实时荧光定量PCR法检测淋病奈瑟菌感染的临床价值分析

目的此次研究旨在探讨实时荧光定量PCR方法对淋病奈瑟菌基因的影响,以期为临床工作中淋病的筛查提供科学合理的依据。方法使用细菌培养法作为对照,将接种完成的含Poly Vite X巧克力的平板置于35℃含5%二氧化碳的培养箱中24~48 h,采用生化反应进行鉴定并使用APINH鉴定试条进行检验;实时荧光定量PCR的检测方法采用试剂盒提供的方法进行。结果此次研究中的200例临床样本53例呈淋病奈瑟菌阳性,其阳性率为26.5%。实时荧光定量PCR结果显示200例临床样本中共61例呈淋病奈瑟菌阳性,其阳性率为30.5%。以细菌培养法为评价依据,结果显示实时荧光定量PCR法其灵敏度为的灵敏度为100%(53/53),其特异度为95.77%(181/189),总符合率为96%(192/200)。结论采用实时荧光定量PCR法对淋病奈瑟菌感染患者进行筛查具有较好的开发价值,应对其进行深入研究。     

实时荧光定量PCR法在淋病奈瑟菌感染检测中的应用效果分析

目的:探讨实时荧光定量PCR法在淋病奈瑟菌感染检测中的应用效果。方法:选取淋病奈瑟菌感染检测患者298例为研究对象,分别采用培养检测法及实时荧光定量PCR法从检测线性范围、检测重复性、检测灵敏度、检测特异性及检测试剂稳定性等方面进行比较。结果:经两组方法比较,在检测线性范围、检测重复性、检测灵敏度、检测特异性及检测试剂稳定性等方面,PCR检测法显示了一定的优势,但也存在一定的漏检率。结论:临床上应充分应用各种检测方法的优势,使之相互补充,以提升淋病奈瑟菌的检出率。     

荧光定量聚合酶链反应检测淋病奈瑟菌

目的　评价荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术检测淋病奈瑟菌的临床应用。方法　采用FQ -PCR技术检测疑似淋病患者泌尿生殖道标本 80例 ,并同时进行淋病奈瑟菌培养 ,对两种方法的检测结果进行比较分析。结果　测试 80例标本 ,FQ -PCR法 30例为阳性 ,DNA拷贝数从 3× 10 5/ml至 6× 10 10 /ml不等 ,阳性率为 37.5 %(30 / 80 ) ;培养法 2 4例阳性 ,阳性率 30 .0 % (2 4/ 80 ) ;FQ -PCR较培养法差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。结论　FQ -PCR技术可定量检测标本中的DNA拷贝数 ,较培养法简单、敏感、准确 ,对于淋病的早期确诊 ,治疗期间疗效的判断具有重要价值     

淋病奈瑟菌的细菌培养与PCR方法检测的结果对比

目的:比较细菌培养法与聚合酶链反应(PCR)检测方法对淋病奈瑟菌的检测效果。方法:对60例疑似淋病患者生殖道分泌物同时进行细菌培养、PCR检测,并对其结果进行比较分析。结果:采用细菌培养法检测60例样本中26例为淋病奈瑟菌阳性,阳性检出率为43.3%;采用PCR方法检测60例样本中45例为淋病奈瑟菌阳性,阳性检出率为75.0%。两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于淋病奈瑟菌采用PCR检测方法具有高效率、高特异性、低误诊率、低漏诊率,是临床上检测淋病奈瑟菌的好方法。     

