吉西他滨联合多西紫杉醇对非小细胞肺癌细胞株的效应

目的 了解吉西他滨(gemcitabine)联合多西紫杉醇(docetaxel)对非小细胞肺癌细胞株的效应。方法经细胞生长抑制实验和四唑氮氢氧化物(XTT)检测得出细胞生存率，用等效应图(Isobologram)分析得出两药各设计浓度在50％生长抑制浓度(IB50)中的联合效应。结果吉西他滨联合多西紫杉醇在肺腺癌细胞株(A549)的生长抑制实验中，11个ID50效应点中8个落在等效应图的拮抗效应区。在肺鳞癌细胞株(EBC-1)的生长抑制实验中，有效的6个ID50效应点中5个落在等效应图的“相加”区和“超相加”区。结论在体外实验中吉西他滨联合多西紫杉醇对人肺鳞癌细胞株具有“相加”和“超相加”效应，而对人肺腺癌细胞株则产生拮抗效应。     

EGFR TKIs 联合化疗的给药顺序对NSCLC 细胞促凋亡的影响

目的 探究表皮生长因子受体络氨酸激酶抑制剂（EGFR TKIs）与化疗药物单用、联用，以及顺 序给药时，对获得性TKI 耐药的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系凋亡的影响。方法 选用存在TKI 耐药基 因突变（T790M，cMET）的NSCLC 细胞系PC9ER、H1975 和HCC827GR，以及TKI 敏感基因突变（19 外 显子突变）的细胞系PC9 和HCC827。采用MTS 法检测化疗药物顺铂和紫杉醇，以及TKI 厄洛替尼单用、 联用，或者顺序给药干预各NSCLC 细胞系时的细胞活性状态，并利用集落形成试验加以验证。采用Western blot 检测各处理组蛋白裂解液中细胞凋亡标志物cPARP 含量变化。结果 MTS 法和集落形成试验结果发 现，EGFR TKIs 联合化疗能协同增加NSCLC 细胞系的细胞毒性。同时给予EGFR TKIs 和化疗或先化疗再用 EGFR TKIs，可获得最佳干预效果。Western bolt 检测结果表明，联合用药后cPARP 蛋白表达升高。而且先 化疗后EGFR TKIs 干预比两者顺序颠倒的促凋亡作用更强。结论 先化疗后EGFR TKIs 干预的最优给药顺 序可使对获得性TKI 耐药的NSCLC 细胞系产生最强的促凋亡作用。     

雷帕霉素联合多西紫杉醇对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制剂雷帕霉素(RAPA)联合多西紫杉醇(DOC)对肺癌细胞系A549、SPC-A-1、95D和NCI-H446增殖抑制及凋亡的影响。方法甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌细胞系增殖抑制作用;流式细胞仪法检测RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌95D细胞凋亡的影响。结果 RAPA能抑制肺癌细胞的增殖,其作用呈剂量依赖性;单独应用DOC及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA均可显著抑制肺癌细胞的增殖,且联合应用抑制率显著升高(P<0.05);流式细胞仪检测显示RAPA及DOC均可增加肺癌95D细胞的凋亡率(P<0.05),联合应用明显增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论 mTOR信号通路参与肺癌细胞的增殖与凋亡,mTOR信号通路抑制剂RAPA可增强DOC的抗肿瘤效应。     

肺癌细胞株对6种抗癌药物敏感性测定

目的　探讨肺癌细胞株抗癌药物的敏感性。方法　采用体外MTT比色分析法对 10株肺癌细胞进行NVB、GEM、TAX、SN - 38、CDDP、5 -Fu 6种抗癌药物的体外敏感试验。结果　 ( 1) 6种抗癌药物对SCLC的显效顺序依次为GEM、NVB、CDDP、TAX、5 -Fu、SN - 38,4株SCLC的敏感性顺序依次为Lu135、N2 31、H6 9、SBC - 3;( 2 ) 6种抗癌药物对NSCLC的显效顺序依次为 5 -Fu、NVB、GEM、CDDP、TAX ,对SN - 38均为耐药 ,3种 6株NSCLC的敏感性顺序依次为Lu 6 5、PC 7、LK - 2、PC 9、PC 14、A 5 49;( 3)SCLC株对 6种抗癌药物敏感性优于NSCLC ,6种抗癌药物对 4株SCLC的总有效率为 87 5 % ,敏感为 6 2 5 % ,较敏感为 2 5 % ,耐药为12 5 % ;对 6株NSCLC的总有效率为 5 2 78% ,敏感为 16 6 7% ,较敏感为 36 11% ,耐药为 4 4 4 4%。结论　 10株肺癌细胞株对 5 -Fu最敏感 ,GEM、NVB、CDDP、TAX次之 ,SN - 38效果最差。 6种药物中对 5 -Fu、CDDP未表现出明显耐药性 ,其余 4种均存在不同程度的耐药性 ,表明肺癌细胞株存在自然耐药性。     

