植物激素对附子多糖含量的影响

目的 研究植物激素对附子多糖含量的影响.方法 在附子的苗期和子根膨大期喷施不同的激素,采用蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量.结果 不同的激素间差异明显,赤霉素(GA)、α-萘乙酸(NAA)对多糖含量的增加也有作用;6-苄氨基嘌呤(6-BA)和6-糠氨基嘌呤(KT)对多糖含量的增加也有作用;吲哚乙酸(IAA)有抑制影响.结论 植物激素对附子多糖的含量有显著的影响.     

葛根素改善3T3-L1 脂肪细胞葡萄糖摄取和胰岛素抵抗

目的：探讨葛根素对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（Insulin resistance,IR）模型葡萄糖利用和IR的影响及其作用机制。方法：诱导分化3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞;用地塞米松诱导建立3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型。成功建立模型后,将实验分为5组进行,分别为空白组、模型组、葛根素10 mg·L-1组、葛根素100 mg·L-1组、葛根素200 mg·L-1组;其中,空白组不建模,模型组建模但不用药物干预,各葛根素组为在建立模型后,给予不同浓度的葛根素干预。用葛根素干预24小时后,以葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定细胞培养基中葡萄糖浓度,四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimehyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide, MTT]比色法检测细胞增值活力;然后分别用Real time PCR、Western Blot 方法检测细胞葡萄糖转运蛋白4（glucosetransporter type 4, GLUT4）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）、蛋白激酶B（protein kinaseB, PKB/AKT）、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator -activated receptor gamma, PPARγ）mRNA基因和蛋白表达。结果：葛根素干预后,细胞培养基中葡萄糖浓度均较模型组降低（P < 0.01）;GLUT4、PI3K、AKT、AMPK、PPARγ mRNA水平及蛋白表达较模型组均增加（P < 0.05）。结论：葛根素能增加3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖利用、改善IR,其作用机制可能与上调P13K、AKT、AMPK、PPARγ基因和蛋白表达,进而增加葡萄糖运转有关。     

中药鬼箭羽提取物对脂肪细胞葡萄糖摄取作用的影响

目的：在对中药鬼箭羽药效学研究的基础上，初步探讨其各提取组份SML-1，SML-2，SML-3，SML-4对于脂肪细胞的降糖作用机制。方法：采用分离的大鼠脂肪细胞，用高浓度葡萄糖和胰岛素诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型，观察鬼箭羽各提取组份对于胰岛素抵抗模型脂肪细胞的葡萄糖摄取的影响以及对于正常脂肪细胞，低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的影响。结果：鬼箭羽各提取组份SML-1，SML-2，SML-4(10μg/ml)对脂肪细胞葡萄糖的基础摄取率有所提高。SML-2，SML-3(100μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3，SML-4(10μg/m1)；SML-1，SML-3，SML-4(1μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3(0．1μg／ml)对于低浓度胰岛素(1．2nmol／L)刺激的外周葡萄糖摄取均有协同增强作用。SML-1，SML-2，SML-3，SML-4(100μg／ml)；SML-1，SML-2，SML-3，SMI-4(10μg／ml)；SML-1，SML-2(1μg／ml)；SML-1，SML-2(0．1μg／ml)可以提高胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取水平。结论：鬼箭羽各提取组份可以促进正常脂肪细胞低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的葡萄糖摄取，促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取可能是其降糖作用机制之一。     

复方附子多糖对肿瘤细胞糖基化作用的影响

目的观察中药多糖对糖蛋白糖链合成的不同糖基转移酶的诱导或阻遏作用,从而发现中药多糖的作用靶点及其作用机制。方法对含有附子多糖的不同药物分组,以肿瘤生长抑制率来观察复方多糖体内抗肿瘤作用,观察中药多糖对肝癌SK-HEP-1细胞糖基转移酶以及肿瘤相关基因表达的影响,同时借助多聚乳糖胺特异性生物素标记凝集素进行流式细胞术检测细胞多聚乳糖胺表达水平变化。结果与模型组比较,各给药组平均瘤重均显著降低(P0.01);与阿霉素组比较,3个复方组的平均瘤重无统计学意义(P0.05)。分别加附子多糖与中药复方多糖,多聚乳糖胺表达水平降低。结论多糖复方配伍抗肿瘤效果基本与阿霉素效果一致,且3个复方配伍组随着熟附子粗多糖比例的增加,降低了多聚乳糖胺表达水平,抗肿瘤作用更加明显。     

