染料木素和槲皮素体外抗肝纤维化作用

目的　研究染料木素和槲皮素对体外肝维化的保护作用。方法　细胞增殖和胶原合成分别用结晶紫染色法和3H 脯氨酸参入法。原胶原mRNA水平用RT PCR法测定。结果　染料木素 (2 5 - 70 μmol·L- 1 )和槲皮素 (6 2 5- 5 0 μmol·L- 1 )浓度依赖抑制PDGF促HSC T6细胞增殖和TGFβ1 刺激的胶原合成及I型原胶原mRNA的表达。结论　染料木素和槲皮素抑制PDGF和TGFβ1 对星状细胞的作用可能对肝纤维化有保护作用     

染料木素和槲皮素体外抗肝纤维化作用

目的 研究染料木素和槲皮素对体外肝纤维化的保护作用。方法 细胞增殖和胶原合成分别用结晶紫染色法和3H-脯氨酸参入法。原胶原mRNA水平用RT-PCR法测定。结果 染料木素(25 ~ 70 mmolL-1)和槲皮素(6.25 ~ 50 mmolL-1)浓度依赖抑制PDGF促HSC-T6细胞增殖和TGFb1刺激的胶原合成及I型原胶原mRNA的表达。结论 染料木素和槲皮素抑制PDGF和TGFb1对星状细胞的作用可能对肝纤维化有保护作用。     

染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响

目的 探讨染料木黄酮对缺氧复氧心肌细胞损伤的影响与其机制.方法 将心肌细胞H9 c2分成对照组、模型组(缺氧复氧)、染料木黄酮组(缺氧复氧,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+anti-miR-NC组(缺氧复氧,转染inhibitor control,2 mol·L-1染料木黄酮预处理)、染料木黄酮+an...     

染料木黄酮对Panc 1细胞株基因表达的影响

目的 研究染料木黄酮对Panc 1细胞株基因表达的影响.方法 用染料木黄酮处理Panc 1细胞株0、1、3、6和12h.从各个样本中提取总RNA并制备成辅酶R标记的探针和人基因组U133A芯片杂交,提取和分析数据.对因染料木黄酮作用而表达水平大幅改变的基因,用实时PCR验证.结果 两次独立实验表明染料木黄酮显著改变了47个基因的表达水平:表达上调的有egr-1和IL-8;下调的有 EGF-R AKT2, CYP1B1, NELL2, SCD, DNA ligase Ⅲ, Rad,和18s及28s rRNA等.这些改变用实时PCR得到了验证,虽然变化的倍数在两种方法中不是完全一致.结论 染料木黄酮的抑癌机制包括了EGF-R信号通路,其中涉及的5个基因表达均下调(EGFR,egr-1,AKT2,CYP1B1和NELL2).染料木黄酮还可能通过抑制AKT2,CYP1B1和DNA连接酶Ⅲ来解除肿瘤细胞的自我保护而起作用.另外,染料木黄酮可能通过抑制SCD的表达来抑制癌肿形成.最后,染料木黄酮抑制rRNA形成从而调节肿瘤生长.     

染料木黄酮在大鼠肝微粒体代谢的酶动力学

目的：体外研究大鼠肝微粒体中染料木黄酮代谢的酶动力学，及选择性细胞色素(CYP)酶抑制剂对其代谢的影响。方法：用大鼠肝微粒体研究染料木黄酮代谢的酶动力学，探讨CYP酶的选择性抑制剂对其代谢的影响及参与其代谢的CYP酶。结果：CYP1A2抑制剂呋喃茶碱可以显地抑制染料木黄酮代谢，使染料木黄酮的代谢速率下降。而其它CYP特异性抑制剂对染料木黄酮代谢没有明显的影响。结论：CYP1A2参与了染料木黄酮的代谢，CYP1A2的抑制剂可能会与染料木黄酮发生代谢相互作用，从而降低染料木黄酮的代谢速率。     

异黄酮对前列腺癌细胞及PTEN基因的影响

目的 通过大豆异黄酮抑制前列腺癌PC-3和LNCaP细胞生长和相关基因表达的影响，探讨大豆异黄酮类抑制前列腺癌的机制。方法 对染料木黄酮和大豆甙元作用后的雄激素非依赖型前列腺癌(PC-3)、雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞的存活率、细胞毒作用、细胞周期和PTEN基因的mRNA表达等进行了研究。结果 染料木黄酮和大豆甙元对PC-3、LNCaP细胞抑制效应具有时间和剂量依赖性，具有诱导凋亡和引起坏死效应；染料木黄酮能诱导PC-3和LNCaP细胞的(PTEN)表达，而大豆甙元只能诱导LNCaP细胞PTEN表达。结论 PTEN基因表达的变化可能在染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞中具有重要的意义。染料木黄酮和大豆甙元抑制PC-3和LNCaP细胞可能存在多种作用途径。     