BIM在EGFR突变非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株的凋亡以及促凋亡蛋白(BIM)的表达,探讨吉非替尼对其的影响.方法 采用Annexin PI单染法检测吉非替尼作用下各细胞株的凋亡,免疫印迹法检测BIM的表达.结果 吉非替尼诱导NSCLC细胞株凋亡,其中对H1650、H1975突变株的诱导凋亡率高于A549细胞株(P＜0.01),H1650的BIM表达随吉非替尼浓度的增加而增强,H1975的BIM表达较高,但受吉非替尼浓度变化的影响不明显,而A549的BIM表达需要更高浓度的吉非替尼作用.结论 吉非替尼可以使NSCLC细胞表皮生长因子受体(EGFR)突变株细胞内的BIM表达增高,并且可能通过上调BIM的表达来诱导肿瘤细胞凋亡.     

MicroRNA-204 在非小细胞肺癌患者组织中的表达及对癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察microRNA-204（miR-204）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者体内的表达水平及对癌细胞增殖的影响,探讨miR-204 在非小细胞肺癌中的临床意义及可能分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-204 在肺癌及癌旁组织中的表达情况;用化学合成的miR-204 模拟物和抑制物转染人非小细胞肺癌A-549 肺癌细胞,CCK-8 法检测细胞增殖的情况,流式检测细胞凋亡情况,qRT-PCR、Western blot 法分别检测Bcl-2 的mRNA 和蛋白表达。结果 miR-204 在肺癌组织中表达水平与对应癌旁组织比较,差异有统计学意义（P <0.05）,肺癌组织低于癌旁组织;肺癌组织中miR-204 低表达与分期、肿瘤大小、肿瘤淋巴结转移相关（P <0.05）;miR-204 可抑制A-549 细胞的增殖,促进细胞凋亡,并下调Bcl-2 的mRNA 与蛋白表达水平。结论 miR-204 在非小细胞肺癌组织中表达下调并与肺癌恶性临床病理特征有关,miR-204 可能通过调节Bcl-2 的表达从而影响非小细胞肺癌细胞的增殖及凋亡。     

谷胱甘肽与铂类药物联用对人胃癌细胞株的影响

目的 探讨谷胱甘肽(GSH)联合奥沙利铂(L OHP)和顺铂（CDDP）对胃腺癌细胞株SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响。方法 按照不同给药方式,分为GSH、CDDP、L-OHP单药组,GSH＋CDDP、GSH＋L-OHP联用组。采用SRB法分别观察不同给药方式对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;使用倒置显微镜、吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;应用流式细胞仪检测分析细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果 GSH分别与CDDP、L-OHP联合可以明显抑制SGC 7901细胞的增殖,GSH和CDDP联用时,与CDDP单药组差异无统计学意义（P＞0.05）;GSH和L OHP联用时,与L-OHP单药组差异有统计学意义（P＜0.05）。经铂类单药及联合用药处理后,镜下可见癌细胞均出现凋亡的形态变化。流式细胞仪分析显示,L-OHP单药组、GSH+L-OHP联合用药组作用后,S期细胞数目减少,均出现明显的凋亡峰,两组相比,有明显差异（P＜0.05）。结论 GSH不改变CDDP对肿瘤细胞的生长抑制作用,但可降低L-OHP对SGC-7901细胞增殖的影响,并降低其诱导胃癌细胞的凋亡率。     

