肾移植受者血他克莫司浓度对外周血自然杀伤细胞及其受体的影响

目的 研究肾移植受者血他克莫司(Tac)浓度对外周血自然杀伤(NK)细胞及其受体的影响.方法 将2007年12月至2009年7月间的60例受者纳入研究,术后受者均采用以Tac为基础的免疫抑制方案.根据术后6个月监测到的血Tac浓度将受者分为低浓度组和高浓度组[各为30例,术后6个月时血Tac浓度分别为(6.84±1.72)和(11.88±2.59)μg/L],另以20名健康志愿者作为对照组.术前和术后6个月,采用流式细胞术检测NK细胞及其抑制性受体(CD85j和CD158d)和活化性受体( CD94、NKG2D)的表达情况,采用酶联免疫吸附试验法检测免疫耐受分子分泌型HLA-G5( sH LA-G5)的表达水平.结果 术前低浓度组和高浓度组受者外周血NK细胞绝对值均较对照组显著降低(P＜0.05),术后6个月时低浓度组和高浓度组NK细胞比例及绝对值较对照组均显著降低(P＜0.05),低浓度组NK细胞绝对值显著高于高浓度组(P＜0.05).术前两组间CD85j、CD158d、CD94、NKG2D表达的差异均无统计学意义(P＞0.05);术后6个月时低浓度组和高浓度组CD85j和CD158d的表达较术前升高,CD94和NKG2D的表达下降,而低浓度组CD85j和CD158d的表达显著高于高浓度组(P＜0.05).经Spearman系数统计,CD85j和CD158d与sHLA-G5呈正相关(P＜0.01),NKG2D与sHLA-G5呈负相关(P＜0.01).结论 肾移植受者血Tac浓度与外周血NK细胞数量及其受体的表达具有相关性,低血Tac浓度受者的NK细胞数量及其抑制性受体的表达升高,仍然能有效保护移植肾功能.     

复发性流产患者主动免疫治疗后淋巴细胞免疫表型的变化

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者行淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)后淋巴细胞免疫表型的变化对治疗效果的评估价值。方法采用流式细胞术分析URSA患者LIT前后外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和调节性T细胞免疫表型的变化(P0.05)。结果 25例URSA患者经LIT后成功妊娠16例,治疗后所有URSA患者(n=25)和妊娠成功组(n=16)外周血CD3+T细胞、CD4+HLA-DR+T细胞比例较治疗前均明显增加,CD4+T和CD3-CD56+NK细胞比例明显降低(P0.05);而治疗前后B细胞和Treg细胞、CD56bright CD16-NK、CD56dimCD16+NK、CD3+CD56+NKT及CD69+NK细胞比例则无明显变化(P0.05)。结论 LIT后外周血T细胞、NK细胞的比例发生了明显变化,CD4+T细胞、CD3-CD56+NK细胞比例降低和CD3+T细胞、活化CD4+T细胞增加也许有利于维持妊娠,T细胞和NK细胞的免疫表型有望作为LIT疗效评估的一个重要指标。     

达昔单抗预防肾移植术后急性排斥反应的效果

目的　探讨达昔单抗 (Dac ,赛尼哌 )在预防肾移植术后急性排斥反应中的作用。　方法　 2 92例肾移植患者随机分为达昔单抗治疗组 (94例 )与对照组 (198)例 ,分析 2组移植肾功能、急性排斥反应发生情况以及外周血T细胞亚群的变化。　结果　术后 1、6及 12个月时达昔单抗组移植肾功能优于对照组 ,术后 12个月时 2组SCr浓度分别为 (133.2± 4 6 .8)和 (16 5 .7± 5 5 .2 ) μmol/L ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。术后 6个月时达昔单抗组急性排斥反应发生率为 2 3.4 % ,对照组为38.4 % ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;术后 2组CD+ 3 与CD+ 4 表达均下降 ,但差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。　结论　达昔单抗可以降低急性排斥反应发生率 ,改善移植肾功能 ,对T细胞亚群无明显影响。     

