甲胎蛋白对肝癌细胞生长的影响 Ⅰ.人AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞RNA合成的促进作用

用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。体外用~3H-UR参入的方法,从转录水平观察AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞生长的影响。结果表明,人AFP能显著地直接促进该肿瘤细胞RNA的合成;人血白蛋白和去除AFP后胎儿肌肉匀浆液等对照均无显著作用;AFP抗血清能显著地清除AFP的这种促进作用。用小鼠S_(180)乳腺肉瘤细胞作为对照表明,AFP促肿瘤生长无严格的组织特异性。     

高剂量非体外去T细胞PBSC作为移植物行减低剂量预处理单倍体HSCT治疗老年急性髓系白血病及骨髓增生异常综合征患者效果观察

目的探讨高剂量非体外去T细胞外周血造血干细胞(PBSC)作为移植物行减低剂量预处理单倍体造血干细胞移植(RIC-haplo-HSCT)治疗老年急性髓系白血病(AML)及骨髓增生异常综合征(MDS)患者的临床效果。方法回顾性分析2014年1月至2022年6月新疆医科大学第一附属医院收治的28例行RIC-haplo-HSCT治疗的年龄≥50岁AML及MDS患者的临床资料。所有患者均采用高剂量非体外去T细胞PBSC作为移植物,加用抗CD25单克隆抗体和糖皮质激素作为强化移植物抗宿主病(GVHD)预防方案。结果28例患者均获得造血重建。100 d内Ⅱ~Ⅳ度、Ⅲ~Ⅳ度急性GVHD的累积发生率分别为22.5%(95%CI 5.1%~39.9%)和8.2%(95%CI 0~19.2%)。3年慢性GVHD的累积发生率为26.8%(95%CI 7.8%~45.8%),广泛型慢性GVHD的累积发生率为5.9%(95%CI 0~17.1%)。中位随访35.5个月(2~83个月),3年累积复发率和非复发死亡率分别为16.7%(95%CI 2.0%~31.9%)、12.2%(95%CI 0~25.2%)。3年无病生存率和总生存率分别为73.3%(95%CI 56.2%~90.4%)、79.1%(95%CI 62.2%~96.0%)。结论高剂量非体外去T细胞PBSC作为移植物行RIC-haplo-HSCT治疗老年AML及MDS患者的临床效果较好。     

阿克拉霉素A诱导人肺癌细胞分化的实验研究

目的:探讨阿克拉霉素A(ACM-A)对人肺癌细胞株Anip-937表型的逆转作用.方法:用细胞培养、MTT法、光镜和电镜观察、~3H-TdR和~3H-UR掺入试验及流式细胞术,检测经ACM-A处理后Anip-937细胞的形态和生物学行为的改变.结果:低剂量ACM-A(4～62.5ng/ml)可明显抑制Anip-937细胞生长,MTT法测得作用4天时的50%增殖抑制浓度(IC_(50))为12.6ng/ml.ACM-A(5～20ng/ml)可使Anip-937细胞形态趋于正常、~3H-TdR和~3H-UR掺入下降、G_0/G_1期细胞比例上升,而G_2/M期细胞比例下降.结论:ACM-A可逆转Anip-937人肺癌细胞的某些表型,诱导该细胞株趋于分化.     

AML1-ETO融合基因转阴对急性髓细胞白血病预后的影响

目的:探讨AML1-ETO融合基因阳性表达的急性髓细胞白血病（acute myelocytic leukemia,AML）患者治疗后融合基因转阴及转阴时间长短对AML患者预后的影响。方法:对2012年1月1日至2016年12月31日在中国医科大学附属盛京医院住院治疗的35例初诊AML1-ETO融合基因阳性AML患者的临床资料进行回顾性分析,总结其形态学、免疫学和分子生物学特征,用 Kaplan-Meier 曲线评估患者生存情况。结果:35例患者男女比例 1.33∶1,中位年龄为34岁(15~71岁)。中位随访时间为16(4~61)个月,诱导缓解率为82.9%,3个疗程或以上缓解占14.3%(n=5),始终未缓解占2.9%(n=1),复发率35.3％(n=12),复发中位时间 12（6~20）个月。其中11例治疗后融合基因转阴,包括3个月内转阴占63.6%（n=7）,大于3个月转阴占36.4%（n=4）。单因素分析表明AML1-ETO融合基因转阴患者OS和PFS高,预后较好,AML1-ETO融合基因转阴时间长短对患者长期生存的影响无统计学意义（P=0.707）。结论:AML1-ETO融合基因转阴的AML患者预后较好,AML1-ETO融合基因转阴时间长短对患者的长期生存无明显影响。     

自体外周血造血于细胞移植联合Mylotarg治疗急性髓系白血病一例并文献复习

目的 探讨减少急性髓系白血病(AML)自体外周血造血干细胞移植(auto-PBSCT)后复发的新方法.方法 报道1例auto-PBSCT联合抗CD33,单抗(Mylotarg)治疗的AML患者,并通过长期随访了解治疗效果.结果 该患者无瘤生存3年.结论 auto-PBSCT联合Mylotarg可能为auto-PBSCT后减少白血病复发提供新的治疗方案,同时为Mylotarg的临床应用提供新途径.     