CD133在人NSCLC组织和细胞系中表达的初步研究

目的观察经典的肿瘤干细胞标记分子CD133在人NCSLC组织和肺癌细胞系中的表达情况。方法用CD133多抗经免疫组化染色观察12例不同类型NSCLC组织中CD133的表达,经免疫荧光染色观察CD133在H446、SPC-A1肺癌细胞中的表达。用AC133单抗经流式和激光共聚焦观察人NSCLC组织、肺癌细胞系中糖基化CD133抗原(AC133抗原)的免疫活性。结果CD133多抗染色发现CD133在NSCLC组织、正常肺组织、H446细胞和SPC-A1细胞中普遍表达。AC133单抗染色发现不同类型NSCLC组织均有少量AC133( )细胞,而在H446、SPC-A1肺癌细胞及正常肺组织中未检测到AC133( )细胞。结论不同类型NSCLC组织中有少量的AC133( )细胞,为深入研究肺癌发生、发展的分子机制提供了新的靶点。     

重组人血管内皮抑制素联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌近期疗效观察

目的观察重组人血管内皮抑制素注射液联合含铂化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的客观疗效及安全性。方法18例Ⅲa～Ⅳ期NSCLC患者恩度TM(重组人血管内皮抑制素)注射液联合含铂化疗方案治疗2周期,其中恩度TM15mg静脉滴注14d,配合化疗一程为一周期,一周后重复。观察近期有效率、近期临床受益率、生活质量及毒副反应。结果近期有效率33.33%,近期临床受益率72.22%,生活质量有一定改善,毒副反应小。结论恩度注射液与含铂化疗方案联合应用治疗晚期非小细胞肺癌具有协同作用,可提高患者的近期疗效,改善患者的生活质量,未见明显的不良反应。     

重组可溶性TRAIL联合顺铂诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的研究

目的 研究重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)与化疗药物顺铂 (CDDP)单独及联合使用诱导骨肉瘤细胞MG-63的凋亡作用.方法 常规培养骨肉瘤细胞系MG-63,用不同浓度rsTRAIL、CDDP和两药联用处理细胞,于处理后的不同时间观察细胞形态变化.应用四氮唑蓝(MTT)比色法和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法检测两药单独使用和联合使用诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用.结果 rsTRAIL对MG-63细胞的生长有明显的抑制作用,可见典型的细胞凋亡特点,细胞抑制率从6 μg/L的10.1%上升到800 μg/L的84.6%,细胞凋亡率从3 μg/L的19%提高到25 μg/L的69.7%,均具显著的剂量效应;亚毒性剂量的CDDP与低浓度的rsTRAIL合用,明显提高了MG-63细胞的生长抑制率和凋亡率(P＜0.05).结论 rsTRAIL具有诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用,并通过诱导凋亡的方式有效地杀伤肿瘤细胞;化疗药物CDDP能加强rsTRAIL的抗肿瘤活性.     

Treating non-small cell lung cancer by targeting the PI3K signaling pathway

The phosphosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) signaling pathway is one of the most important intracellular signal transduction pathways affecting cell functions, such as apoptosis, translation, metabolism, and angiogenesis. Lung cancer is a malignant tumor with the highest morbidity and mortality rates in the world. It can be divided into two groups, non-small cell lung cancer (NSCLC) and small cell lung cancer (SCLC). NSCLC accounts for >85% of all lung cancers. There are currently many clinical treatment options for NSCLC; however, traditional methods such as surgery, chemotherapy, and radiotherapy have not been able to provide patients with good survival benefits. The emergence of molecular target therapy has improved the survival and prognosis of patients with NSCLC. In recent years, there have been an increasing number of studies on NSCLC and PI3K signaling pathways. Inhibitors of various parts of the PI3K pathway have appeared in various phases of clinical trials with NSCLC as an indication. This article focuses on the role of the PI3K signaling pathway in the occurrence and development of NSCLC and summarizes the current clinical research progress and possible development strategies.     

FTY720联合吉西他滨对非小细胞肺癌肿瘤相关细胞株增殖和凋亡作用的研究

目的 探讨FTY720与吉西他滨用药对人非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤细胞株A549和H520增殖和凋亡的影响作用.方法 分别选取0、2、4、6、8、10 μmol/L浓度的FTY720对体外培养得到NSCLC细胞株A549及H520做干预影响,于培养24、48、72 h后分别检测吸光度值,观察各浓度条件下FTY720对A549及H520的抑增殖作用;对A549及H520细胞株加分别单独加7 μmol/L FTY720和0.2 μmol/L吉西他滨及37 μmol/L FTY720结合0.2μmol/L吉西他滨,观察各组细胞培养48 h后抑制和凋亡差异.结果 不同浓度FTY270抑制NSCLC细胞株A549、H520增殖,差异有统计学意义(P＜0.05),FTY720对NSCLC细胞株A549、H520的增殖抑制作用和浓度、时间具有相关性,FTY720联合吉西他滨抑制A549、H520细胞和凋亡率显著强于两种药品的单独使用(P＜0.05).结论 FTY720联合吉西他滨可显著抑制人NSCLC细胞株A549及H520的增殖,并可有效促进癌细胞凋亡的作用,临床价值较高.     