体外刺激肾移植受者外周血淋巴细胞进行免疫监测的临床研究

目的探讨应用体外刺激外周血淋巴细胞的方法进行免疫监测来预测肾移植术后急性排斥反应的价值。方法选取40例肾移植受者,将其分为急性排斥反应组(20例)和肾功能正常组(20例);选取10名健康供者作为正常对照组。抽取所有研究对象的外周静脉血,分离出外周血淋巴细胞,并经佛波酯(phorbol myfismte acetate,PMA)和离子霉素(ionomycin,Ion)体外刺激8h。应用流式细胞术检测细胞培养上清液白介素(IL)-2、IL-6的表达强度及CD3+CD69+、CD3+CD71+淋巴细胞比例;应用受试者工作特征(ROC)曲线评价IL-2联合IL-6、CD3+CD69+联合CD3+CD71+预测肾移植术后急性排斥反应的敏感度和特异度。结果急性排斥反应组的IL-2、IL-6的荧光强度和CD3+CD69+、CD3+CD71+淋巴细胞比例均显著高于肾功能正常组(P≤0.01);IL-2联合IL-6预测肾移植受者急性排斥反应的敏感度为0.90,特异度为0.95。CD3+CD69+联合CD3+CD71+预测急性排斥反应的敏感度为0.95,特异度为0.90。结论监测肾移植受者外周血淋巴细胞体外刺激上清液中的IL-2、IL-6及CD3+CD69+、CD3+CD71+的表达强度,可以预测急性排斥反应。此法简便,敏感度和特异度高。     

肾移植术后外周血CD3+细胞CD69、CD25及CD71的表达及意义

目的　探讨肾移植患者术后外周血CD3 细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达及其意义。方法　提取患者的外周血淋巴细胞 ,进行CD3·PE和CD6 9/CD2 5 /CD71·FITC的双色免疫荧光标记 ,流式细胞分析仪测定。结果　术后稳定组和环孢素中毒组CD3 细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达均较术前下降 (P <0 .0 5 ) ,而急性排斥反应组和感染组则显著升高 (P <0 .0 1) ,而且其升高的时间比临床确诊要早 1～ 4d。结论　动态监测CD3 细胞CD6 9、CD2 5及CD71的表达将有助于急性排斥的早期诊断和鉴别诊断 ,对及时治疗和抗排斥疗效的评价具有一定意义。     

三色荧光标记鉴定早孕蜕膜及外周免疫细胞组成

目的建立早孕妇女蜕膜免疫细胞高纯度的分离方法,流式细胞术多色荧光直接标记分析早孕蜕膜及外周血主要免疫细胞的构成比。方法经胶原酶消化、Percoll密度梯度离心、短期培养结合的方法分离纯化蜕膜免疫细胞,采用三色、双色及单色荧光直接标记流式细胞术分别检测早孕妇女和对照组中蜕膜、外周血CD3-CD56+CD16-和CD3-CD56+CD16+NK细胞、NKT和γδT细胞、T细胞和单核细胞的阳性率。结果与外周血相比,蜕膜免疫细胞以CD3-CD56+CD16-数量最多,约占免疫细胞总数的(67.02±18.33)%,T细胞占(11.05±7.22)%,单核细胞占(5.28±0.29)%,NKT细胞占(2.35±1.62)%;早孕妇女外周血T淋巴细胞较正常生育期妇女明显下降(P<0.05),而早孕妇女外周血中NK细胞、NKT细胞、单核细胞数量与对照组相比无显著差别。结论早孕妇女蜕膜中具有与外周血不同的免疫细胞组成,应用多色荧光标记的流式细胞术能够简单、直接地鉴定各免疫细胞亚群。     

T淋巴细胞亚群检测在肾移植排斥反应与巨细胞病毒感染鉴别诊断中的应用

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群的检测在人类同种异体肾移植术后急性排斥反应与巨细胞病毒(CMV)感染的诊断与鉴别诊断中的价值。方法:采用三色流式细胞技术对47例肾移植术后肾功能正常、16例急性排斥反应、11例CMV感染三组患者外周血淋巴细胞中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的百分比进行检测,并计算出CD3+CD4+细胞与CD3+CD8+的比值,分析不同T淋巴细胞亚群在三组患者中的差别,并行t检验。结果:肾功能正常组、急性排斥反应组与CMV感染组外周血淋巴细胞中CD3+细胞的百分比分别为(70.33±10.96)%、(74.46±8.78)%和(74.06±12.94)%,差异无统计学意义;CD3+CD4+细胞的百分比分别为(40.85±9.58)%、(50.85±8.43)%和(28.62±9.40)%,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(t=3.871;P<0.01。CD3+CD8+淋巴细胞的百分比分别为(27.08±9.40)%、(20.15±5.47)%和(46.32±15.51)%,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(t=2.787,P<0.01;t=5.346,P<0.01);CD3+CD4+/CD3+CD8+分别为1.78±0.98、2.88±0.76和0.69±0.31,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论:检测外周血淋巴细胞亚群的变化,特别是CD3+CD4+/CD3+CD8+比值,对肾移植术后急性排斥反应及CMV感染具有鉴别诊断价值。     