淋病奈瑟菌耐药性检测分析

淋病是最重要的性传染疾病之一。淋病奈瑟菌的感染率不断提高 ,正确地检测了解其耐药性 ,对淋病的治疗和控制有着重要的意义。我们对临床分离的淋病奈瑟菌 (ＮＧ)进行了纸片扩散 (Ｋ Ｂ)法药敏试验 ,同时对这些淋病奈瑟菌进行ＰＣＲ测定及ＤＮＡ测序以检测其青霉素、四环素、环丙沙星的耐药基因。1　材料与方法1.1　材料　菌株来源 :5 0株ＮＧ为 2 0 0 1年 6月～ 11月来我院就诊病人及市皮肤病防治所对淋病高危人群体检取样分离培养所得 ,细菌经培养及生化试验确证为淋病奈瑟菌。抗生素 :青霉素、四环素、环丙沙星、头孢噻污、头孢西丁均为…     

吕氏美兰染色法与PCR法检测淋病奈瑟菌结果比较

目的比较两种淋病奈瑟菌检测方法的优缺点。方法对临床114例疑似淋病患者进行吕氏美兰染色法和PCR法进行淋病奈瑟菌检测。结果PCR法检出率比吕氏美兰染色法高出10．5％。二者相比,有显著性差异（P〈0．01）。结论吕氏美兰染色法方便、价廉,便于基层医院开展,但检测率低。PCR法具有极高的灵敏度和准确性,但操作略繁琐,费用较高。     

PCR对可疑慢性淋病病人淋病奈瑟菌的检测

明确临床上可疑慢性淋病病人的病原学诊断。方法用聚合酶链反应对７６例可疑慢性淋病病人的尿道分泌物进行了淋病奈瑟菌检测，并与传统的细菌分离培养法的敏感性进行了比较。结果聚合酶链反应测出阳性标本２２份，分离培养法测出阳性标本８份。两种方法敏感性比较，差异有显著性。     

淋病奈瑟菌检测技术研究进展

随着基因组学、现代分子生物学理论与技术的发展以及新仪器的研发,淋病奈瑟菌的检测方法将向快速、准确、灵敏、特异的方向发展,特别是PCR、ELISA等现代分子生物学技术的联用及实时PCR的进一步完善,大大提高了淋病奈瑟菌的检测质量和效率。     

PCR检测淋病奈瑟菌的核酸分析

410例泌尿生殖系统感染的尿、阴道分泌物、前列腺炎的前列腺液,作涂片Giemse染色和NG-DNA-PCR反应.分析如下:     

淋病奈瑟氏菌的细菌培养与PCR方法检测的结果对比

<正>当前性传播疾病在我国日趋流行,其中尤以淋病的发病率较高[1],已成为威胁公众健康的重要疾病。目前,临床上检测淋球菌的方法有很多且各有利弊,其中主要采用的是聚合酶链反应(简称PCR)和细菌培养法两种。本文对我院于2008年6月至2010年12月采用PCR和细菌培养方法检测淋病奈瑟氏菌的结果进行比较,现报告如下。     

应用聚合酶链反应检测淋病奈瑟氏菌

根据已知淋球菌隐蔽性质粒的ｃｐｐＢ基因序列，设计了一对聚合酶链反应引物，对２１株淋球菌进行扩增均获得３９０ｂｐ片段，６株其它奈瑟氏菌及９株共生菌未能扩增出任何片段。该３９０ｂｐ片段能被限制性内切酶ＭｓｐＩ降解为２５０ｂｐ，１４０ｂｐ两个片段。经过３５个ＰＣＲ循环可检测出４００ｃｆｕ淋球菌。用ＰＣＲ法检测８２份临床标本，其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为：１００％，９０％，９１．３％及１００％。     

聚合酶链反应检测淋球菌的临床应用

应用ＰＣＲ法对１１３例临床标本中淋球菌菌体内所特有的４．２ｋｂ隐蔽性质粒上的ｃｐｐＢ基因进行了检测。与直接涂片法相比，ＰＣＲ法的敏感性和特异性分别达１００％和８７．５％。     