重组人内皮抑素联合化疗改善晚期非小细胞肺癌生活质量临床研究

目的：观察抗肿瘤新药重组人血管内皮抑素注射液（恩度）联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效及其对生活质量的影响,并与单纯含铂方案比较。方法：经组织学或细胞学确诊的62例晚期非小细胞肺癌患者分为治疗组（32例）和对照组（30例）,治疗组接受重组人血管内皮抑素加化疗药物联合治疗,对照组则单纯给予化疗药物治疗。按照实体瘤治疗疗效评价标准（RECIST）评价近期客观疗效,按照世界卫生组织（WHO）标准评价药物毒性。治疗1个周期后评价毒性,2个周期后评价疗效。生活质量分析采用欧洲癌症研究和治疗组织（European Organization for Research and Treatment of Cancer, EORTC）简体中文版EORTCQLQ—C30和QLQ—LC13问卷对生活质量的改变进行评估。结果：所有62例患者均可评价疗效,其中治疗组和对照组有效率分别为25．00％、20．00％,差异无统计学意义（P〉0．05）。疾病控制率为87．50％、66．67％,差异有统计学意义（P〈0．05）。62例患者完成了问卷调查。治疗组患者综合生活质量的改善率高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组患者乏力症状的改善率高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组患者肺癌相关症状（咳嗽、胸痛,呼吸困难）的改善率显著高于疾病进展者（P〈0．05）。两组不良反应主要为疲乏、恶心呕吐、骨髓抑制。两者不良反应差异无统计学意义。结论：重组人内皮抑素联合化疗一线治疗晚期NSCLC耐受性好,可以提高化疔的疾病控制率,可改善症状提高生活质量。     

泛素特异性蛋白酶39 在非小细胞肺癌中的表达 及其对细胞增殖的影响

目的 检测泛素特异性蛋白酶39（USP39）在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达情况,并分析 USP39 的表达水平与85 例非小细胞肺癌患者的临床病理特征的相关性,及USP39 对非小细胞肺癌细胞系增殖、 凋亡和周期的影响。方法 利用免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌石蜡组织标本中USP39 蛋白的表达情况, 分析非小细胞肺癌组织及癌旁组织中USP39 的表达差异,利用Spearman 秩相关分析USP39 与非小细胞肺癌患 者临床病理特征的相关性,利用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测非小细胞肺癌细胞系及支气管上 皮样细胞系中USP39 的表达,利用CCK-8 实验检测USP39 对非小细胞肺癌细胞增殖的影响,利用流式细胞术检 测USP39 对非小细胞肺癌细胞凋亡和周期的影响。结果 USP39 蛋白在非小细胞肺癌组织中的阳性率高于癌旁 组织（P <0.05）;USP39 蛋白的表达水平与非小细胞肺癌患者TNM 分期呈正相关（P <0.05）,而与其他临床病 理特征无相关性（P >0.05）;非小细胞肺癌细胞系中USP39 的表达水平高于支气管上皮样细胞（P <0.05）;转 染USP39 siRNA 的非小细胞肺癌细胞增殖能力低于转染USP39 NC 者（P <0.05）;转染USP39 siRNA 的非小 细胞肺癌细胞早期凋亡细胞比例高于转染USP39 NC 者（P <0.05）,细胞周期被阻滞于G1 期。结论 USP39 在 非小细胞肺癌中表达升高,与患者TNM 分期密切相关,可促进非小细胞肺癌的增殖。     

黑素瘤抗原-1基因在非小细胞肺癌中的表达

目的:检测黑素瘤抗原-1(MAGE-1) mRNA及其编码的肿瘤抗原在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨以该抗原作为疫苗对NSCLC患者进行免疫治疗的可能性.方法:用RT-PCR方法和流式细胞术(FCM)对3种人肺癌细胞系、56例NSCLC标本和相邻正常肺组织标本MAGE-1 mRNA及蛋白的表达情况进行检测.结果:MAGE-1 mRNA及蛋白在3种人肺癌细胞系均表达;56例NSCLC标本中,27例表达MAGE-1 mRNA,22例表达MAGE-1蛋白,而在相邻正常肺组织中均不表达.结论:MAGE-1 mRNA及蛋白在NSCLC中具有较高的表达频率,提示该抗原有望成为对NSCLC患者进行免疫治疗的适宜靶点.     

