｋ＋ＡＴＰ酶活性下降具有恢复作用，提示微量元素锌对生物膜具有明显的保护作用。     

不同运动强度对人红细胞膜Na~+、K~+-ATP酶活性及红细胞膜脂质成分的影响

【目的】研究不同运动强度对红细胞膜Na+、K+-ATP酶活性及红细胞膜脂质成分的影响,探讨运动对红细胞形态和功能影响的机制,进而探讨疲劳发生的可能机制。【方法】武警指挥院校学员,选取3种训练科目,用Polar表记录心率,分别在3种运动负荷前后采集静脉血,采用比色法红细胞膜Na+、K+-ATP酶活性;采用邻苯二甲醛法测定红细胞膜胆固醇含量;采用定磷法测定红细胞膜磷脂含量。【结果】在中、大强度运动范围,Na+、K+-ATP酶活性升高,胆固醇及磷脂含量降低(P<0.05),胆固醇/磷脂比值无明显变化;在极限强度运动范围,Na+、K+-ATP酶活性下降,胆固醇及磷脂含量进一步降低(P<0.01),胆固醇/磷脂比值降低(P<0.05)。【结论】红细胞膜胆固醇/磷脂含量影响红细胞膜Na+、K+-ATP酶活性,表现为双向态势。在中、大强度运动范围呈代偿性影响,可能与运动适应有关。在极限强度运动范围,呈协同下降影响,可能与运动疲劳形成有关。     

缺铁对大鼠红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的影响

为探讨铁缺乏对红细胞膜蛋白的影响,对缺铁性贫血大鼠红细胞脱Na~+-K~+-ATP酶活力与位点进行了研究。结果表明,随缺铁病程发展,酶活力呈现不同的变化特征;缺铁大鼠和正常大鼠酶位点测值之间无显著差异;与对照组不同,缺铁红细胞的酶活力与酶位点之间无相关联系,提示缺铁红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活力变化可能主要受酶分子所处的细胞代谢状态和空间结构环境的调控。     

夹竹桃甙对Na~+、K~+-ATP酶抑制的动力学研究

本文对夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶的动力学作了探讨,并与乌本甙的作用进行了比较。结果表明:夹竹桃甙抑制Na~+、K~+-ATP酶,在Na~+、K~+浓度改变对均为非竞争性抑制,Na~+/K~+比例6:1时,为混合性抑制,而ATP对夹竹桃甙的作用几无影响。     

细胞水化状态对肝细胞膜Na~ /K~ -ATP酶活性的调节

目的:探讨不等渗培养条件下肝细胞水化状态(即容积)改变对肝细胞膜Na /K -ATP酶活性的调节作用及对细胞蛋白合成代谢的影响。方法:动态观察不同渗透压培养的鼠肝细胞膜Na /K -ATP酶活性、[3H]亮氨酸掺入量及培养上清液中ALT、AST、LDH活性。结果:低渗培养膜酶活性随培养时间延长逐渐降低,高渗组逐渐增高,与等渗组比较差异非常显著(P值分别<0.01)。膜酶活性与[3H]掺入量在低渗组呈非常显著负相关,高渗组呈显著正相关(P<0.001)。同期培养上清液ALT、AST、LDH活性在正常范围内波动。结论:高渗状态可以激活肝细胞膜Na /K -ATP酶,低渗状态则呈抑制状态,以此作为引发调节肝细胞蛋白代谢的一种生理性因素。     

人红细胞膜(N_a~+,K~+)——ATP酶活性的研究

本文报道人红细胞膜(Na~+,K~+)—ATP 酶活力测定方法及25例正常人红细胞膜(Na~+,K~+)—ATP 酶活力测定结果。经统计学处理,正常值范围为每小时0.4～1.62微克分子磷/毫克蛋白(均值±1.5标准差),在文献报道范围之内。此法较文献报道简便易行,结果可靠。讨论了酶蛋白含量、酶蛋白存放时间,红细胞悬液的性状及 ATP 酶质与量对酶活性的影响。     

柴胡皂甙抑制Na~+、K~+-ATP酶活性的构效关系

报道在离体条件下各种单体柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性构效关系。结果表明，各种柴胡皂甙抑制Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性作用强度依次为：ｂ２＞ｄ＞ｂ１＞ｂ４＞ａ＞ｂ３＞ｅ＞ｃ。其中柴胡皂甙结构中的Ｃ２３－ＯＨ，Ｃ１６－ＯＨ以及Ｃ１１和Ｃ１３的共轭双烯可能对其抑制活性起重要作用。证明，柴胡皂甙ｄ对Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶的抑制为非竟争性抑制。     

孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ca~(2+)-ATP酶和Na~+、K~+-ATP酶活性

