红景天苷对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞再生的作用研究

目的探讨红景天苷对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织神经再生的作用。方法SD大鼠随机分为假手术组、模型组和红景天苷组,采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,红景天苷组于造模后给予红景天苷(40mg/kg)腹腔注射,每日1次,连续7d;其余2组腹腔注射生理盐水。于再灌注后第1、3、7d,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)、平衡木试验、足失误试验评价动物神经功能恢复状况;采用免疫荧光化学方法检测侧脑室下区(SVZ)和海马齿状回(DG)细胞增殖标记5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和新生神经细胞标记DCX的表达。结果红景天苷组大鼠的mNSS评分、平衡木试验评分、足失误比率均较模型组显著降低(P0.05);在大脑SVZ区和海马DG区,红景天苷组BrdU和DCX的表达较模型组均显著升高(P0.05)。结论红景天苷可改善脑缺血损伤大鼠的神经行为学症状,其机理可能与红景天苷可促进脑组织内源性神经再生相关。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的保护作用

目的:观察电针对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠神经行为学及脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触囊泡蛋白(SYN)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、勿动蛋白A(Nogo-A)表达的影响,探讨电针对MCAO/R模型大鼠神经血管单元的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组20只。采用线栓法制作大鼠MCAO/R模型。电针刺激在造模成功90min后进行,针刺双侧"内关"水沟"三阴交"及"百会"穴,留针30min,每天针刺1次,共14d。各组大鼠在7、14d两个时间点各取10只进行神经功能评估并行免疫组化SP法检测缺血脑组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP、Nogo-A的表达。结果:模型组出现明显神经功能缺损症状,14d电针组大鼠神经功能恢复明显优于模型组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、Nogo-A的表达增多,SYN在两个时间点的表达均减少(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,电针组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP阳性表达均增多(P<0.01,P<0.05),Nogo-A的表达减少(P<0.01)。结论:①电针能有效改善局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经功能;②电针能通过上调各时间点局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织内VEGF、GAP-43、SYN、MBP的表达,下调Nogo-A的表达,促进血管、神经元、神经胶质细胞的恢复,从而保护脑缺血再灌注大鼠的神经血管单元。     

脑脉通联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血大鼠神经元突触重建的影响

目的 观察BMSCs移植后脑缺血再灌注大鼠神经元结构变化及突触重建标志性蛋白的变化特点及脑脉通对其的影响,探讨脑脉通联合BMSCs移植促进脑缺血神经功能修复的作用途径.方法 体外全骨髓贴壁筛选培养法扩增BM-SCs;线栓法制备脑缺血模型;大鼠脑缺血再灌注后24h颈内动脉移植BMSCs;脑脉通灌胃给药;BMSCs移植后7d、14d、28d综合测评神经功能,透射电镜观察神经元突触结构,免疫组织化学法测定神经丝蛋白(NF-200)和生长相关蛋白(GAP-43)及突触素蛋白(Synaptophysin,Syn)表达变化.结果 模型各组神经功能评分均较假手术组降低;脑脉通和联合组各时间点、移植28d组神经评分较模型组增高;联合7d和28d组评分较移植组增高.模型各组NF-200和GAP-43及Syn表达均较假手术组减弱;与模型组比较,脑脉通和移植28d组、联合14d和28d组大鼠NF-200、GAP-43、Syn表达均明显增强;与移植组比较,联合14d和28d组的NF-200和GAP-43表达均增强,28d组Syn表达增强显著.结论 脑缺血引起的神经元结构损伤随再灌注时间延长呈加重趋势,并使突触重塑功能减弱;BMSCs移植脑早期对神经功能修复作用不明显,脑脉通可使BMSCs移植后修复神经功能的作用提前并增强,其作用途径可能与增强突触重建相关生长蛋白GAP-43水平,进而促进神经元突触重建相关.     