唑来膦酸联合GP方案治疗非小细胞肺癌骨转移

目的观察唑来膦酸联合GP方案治疗非小细胞肺癌（NSCLC）骨转移的疗效。方法48例NSCLC骨转移患者,随机分为两组,每组24例。甲组接受唑来膦酸联合GP方案化疗,乙组为单纯GP方案化疗。结果甲组疼痛缓解率79．2％,乙组45．8％。两组止痛有效率比较有显著性差异（P〈0．05）;且甲组活动能力改善情况明显高于乙组（P〈0．05）。骨病灶控制总有效率,甲组为54．2％,乙组为20．8％（P〈0．05）。两组肺部原发病灶有效率,甲组为41．7％,乙组为33．3％,中位生存期甲组9．6个月,乙组8．8个月。结论唑来膦酸联合GP方案化疗对NSCLC骨转移不仅有较好的止痛作用,而且有提高化疗疗效,延长患者生存期的潜在获益可能。     

促红细胞生成素治疗非小细胞肺癌化疗所致贫血的临床研究

目的评价促红细胞生长素(EPO)治疗非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗所致贫血的临床疗效及副反应。方法64例NSCLC患者分成观察组34例和对照组30例,观察组化疗同时皮下注射EPO,剂量为150 u.kg-1体重,每周3次;对照组化疗同时给予利血君口服,观察两组的治疗效果和不良反应。结果治疗2周后观察组和对照组血红蛋白浓度、红细胞压积、红细胞总数均较治疗前显著降低(P<0.01)。治疗4周起观察组血红蛋白浓度、红细胞压积、红细胞总数均明显上升(P<0.01),且高于对照组同期水平(P<0.01)。治疗结束后观察组血红蛋白浓度、红细胞压积、红细胞总数均较治疗前显著增加(P<0.01)。结论EPO对非小细胞肺癌采用以顺铂为主联合化疗方案所致贫血有肯定的疗效。     

长春瑞滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌临床观察

目的比较长春瑞滨(NVB)加顺铂(DDP)与环磷酰胺(CTX)加阿霉素(ADM)加顺铂(DDP)两方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效。方法随机将62例患者分为 NP 组(32例)和 CAP 组(30例),均化疗2疗程,疗效评价按 WHO疗效标准,总有效率以 CR PR 计算。结果总有效率 NP 组46.8%,GAP 组20.0%,χ~2=4.99,P<0.05,两者有显著差异。结论 NP 方案治疗晚期非小细胞肺癌疗效较好,高于 CAP 方案。     

In Vitro and In Vivo inhibitory effect of the combination of Wenxia Changfu Formula (温下肠腑方) with cisplatin in non-small cell lung cancer

Objective  

To observe the effect of the combination of Wenxia Changfu Formula (温下肠腑方, WCF) with cisplatin (CDDP) on inhibiting non-small cell lung cancer (NSCLC) in vitro and In Vivo and explore its mechanism from its effect on cell cycle.     

化疗对非小细胞肺癌患者血清褪黑素及尿液中6-羟基褪黑素的影响

目的探讨化疗对非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清褪黑素（MLT）及尿液中6-羟基褪黑素（6-OH-MLT）水平的影响。方法采用高效液相色谱法（HPLC）测定30例NSCLC患者在化疗前和化疗后血清中MLT和尿液中6-OH-MLT的浓度以及10例正常对照者血清MLT和尿液6-OH-MLT水平。结果NSCLC患者血清MLT和尿液6-OH-MLT水平较正常对照显著降低（P〈0．05）,30例NSCLC患者化疗前后夜间（C 0：00）血清MLT及尿液中6-OH-MLT水平与中午（C12：00）时相比均显著增高（P〈0．01）,C 0：00血清MLT和尿液中6-OH-MLT浓度在化疗后均显著低于化疗前（P〈0．01）。结论NSCLC患者化疗后体内MLT及其主要代谢产物6-OH—MLT明显降低,提示化疗可能影响NSCLC患者体内MLT合成,使其内源性MLT水平下降。