附子粗多糖提取工艺的优化

目的：优化附子粗多糖的提取工艺。方法：以多糖中的葡萄糖含量为指标，对加水量、提取时间、提取次数作了L9(3^4)正交实验考察，确定附子粗多糖最佳提取方案。结果：最佳提取工艺为加水150ml，提取3次，90min／次。结论：优化工艺稳定，提取率高。     

三丫苦对胰岛素抵抗模型大鼠脂肪细胞炎症因子的影响

目的 观察三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞炎症因子的影响.方法 将40只SD雄性大鼠随机分为4组;正常对照组、模型对照组、三丫苦组、罗格列酮组,建立高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠模型.检测各组大鼠TC、TG、FBG、FINS等指标的变化,清醒状态下高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验检测葡萄糖输注率,ELISA法检测脂肪细胞炎症因子TNF-α、IL-6和MCP-1.结果 与正常对照组比较,模型对照组TC、TG、FBG、FINS均升高(P＜0.01),葡萄糖输注率降低(P＜0.01).给予三丫苦后,大鼠TC、TG、FBG、FINS降低(P＜0.01或P＜0.05),GIR水平升高(P＜0.05),与罗格列酮组比较,TC和TG降低(P＜0.05).与正常对照组比较,模型对照组TNF-α、IL-6和MCP-1含量均显著升高(P＜0.01).与模型对照组比较,三丫苦组和罗格列酮组TNF-α、IL-6和MCP-1含量均有不同程度的降低(P＜0.01或P＜0.05).与罗格列酮比较,三丫苦组MCP-1含量降低(P＜0.05).结论 三丫苦对高脂饮食性胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞炎症因子有一定调节作用.     

附子多糖的药理作用研究进展

附子是临床常用的有毒中药,具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛功效,用于亡阳虚脱及阳虚诸证,被誉为“百药之长”。附子多糖是其有效成分之一,研究发现附子多糖具有调节免疫、抗肿瘤、保护心肌细胞、降血脂等作用。     

附子多糖硫酸降解的研究

目的在常态和超声条件下,对附子多糖在硫酸中的降解进行研究。方法采用L,（3＋）正交设计,以酸浓度、反应时间、反应温度和超声功率为参数,以降解后产物中低分子量多糖含量为指标,对附子多糖在常态和超声条件下的硫酸降解进行优选。结果常态条件下的硫酸降解,在酸浓度为10％、100℃下反应2h最佳,此时低分子量多糖含量约为36．17％。超声条件下的硫酸降解,在超声功率150W、40℃下反应1h、酸浓度为5％时最佳,此时低分子量多糖得率为44．63％。结论超声条件下硫酸降解可以提高产物中低分子量多糖的含量。     

葡萄糖氧化酶法筛选西洋参干预胰岛素抵抗脂肪细胞模型的活性成分

目的:通过葡萄糖消耗试验测定西洋参单体成分对IR脂肪细胞模型葡萄糖消耗量的影响,筛选西洋参干预胰岛素抵抗的活性成分。方法:将西洋参的根部用70%EtOH回流,将提取物进行AB-8型大孔树脂柱色谱分析,按不同浓度洗脱,得到西洋参95%醇提组、西洋参60%醇提组、西洋参30%醇提组和水提组四个部分。本课题组的前期药效学试验已证明,西洋参60%醇提组为活性部位。将西洋参60%醇提部位用硅胶柱色谱及HPLC等现代分离技术与方法分离和纯化,通过理化常数及光谱数据确定其结构,共得12个化合物。将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,给予高糖高胰岛素(25mmol·L-1葡萄糖,1×10-6mol·L-1胰岛素)刺激,建立胰岛素脂肪细胞模型,随机分为空白组、模型组、罗格列酮组、西洋参单体成分组。药物干预培养24h后,通过葡萄糖消耗试验测定西洋参单体成分对IR脂肪细胞模型葡萄糖消耗量的影响,筛选西洋参干预胰岛素抵抗的有效成分。结果:与模型组细胞葡萄糖消耗量比较,罗格列酮组、人参皂苷R3组、20(R)人参皂苷Rb1组、20(R)人参皂苷Rb2组、拟人参皂苷F11组细胞葡萄糖消耗量有不同程度的升高,其中人参皂苷R3组、20(R)人参皂苷Rb1组、20(R)人参皂苷Rb2组、罗格列酮组葡萄糖消耗量明显升高,差异极显著(P0.01),拟人参皂苷F11组差异显著,(P0.05)。其余化合物组与模型组比较,葡萄糖消耗量无统计学差异。结论:20(R)人参皂苷Rb1,20(R)人参皂苷Rb2,人参皂苷R3,拟人参皂苷F11可能是西洋参干预IR脂肪细胞模型的活性成分。     