为探索同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的方法。采用孔雀绿比色法测定磷以反映酶活性。结果显示：Ｃａ２＋浓度以及成骨细胞传代培养的代数是影响酶活性的重要因素。Ｃａ２＋有助于提高ＡＴＰａｓｅ活性。Ｃａ２＋浓度为４０μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＴＰａｓｅ活性较高。细胞传代越多，膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性越低。成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ。结论：孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，方法简便、灵敏、可靠。     

脑外伤患者红细胞变形性与红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶的水平及临床意义

目的　动态观察30例脑外伤患者的红细胞变形性与红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性变化。方法　采用核孔滤膜法测定红细胞变形性,定磷法测定红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性。结果　红细胞变形性与红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性于伤后12h下降,2 4h至最低,96h开始恢复,与正常对照相比有显著意义(P <0 .0 1)。伤情愈重,红细胞变形性与红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性下降愈明显(P <0 .0 1)。结论　红细胞变形性与红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性可作为判断脑损伤程度的指标。     

缺血再灌注损伤对鼠视网膜细胞膜Na~+、K~+—ATP酶活力的影响

视网膜组织的缺血性疾病在临床实践中经常出现,如视网膜中央动脉栓塞等。近年来对再灌注损伤性疾病的研究愈来愈受到关注。本实验观察了缺血再灌注损伤对视网膜     

不同氧压高压氧对急性脑缺血组织Na~+、K~+、-ATP酶活力的影响

利用蒙古种沙土鼠(Mongolian Gerbil)制成急性脑缺血动物模型,观察了缺血后脑组织Na~+,K~+-ATP酶活力的改变。结果表明:脑缺血60min后重灌流80min的脑组织Na~+,K~+-ATP酶活力显著下降(Po.05)。从而提示,高压氧治疗脑水肿机制是通过恢复脑组织Na~+,K~+-ATP酶活力、恢复细胞内外离子分布而实现。     

人红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶的研究Ⅱ原发性高血压病人红细胞膜Na~ -K~ -TP酶活力及川芎治疗后酶活力变化的观察

测定了43例原发性高血压病人及10例正常血压健康人的红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶活力。采用渗低溶血,高速离心洗涤沉淀法制备红细胞膜制剂,以乌本苷作为酶的专一抑制剂测得酶活力。发现原发性高血压病人川芎治疗组与未用川芎治疗组的红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶活力差别不显著,但与健康对照组比较则治疗及未治疗两级酶活力均显著降低。     

Na~+,K~+ -ATP酶信号转导功能的研究进展

Na+,K+-ATP酶作为一种膜结合蛋白不仅参与钠离子和钾离子的跨膜转运,而且有信号转导功能。作为强心甾类物质的受体,Na+,K+-ATP酶与细胞外的特异性配体结合,继而与细胞内的蛋白相互作用触发细胞内信号转导通路的级联反应,从而参与心肌细胞的分化和增殖、肿瘤细胞的凋亡、前破骨细胞的融合等多种生理、病理过程。该文就Na+,K+-ATP酶信号转导功能的研究进展予以综述。     

苦瓜提取物对糖尿病大鼠肾皮质Na~+,K~+-ATP酶活性的影响

目的探讨苦瓜提取物(MCE)对糖尿病肾病(DN)的保护作用及对肾皮质Na+,K+-ATP酶活性的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型,随机将大鼠分为正常组,模型组,MCE预防给药低、高剂量组,MCE治疗给药低、高剂量组。测定各组大鼠24 h尿蛋白量、血肌酐、尿素氮浓度及肾皮质Na+,K+-ATP酶活性的变化,HE染色观察肾脏病理学变化。结果与正常组相比,模型组大鼠的24 h尿蛋白量、血清肌酐、尿素氮浓度及Na+,K+-ATP酶活性均明显升高(P<0.05);与模型组相比,MCE各给药组大鼠的24 h尿蛋白量、血清肌酐、尿素氮浓度及肾皮质Na+,K+-ATP酶活性均明显降低(P<0.05或P<0.01),且MCE各给药组均在不同程度上减轻了DN组大鼠的肾小球结构模糊、细胞数增多等病理变化;相同剂量下与治疗给药组比较,MCE预防给药组24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮浓度及肾皮质Na+,K+-ATP酶活性均下降更为明显(P<0.05),减轻病理变化也更显著。结论苦瓜提取物对DN大鼠的肾损伤有一定保护作用,能阻遏DN大鼠肾皮质Na+,K+-ATP酶活性的升高。     