流式细胞术在肾移植术后感染中的诊断价值

目的探讨流式细胞术在肾移植术后感染中的诊断价值。方法根据术后影像学和实验室检查结果,将51例首次肾移植受体分为细菌组33例、真菌组9例、BK病毒组9例;另选择肾移植术后稳定的受体28例作为稳定组。采用流式细胞术分析各组受体外周血淋巴细胞亚群比例和绝对计数。比较各组肾移植受体的肾功能、外周血淋巴细胞亚群的比例及绝对计数;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析淋巴细胞亚群比例和绝对计数在肾移植术后感染性疾病中的诊断价值。结果与稳定组相比,细菌组、真菌组和BK病毒组血清肌酐(Scr)水平和血尿素氮(BUN)水平均有不同程度升高,差异均有统计学意义(P=0.035、0.007、0.024;0.037、0.006、0.032)。与稳定组比较,细菌组和真菌组CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例均下降(P=0.036、0.015);真菌组CD4+/CD8+T细胞比例明显下降(P=0.004)。与细菌组相比,真菌组和BK病毒组的CD3+CD8+T细胞比例均升高(P=0.013、0.008),CD3+CD4+T细胞比例均降低(P=0.003、0.010),CD4+/CD8+T细胞比例均明显下降(P=0.003、0.005)。与稳定组比较,细菌组、真菌组、BK病毒组CD3+T细胞数量、CD3+CD8+T细胞数量、CD16+CD56+NK细胞数量均明显降低(P=0.025、0.002、0.003;0.015、0.005、0.006;0.001、0.001、0.031);真菌组和BK病毒组CD3+CD4+T细胞数量降低(P=0.001、0.003);BK病毒组CD19+B细胞数量明显降低(P=0.019)。与细菌组比较,真菌组CD3+CD4+T细胞数量明显降低(P=0.023)。ROC曲线分析显示,CD3+CD4+T细胞和CD16+CD56+NK细胞数量诊断真菌感染的准确度较高,ROC曲线下面积分别为0.8492和0.8889;CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞和CD19+B细胞数量诊断BK病毒感染的准确度较高,ROC曲线下面积分别为0.8472、0.8452和0.8115。结论采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群可以评估患者机体免疫功能状态,绝对计数能够直观地判断免疫程度,两者结合对于肾移植受者感染性疾病的诊断和鉴别诊断具有指导意义。     

亲属活体肾移植术后受者外周免疫细胞亚群的动态变化

目的 观察亲属活体肾移植后受者免疫细胞亚群的动态变化.方法 首次肾移植受者16例,应用抗CD25单克隆抗体行免疫诱导,免疫抑制维持方案为他克莫司+吗替麦考酚酯+皮质激素.术前及术后6个月内流式多点检测外周血中T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)重要亚群的比例及其相关重要分子的表达.结果 T淋巴细胞在术后3d明显降低,此后逐渐回升至术前水平.CD4+、CD8+T淋巴细胞表面CD25表达及CD4+ CD25high CD127low调节性T淋巴细胞明显降低,术后3个月开始回升,至术后6个月恢复至术前水平.B淋巴细胞比例术后1个月内升高至术前的1.8～2.1倍,术后3个月恢复;CD19+ CD5+B淋巴细胞逐渐下降,术后6个月降至术前的45％;记忆性B淋巴细胞逐渐升高至术前的1.3倍;B淋巴细胞活化因子受体(BAFF-R)的表达一直维持在较高水平(91.7％～97.9％);前生发中心、生发中心细胞比例持续下降.NK细胞比例逐渐下降至术前的44％,但NK细胞表面抑制性受体(NKG2A)与活化性受体(NKG2D)比值明显升高.结论 效应性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞表面CD25表达在术后3个月开始恢复;术后早期B淋巴细胞比例明显增加,其活化可能不受抑制;NK细胞比例明显降低,且杀伤功能可能减弱.外周免疫细胞亚群的系统动态监测有助于了解肾移植受者术后的免疫风险.     