染料木素和槲皮素体外抗肝纤维化作用

目的　研究染料木素和槲皮素对体外肝维化的保护作用。方法　细胞增殖和胶原合成分别用结晶紫染色法和³H-脯氨酸参入法。原胶原mRNA水平用RT-PCR法测定。结果　染料木素(25 - 70 μmol·L^-1 )和槲皮素(6.25- 5 0 μmol·L^-1 )浓度依赖抑制PDGF促HSC-T6细胞增殖和TGFβ₁ 刺激的胶原合成及I型原胶原mRNA的表达。结论　染料木素和槲皮素抑制PDGF和TGFβ₁ 对星状细胞的作用可能对肝纤维化有保护作用     

染料木黄酮抑制前列腺癌进展和转移的机制研究

目的 探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法 将前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1细胞分为对照组（常规培养）和实验组（50μmol/L染料木黄酮处理）。采用噻唑蓝（MTT）法分析染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖能力的影响,通过细胞划痕实验和Transwell实验分析染料木黄酮对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。Western blot检测上皮间质转化（EMT）中间质标志物E-钙黏蛋白（ECadherin）、N-钙黏蛋白（N-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）以及肿瘤干细胞标志物CD44和Oct4的蛋白水平。结果MTT实验结果表明,染料木黄酮具有抑制前列腺癌细胞增殖的作用。实验组LNCaP和CWR22RV1细胞划痕闭合率较对照组下调,穿过Transwell膜的细胞数量减少（P<0.05）。Western blot实验证实,染料木黄酮能够下调前列腺癌细胞中间质的标志物N-Cadherin、Vimentin和肿瘤干细胞的标志物CD44与Oct4蛋白表达,上调上皮细胞标志物ECadherin表达（P<0.01）。结论 染料木黄酮通...     

染料木黄酮脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用

目的研究染料木黄酮脂质体的制备方法及其对肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用超声薄膜法制备染料木黄酮脂质体;活细胞计数法和MTT法观察染料木黄酮脂质体对肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果染料木黄酮脂质体的平均粒径为136．7nm,剂量依赖性抑制A549和HepG2细胞的增殖,IC50分别为10．46、12．34μmol／L。结论染料木黄酮脂质体对A549和HepG2肿瘤细胞有明显的增殖抑制作用,且作用强于游离染料木黄酮。     

染料木黄酮对哮喘患者核因子-kB表达和肿瘤坏死因子-a分泌的影响

目的 :探讨染料木黄酮对支气管哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMCs)核因子 κB(NF κB)表达及肿瘤坏死因子 α(TNF α)分泌的作用。方法 :32例支气管哮喘急性发作期患者及 31例健康对照者的PBMCs ,均分空白对照、地塞米松和染料木黄酮 3组进行研究。NF κB表达由免疫组化染色检测 ,TNF α含量由放射免疫法测定。结果 :哮喘患者PBMCsNF κB胞核染色阳性率及培养上清TNF α含量明显高于健康对照者 (P <0 .0 1) ,且二者呈显著正相关(P <0 .0 1)。染料木黄酮抑制哮喘组NF κB高表达及TNF α高分泌 ,与哮喘空白对照组比较二者均有统计学意义 (P <0 .0 1) ,但其抑制作用弱于地塞米松 ,且哮喘染料木黄酮组PBMCsNF κB胞核染色阳性率与TNF α含量呈显著正相关 (P <0 .0 1)。结论 :哮喘患者NF κB表达增高 ,TNF α分泌增多。染料木黄酮可抑制哮喘患者PBMCsNF κB的高表达及TNF α的高分泌 ,对哮喘可能有潜在的治疗作用。     

金雀异黄素和槲皮素对大鼠肝星状细胞增殖、胶原合成及Ⅰ型原胶原nRNA水平的影响(英文)

目的:研究金雀异黄素和槲皮素对HSC-T6大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成及Ⅰ型原胶原mRNA表达的影响。方法:细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和[~3H]-脯氨酸掺入法。原胶原mRNA水平用RT-PCR法测定。结果:金雀异黄素(25-70μmol/L)和槲皮素(6.25-50μmol/L)浓度依赖抑制HSC-T6细胞增殖和胶原合成,对Ⅰ型原胶原mRNA表达也有抑制作用。结论:金雀异黄素和槲皮素抑制肝星状细胞增殖和胶原合成可能对肝纤维化有保护作用。     