栝楼桂枝汤调节小胶质细胞活化后的表型转化缓解脑缺血再灌注大鼠模型的神经损伤

目的 基于小胶质细胞活化后的表型转化探讨栝楼桂枝汤缓解脑缺血再灌注大鼠模型的神经损伤。方法 将SD大鼠随机分为假手术组10只和造模组20只。造模组建立脑缺血再灌注大鼠模型,假手术组仅钝性分离颈部肌肉血管,不插入线栓。Longa评分1～3分视为造模成功,采用抽签法将造模成功的大鼠分成模型组和栝楼桂枝汤组各10只。于造模成功后第2天开始灌胃,栝楼桂枝汤组按0.15 mg/（kg·d）给予栝楼桂枝汤药液灌胃,假手术组和模型组按10 mL/（kg·d）给予生理盐水灌胃,每日1次,持续灌胃1周。采用Longa评分进行神经功能评估;ELISA检测血清白细胞介素-1(IL-1)含量;HE染色法观察脑组织病理变化;Western blot检测M1表型标志物脑组织相容性复合物Ⅱ（MHC-Ⅱ）及M2表型标志物精氨酸酶1(Arg-1)蛋白表达量;免疫组化法检测脑组织离子钙接头蛋白（Iba-1）、微管相关蛋白2(MAP-2)的蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组Longa评分明显提高（P<0.05）,血清IL-1含量和脑组织MHC-Ⅱ、Iba-1蛋白表达均明显提高（P<0.05）,Arg-1...     

蒲参胶囊对大鼠脑缺血/再灌注后GAP-43和β-TubulinⅢ蛋白表达的影响

目的观察蒲参胶囊对大鼠脑缺血/再灌注后梗死区周边组织生长相关蛋白43(GAP-43)及β微管蛋白Ⅲ(β-TubulinⅢ)表达的影响。方法将健康SD大鼠随机分成蒲参胶囊低、中、高剂量组,假手术组和模型组。通过线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)脑缺血再灌注模型,术后高剂量组(250 mg/200 g)、中剂量组(125 mg/200 g)、低剂量组(62.5 mg/200 g)每日予灌胃给药1次,假手术、模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃。分别在术后第1、7、14日行神经功能缺损评分(NSS),用Western blotting检测梗死周边区GAP-43和β-TubulinⅢ的蛋白表达情况。结果通过NSS评分,蒲参胶囊对脑缺血/再灌注大鼠的神经功能损伤的恢复有一定的改善趋势,Western blotting检测显示,与模型组比较,蒲参胶囊中剂量组在术后7 d时,可提高GAP-43和β-TubulinⅢ蛋白水平(P 0.05或P 0.05);中剂量组在术后14 d,β-TubulinⅢ的蛋白水平也处于明显升高状态(P 0.05)。结论蒲参胶囊在一定程度上可提高GAP-43及β-TubulinⅢ的蛋白表达水平,提示蒲参胶囊具有促进脑缺血损伤后的神经再生修复的作用。     

栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体能量代谢的影响

目的:探讨栝楼桂枝颗粒是否通过调控线粒体能量代谢对脑缺血再灌注损伤大鼠起到脑保护作用.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和中药组.采用线栓法制备脑缺血再灌注模型,采用神经功能缺损评分法(mNSS)进行大鼠神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积,采用透射电镜观察脑线粒体超微结构的改变;采用分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合物...     

电针联合强制性运动对脑缺血大鼠神经功能及GAP-43表达的影响

目的:探讨电针联合强制性运动对局灶性脑缺血大鼠的不同时间点神经功能评分及灶周生长相关蛋白-43(growth associated protein,GAP-43)表达的影响。方法:将200只SD雄性大鼠按完全随机分组法分为假手术组、模型组、强制性运动(constraint-induced movement therapy,CIMT)组、电针组和电针联合强制性运动组各40只,每组随机分为7 d、14 d、21 d、28 d和35 d 5个亚组,每个亚组各8只大鼠。采用线栓法制作大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血模型,造模24 h后模型组和正常组动物自然饲养,不作特殊处理,其他组行相应治疗,分别于相应天数进行神经功能缺损评分,随后取脑采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围GAP-43的表达。结果:造模后各时间点电针联合强制性运动组大鼠神经功能缺损评分明显低于模型组、CIMT组和电针组(P0.01);与模型组比较,CIMT组、电针组在28 d和35 d神经功能缺损评分减低(P0.05),CIMT组在造模后35 d与电针组神经功能缺损评分比较无统计学差异(P0.05)。电针联合强制性运动组与模型组进行比较,在14、21、28 d时能够显著上调GAP-43表达(P0.05),且强于CIMT组和电针组(P0.05);在35 d缺血区周围GAP-43表达增加,但CIMT组和电针组比较无显著性差异(P0.05)。结论:电针联合强制性运动可促进脑梗死灶周围GAP-43的表达,改善大鼠神经功能,可能与缺血损伤神经元的再生和修复有关。     