逆转录聚合酶链反应诊断新生儿肠道病毒感染的效果

①目的　探讨逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术对新生儿肠道病毒 (EV)感染检测的效果。②方法　采用RT PCR方法检测了 2 3例住院新生儿脑脊液 (CSF)、血清及尿液标本中EVRNA。③结果　急性期病儿的标本 (CSF、血清、尿液 )中 1 5例EVRNA阳性 ,而病毒培养 8例阳性 ,两者比较差异有显著性 (χ2 =4.2 6 ,P <0 .0 5)。④结论　RT PCR方法是诊断新生儿EV感染简单、快速、敏感的方法     

用多聚酶链式反应检测献血员巨细胞病毒感染

采用多聚酶链式反应，检测了７６份血库献血员的巨细胞病毒感染情况。结果显示：３９份表现阳性，阳性率为５１．３％。同时还检测了其敏感性和特异性。结果表明，可检测到的巨细胞病毒ＤＮＡ最低限为５ｆｇμｌ－１。本方法简单，快速，特异性较好，灵敏度高，可适用于临床巨细胞病毒感染的检测。     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％；其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％。与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．２％；提示ＰＣＲ检测临床标本中ＨＣＭＶ，不仅敏感特异，而且与ＣＣＣ，ＤＥＡ两法相比快速简便。     

聚合酶链式反应对结核病的诊断评价

本文对８２例血、痰等ＴＢ－ＰＣＲ阳性患者的临床检查结果发现，其中有５０例确诊为结核病，结核的诊断率为６１．０％：３２例为肺部其它疾病（３９．０％）。说明不能仅以ＴＢ－ＰＣＲ阳性诊断结核病，应结合临床症状用其它有关检查来进一步明确诊断。     

PCR对脑膜炎双球菌DNA片段的检测

用聚合酶链反应(PCR)检测脑膜炎双球菌,在该菌染色体DNA中的保守区域中选择一段核苷酸作为靶DNA,用PCR技术进行扩增,经过35个循环后可将1ngDNA扩增到能通过凝胶电泳检测出其596bp的特异性DNA产物,与其设计的该菌核苷酸序列长度一致.该方法对人有致病性的A,B,C 3型细菌均能扩增出阳性结果,且能快速、敏感、特异地检测出脑膜炎双球菌,在临床上具有重要的应用价值和广泛的应用前景.     

聚合酶链反应检测132例乙肝感染者HBVDNA

本文运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）．可检出极微量的ＨＢＶ感染者，它对乙肝发病机理的研究、判断患者病变活动和传染性以及判定抗病毒药物疗效均具有重要意义。     

聚合酶链反应中引物的计算机辅助筛选

利用计算机辅助筛选聚合酶链反应（ＰＣＲ）的扩增引物。计算机程序根据引物筛选规则编写。这些规则包括：①引物的３′端均以ＧＣ对结尾；②引物的长度为１８～的个寡核苷酸；③每个引物中的ＧＣ含量为４５％～６０％；④避免引物自身及引物之间的同源性。由此我们设计了ＳＲＳ小鼠白血病病毒的引物，成功地扩增了３．４ｋｂ的大片段目的基因。实验结果证明了由此法筛选出来的引物的有效性和特异性。     

用Nested聚合酶链反应检测嗜肺军团菌的实验研究

用Nested聚合酶链反应(Nested PCR)法检测嗜肺军团菌种。Nested PCR法所用的两对寡核苷酸引物按编码24 kDa嗜肺军团菌表面抗原的基团片段序列设计的。用此两对引物对实验的军团菌种和非军团菌种细菌DNA进行扩增,只有嗜肺军团菌种DNA被扩增,而其他军团菌种和非军团菌属细菌没有被扩增。第1步和第2步PCR分别检测到最小量为10pg和10 fg的靶DNA。对不同量的嗜肺军团菌配制成的痰标本进行检测,能检测到0.1cfu/ml的嗜肺军团菌,只需12h。这些结果显示Nested PCR法检测嗜肺军团菌特异性强,敏感性高。此方法为从临床标本和环境材料中早期、快速检测到嗜肺军团菌提供了有效的工具。