远志YZ-50对慢性应激抑郁模型大鼠海马Bax、Bcl-2表达的影响

目的：探讨远志YZ-50对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元凋亡因子Bax、Bcl-2表达的影响。方法：采用健康雄性Ⅱ级Wistar大鼠慢性应激抑郁模型，通过免疫组化染色法检测模型大鼠海马区凋亡调控因子Bax、Bcl-2蛋白的表达，从分子水平探讨在给予远志YZ．50后凋亡调控因子Bax、Bcl-2在慢性应激抑郁大鼠海马组织的变化规律。本实验共设五组，分别是空白对照组、慢性应激模型组、地昔帕明组（20mg·kg^-1）、YZ-50低剂量组（2．8g生药·kg^-1）、YZ-50高剂量（5．6g生药·kg^-1）组。结果：在给予大鼠慢性应激刺激21d，造成应激抑郁模型后，通过检测表明模型组动物Bax蛋白的表达明显增加，Bcl-2蛋白表达很弱；YZ-50低、高剂量组动物Bcl-2蛋白的表达与模型组动物相比明显增加；Bax蛋白的表达与模型组动物相比均显著降低（P〈0．05）。结论：YZ-50能够提高慢性应激抑郁模型大鼠海马区CA3区Bcl-2蛋白的表达、抑制Bax蛋白的表达，调控Bcl-2／Bax比例而抑制神经细胞的凋亡，减少外界刺激对脑部神经元的损害，从而改善其抑郁状态。     

活血益智片对血管性痴呆大鼠记忆障碍及海马Bcl-2蛋白表达的影响

目的研究活血益智片对血管性痴呆大鼠(VaD)认知功能及海马神经元凋亡的影响。方法Wistar大鼠腹腔注射硝普钠2.5mg·kg-1后,立即反复夹闭大鼠双侧颈总动脉,制备血管性痴呆大鼠模型,观察活血益智片组(1.55,3.1,6.2g.kg-1)及氢麦角碱组(5.4mg·kg-1)连续给药28天后,对大鼠学习记忆能力及海马中SOD、MDA活性及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果活血益智片组与模型组比较,可提高大鼠的学习记忆能力及SOD活性,降低MDA含量;增加Bcl-2及减少Bax蛋白表达。结论活血益智片可通过调节Bcl-2及Bax表达而发挥抗凋亡作用。     

促肾上腺皮质激素释放激素受体1拮抗剂CP154526对大鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体1拮抗剂CP154526对海马神经元凋亡的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,然后分为4组:正常对照组(Con)、CRH刺激组(CRH)、CRH和CP154526共同刺激组(CRH+CP)、CP154526刺激组(CP)。TUNEL、流式细胞术AnnexinⅤ-PI法检测神经元凋亡率;Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表达水平。结果 10-8mol·L-1的CRH作用于海马神经元后,细胞存活率下降(P<0.05);50 mmol·L-1的CP154526可明显提升神经元存活率(P<0.05)。与正常对照组相比,CRH刺激后神经元凋亡率增加,Bax/Bcl-2比值增高,caspase-3表达增加;加用CP154526可明显降低神经元凋亡率、Bax/Bcl-2比值及caspase-3表达水平;而单独应用CP154526对凋亡没有明显影响。结论一定浓度的CRH可诱导海马神经元细胞凋亡,其受体1拮抗剂CP154526可有效减轻细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

5,6-二羟乙基黄芩苷对大鼠急性脑缺血再灌注所致海马神经细胞凋亡的保护作用

目的考察5,6-二羟乙基黄芩苷对脑缺血再灌注所致神经元损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断合并降压法导致全脑缺血再灌注损伤模型,用HE染色法观察大鼠海马CA1区神经元形态变化;TUNEL法测定海马CA1区神经细胞凋亡的数量;免疫组织化学法检测大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax与Caspase-3蛋白的表达。结果 5,6-二羟乙基黄芩苷各给药组能够剂量依赖性地减少TUNEL阳性凋亡细胞的数量,下调促凋亡蛋白Bax及Caspase-3的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,并不同程度地改善了大鼠海马CA1区神经元的病理改变。结论 5,6-二羟乙基黄芩苷对脑缺血再灌注损伤具有显著的保护作用,其作用机制可能与抗神经元凋亡有关。     