白藜芦醇对U937细胞基质金属蛋白酶-9转录的抑制作用

目的:观察白藜芦醇对佛波酯诱导的U937细胞中基质金属蛋白酶-9活性的影响,并从蛋白、mRNA及核转录因子激活蛋白-1(AP-1)水平对其影响进行分析。方法:酶谱法测定U937细胞培养上清中MMP-9的活性;Western blot法考察MMP-9蛋白的生成;RT-PCR法检测MMP-9 mRNA的表达;电泳迁移率变动分析法(EMSA)研究核转录因子SP-1的活性。结果:PMA 10nmol/L 可显著诱导无血清培养的U937细胞中MMP-9活性(P<0.01);白藜芦醇在1和10 μmol/L浓度下可抑制 PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9活性(P<0.05 和P<0.01);PMA 10 nmol/L可显著诱导U937细胞中MMP-9蛋白生成(P<0.01)和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01),白藜芦醇在1、10μmol/L浓度下可抑制PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9蛋白生成和MMP-9 mRNA的表达(P<0.05);白藜芦醇在10、1和0.1μmol/L浓度下可抑制PMA诱导的U937细胞中AP-1的活化。结论:白藜芦醇可有效地抑制PMA诱导的U937细胞中MMP-9的活性,其作用可能是通过抑制PMA诱导的U937细胞核转录因子AP-1活化,进而降低MMP-9 mRNA表达,减少MMP-9蛋白生成而实现的。     

Nutritional concentration of genistein protects human dermal fibroblasts from oxidative stress-induced collagen biosynthesis inhibition through IGF-I receptor-mediated signaling

The effects of genistein, a soy isoflavone phytoestrogen and antioxidant, on collagen and DNA biosynthesis (measured by the 5-[3H]proline and the [3H]thymidine incorporation assays), prolidase activity (colorimetric method) and expression (determined by Western immunoblot) of the beta1-integrin receptor, focal adhesion kinase pp125(FAK) (FAK), Src, the insulin-like growth factor-I (IGF-I) receptor, Shc, growth-factor receptor-bound protein 2 (Grb2), son of sevenless protein (Sos) and phosphorylated mitogen activated protein (MAP) kinases, extracellular signal-regulated kinase 1 and 2 (ERK1/ERK2) were examined in normal human dermal fibroblasts (CRL-1474) exposed to oxidative stress. Subconfluent cells were subjected to repetitive stress with 30 microM t-butylhydroperoxide (t-BHP) in combination with 1-100 microM genistein for 1 h per day over the course of 5 days. Also, the cells were treated with t-BHP alone or with t-BHP in combination with 1-100 microM ascorbate. It was found that genistein at 1 microM counteracted the inhibition of collagen biosynthesis evoked by t-BHP in fibroblasts, more effectively than ascorbate at the same concentration. At 10 microM, genistein exerted significantly diminished protective effect on collagen biosynthesis in fibroblasts, while at 100 microM it induced inhibition of this process. The protective effect of genistein on collagen biosynthesis was not related to modulation of prolidase activity or the expression of the beta1-integrin receptor, FAK, Src or Grb2. It was found that genistein, at 1 microM, diminished t-BHP-induced down-regulation of the IGF-I receptor, Shc, Sos and phosphorylated ERK1/ERK2 expression in fibroblasts. Simultaneously, genistein counteracted the antiproliferative activity of the oxidant. These results suggest that the mechanism of the protective effect of genistein on collagen biosynthesis in t-BHP-treated fibroblasts may be due to prevention of disturbances in the IGF-I receptor-mediated, ERK1/ERK2-associated signaling pathway evoked by the oxidant.     

Curcumin inhibits collagen synthesis and hepatic stellate cell activation in-vivo and in-vitro

We previously demonstrated that curcumin, a well-known antioxidant, inhibits collagen deposition in carbon tetrachloride-induced liver injury in rats. The major effector cells responsibleforcollagensynthesis in the liver are activated hepatic stellate cells. In this study,we investigated the inhibitory effects of curcumin on the collagen synthesis and activation of rat hepatic stellate cells in-vitro, and on hepatic stellate cell activation in-vivo. The effects of curcumin on the production of collagen and smooth muscle alpha-actin proteins and of alpha1(I) collagen mRNA were studied in-vivo and in-vitro. The effect of curcumin on DNA synthesis was also determined in-vitro. In-vivo, treatment with curcumin reduced collagen deposition and smooth muscle alpha-actin-positive areas and lowered mRNA levels of type I collagen in the liver. In-vitro, curcumin at a concentration of 5 microg mL(-1) reduced DNA synthesis, and downregulated smooth muscle alpha-actin and type I collagen expression, and alpha1(I) collagen mRNA expression. We concluded that curcumin inhibits collagen synthesis and hepatic stellate cell activation in-vivo and in-vitro, and thus may prove a valuable anti-fibrogenic agent.     

