细辛木脂素联合供者脾细胞对心脏移植大鼠免疫耐受的诱导效果

观察细辛木脂素联合供体脾细胞对同种异体心脏移植免疫耐受的诱导效果,为抗排斥药物的研究提供依据。方法:分别采用供体脾细胞、细辛木脂素(ＨＡＬ)和ＨＡＬ联合供者脾细胞预处理移植受体,然后行大鼠异位心脏移植术。根据实验各组移植心脏存活时间和混合淋巴细胞反应进行观察。结果:对照组、脾细胞组、ＨＡＬ组和ＨＡＬ＋脾细胞组的移植心脏存活天数分别为(６．８１±０．９７)ｄ,(７．２０±１．５５)ｄ,(１０．４０±２．７８)ｄ,(２７．６３±６．４６)ｄ,ＨＡＬ＋脾细胞组的移植心脏存活时间明显长于脾细胞组和 ＨＡＬ组(Ｐ＜０．０１);移植术后７ｄ和１４ｄ的混合淋巴细胞反应以ＨＡＬ＋脾细胞组的ＣＰＭ值为最低(Ｐ＜０．０１)。结论:细辛木脂素能够明显提高供体脾细胞所诱导的免疫耐受强度,显著地延长大鼠同种异移植体心脏的存活时间。     

胸腺内注射异基因抗原诱导同种异体肢体移植免疫耐受的实验研究

目的：探讨胸腺内注射异基因抗原对同种异体肢体移植存活的影响。方法：Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体。将SD大鼠随机分成4组,A组（自体肢体移植组）、B组（异体肢体移植组）、C组（异体肢体移植加用免疫抑制剂组）、D组（胸腺内注射组）。术后观察肢体的存活时间,术后7d进行组织学检查。结果：肢体存活时间C组和D组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,与B组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。组织学检查,D组优于B、C组（P〈0．05）。结论：胸腺内注射异基因抗原可诱导对异体肢体移植的特异性免疫耐受。     

胸腺内预注射异基因脾细胞使移植心肺存活延长的实验研究

用改良Fox－Lee术式建立大鼠异位心脏、肺叶联合移植模型。受体SD大鼠胸腺内预注射供体Wistar大鼠牌细胞5×107联合一次性腹腔注射抗淋巴细胞血清1ml,3周后接受移植,成功诱导免疫耐受,移植心肺不需免疫抑制剂而长期存活（MST＝78．00±22．66d）;对照组和空白对照组移植心肺均被排斥。其机制有待进一步深入研究。     

核因子-kappa B反义核苷酸对小鼠移植心脏存活时间的影响

目的;设计特定的反义硫代寡聚脱氧核苷酸(ODN)来特异性地抑制小鼠核因子-kappa B(NF-кB)的mRNA,并观察其对小鼠移植心脏存活时间的影响。方法;将30只小鼠随机分成NF-кB反义ODN给药组、碱基错配ODN对照组和未给药组,小鼠心脏移植血管重建后经腹腔缓释泵分别以12.5mg·kg~(-1)·d~(-1)的剂量全身给予NF-кB反义ODN和碱基错配ODN,持续给药14d,而未给药组不给药物。观察受体小鼠移植心脏存活时间;术后d7各组分别处死5只小鼠,测定受体小鼠脾细胞的混合淋巴细胞培养(MLC)和细胞毒T细胞(CTL)活性。结果:给药组小鼠的移植心脏存活时间较对照组和未给药组明显延长 (P<0.05);MLC显示给药组小鼠脾细胞对供体抗原刺激的增殖反应受到抑制(P<0.05);给药组受体小鼠的脾细胞的CTL活性也明显减弱(P<0.05)。结论:NF-кB反义ODN能有效抑制受体对小鼠移植物的细胞免疫反应,使同种异体的心脏移植存活时间延长。     

阻断共刺激信号在异种小动物心脏移植中诱导免疫耐受的研究

目的在非协调性异种小动物豚鼠-大鼠心脏移植模型当中,通过单克隆抗体阻断T细胞B7/CD28及CD40/CD40L激活通路途径来探讨T细胞在异种移植延迟性免疫排斥中的作用,探索诱导异种移植T细胞外周耐受的可能性。方法将供体三色豚鼠和受体SD大鼠随即分成四组：A组（对照组）,在移植前一天大鼠腹腔内注射CVF 0.4mg/kg;B组（B7mAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg,余处理同A组;C组（CD40LmAb组）,在移植当天大鼠腹腔内注射CD154单抗0.1mg,余处理同A组;D组（联合组）,在移植当天大鼠腹腔内注射B7单抗0.1mg、CD154单抗0.1mg,余处理同A组。观察各组供心存活的时间,并行移植心脏的常规病理和免疫组化检查。结果对照组移植心脏的存活时间为（19.5±2.7）h,与对照组比较,B7组、CD40L组和联合处理组的移植心脏存活时间均得到了显著的延长,但联合处理组延长最为明显。移植心脏组织病理学检查均呈急性血管排斥反应改变,且以CD8＋T细胞浸润为主。结论联合阻断CD28/B7与CD40/CD40L共刺激通路可延长异种移植心脏存活时间。     