梓醇对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 考察梓醇对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.方法 采用双侧颈总动脉结扎来制备VD大鼠模型,造模后第30天,将大鼠分成模型组、阳性组及梓醇高、中、低剂量组,连续给药30 d.采用Morris水迷宫法检测大鼠的学习记忆能力,HE染色法观察海马CA1区的病理组织形态,免疫组化法检测海马CA1区Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 与模型组相比,高、中剂量组大鼠第3、4天的逃避潜伏期明显缩短,高、中、低剂量梓醇组大鼠的站台穿越次数明显增加;梓醇能改善大鼠海马CA1区神经元的病理改变;梓醇高、中剂量能下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达.结论 梓醇能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马神经细胞凋亡有关.     

葡萄籽原花青素对血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响

目的观察葡萄籽原花青素(GSP)对血管性痴呆(VD)大鼠空间学习记忆能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用改良Pulsinelli四血管阻塞法建立VD大鼠模型,造模成功后,每天灌胃给药,Wistar大鼠分为假手术组,模型组,原花青素组(50 mg/kg和150 mg/kg),银杏叶片24 mg/kg。Morris水迷宫检测VD大鼠空间学习记忆能力;比色法检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测海马Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与模型组比较,原花青素可明显改善VD大鼠空间学习记忆能力;提高脑组织SOD活性、GSH含量和总抗氧化能力,降低MDA含量;提高海马Bcl-2/Bax mRNA比值。结论原花青素可改善VD大鼠学习记忆功能,其机制可能与提高机体抗氧化能力、抑制海马神经元凋亡有关。     

神经节苷脂对大鼠弥漫性轴索损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨神经节苷脂对大鼠弥漫性轴索损伤后海马CA1区神经元凋亡的影响。方法 Wistar大鼠,♂,192只,随机分为正常对照组、假手术组、脑损伤组和药物干预组。正常对照组不给予任何干预措施;假手术组仅进行头皮切开缝合处理;脑损伤组和药物干预组均制作弥漫性轴索损伤模型,其中药物干预组在制作模型后定期给予神经节苷脂（40 mg·kg-1·d-1）。造模3,6,12,24,336 h后,用免疫组化方法检测海马CA1区凋亡蛋白酶激活因子-1（apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1）蛋白的表达。结果脑损伤组和药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达含量均于3 h开始增加,6 h达到高峰,此后逐渐下降。药物干预组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白表达含量在各个时间点均低于脑损伤组,除3 h组外,差异均有统计学意义（P〈0·05）。结论弥漫性轴索损伤可引起大鼠海马CA1区神经元凋亡,神经节苷脂可改善该凋亡的发生发展。     

耳针对血管性痴呆大鼠海马神经元细胞凋亡的干预研究

目的观察耳针对血管性痴呆（VD）大鼠记忆力、海马神经元细胞凋亡及凋亡蛋白酶caspase-3mRNA表达的影响,探讨耳针治疗VD的可能机制。方法采用4-血管阻断方法制备VD大鼠模型,针刺脑、肾耳穴后,morris迷宫检测大鼠学习记忆能力改善情况、原位末端标记法观察海马CA1区神经元细胞凋亡数、原位分子杂交观察促凋亡蛋白酶caspase-3 mRNA表达的变化。结果治疗组海马CA1区神经元细胞凋亡数明显减少（P〈0．01）,caspase-3 mRNA表达降低（P〈0．01）。结论耳针改善VD大鼠学习记忆能力障碍,可能与针刺下调caspase-3 mRNA的表达、抑制神经元细胞凋亡、保护缺血后海马神经元的作用有关。     