纤维支气管镜活检组织Sox2基因的检测对肺癌的诊断价值

【摘要】 目的 探讨纤维支气管镜活检组织标本中干细胞标志物Sox2 mRNA对肺癌的诊断价值。方法 采用 RT-PCR技术检测100例肺癌患者和18例良性肺疾病患者纤维支气管镜活检标本中Sox2 mRNA的表达, 随后利用免疫组化技术验证Sox2蛋白在50例肺癌组织、 32例良性病变肺组织和18例癌旁正常肺组织间表达的差异, 分析Sox2 mRNA表达与肺癌临床病理参数的关系及其在肺癌诊断中的潜在价值。结果 Sox2 mRNA和蛋白在肺癌组织中的表达量显著高于非癌肺组织 （P＜0.05）。肺癌患者不同年龄、 性别、 病理类型、 TNM分期、 肿瘤分化程度及淋巴结是否转移, Sox2 mRNA的表达差异无统计学意义。Sox2 mRNA ROC曲线下面积为0.748, 临界值取0.513时, 其灵敏度和特异度分别为85.0%和61.1%。结论 纤维支气管镜活检组织标本Sox2 mRNA可能是肺癌诊断的有效标志物。     

JAK/STAT途径调节瘦素诱导的肝星状细胞Ⅰ型胶原基因的表达

目的研究瘦素对肝星状细胞(HSC)α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成的影响,探讨Janus激酶/信号传导及活化转录因子(JAK/STAT)信号传导通路在瘦素诱导的HSC胶原基因表达过程中的作用。方法采用RT-PCR法、ELISA法和Western blot法分别检测不同浓度的瘦素对人肝星状细胞株LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达、蛋白合成以及JAK1、STAT3磷酸化状态的影响;采用Western blot法和RT-PCR法分别观察JAK1抑制剂AG490对瘦素诱导的JAK1磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响;采用Western blot法分别观察AG490、LX-2转染STAT3反义寡核苷酸(STAT3-ASON)对瘦素诱导的STAT3磷酸化状态的影响;应用RT-PCR法检测LX-2转染STAT3-ASON对瘦素诱导的α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响。结果瘦素增加LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成,呈剂量效应关系,当瘦素浓度为80μg·L-1时达到最大值;瘦素促进JAK1、STAT3磷酸化,呈时间效应关系;AG490完全阻断瘦素诱导的JAK1、STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达;LX-2转染STAT3-ASON阻断瘦素诱导的STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达。结论瘦素通过增加HSCα1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成而在肝纤维化发生发展过程中发挥重要的作用,JAK/STAT信号传导通路参与并调节该过程,AG490和LX-2转染STAT3-ASON可有效阻滞此传导途径。在人HSC中,活化的JAK1和STAT3信号可作为肝纤维化治疗新的分子靶点。     

17beta-estradiol inhibits angiotensin II-induced collagen synthesis of cultured rat cardiac fibroblasts via modulating angiotensin II receptors

Circulating endogenous estrogen is considered to be cardiovascular protective, but the underlying mechanisms remain obscure. The cardiac fibroblasts, the most abundant cell type present in the heart, are responsible for the deposition of extracellular matrix. Angiotensin II has been known to stimulate cardiac collagen gene expression. The present study was designed to investigate the effect of 17beta-estradiol on the angiotensin II-induced proliferation and collagen synthesis in cultured cardiac fibroblasts by using real-time polymerase chain reaction (PCR), Western blot and 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide proliferation assay. Angiotensin II increased the cell proliferation and synthesis of collagen types I and III. Angiotensin II up-regulated the gene expression of the angiotensin AT(1) receptor and down-regulated the gene expression of the angiotensin AT(2) receptor in cardiac fibroblasts. The effects of angiotensin II was abolished by the angiotensin AT(1) receptor antagonist, losartan, but not by the angiotensin AT(2) receptor antagonist, PD 123319. 17beta-estradiol prevented increases in proliferation and attenuated the collagen synthesis in response to angiotensin II. The increased AT(1) receptor mRNA levels and decreased AT(2) receptor mRNA levels were partially reversed by 17beta-estradiol treatment. In conclusion, the down-regulation of angiotensin AT(1) receptor expression and function is likely to be an important mechanism accounting for the inhibitory effect of 17beta-estradiol on angiotensin II-stimulated proliferation and collagen synthesis in cardiac fibroblasts. This effect may confer at least in part the cardiac protective action of 17beta-estradiol under pathological conditions with increased activity of the rennin-angiotensin system.