桂苏汤抗大鼠同种异位心脏移植急性排斥反应的实验研究

目的应用大鼠同种异体异位心脏移植模型,观察桂苏汤对心脏移植后受体大鼠移植心跳动情况、存活时间、凋亡细胞指数及bcl-2基因的蛋白表达的影响,探讨桂苏汤抗移植心心肌细胞凋亡的作用机理。方法心脏移植以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,制作成大鼠异位全心移植模型。分为模型对照组、小剂量治疗组、中剂量治疗组、大剂量治疗组。结果桂苏汤大、中剂量组移植术后第5d移植心跳动情况优于移植对照组,移植心凋亡细胞指数降低及bcl-2表达升高,小剂量组与移植对照组比较无显著意义。结论桂苏汤抗心脏移植急性排斥反应有一定的作用。     

抗淋巴细胞血清联合脾细胞促进异基因骨髓细胞形成嵌合体诱导免疫耐受

目的:探讨抗淋巴细胞血清(ALS)联合异基因脾细胞(SC)在促进异基因骨髓细胞移植诱导小鼠皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:第-5～-3天,C57BL/6(H-2b)受体小鼠每天腹腔注入0.5 ml抗淋巴细胞血清(ALS),共3天。第0天,C57BL/6受体小鼠通过尾静脉输注均源自BALB/c(H-2d)的1×108脾细胞(SC)及2×107骨髓细胞(BMC)。第二天,受体鼠腹腔注入200 mg/kg的环磷酰胺(CP)。第六天进行从BALB/c到C57BL/6的尾-尾皮肤移植。每天观察移植皮片存活情况,共观察100天。并于骨髓细胞移植后30天、50天及70天对受体小鼠外周血进行嵌合体检查。结果:抗淋巴细胞血清和(或)异基因脾细胞的输注能促进异基因BMC的植入,并能延长移植皮片的存活时间。在30、50天及70天,SC BMC CP、ALS BMC CP及ALS SC BMC CP移植组受体小鼠体内能检测到供体骨髓源性细胞,ALS SC BMC CP移植组的嵌合率较高,随着时间推移,嵌合率下降,而且移植皮片存活时间与嵌合率具一定相关性。结论:抗淋巴细胞血清(ALS)联合异基因脾细胞能协助异基因BMC植入,形成嵌合体,促进免疫耐受的诱导,使移植皮片存活时间延长。     

胸腺内移植脾细胞延长大鼠移植肝存活的研究

探讨大鼠胸腺内移植供体脾细胞在建立特异性供体不反应性中的作用。ＴＪＲ／１大鼠作供体，ＳＤ大鼠为受体。切取供体鼠脾脏制成脾细胞悬液，注入到受体鼠胸腺内，此前两天受体鼠口服环孢素４０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，胸腺内脾细胞移植前皮下注射地塞米松２５ｍｇ／ｋｇ。１０天后取同一供体肝脏进行原位肝移植，术后不用免疫抑制剂。     

灯盏花提取物对大鼠心脏移植排斥反应的作用

目的:研究中药灯盏花提取物对大鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为灯盏花提取物低剂量组(5mg·kg-1·d-1,E1)、高剂量组(10mg·kg-1·d-1,E2)、环孢素A(CsA)组和对照组(C组)。移植术后各实验组受体腹腔注射药物至移植心停跳。观察移植心存活时间、病理变化及受体外周血液中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平。结果:E1组、E2组和CsA组受体大鼠外周血IL-2的水平明显较C组低,同时移植心脏的存活时间较C组延长,排斥反应减弱。结论:灯盏花提取物预处理可明显减轻大鼠移植心脏的排斥反应,并延长移植心脏的存活时间。     