黄芪总苷及黄芪甲苷对糖皮质激素诱导老前期小鼠记忆障碍的保护作用及其机制

目的探讨黄芪总苷（Astragaloside,AST）和黄芪甲苷（Astragalus Saponin I,ASI）对氢化可的松（Hydrocortisone,HC）引起小鼠记忆障碍的保护作用及对胞浆钙浓度（[Ca^2＋]i）的影响。方法用HC（4mg·kg^-1,se,21d）建立老前期小鼠学习记忆损伤模型,避暗实验检测小鼠学习记忆功能;Fura-2／AM负载法检测小鼠胸腺细胞和海马神经元突触体[Ca^2＋]i;电镜观察海马神经元的超微结构。结果与HC模型组比较,AST（50mg·kg^-1）和ASI（50mg·kg^-1）能改善小鼠的记忆功能,降低小鼠胸腺细胞和海马神经元突触体[Ca^2＋]i,改善海马神经元的超微结构。结论氢化可的松可明显引起老前期小鼠记忆障碍,AST和ASI能改善小鼠的学习记忆功能,其机制可能与抑制细胞内钙超载有关。     

藏红花酸对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮的保护作用

目的研究藏红花酸对链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮的保护作用及机制。方法♂SD大鼠40只,随机选取30只腹腔注入STZ(60 mg·kg^-1)将大鼠随机分为3组:糖尿病对照组、藏红花酸低剂量组(50 mg·kg^-1·d^-1,p.o.)、藏红花酸高剂量组(100 mg·kg^-1·d^-1,p.o.)。空白对照组及糖尿病组每天给予3 mL 0.5%CMC-Na。第8周末取各组大鼠眼球检测视网膜神经上皮caspase-3、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)表达量,实时荧光定量PCR检测大鼠视网膜神经上皮Bcl-2、TNF-α、Bax、PKC-βmRNA表达水平。结果caspase-3、TNF-α、PKC及Bax表达量DM组表达最高,DM+CRO组比DM组明显下降(P<0.05),Bcl-2表达量DM+CRO处理组较DM组明显升高(P<0.01)。结论藏红花酸对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜神经上皮具有保护作用,其可能机制是抑制TNF-α、Bax、caspase-3表达,提高Bcl-2的表达,并且藏红花酸可以减少视网膜神经上皮PKC蛋白和基因的表达,保护糖尿病大鼠视网膜。     

鼠李黄素对心肌缺血再灌注大鼠心脏功能和免疫反应的调节作用

目的研究鼠李黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法将100只SD大鼠随机分成正常组,模型组,鼠李黄素低(50 mg·kg^-1)、中(100 mg·kg^-1)、高(200 mg·kg^-1)剂量组,每组20只。除正常组外,各组大鼠采用结扎左冠状动脉前降支法制备心肌缺血模型。鼠李黄素各组按相应剂量灌胃,每天1次,连续20 d。BL-420信号采集系统检测大鼠MAP、HR和LVSP水平;ELISA检测血清中CK-MB、Mb、cTn I、IL-6、IL-1β、iNOS和TNF-α的表达;Western blotting检测心肌细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、TLR4、P-NF-κB p65和MIP-2;试剂盒检测心肌细胞中MDA和SOD含量;免疫组化检测心肌细胞中Ki67的表达;HE染色观察心肌损伤。结果与模型组比较,给药组MAP、HR和LVSP显著升高,CK-MB、Mb和cTn I表达显著降低,Bax表达显著下调,Bcl-2表达显著上调,SOD含量显著增高,MDA含量显著降低,Ki67阳性比率显著降低,心肌细胞恢复正常形态,caspase-3和caspase-9表达显著下调,IL-6、IL-1β、iNOS、TNF-α含量显著降低,TLR4、P-NF-κB p65和MIP-2表达显著降低。结论鼠李黄素主要是通过降低氧化应激水平,诱导细胞增殖,抑制细胞凋亡、减缓炎症反应等途径来保护心肌细胞,减缓缺血再灌注损伤危害。     