二苯乙烯苷对脑缺血-再灌注大鼠NGF及GAP-43表达的影响

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。方法:雄性SD大鼠96只,随机分为4组:假手术组、模型组及TSG低、高剂量组,每组24只。TSG灌胃7d后应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血-再灌注损伤模型,术后6、24、48h及7d4个时间点观察动物神经行为学变化并评分,免疫组化法检测NGF、GAP-43蛋白表达。结果:神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除6h时间点外,各剂量TSG治疗组其余各时间点神经功能评分显著低于模型组(P0.05);与模型组比较,各剂量TSG组各时间点神经生长因子、生长相关蛋白-43蛋白表达均显著升高(P0.01)。NGF与GAP-43蛋白表达增加呈正相关。结论:TSG能增加脑缺血-再灌注大鼠缺血周边区NGF、GAP-43蛋白表达,起到脑保护作用。     

强制性运动联合高压氧对脑缺血大鼠神经功能及GAP-43表达的影响

目的 观察强制性运动联合高压氧对局灶性脑缺血大鼠的不同时间点神经功能评分及灶周生长相关蛋白-43 （GAP-43）表达的影响.方法 将200只SD雄性大鼠采用插线法制作大脑中动脉闭塞（MCAO）局灶性脑缺血模型,随机分为假手术组、模型组、强制性运动组（CIMT组）、高压氧组和强制性运动联合高压氧组各40只,每组随机分为7d、14d、21 d、28 d和35d5个亚组,每个亚组各8只大鼠.造模24h后模型组和正常组动物自然饲养,不作特殊处理,其他组行相应治疗,分别于相应时间进行神经功能缺损评分,随后取脑采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围GAP-43的表达.结果 假手术组神经功能缺损评分为0,造模后各时间点强制性运动联合高压氧组大鼠神经功能缺损评分明显低于模型组、CIM组和高压氧组（P＜0.01）,与模型组比较,CIMT组、高压氧组在28 d和35 d神经功能缺损评分减低（P＜0.05）,CIM组在造模后35 d与高压氧组神经功能缺损评分相当（P＞0.05）.强制性运动联合高压氧组与模型组进行比较,在14、21、28 d时能够显著上调GAP-43表达（P＜0.05）,且强于CIMT组和高压氧组（P＜0.05）;在35 d缺血区周围GAP-43表达增加,但CIMT组和高压氧组差异无统计意义（P＞0.05）.结论 强制性运动联合高压氧可促进脑梗死灶周围GAP-43的表达,改善大鼠神经功能,可能与缺血损伤神经元的再生和修复有关.     