蜕皮甾酮对大鼠同种异体心脏移植的影响

目的 探讨蜕皮甾酮(EDS)对大鼠同种异体心脏移植的保护作用.方法 随机取供体、受体各20只SD大鼠建立腹腔心脏移植动物模型,受体术后EDS组(10只,每日腹腔注射EDS20mg/kg),对照组(10只,每日腹腔注射生理盐水);另10只为仅开关腹腔假手术组.术后第7天,取移植心脏病理学观察细胞形态及透射电镜观察超微结构;移植受鼠和假手术组,采血测血清心肌酶谱、氧化代谢产物.TUNEL技术和ABC法免疫组化染色检测细胞凋亡指数(AI)及相关基因了解细胞凋亡情况.结果 病理切片和透射电镜观察均提示EDS组心肌细胞损害轻于对照组.与对照组相比,EDS组血清各心肌酶含量明显减少(P＜0.01),氧化代谢产物明显减少.对照组与EDS组相比AI上升.EDS组凋亡相关基凶Bcl-2表达增强,Bax表达减弱.结论 EDS对移植心脏有多种保护作用.     

小檗碱联用环孢素诱导免疫耐受后对肾功能的影响

目的　研究小檗碱联用环孢素诱导同种异基因移植免疫耐受后对受体肾功能的影响。方法　采用Ono’s方法建立同种异基因大鼠心脏异位移植免疫耐受模型 ,将实验动物分为 5组。对照组 (Wistar Wistar) :每天注射生理盐水共2 1d ;安慰剂组 (SD Wistar) :每天注射生理盐水共 2 1d ;CsA组 (SD Wistar) :每天按 2mg·kg-1剂量注射环孢素A(Cy closporineA ,CsA)共 2 1d ;Ber组 (SD Wistar)每天按 16mg·kg-1剂量灌服小檗碱 (Berberine,Ber)共 2 1d ;CsA +Ber组(SD Wistar) :每天按 2mg·kg-1剂量注射CsA ,16mg·kg-1剂量灌服Ber共 2 1d ,观察受体血清尿素氮 (BUN)、肌酐(Cr)指标水平的变化。结果　联用Ber后 ,降低了受体长时间使用CsA后的尿素氮 (BUN)和肌酐 (Cr)水平。结论　联用Ber有助于减轻长期使用CsA后对受体肾功能的影响     

改良大鼠腹腔内心脏移植模型80例复制体会

目的 总结复制改良大鼠腹腔异位心脏移植模型的体会.方法 健康远交系Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,各80只,将供心移植于受体的腹腔内,供心的升主动脉及右肺动脉分别与受体的腹主动脉和下腔静脉做端侧吻合;术后第3、5、7天各取5例移植心脏行组织学检查.结果 成功建立75例大鼠异位心脏移植模型,供心缺血时间(28±5.5)min,手术成功率93.75%(75/80).大鼠移植后均呈急性排斥反应改变.结论 通过调整动脉吻合口与静脉吻合口管径比率进一步完善改良移植模型,可稳定诱导急性排斥反应发生.     

转化生长因子β1在心脏移植排斥反应中研究

目的研究转化生长因子-β1（TGF-1）在大鼠心脏移植排斥反应中的表达。方法以对照组（n=40）和新赛斯平组（CsA组，n=40）建立大鼠心脏移植模型，观察供心存活时间，于移植术后第1、3、5、7、9、11、14天分别取供心组织各5例，半定量RT—PCR的方法动态检测供心中TGF—1的表达情况。结果供心存活时间分别为：对照组（8．6±1．5）d，CsA组（20．4±5．1）d，两组间有显著差异（P〈0．01）。两组中TGF-1表达的时间变化趋势与供心存活时间有一致性，但在两组中的表达强度不同，对照组较CsA组弱，二者间有显著性差异（P〈0．01）。结论TGF-1的产生和表达可能因CsA的干预而增加，CsA的干预明显延长了供心的存活时间。     

H-2 Ag-TCS连接物制备及抑制异种脾细胞增殖活性的研究

诱导特异性免疫无反应 ,防止器官移植排斥反应。方法供者(NIH小鼠)主要组织相容性抗原(H -2Ag)与天花粉毒素(TCS)经异型双功能试剂SPDP、2 -IT交联 ,制备免疫毒素(Ag-TCS) ;Ag-TCS预处理受者(SD大鼠) ,体外观察其脾细胞对供者抗原再刺激的反应。结果受者脾细胞对供者抗原再刺激呈抑制状态 ,而对非特异性刺激(PHA)呈增生活跃。结论Ag-TCS诱导的免疫无反应性具有供者特异性 ,可用于器官移植免疫耐受的诱导。     