自体外周血造血干细胞移植联合Mylotarg治疗急性髓系白血病一例并文献复习

 目的　探讨减少急性髓系白血病（AML）自体外周血造血干细胞移植（auto-PBSCT）后复发的新方法。方法　报道1例auto-PBSCT联合抗CD33单抗（Mylotarg）治疗的AML患者，并通过长期随访了解治疗效果。结果　该患者无瘤生存3年。结论　auto-PBSCT联合Mylotarg可能为auto-PBSCT后减少白血病复发提供新的治疗方案，同时为Mylotarg的临床应用提供新途径。     

卵巢癌等人体肿瘤细胞体外抗癌药物敏感试验

本实验用~3H-TdR掺入法。对20例肿瘤患者的手术标本及胸水做了体外抗癌药物的敏感试验,临床按试验结果选用抗癌药物。其总符合率为80％,敏感指数为78％,耐药指致为82％,本试验可为临床化疗选药提供参考依据。     

体外双层琼脂法与~3H—TdR参入法测定抗癌药敏感性比较

本文采用修改Hamburger—salmon体外双层琼脂法与~3H—TdR参入法同时对人类宫颈癌细胞系细胞和卵巢癌细胞进行药物敏测。观察了13例卵巢癌患者用两法测得顺铂体外敏感性与临床疗效的关系。结果表明:HeLa细胞和卵巢癌细胞接种数与克隆产率、CPM值在一定范围内均呈线性相关。用剂量——存活曲线测得阿霉素、顺氯氨铂和长春新碱对HeLa细胞系细胞的IC_(50)值无明显差异。两法测定顺铂对卵巢癌的体外敏感性与临床疗效相关。体内外阳性相关率为88％(8/9);阴性相关率为100％(4/4)。两种方法测得药敏结果无明显差异。我们的实验数据表明~3H～TdR参入法有可能取代双层琼脂法为指导临床化疗选药提供一定依据。     

急性髓细胞白血病早期病死的预测诊断

目的建立一个数学模型，对急性髓细胞白血病（AML）早期病死（ED）作出预测诊断。方法对193例AML各因素进行Logistic多元回归分析及判别分析，建立判别函数。结果Logistic多元回归分析表明，ED的危险因素包括体温、白细胞计数、血小板计数、骨髓增生度及白血病细胞类型等；据此建立的判别函数，总的判别符合率为86．5％，ED组及非ED组判别符合率分别为78．6％和88．7％。结论本判别函数判别符合率高，错判率低，具有一定的临床应用价值。     

体外化疗药物诱导白血病细胞凋亡预测临床疗效

[目的]探讨急性髓系白血病(AML)患者体外化疗药物诱导白血病细胞凋亡在化疗疗效预测中的价值。[方法]应用TdT介导的脱氧核苷酸切口和末端标记法(Tunel)、单克隆抗体免疫组化检测等方法研究42例初治AML患者体外化疗药物诱导白血病细胞凋亡、bcl鄄2表达与临床化疗疗效的关系。[结果]42例AML患者中,30例获完全缓解(CR)者,bcl鄄2表达显著低于12例未缓解(NR)者(P<0.05);CR患者柔红霉素(DNR)和阿糖胞苷(Ara鄄C)体外诱导白血病细胞凋亡率均分别高于NR患者,差异有显著性(P均<0.05);体外DNR和Ara鄄C两药诱导白血病细胞的总凋亡率,可以作为临床预测AML患者DA方案疗效的定量指标。[结论]体外化疗药物能否有效地诱导白血病细胞凋亡是判断AML患者化疗敏感性的重要指标。     

DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变正常核型急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的 分析DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常核型急性髓系白血病(AML)患者的临床特征,探讨该类患者的预后.方法 回顾性分析2005年12月至2014年6月就诊的109例正常核型AML患者的临床特征及预后.其中DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+AML患者共25例,单独FLT3-ITD+ AML患者共32例,单独NPM1+AML患者24例,单独DNMT3A+ AML患者28例.结果 25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+ AML患者平均年龄46岁,伴有高白细胞(81.7×109/L)及较高的骨髓原始细胞(66.3％).其中,17例选择大剂量化疗,8例行异基因造血干细胞移植,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组比较,差异均无统计学意义.25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+患者的3年总生存率为17.65％,3年无病生存率为13.88％,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组差异均有统计学意义(P值分别为0.049 9、0.036 1、0.013 4),3年无病生存率差异无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常AML患者往往合并高的外周血白细胞及骨髓原始细胞,预后较差.     