原发性高血压患者红细胞膜ATP酶活性的变化

本文检测了１９例原发性高血压Ⅰ－Ⅱ期患者及１７例正常人（对照组）的红细胞膜Ｃａ２＋ＡＴＰ酶、Ｎ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶及Ｍｇ２＋ＡＴＰ酶活性。结果表明高血压患者Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显低于对照组，Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶活性明显高于对照组，而Ｍｇ［２＋］ＡＴＰ酶活性无明显变化，相关分析表明：高血压组红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴ酶、Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性与收缩压。平均动脉压呈弱相关（无统计学意义）。说明了高血压Ｇａ２＋ＡＴＰ酶活性降低，致细胞内游离钙升高，可能与其发病机制有关。     

Na~+/K~+-ATP酶α1亚单位小干扰RNA和哇巴因诱导肝癌HepG2细胞S期阻滞及其机制

目的 观察哇巴因联合Na~+/K~+-ATP酶(钠泵)α1亚单位小干扰RNA(siRNA)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响.方法 分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织和肝癌细胞系SMC7721、Bel7402和HepG2细胞钠泵α1亚单位的表达.CCK-8法检测采用钠泵α1亚单位siRNA和哇巴因作用肝癌HepG2细胞增殖抑制状况,分析各组细胞的钠泵活性变化,流式细胞术分析细胞周期变化.实时定量PCR和蛋白质印迹法检测钠泵α1、促分裂源活化蛋白激酶1(MAPK1)、细胞围期蛋白1(CyclinA)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白抑制因子(P21~(WSF1))表达的变化.结果 肝癌组织标本的钠泵α1亚单位密度值(174.7±16.8)明显高于正常肝组织(65.3±7.9,P<0.05);HepG2细胞钠泵α1亚单位表达明显高SMMC-7721和Bel-7402细胞(P<0.05).siRNA、哇巴因和联合用药可抑制HepG2细胞的增殖,联合实验组效果更显著(P<0.05),0.03μmol/L siRNA组、0.1 μmol/L哇巴因和联合实验组细胞24、48和72 h抑制率分别为17.4%、20.3%、24.3%,37.5%、44.3%、51.2%,52.3%、70.2%、88.2%.各实验组均出现钠泵活性降低,以联合实验组最显著(P<0.05).0.1 μmol/哇巴因和联合实验组HepG2细胞S期比例从24.2%上升至66.5%和75.2%;实时定量PCR和蛋白质印迹检测显示哇巴因组和联合实验组P21<'WAF1>表达上调而钠泵μ1亚单位、MAPK1、CyclinA、CDK2和PCNA表达下调.结论 钠泵α1亚单位siRNA联合哇巴因抑制HepG2细胞钠泵后可抑制细胞增殖,而P21~(WAF1)表达上调和CyclinA/CDK2/PCNA周期调控复合体生成减少可能是引起S期阻滞的主要原因.     

神经节苷脂GM_2、GM_3、GD_3及脑苷脂对猪肾Na+、K+-ATP酶活性的影晌

本文报道神经节苷脂单组分GM_2、GM_3、GD_3及脑苷脂对猪肾Na+、K~+-ATP酶活性的影响。实验结果表明,GM_3对Na~+、K~+-ATP酶有明显抑制作用。结构上比GM_3多一个唾液酸的GD_3和多一个乙酰糖基的GM_2均无抑制怍用。即使去除唾液酸的CDH,或是在此基础上再去除一个半乳糖基的脑苷脂(CMH)及唾液酸,对该酶也无抑制作用。提示GM_3结构完整的重要性。动力学研究表明,在不同Na~+、K+浓度对,GM_3对Na~+、K~+-ATP酶的抑制作用,均呈非竞争性抑制。     

BERH-2肝癌大鼠红细胞膜K~+依赖性磷酸酶的活性

BERH-2肝癌大鼠红细胞膜K~+依赖性磷酸酶活性与正常大鼠无显著差异。但是,K~+对酶的变构激活及F~-对酶的变构抑制却差别显著,其Hill系数不同于正常大鼠。此差别在0.10mg/ml Triton X-100存在时消失,因此,Hill系数的差异可能由于BERH-2肝癌大鼠红细胞膜中脂质成分与正常的不同所致。     

热毒清对红细胞膜Na~+,K~+-ATP酶保护作用的实验研究

热毒清(原名抗炎6号)系我校附属同济医院用四味清热解毒中药制成的静脉注射液,具有抑菌、抗炎、解毒、退热、增强免疫功能及稳定溶酶体膜、保护线粒体H~+-ATP合酶等多方面的作用,其多相药理作用可能与保护生物膜活性有关。本实验研究热毒清对内毒素所致家兔红细胞膜Na~+,K~+-ATP酶活性损害作用的影响,以探讨热毒清治疗疾病的机理。 一、材料和方法 1.动物、健康日本大耳白兔24只,体重2～2.5 kg, 雌雄不拘,随机分为4组,每组6只。①正