川附子粗多糖提取工艺的研究

目的：研究川附子粗多糖最佳提取工艺。方法：通过单因素试验和L9（3^4）正交试验，研究了料水比、温度、提取时间、pH、提取次数、醇沉浓度对川附子粗多糖提取率的影响。结果：温度和料水比是影响川附子粗多糖提取率的主要因素，最佳提取工艺为料水比1：40，提取温度90℃，时间2h，pH8，提取1次，醇沉浓度80％。在此条件下，测得川附子粗多糖提取率为13．07％，含糖量为9．11％。结论：本工艺为川附子粗多糖的进一步研究奠定了基础。     

论中医现代化与生物医学工程

目前中医现代化的主要矛盾是先进的中医理念与现代中医缺乏先进适用技术的矛盾。中医现代化的关键是中医科学技术现代化,现阶段的重点是传统中医技术与现代技术的融合。建设具有现代水平的中医基础医学研究平台,是中医技术现代化的重要内容,生物医学工程在这方面既承担着艰巨的任务,又面临着美好的发展前景。     

附子对腺嘌呤造成的小鼠慢性肾衰的疗效及其机制探讨

目的:研究中药附子对腺嘌呤造成的小鼠慢性肾衰的疗效,并探讨其作用机制。方法:选取雄性小鼠随机分为4组:对照组(C),模型组(M),附子低剂量组(FL),附子高剂量组(FH)。对照组给予溶剂,模型组灌胃给予腺嘌呤,各给药组在给予腺嘌呤的基础上,再分别给予3g/kg/d、10g/kg/d的附子水煎剂。实验结束时,测定血清尿素氮、肌酐、γ-谷氨酰转肽酶,肾组织γ-谷氨酰转肽酶、一氧化氮、谷胱甘肽、自由基等的含量,并记录附睾精子数、全血血红蛋白含量。结果:附子高剂量组优于低剂量组,能降低尿素氮、肾系数,提高精子数、血红蛋白含量。而附子低剂量组则无明显疗效。结论:附子高剂量显示对腺嘌呤造成的慢性肾衰有一定的疗效,其作用机制还有待于进一步研究。     

薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响及机制

目的：探究薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响,并探讨其相关的细胞凋亡机制。方法：不同质量浓度(0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、16 g·L^-1 )薏苡附子败酱散干预结肠癌细胞24、48、72 h,细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测细胞体外增殖的影响;设空白组、卡培他滨组(1.8 g·L^-1 )和薏苡附子败酱散组(6、10、14 g·L^-1 ),分别处理48 h,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,Hochest 33342荧光染色观察细胞凋亡形态,线粒体红色荧光探针(Mito-Tracker Red CMXRos)分析线粒体膜电位(MMP)变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3、活化的(cleaved) Caspase-9、cleaved Caspase-3的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time...     

附子药代动力学研究进展

附子为毛茛科多年生草本植物乌头子根的加工品,具有局麻、镇痛、镇静、强心、抗炎、抗肿瘤等功效,广泛用于治疗跌打损伤,风湿关节炎,肿瘤等疾病。由于在临床使用过程中不良反应和中毒事件频频发生,近年来对附子提取物及其有效/有毒成分的药代动力学研究甚多,作者对此研究近况做一综述。     

梓醇对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响及其机制研究

目的 观察梓醇对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢及过氧化物酶体增长因子活化受体(PPAR-γ)蛋白表达的影响。方法 采用3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,以葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗,以油红O染色法检测梓醇、罗格列酮对前脂肪细胞分化的影响,以Western Blot法检测各组PPAR-γ蛋白的表达。结果 与空白对照组比较,梓醇组、罗格列酮组3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量均明显增高(P < 0.01),梓醇组与罗格列酮组比较差异无统计学意义(P ＞ 0.05);罗格列酮组OD值及PPAR-γ蛋白的表达较空白对照组明显升高(P < 0.05);梓醇组OD值及PPAR-γ蛋白的表达较空白对照组明显降低(P < 0.05)。结论 梓醇在抑制PPAR-γ蛋白表达的同时能够促进葡萄糖的消耗,初步表明其具有体外调节脂肪细胞糖脂代谢的作用。     