急性白血病化疗药物敏感性ATP法的临床应用

 用ATP法对26例白血病病人进行体外药敏检查，观察其中18例急性白血病病人体外药敏与体内疗效关系。急性淋巴细胞白血病4例、急性非淋巴细胞白血病11例、慢性粒细胞白血病急性变3例。总符合率为83.3%，阳性符合率91.7%，阴性符合率66.7%.结果提示ATP法具有定量、短期、客观的临床应用价值。     

短期细胞培养体外药敏试验预测急性白血病对化疗的反应(摘要)

本文介绍了体外使用短期细胞培养经氟尿嘧啶(~3H—UR)参入白血病细胞的方法,并预测了50例急性白血病人对高三夫杉酯碱等5种化疗药物的敏感性。就其应用情况及其使用价值进行了阐述。     

AML-M2a诱导TCR Vβ T细胞的克隆性增殖和细胞毒作用

目的:了解急性髓性白血病（AML）M2a细胞诱导的体外增殖T细胞的特异性杀伤作用和克隆性增殖情况。方法:利用肿瘤细胞T淋巴细胞混合培养方法 （MLTC），分别收集3例经AMLM2a细胞体外诱导不同扩增时间的健康人T细胞，利用LDH释放方法分析其特异性细胞毒作用，同时利用RTPCR和基因扫描方法分析经AMLM2a细胞诱导前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族基因的表达和克隆性情况。结果：在培养第12天和第21天时，1例AMLM2a细胞诱导的3例健康人T细胞对该诱导细胞的平均杀伤率分别为39.88±7.79%和62.14±9.79%，而对AMLM2a患者和健康人外周血T细胞均无杀伤作用。 TCR Vβ谱系分析发现诱导后3例健康人T细胞均出现Vβ16的克隆性增殖。结论：AMLM2a细胞可诱导健康人T细胞成为具有克隆性增殖的特异性CTL，并以Vβ16的克隆性增殖为主。     

化学法提取贮存骨髓涂片DNA检测Fms样酪氨酸激酶3基因突变预测急性髓系白血病患者预后

目的 探讨用化学法(苯酚:氯仿:异戊醇法)从贮存的骨髓涂片中提取微量DNA检测Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)突变情况,分析其对急性髓系白血病(AML)预后的预测价值.方法 采用化学法从58例-20℃贮存1~5年的骨髓涂片(AML 48例和非恶性血液病10例)中提取微量DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测患者FLT3-ITD突变情况.结果 48例初治AML患者中6例(12.5%)检测到FLT3-ITD,10例非恶性血液病患者中均未检测到FLT3-ITD.FLT3-ITD阳性AML患者初次诱导完全缓解(CR)率较FLT3-ITD阴性者低[0(0/6)比77.78%(21/27),P=0.001],总生存时间短(x2=7.274,P=0.007).肝、脾大和FLT3突变是影响AML患者初次化疗CR的危险因素(OR=7.2,P=0.12;OR=36.3,P=0.10).FLT3-ITD是初治AML患者不良预后的危险因素(RR=9.088,P=0.029).结论 使用化学法提取贮存的AML患者骨髓涂片微量DNA可在临床中应用,是进行回顾性分子生物学研究的重要实验方法.从骨髓涂片中提取微量DNA检测FLT3-ITD可用于预测AML预后.     

VX-680体外诱导异基因干细胞移植后复发AML细胞凋亡的初步研究

目的:探讨Aurora激酶抑制剂VX-680在体外对异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后复发的急性髓系白血病(AML)患者细胞增殖和凋亡的影响。方法:以正常人CD34+细胞为对照,体外用5nmol/L浓度VX-680分别处理3例Allo-HSCT后复发的AML患者白血病细胞,48h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察细胞增殖活力,Hoechest33342方法观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡百分率,蛋白质印迹法检测Aurora-A磷酸化蛋白及Caspase-3凋亡蛋白的表达。结果:MTT法观察发现,体外VX-680均能抑制3例复发患者白血病细胞的增殖,增殖抑制率分别为(77.5±3.1)%、(76.8±4.7)%和(81.1±4.2)%,均明显高于正常对照的(11.2±1.6)%,P值均<0.001;Hoe-chest33342方法观察发现,3例患者白血病细胞在VX-680作用下出现了明显的细胞凋亡形态,流式细胞术检测到凋亡百分率分别为(88.8±4.6)%、(98.7±0.9)%和(99.3±0.4)%,也均高于正常对照的(13.6±3.5)%,P值均<0.001;蛋白质印迹法检测显示,VX-680处理后3例患者白血病细胞中Aurora-A磷酸化蛋白表达显著下降,而Caspase-3凋亡蛋白表达明显升高。结论:VX-680体外可通过诱导Allo-HSCT后AML复发患者的白血病细胞凋亡来抑制其增殖。     