通脉降浊解毒方对缺血性脑卒中大鼠皮质神经生长相关蛋白-43表达的影响研究

目的:探讨通脉降浊解毒方对缺血性脑卒中大鼠皮质神经生长相关蛋白-43(GAP-43)的影响。方法:将48只SD雄性大鼠通过随机分组的方式分为正常组、模型组、药物低剂量组与高剂量组,每组12只,每组又分为7d与14d亚组,各6只。采用热凝闭大脑中动脉法制备模型组与高、低剂量组的缺血性脑卒中大鼠模型。大鼠造模清醒后用0.9%NaCl注射液对正常组、模型组大鼠灌胃,用不同浓度的通脉降浊解毒方对高、低剂量组大鼠灌胃,1次/d。在治疗7d与14d分别对各组大鼠进行Longa评分测试、平衡木行走实验与转棒上行走实验,并通过免疫组化法检测各组大鼠病灶周围GAP-43表达水平。结果:各时间段,中药高、低剂量组Longa评分均明显低于模型组(P0.05);低剂量组治疗14d的平衡木行走实验评分与转棒上行走实验评分均明显低于对照组(P0.05);高剂量组治疗7d、14d的平衡木行走实验评分与转棒上行走实验评分均明显低于对照组(P0.05);模型组治疗7d、14d的GAP-43表达水平明显高于正常组(P0.05);低剂量组治疗7d、14d的GAP-43表达水平明显高于模型组(P0.05);高剂量组治疗7d、14d的GAP-43表达水平明显高于模型组与低剂量组(P0.05)。结论:通脉降浊解毒方可以有效改善缺血性脑卒中大鼠血流灌注状态,促进大鼠受损神经功能恢复。其作用机制可能与上调病灶周围GAP-43表达、改善局部缺血区域的微循环有关。     

电针风池穴对脑缺血再灌注大鼠突触素、生长相关蛋白-43的影响

目的观察电针风池穴对脑缺血再灌注大鼠突触素(synaptophysin, SYN)、生长相关蛋白-43(growth associated protein-43, GAP-43)表达变化的影响。方法将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,每组8只。模型组和电针组采用线栓法制作脑缺血再灌注模型。采用电针双侧风池穴对电针组大鼠进行治疗,每日1次,每次30 min,至动物处死。应用免疫组织化学法检测SYN和GAP-43的表达。结果模型组和电针组造模后2 h和造模后6 d Bederson评分与正常组和假手术组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。模型组和电针组造模后6 d海马和皮层SYN IOD值和GAP-43 IOD值与正常组和假手术组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。电针组造模后6 d海马和皮层SYN IOD值和GAP-43 IOD值与模型组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论电针风池穴可促进脑缺血再灌注模型大鼠的GAP-43和SYN的表达,表明电针可以促进轴突再生,对突触的可塑性具有正向改善作用。     

复方麝香注射液联合神经节苷脂对弥散性轴索损伤大鼠神经元凋亡的影响

目的:探讨复方麝香注射液联合神经节苷脂对弥散性轴索损伤(DAI)大鼠神经元凋亡及神经丝蛋白200(NF200)、生长相关蛋白43(GAP-43)、凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达的影响。方法:采用大鼠头颅瞬间旋转损伤装置建立DAI大鼠模型。将成功建立的45只DAI大鼠随机分为模型组、实验组和联合组,每组15只;另选择15只正常大鼠作为对照组。实验组大鼠腹腔注射单唾液酸四己糖神经节苷脂钠[30 mg/(kg·d)],联合组大鼠腹腔注射单唾液酸四己糖神经节苷脂钠[30 mg/(kg·d)]+复方麝香注射液[2 mL/(kg·d)],对照组与模型组腹腔注射等量生理盐水,连续干预7 d。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)法评估各组大鼠的神经功能缺损情况;采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织病理学变化;采用TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测各组大鼠神经元凋亡情况;采用蛋白质免疫印迹(Wb)法检测大鼠脑组织NF200、GAP-43与DAPK1蛋白表达。结果:干预第1~7天,模型组、联合组与实验组大鼠mNSS评分均逐渐降低;与对照组比较,模型组大鼠第1~7天的mNSS评分均明显升高,但联合组与实验组低于模型组,联合组低于实验组(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠神经元凋亡指数及脑组织DAPK1蛋白相对表达量均明显升高,且联合组与实验组低于模型组,联合组低于实验组(P<0.05);NF200、GAP-43蛋白相对表达量明显降低,且联合组与实验组高于模型组,联合组高于实验组(P<0.05)。结论:复方麝香注射液联合神经节苷脂治疗DAI可改善大鼠神经功能缺损情况,抑制神经元凋亡,改善神经功能,其作用机制可能与上调脑组织NF200、GAP-43蛋白表达,下调DAPK1蛋白表达相关,且两药联合使用效果更佳。     

栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注模型大鼠皮质内质网应激相关因子表达的影响

目的探讨栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注损伤模型大鼠皮质内质网应激相关因子m RNA表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组和造模组,造模组采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,假手术组除不插入线栓外其余操作相同。将造模成功的大鼠随机分为模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。低、中、高剂量组分别予不同剂量的栝楼桂枝汤灌胃,阳性对照组给予尼莫地平混悬液灌胃,假手术组和模型组予等量生理盐水灌胃,每日1次,连续干预7 d。采用Longa神经学评分法评定大鼠神经功能损伤程度,RTq PCR法检测大鼠缺血侧皮质组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录活化因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及其B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)m RNA的表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能损伤评分及大鼠皮质组织中GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-3 m RNA表达明显提高(P0.01,P0.05),Bcl-2 m RNA表达降低(P0.05);与模型组比较,阳性对照组和低、中、高剂量组神经功能损伤评分及大鼠皮质组织中GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-3 m RNA表达明显下降(P0.01,P0.05),Bcl-2m RNA表达提高(P0.05)。结论栝楼桂枝汤对MCAO模型大鼠具有较好的治疗作用,其作用机制可能与调控内质网应激相关因子的表达,降低内质网应激水平有关。     

电针任督脉对局灶性脑缺血大鼠神经功能和神经细胞凋亡的影响

目的探究电针任督脉对局灶性脑缺血模型大鼠神经功能和神经细胞凋亡的影响。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,利用改良的神经功能缺损评分表（mNSS）观察治疗后大鼠神经行为学变化情况,并采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测其大脑皮层神经细胞凋亡情况,以及电针任督脉对其的影响。结果大鼠造模后mNSS显著升高,且大脑皮层TUNEL阳性细胞数明显增多：与同时期模型组比较,电针任督脉组脑缺血再灌注7d、14d和28d其mNSS和TUNEL阳性细胞数明显降低。结论电针任督脉可能通过抑制脑缺血再灌注后皮层神经细胞凋亡和改善神经功能缺损来改善脑缺血损伤。     

栝楼桂枝汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后PARP-1表达的影响

目的观察栝楼桂枝汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中多聚(腺苷二磷酸核糖)聚合酶-1(PARP-1)表达的影响,探讨栝楼桂枝汤的神经保护机制。方法用线栓法制备大脑中动脉闭塞大鼠模型,手术当日大鼠清醒后用栝楼桂枝汤干预,每日1次,7天后用Longa评定法评价神经功能损伤程度,TTC染色检测脑梗死体积,HE染色检测缺血侧大脑皮层的病理改变,免疫组化法检测缺血侧大脑皮层PARP-1的表达。结果与模型组比较,栝楼桂枝汤组能明显改善MCAO模型大鼠的神经功能缺损症状,缩小脑梗死体积,减轻大脑皮层病理损伤,减少大脑皮层PAPR-1的表达。结论栝楼桂枝汤能有效降低缺血再灌注后脑组织的PARP-1表达,具有较好的神经保护作用。     

双侧电针结合康复训练对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠海马CA 3区神经生长相关蛋白43及突触素表达的影响

目的:探讨应用双侧电针结合康复训练对局灶性脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)大鼠运动功能及海马CA 3区神经生长相关蛋白43(GAP-43)和突触素(SYP)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为模型组、康复组、患侧电针康复组、双侧电针康复组,每组各10只,另设空白组6只。参考改良Zea Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞/再灌注大鼠模型,患侧电针康复组电针患侧"曲池""后三里""百会"配合康复训练,双侧电针组电针双侧"曲池""后三里"及"百会"配合康复训练,康复组单纯采用康复训练,均每天治疗1次,共治疗12次。术后24h,7、14d时进行神经行为学评分,免疫组化法检测海马CA 3区GAP-43、SYP表达。结果:术后7、14d,双侧电针康复组的神经行为学评分均明显低于模型组、康复组和患侧电针康复组(P0.05)。与空白组比较,模型组GAP-43、SYP表达显著增加(P0.05);与康复组或模型组比较,患侧电针康复组及双侧电针康复组GAP-43、SYP表达均显著增加(P0.05);与患侧电针康复组比较,双侧电针康复组GAP-43、SYP表达显著增加(P0.05)。结论:电针结合康复训练能促进大鼠神经功能的恢复及海马CA 3区GAP-43、SYP的表达,而在针刺方法上,双侧电针法较患侧电针法能更好地促进CI/RI大鼠的中枢神经系统功能重塑。     