Identification of tolerant recipients following liver transplantation

The need to administer livelong immunosuppressive medication (IS) to transplant recipients to prevent graft rejection often results in severe side effects like infections, malignancies, renal failure and cardiovascular complications. This constitutes one of the major drawbacks of clinical organ transplantation. Therefore, a means to establish medication-independent graft acceptance (tolerance) would be a major breakthrough in the field. Transplantation tolerance can be readily generated in experimental animal models, but so far most efforts to purposely induce this phenomenon in the clinic have failed. Liver transplantation is a unique clinical setting in that up to 20% of recipients can spontaneously withdraw IS without rejecting their grafts and are considered as operationally tolerant. This clinical observation is probably the most extreme manifestation of the well-documented intrinsic tolerogenic properties of the liver. The high rate of spontaneous operational tolerance following liver transplantation and the relative resistance of liver allografts to the effects of cytopathic alloimmune responses make liver transplantation the most suitable clinical transplantation model to test IS withdrawal strategies and tolerance promoting therapies. Liver transplantation constitutes therefore a unique setting to learn the mechanisms underlying allograft tolerance in humans.     

供体腹主动脉行肝动脉重建对猪肝移植血流动力学和心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的 观察以供体腹主动脉重建肝动脉对受体血流动力学和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的影响.方法 将健康广西巴马小型猪12头随机分为供、受体两组,每组6头,受体再随机分为A组(肝动脉吻合组)和B组(腹主动脉吻合组)),每组3头.供、受体动物均接受静脉全身麻醉,气管插管后行机械通气.供体动物行快速肝脏切取术取出供肝.受体动物置入Swan-Ganz导管,行背驮式肝移植术,A、B组采用不同的肝动脉重建方式,A组在不阻断腹主动脉下采用肝动脉端端连续吻合,B组在阻断腹主动脉后以其腹主动脉侧壁和供肝腹主动脉行端侧吻合.检测开腹前5 min (T0)、无肝期30min (T1)、新肝期30 min (T2)、肝动脉重建后10 min (T3)、术毕时(T4)、术后1 h(T5)6个时间点的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、中心静脉压(CVP)、肺动脉压(PAP)、肺动脉楔压(PCWP)、心排量(C0)等血流动力学参数和cTnI.结果 在T0～T2时,组间各指标无差别;在T3时点,B组HR、CO低于A组,MAP、CVP、PAP、PCWP高于A组,cTnI组间无差别;在T4、T5时,B组MAP低于A组,CVP、PAP、PCWP、cTnI高于A组,HR、CO组间无差别.结论 采用完全阻断腹主动脉和以腹主动脉行端侧吻合的肝动脉重建方式加重了血流动力学的变化和心肌损伤.     

大鼠异位辅助性肝移植术后PFP mRNA的表达

目的建立稳定的脾窝异位辅助性肝移植大鼠模型,观察术后移植肝病理学变化,并应用RT-PCR法,研究外周血中PFP mRNA的表达与急性排斥反应的关系。方法采用健康清洁成年Wistar和SD大鼠。实验分为3组：A组：空白对照组n=30;B组：肝移植术后免疫抑制组,n=30;C组：肝移植术后非免疫抑制组,n=30。各组在术后第1、3、5、7、10d随机取6只动物肝脏和外周血,将肝脏作病理学检查,并应用RT-PCR方法监测外周血的穿孔素mRNA的表达。结果外周血PFP mRNA表达能随病理变化,以数值的形式反应术后的急性排斥反应变化过程。通过检测未发现A组PFP mRNA表达,而B、C组均有表达,对比各时间观察的穿孔素表达水平发现B组与C组比较有显著差异（P〈0.05）。结论 （1）通过各时间点的监测,发现外周血PFPmRNA表达水平与移植肝的病理变化趋同,因而应用半定量RT-PCR检测外周血穿孔素mRNA表达可作为早期诊断肝移植急性排斥反应一种较好的方法。（2）免疫抑制剂的应用,可以有效地减少炎性细胞的浸润,降低穿孔素mRNA的表达,对减轻急性排斥反应作用明显。但仍无法较完全地控制肝细胞坏死和出血。     

固相检测法在肾移植术后抗体监测中的应用

肾移植术前预存的和术后新生成的人类白细胞抗原（HLA）抗体在抗体介导的排斥反应以及慢性移植物肾病中发挥重要作用。采用固相法（SPA）检测HLA抗体,彻底改变了肾移植术后患者免疫状态的监测方式。该法的灵敏度和特异性较高,且测得的HLA抗体在临床上具有重要意义。本文综述SPA在肾移植术后监测中的应用,为临床上肾移植受者的术后随访提供依据。