Neuropilin-1某因在髓细胞白血病和正常人骨髓基质细胞中的表达(英文)

目的了解 neuropilin-1(NP-1)基因在髓细胞白血病(AML 和 CML)患者及正常人骨髓基质细胞中的表达情况。方法收集12例 AML、14例 CML 和20例正常对照骨髓标本,分离单个核细胞。进行体外长期培养,收集贴壁细胞(骨髓基质细胞)。利用逆转录-聚合酶链反应分别检测3组骨髓基质细胞中 NP-1基因的表达。结果成功建立了 AML、CML 和正常人骨髓基质细胞培养方法,NP-1基因在 AML、CML 骨髓基质细胞中的表达率分别为47.1%和50%,明显低于正常对照(85%)。结论 NP-1基因可表达于部分 AML、CML 和大部分正常人的骨髓基质细胞中,其在髓细胞白血病患者骨髓基质细胞中的低表达,可能与其调节造血功能异常有关。     

Neuropilin-1基因在髓细胞白血病和正常人骨髓基质细胞中的表达

目的了解neuropilin-1(NP-1)基因在髓细胞白血病(AML和CML)患者及正常人骨髓基质细胞中的表达情况。方法收集12例AML、14例CML和20例正常对照骨髓标本,分离单个核细胞。进行体外长期培养,收集贴壁细胞(骨髓基质细胞)。利用逆转录-聚合酶链反应分别检测3组骨髓基质细胞中NP-1基因的表达。结果成功建立了AML、CML和正常人骨髓基质细胞培养方法,NP-1基因在AML、CML骨髓基质细胞中的表达率分别为47.1%和50%,明显低于正常对照(85%)。结论NP-1基因可表达于部分AML、CML和大部分正常人的骨髓基质细胞中,其在髓细胞白血病患者骨髓基质细胞中的低表达, 可能与其调节造血功能异常有关。     

WT1基因突变与急性髓系白血病预后关系的Meta分析

目的分析总结WT1基因突变与急性髓系白血病(AML)预后的关系。方法检索PubMed、Google Scholar及Cochrane Library数据库截至2018年4月2日收录的相关文献,采用Review Manager 5.2软件进行Meta分析。结果共纳入9篇文献。Meta分析结果显示,对于儿童AML患者,WT1基因突变型组较野生型组总生存(OS)时间更短(HR=1.41,95% CI 1.07~1.87,P=0.01)。对于总体AML患者,WT1基因突变型组较野生型组无复发生存(RFS)时间更短(HR=2.21,95% CI 1.15~3.93,P=0.02),而两组OS及无病生存(DFS)时间差异均无统计学意义(HR=1.65,95% CI 0.97~2.80,P=0.06;HR=0.46,95% CI 0.08~2.57,P=0.38)。对于正常核型AML及成年AML患者,WT1基因突变型组与野生型组OS时间差异均无统计学意义(HR=2.66,95% CI 0.57~12.31,P=0.21;HR=2.10,95% CI 0.70~6.30,P=0.18)。结论WT1基因突变是影响儿童AML患者OS及总体AML患者RFS的危险因素。     

HAA方案治疗难治、复发老年急性髓系白血病的临床观察

目的:探讨HAA方案治疗难治、复发老年急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的疗效及毒副反应。方法:回顾性分析首次接受HAA方案(HHT 2.0 mg/m2 qd,d1~7;Ara-C 100~200 mg/m2 qd,d1~7;Acla 12 mg/m2 qd,d1~7;根据情况调整具体天数)挽救治疗17例难治、复发老年AML患者的疗效及毒副反应,统计长期生存情况。结果:17例难治、复发老年AML患者中,3例达完全缓解（complete remission,CR）,3例达部分缓解(partial remisson,PR),11例未缓解(none remisson,NR),临床有效率(CR+PR)35.3%。无1例患者出现早期死亡。中位生存时间为6.2个月(0.5~32.0个月)。结论:HAA方案治疗难治、复发老年AML患者疗效与地西他滨方案相近,且安全性高,但由于样本量较小,需进一步开展多中心随机对照试验证实。