肾移植患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的观察肾移植患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于移植前（P〈0．01）。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7～21d，其CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。     

Expression of CD158b on peripheral blood lymphocytic cell after kidney transplantation

OBJECTIVE: To investigate the expression of CD158b on peripheral blood lymphocytes after kidney transplantation. METHODS: Sixty two kidney transplant patients were divided into two groups (normal group and rejection group) according to pathologic results and clinical situation. Blood samples were assessed for percentage of CD3+; CD19+; CD3-CD16/56+; CD3+CD158b+; CD19+CD158b+, and CD3-CD16/56+CD158b+ subsets. RESULTS: The percentages of CD3+ cells preop as well as at 1 and 7 postoperative and the day acute rejection happened were 60.06 +/- 4.67, 40.43 +/- 4.11, 31.67 +/- 4.04, and 39.21 +/- 5.20, respectively. The percentages of CD3-CD16/56+ were 21.65 +/- 1.79, 33.84 +/- 5.45, 38.10 +/- 4.86, and 39.53 +/- 4.80, respectively. The percentages of CD3+CD158b+ were 1.46 +/- 0.31, 1.88 +/- 0.70, 2.03 +/- 1.04, and 0.65 +/- 0.12, respectively. The percentages of CD3-CD16/56+CD158b+ were 5.87 +/- 1.24, 3.57 +/- 0.57, 2.82 +/- 0.45, and 1.60 +/- 0.33, respectively. CONCLUSIONS: The percentage of CD3+ cells in the normal and the rejection groups decreased significantly. The percentages of CD158b+T cells decreased significantly after acute rejection. The percentage of CD158b+NK cells decreased significantly after kidney transplantation, decreasing gradually after acute rejection. The percentage of CD158b+ total T cells decreased significantly following acute rejection. The percentage of CD3-CD16/56+CD158b+ of total NK cells decreased significantly after kidney transplantation and after acute rejection. Because few factors interfere with the expression of CD158b on NK cells, monitoring of this marker may be accurate and sensitive.     

Analysis of KIR2D receptors on peripheral blood lymphocytes from liver graft recipients

KIR2D receptors are killer cell immunoglobulin-like receptors (KIRs) specific for HLA-C epitopes, that are expressed on NK cells as well as on minor peripheral blood T-cell subsets, and are able to control NK and T cells activity. The present work explores NK, and particularly CD8(+) T cells expressing KIR2D2L1/S1 (CD158a) or KIR2D2L2/3/S2 (CD158b) receptors in liver graft alloresponse. Flow cytometry was used to analyse peripheral blood mononuclear cells stained with anti-CD158a and anti-CD158b antibodies from 110 liver recipients and 46 healthy controls, previous to and along the first month after transplantation. Pre-transplantation data shows that both CD158a and CD158b molecules can be detected on NK and T cells from all patients and controls, but both KIR2D(+)NK cells are significantly under-represented in patients respect to controls (P<0.001), and CD3(+)CD8(+)CD158a(+) cells decreased particularly in patients suffering from acute rejection (4.03+/-1.33 cells/microL) compared with controls (7.8+/-2.4 cells/microL). Following transplantation, KIR2D(+)CD8(+) T-cell repertoires increased through the first month, mainly in recipients with a good graft acceptance. In summary, monitoring of KIR2D(+)CD8(+) T cells, particularly KIR2DL1/S1(+)CD8(+) T cells at pre-transplant, and both KIR2DL1/S1(+) and KIR2DL2/3/S2(+) T-cell subsets at early post-transplant period, could offer useful information for clinical follow-up of liver grafts.     