附子与干姜、甘草配伍使用后乌头碱含量的变化研究

目的：研究附子与干姜、甘草配伍使用后乌头碱含量的改变。方法：将附子分别和干姜、甘草配伍,利用高效液相色谱法（HPLC）对其配伍后乌头碱含量改变情况加以检测。结果：附子与干姜、附子与甘草中乌头碱含量及有毒生物总碱含量显著低于附子,且附子与甘草中乌头碱含量及有毒生物总碱含量显著低于附子与干姜。结论：附子在许多疾病治疗中有显著效果,在临床中使用时可根据实际需求将之和干姜、甘草等合理配伍,促使附子内乌头碱含量降低,有效降低毒性,从而为患者的安全用药提供有力保证。     

酸碱对药大黄与附子在大黄附子汤中配伍的化学研究

目的：考察酸碱对药大黄与附子在大黄附子汤中配伍后酸、碱性成分的变化情况。方法：采用高效液相色谱法对大黄、附子单味药提取液、大黄附子对药提取液及全方提取液中蒽醌类成分和乌头生物碱类成分的提取量进行了测定。结果：对大黄而言,蒽醌类成分的提取量随着单药、对药及全方的配伍变化,水煎滤过、水煎离心逐渐减低,乙醇回流蒽醌类成分的提取总量逐渐升高。水煎煮单药与对药、对药与全方之间的变化趋势均明显。对附子而言,水煎煮只检测到单酯型乌头生物碱,乙醇提取既可检测到单酯型乌头生物碱,又可检测到双酯型乌头生物碱;乌头生物碱的提取量随着单药、对药及全方的配伍变化,水煎滤过、水煎离心逐渐减低,乙醇回流变化不明显;水煎煮单药与对药、对药与全方之间的变化趋势均明显。结论：大黄、附子单煎和乙醇回流、大黄、附子对药煎煮或和乙醇回流、大黄附子汤全方煎煮和乙醇回流,酸、碱性成分的提取量发生有规律的变化。     

木通对附子解毒作用的初步观察

木通可明显降低附子的毒性,在一定范围内,其减毒效应与配伍木通量呈正相关。且附子配伍木通后生物碱含量明显下降。     

穴位贴敷对麻黄附子细辛汤抗炎、镇痛作用影响的实验研究

目的：探讨麻黄附子细辛汤经穴位给药治疗变应性鼻炎的有效性,并为临床选穴提供依据。方法：选择治疗变应性鼻炎的常用穴———大椎穴和神阙穴为给药部位,考察麻黄附子细辛汤提取物穴位贴敷对二甲苯所致小鼠耳肿胀和醋酸致小鼠扭体反应的影响。结果：与空白对照组比较,除麻黄附子细辛汤非穴位组镇痛作用有显著性差异（P〈0.05）外,鼻炎康片组及麻黄附子细辛汤各穴位给药组抗炎及镇痛作用均有极显著性差异（P〈0.01）;与非穴位组比较,麻黄附子细辛汤大椎穴组抗炎及镇痛作用均有显著性差异（P〈0.05）,麻黄附子细辛汤神阙穴组及大椎穴＋神阙穴组差异不明显（P〉0.05）。结论：麻黄附子细辛汤经皮给药（穴位贴敷或非穴位贴敷）均有抗炎镇痛作用;穴位贴敷有利于麻黄附子细辛汤抗炎、镇痛作用的发挥,并以大椎穴为佳。     

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4的影响及其止泻机制

目的:观察附子理中汤对脾阳虚大鼠水通道蛋白4(AQP4)的影响,探讨附子理中汤止泻作用的机制.方法:Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只.在模型组基础上,低剂量组按10g·kg-1ig,中剂量组按20 g·kg-1 ig,高剂量组按40 g·kg-1 ig,每天1次,连续4周.取结肠标本,酶联免疫法(ELISA)法检测AQP4含量,RT-PCR法检测AQP4 mRNA表达.结果:和对照组比较,模型组的AQP4含量(13.25 ±4.22) ng·L-1.AQP4mRNA相对表达量(0.38±0.11)均降低(P＜0.01或P＜0.05).和模型组比较,附子理中汤中剂量组的AQP4含量(23.84±5.68) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.54±0.26)均升高(P＜0.05).和模型组比较,高剂量组的AQP4含量(28.98±6.12) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.62±0.32)均显著升高(P＜0.01).结论:附子理中汤能恢复脾阳虚大鼠AQP4含量和AQP4 mRNA正常表达,以高剂量的恢复作用较明显,附子理中汤可能通过上调AQP4表达,促进胃肠道黏膜对水液的重吸收而起到止泻的作用.