基于nNOS途径的天麻素注射液改善甲基苯丙胺诱导大鼠神经毒性损伤的作用机制研究

目的:研究天麻素注射液通过神经型一氧化氮合酶(nNOS)途径改善甲基苯丙胺诱导大鼠神经毒性损伤的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为对照组、甲基苯丙胺组、常规剂量天麻素组、加倍剂量天麻素组、阴性对照(NC)腺病毒组、NC腺病毒+甲基苯丙胺组、NC腺病毒+天麻素组、n NOS腺病毒+天麻素组,每组10只。对照组大鼠腹腔注射生理盐水,每日2次;甲基苯丙胺组大鼠腹腔注射甲基苯丙胺(7.5 mg/kg),每日2次;常规剂量、加倍剂量天麻素组大鼠提前30 min分别腹腔注射不同剂量天麻素注射液(10、20 mg/kg),每日1次,再按甲基苯丙胺组方法注射甲基苯丙胺。NC腺病毒组大鼠在纹状体一次性注射NC腺病毒(4.8×107PFU)3μL+腹腔注射生理盐水,每日2次;NC腺病毒+甲基苯丙胺组大鼠同法注射NC腺病毒,然后腹腔注射甲基苯丙胺(7.5 mg/kg),每日2次;NC腺病毒+天麻素组大鼠同法注射NC腺病毒+甲基苯丙胺,同时在注射甲基苯丙胺之前30 min腹腔注射天麻素注射液(20 mg/kg),每日1次;nNOS腺病毒+天麻素组大鼠同法注射nNOS腺病毒和甲基苯丙胺,同时在注射甲基苯丙胺之前30 min腹腔注射天麻素注射液(20 mg/kg),每日1次。各组大鼠每次腹腔注射体积均为1 mL/100 g,均连续注射给药3 d。观察大鼠刻板行为并评分,检测大鼠纹状体的细胞凋亡率、凋亡相关因子[Bcl-2、Bax、活化胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)]蛋白表达量、氧化应激相关因子[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)]水平,以及一氧化氮(NO)水平和nNOS蛋白表达量。结果:与对照组比较,甲基苯丙胺组大鼠的刻板行为评分和纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、nNOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);与甲基苯丙胺组比较,常规剂量、加倍剂量天麻素组大鼠的刻板行为评分和纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著降低,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著升高,且加倍剂量天麻素组大部分上述指标均显著优于常规剂量组(P<0.05或P<0.01)。与NC腺病毒组比较,NC腺病毒+甲基苯丙胺组大鼠纹状体的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.01);与NC腺病毒+甲基苯丙胺组比较,NC腺病毒+天麻素组大鼠纹状体中细胞凋亡率,Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量以及MDA、NO水平均显著降低,Bcl-2蛋白表达量以及SOD、GPx水平均显著升高(P<0.01);与NC腺病毒+天麻素组比较,n NOS腺病毒+天麻素组大鼠纹状体中的细胞凋亡率、Bax、Cleaved caspase-3、n NOS蛋白表达量及MDA、NO水平均显著升高,Bcl-2蛋白表达量及SOD、GPx水平均显著降低(P<0.01)。结论:天麻素注射液对甲基苯丙胺诱导的大鼠神经毒性损伤具有明显的保护作用,且这一作用与抑制n NOS介导的细胞凋亡及氧化应激反应有关。     

Protective effects of compound FLZ on β-amyloid peptide-（25-35）-induced mouse hippocampal injury and learning and memory impairment

AIM: To study the protective effects of compound FLZ, a novel synthetic analogue of natural squamosamide, on learning and memory impairment and lesions of the hippocampus caused by icv injection of beta-amyloid(25-35)(Abeta(25-35)) in mice. METHODS: Mice were icv injected with the Abeta(25-35) (15 nmol/mouse), and then treated with oral administration of 75 mg/kg or 150 mg/kg of FLZ once daily for 16 consecutive days. The impairment of learning and memory in mice were tested using step-down test and Morris water maze test. The content of malondialdehyde (MDA) and the expressions of acetylcholinesterase (AChE), Bax, and Bcl-2 in the CA1 region of the mouse hippocampus were measured by biochemical and immunohistochemical analysis, respectively. The pathological damages of hippocampus were observed using a microscope. RESULTS: FLZ (75 mg/kg, 150 mg/kg) significantly attenuated Abeta(25-35)-induced impairment of learning and memory in the step-down test and Morris water maze test. FLZ also reduced pathological damages to the hippocampus induced by Abeta(25-35). Furthermore, FLZ prevented the increase of AChE and Bax, and the decrease of Bcl-2 immunoreactive cells in the CA1 region of the hippocampus, and reduced the increase of MDA content in the hippocampus in mice injected with Abeta(25-35). CONCLUSION: FLZ has protective action against the impairment of learning and memory and pathological damage to the hippocampus induced by icv injection of Abeta(25-35) in mice.     