肾移植术后测定外周血CD3/HLA-DR及CD3/CD(16+56)的临床意义

目的探讨肾移植患者术后外周血ＣＤ３／ＨＬＡ－ＤＲ及ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）的变化及其意义。方法提取患者的外周血淋巴细胞,加入双荧光标记的鼠抗人单克隆抗体ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）、ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ,流式细胞分析仪进行测定。结果术前患者的ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）及ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋高于健康人,而ＣＤ＋３／ＣＤ－（１６＋５６）和ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ－低于健康人;术后３天肾功能稳定者的全部淋巴细胞亚群下降,尤以ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）为著;术后排斥者的ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋及ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ＋较稳定者显著升高,而急性肾小管坏死者的上述４个指标异常增高,是排斥组的２倍。结论术后动态测定ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ和ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）有助于急性排斥和急性肾小管坏死的早期诊断及鉴别诊断,对及时治疗和抗排斥疗效的评价具有一定意义     

Compartment‐specific expression of natural killer cell markers in renal transplantation: immune profile in acute rejection

Natural killer (NK) cells have been implicated in graft dysfunction. Here, we formulated hypothesis that distinct patterns of expression NK cells markers correlated with acute rejection in kidney transplantation. Therefore, we studied the pattern of NK cell markers CD56, CD57, and CD16 in different compartments of biopsies obtained from recipients diagnosed with acute graft rejection, with or without donor‐specific antibodies (DSA). DSA‐negative biopsies‐from patients with acute T‐cell mediated rejection (aTCMR) had an increased expression of CD56+ and CD57+ cells (P = 0.004 and P = 0.001) in the interstitial compartment in comparison with DSA‐positive biopsies from patients acute antibody‐mediated rejection (aABMR) with (aABMR C4d+) and without C4d deposition (aABMR C4d‐). CD16+ cells was increased (P = 0.03) in the glomerular compartment in DSA‐positive biopsies. We assume that CD16+ expression and antibody‐dependent cellular cytotoxicity (ADCC) in microvascular injury can be associated with aABMR. IFN‐γ release from cytoplasmic granules of NK cell could be associated with aTCMR. Our findings suggest that NK cells need to be carefully evaluated because variations in NK cell marker expression might imply the involvement of different immune system pathways in graft rejection.     

全身照射预处理供体对异基因大鼠肝移植的作用及对受体内CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的 探讨全身照射(TBI)预处理诱导大鼠肝移植术后急性排斥反应的发生机制,及CD4~+ CD25~+调节性T细胞的变化在诱导免疫耐受中的作用.方法 以雄性Lewis、DA大鼠为供、受体,随机分为正常对照组、同种肝移植组、自发免疫耐受组、急性排斥反应组.观察各组受体的生存时间及生存率,检测受体术后外周血中ALT、TB含量、Foxp3~+ CD4~+ CD25~+ 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达,检测受体术后第14天移植肝的病理变化和受体脾脏CTL杀伤活性.结果 自发免疫耐受组,术后经历短暂排斥反应最终获得免疫耐受并长期存活.急性排斥反应组,在术后第17～21天死亡,与其他组相比,外周血血清中ALT、TB含量明显升高,而Foxp3~+ CD4~+ CD25~+调节性T细胞比例明显降低.TBI预处理大鼠供肝致受体外周血中CD3~+ CD4~+ T细胞上GITR表达降低,CD3~+CD8~+T细胞上GITR表达增加,提高CTL的杀伤活性.结论 通过TBI清除供体大鼠肝移植物中携带的旁路淋巴细胞,致受体外周血中Foxp3~+ CD4~+ CD25~+调节性T细胞表达降低,而使CD3~+ CD8~+T细胞上GITR表达增加,共同诱导大鼠肝移植术后急性排斥反应发生和耐受障碍.     

Role of natural killer cells in the rejection process of corneal allografts in rats

BACKGROUND: The exact mechanism of human corneal allograft rejection, which is the major cause of corneal transplant failure, remains unclear. We investigated the role of natural killer (NK) cells in rat corneal allograft rejection by examining the aqueous humor (AH) cell infiltrate on different postoperative days. METHODS: Flow cytometric analysis was performed on the AH and submandibular draining lymph node (DLN) cells before transplantation and at different time points thereafter. In addition, we performed functional cytotoxicity assays with cells present in the AH during corneal rejection. RESULTS: We demonstrated a gradual increase in the absolute cell number of different hematopoietic subpopulations in the AH after allogeneic cornea transplantation. CD3CD4 cells, mainly monocytes and macrophages, were the predominant subpopulation 2 days after transplantation, followed by a successive relative increase of CD4 T cells, CD8 T cells, CD161 T cells, and NK cells. NK and CD161 T cells were present at a 10- to 15-fold higher percentage than in the DLN, suggestive of local expansion of these cells. A higher percentage of NK cells were CD8-negative compared with DLN NK cells. AH cells specifically lysed allogeneic cells, and this cytotoxicity was mainly attributable to NK cells but not to CD4 or CD8 T lymphocytes. CONCLUSION: These results confirm the crucial role of CD4 cells in the allogeneic corneal graft rejection process and implicate NK cells as possible mediators of the rejection.     