葡萄籽原花青素对2型糖尿病大鼠血清中SOD GSH MDA及NO表达的影响

目的观察葡萄籽原花青素(GSPE)对2型糖尿病大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)表达的影响。方法选取SPF级雄性SD大鼠30只,出生180d,体质量180～220g,高脂饲料喂养4周后再小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病模型,随机分为糖尿病对照组,GSPE250mg·kg-1·d-1、50mg·kg-1·d-1剂量干预组;另设6只为普食对照组。检测各组喂养第6周、10周后的血糖水平,并检测第10周后大鼠血清中SOD、MDA、GSH及NO的变化。结果GSPE能降低血糖,但效果不明显。在抗氧化指标的检测中,与糖尿病对照组相比,GSPE250mg·kg-1·d-1剂量干预组SOD、GSH明显升高(P<0.05),MDA、NO明显降低(P<0.05);50mg·kg-1·d-1剂量干预组SOD、GSH有所升高,MDA、NO有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论较高剂量的GSPE能有效改善2型糖尿病大鼠的抗氧化能力,对其作用机制的进一步研究,可为GSPE对糖尿病及其并发症的营养干预治疗提供新的思路和依据。     

Study on the protective effect of salidroside on memory impairment in mice under high altitude hypoxia北大核心CSCD

目的探究红景天苷在高原低氧条件下改善小鼠学习记忆能力的作用。方法48只C57BL/6J♂小鼠按体重随机分成平原对照组、高原模型组和红景天苷组,每组16只,各组动物按剂量预防给药3 d后急进海拔4010 m的高原,缺氧暴露1 d后进行Morris水迷宫实验测试小鼠学习记忆能力;测定丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_(2)O_(2))、谷胱甘肽(GSH)、谷氨酸含量及超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活力;通过HE染色及尼氏染色观察海马组织病理学变化;通过Western blot法检测谷氨酸受体1(Grin1)和Bax、caspase-3的表达。研究高原低氧条件下红景天苷对小鼠记忆损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制。结果与高原模型组比较,给予红景天苷后能明显缩短小鼠潜伏期、增加穿越平台次数,不同程度的降低小鼠脑组织MDA、H_(2)O_(2)、谷氨酸含量及AChE活力,增加GSH含量及SOD活力,改善海马体中的神经元损伤,降低海马组织中Grin1和凋亡蛋白Bax、caspase-3的表达。结论红景天苷可以减轻氧化应激损伤、调节神经递质水平、缓解海马组织损伤并减少神经元凋亡,最终改善由高原低氧造成的小鼠记忆损伤。     

7-羟乙基白杨素对低压低氧大鼠认知功能的保护作用及机制研究

目的：研究7-羟乙基白杨素（7-HEC）对低压低氧致大鼠认知功能损伤的保护作用及其机制。方法：将48只雄性大鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、白杨素组和7-HEC组，连续灌胃给药5 d，其中舱外2 d，然后将大鼠置于模拟海拔8 000 m环境停留3 d，期间每天给药一次。八臂迷宫检测大鼠空间学习记忆能力，HE染色观察脑组织海马区病理改变，检测海马组织中H₂O₂、MDA和抗氧化酶的活性变化，ELISA法检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的水平，蛋白印迹法检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的表达情况。结果：低压低氧导致大鼠海马组织损伤明显，参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）、总错误次数（TE）和总时间（TT）显著升高，海马组织中H₂O₂、MDA含量和炎性因子水平显著增加，抗氧化酶活性显著减低，Bax和caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2蛋白表达降低。经7-HEC预处理后能够显著降低WME、RME、TE和TT，降低大鼠海马组织中H₂O₂、MDA含量和炎性因子水平，提高抗氧化酶活性，降低Bax和caspase-3蛋白表达，显著提高Bcl-2蛋白的表达。结论：7-HEC能够减轻低压低氧诱导的认知功能损伤，作用机制可能与清除自由基，提高抗氧化酶活性，降低机体氧化应激，抑制炎性反应和细胞凋亡有关。