RNA干扰技术阻断CD40/CD40L共刺激通路对小鼠移植心存活时间的影响

目的 探讨慢病毒介导RNA干扰(RNAi)技术阻断CD40/CD40L共刺激通路对小鼠移植心存活时间的影响.方法 以针对小鼠CD40基因的RNAi慢病毒载体在体外感染供者骨髓来源的树突状细胞(DC),制备低表达CD40的耐受性DC(Tol-DC).荧光实时定量聚合酶链反应及流式细胞术检测DC感染前后CD40 mRNA及DC表面抗原CD40、CD11c和MHCⅡ的表达.建立小鼠异位腹腔心脏移植模型.在小鼠异位心脏移植前7 d,经静脉给受者输注体外制备的低表达CD40的Tol-EC(慢病毒感染DC注射组),并设置单纯移植对照组和未感染DC注射组作为对照.观察各组移植心的存活时间,评定各组术后第7天移植心排斥反应的病理分级.结果 CD40-RNAi慢病毒载体在体外感染DC 48 h后,CD40 mRNA表达明显受到抑制,抑制率为80.9%;CD40表达明显下降,由(74.37±4.08)%降至(40.07±4.03)%(P＜0.05).单纯移植对照组、未感染DC注射组和慢病毒感染DC注射组移植心存活时间分别为:(8±2)d、(9±1)d和(14±4)d,慢病毒感染DC注射组移植心存活时间明显延长,并且移植心排斥反应病理分级显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阻断CD40/C40L共刺激通路可抑制异系T淋巴细胞的活化,从而抑制急性排斥反应,延长小鼠移植心的存活时间.     

蜕膜自然杀伤细胞与不明原因反复自然流产的关系

目的通过测定子宫蜕膜自然杀伤(NK)细胞亚群及其杀伤活性,探讨其在不明原因反复自然流产(URSA)发病中的作用。方法随机选取确定URSA的患者10例为实验组,选取15例正常妊娠(NP组)为对照,采用流式细胞仪检测两组蜕膜组织NK细胞亚群,MTT还原法测定NK细胞杀伤活性。结果URSA组蜕膜中CD56+NK细胞含量显著高于NP组(P<0.01),且URSA组CD56+CD16+细胞亚群含量及CD56+CD16+/CD56+CD16-比值也较NP组显著升高(P均<0.01),而CD56+CD16-细胞亚群含量两组比较无差异(P>0.05)。蜕膜NK细胞活性URSA组为(31.60±2.62)%,而NP组仅为(15.65±2.02)%,两组蜕膜NK细胞活性有显著差异(P<0.01)。结论URSA的发生可能与NK细胞亚群失衡及杀伤活性异常增高而导致母胎间的免疫耐受平衡被打破有关。     

Tim-3在小鼠心脏移植受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化

目的 检测激活的T_H1类淋巴细胞标记分子"T淋巴细胞免疫球蛋白域及粘蛋白域蛋白-3(Tim-3)"在受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化,探讨其与急性排斥反应的关系.方法 建立小鼠同基因和异基因心脏移植模型(简称:同基因组和异基因组);移植术后第3和第6天,分离和制备两组受者外周血、脾脏、引流淋巴结和移植心内淋巴细胞悬液,采用流式细胞仪检测Tim-3阳性细胞在CD4~+ 和CD8~+ T淋细胞中的比值.结果 两组受者术后外周血和脾脏内Tim-3~+/CD4~+以及Tim-3~+/CD8~+ 的比值比较,差异均无统计学意义(P>O.05).与同基因组比较,异基因组引流淋巴结内Tim-3~+/CD4~+ 比值轻度升高(P<0.05);但异基因组术后第6天与第3天比较,差异无统计学意义(P>0.05).与同基因组比较,移植心内Tim-3~+/CD4~+和TiM-3~+/CD8~+比值均显著升高(P<0.01);异基因组术后第6天与第3天比较.移植心TiM-3~+/CD4~+和Tim-3~+/CD8~+比值也显著升高(P<0.01).结论 小鼠异基因心脏移植受者引流淋巴结和移植心内T淋巴细胞上Tim-3的表达升高与急性排斥反应的进展动态相关.