参麦注射液对大鼠脑梗死后GAP-43和SYP蛋白表达的影响

目的:探讨参麦注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周围大脑皮质GAP-43和SYP表达的影响。方法:健康SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、参麦注射液治疗组和三七皂苷对照组,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,各组分别于术后3、7、14d随机取6只大鼠处死后取梗死灶周围区大脑皮质用免疫组化法测定GAP-43蛋白和SYP蛋白的表达量。结果:与模型组及阳性对照组比,参麦注射液组能明显改善脑缺血大鼠的神经缺失症状,并在大鼠脑缺血后上调梗死灶周围大脑皮质区GAP-43和SYP的表达(P<0.05)。结论:参麦注射液对于脑缺血大鼠脑可塑性具有有益的作用。     

醒脑开窍针法结合康复训练对缺血性脑卒中大鼠神经修复和梗死灶周围皮质神经生长相关蛋白-43表达的影响

目的:观察醒脑开窍针法结合丰富康复训练对缺血性脑卒中大鼠运动功能及脑组织梗死灶周围皮质神经生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响,探讨针刺配合康复治疗对缺血性脑卒中的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、康复组、综合康复组,每组18只。每组分7、14、21d3个亚组,每组6只。采用热凝闭大脑中动脉法复制大鼠局灶性脑缺血模型。康复组给予丰富康复训练的方法治疗,每日1次;综合康复组在给予丰富康复训练的基础上针刺双侧"内关"及"水沟"穴,每日1次,每次30min。各组大鼠分别于相应治疗时间结束后进行神经功能评分,平衡木行走、转棒上行走实验评分,并行免疫组化SP法检测脑组织梗死灶周围皮质GAP-43表达。结果:各时间点模型组大鼠神经功能评分及平衡木行走、转棒上行走实验评分较假手术组均显著升高(P0.01)。造模7d后,康复组和模型组比较,大鼠平衡木行走、转棒上行走实验评分差异无统计学意义(P0.05);其余各时间点康复组、综合康复组大鼠神经功能评分及平衡木行走、转棒上行走实验评分均较模型组显著降低(P0.05)。各时间点综合康复组大鼠神经功能评分及平衡木行走、转棒上行走实验评分均较康复组显著降低(P0.05)。各时间点模型组大鼠脑组织中梗死灶周围皮质GAP-43阳性细胞数表达较假手术组均显著增加(P0.01)。各时间点康复组与综合康复组大鼠脑组织梗死灶周围皮质GAP-43阳性细胞数较模型组均显著增加(P0.01)。各时间点综合康复组大鼠脑组织中梗死灶周围皮质GAP-43阳性细胞数较康复组均显著增加(P0.01)。结论:醒脑开窍针法结合丰富康复训练的综合治疗方法可有效地促进缺血性脑卒中大鼠的神经功能恢复,增加大鼠脑组织梗死灶周围皮质GAP-43表达可能是其重要的机制之一。     

栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Ca~(2+)/CaMKⅡ/CREB信号通路的影响

目的观察栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织Ca~(2+)/Ca MKⅡ/CREB信号通路的影响,探讨其作用机制。方法采用线栓法致大脑中动脉栓塞建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。SD大鼠随机分为假手术组、模型组和中药组,中药组给予栝楼桂枝颗粒药液灌胃,连续7 d。采用改良的神经功能缺损评分法进行大鼠神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积,采用透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构,RT-PCR检测大鼠脑组织钙活化调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca MKⅡ)、c AMP反应元件蛋白(CREB)的基因表达,Western blot检测大鼠缺血侧脑组织p-CREB、p-CaMKⅡ、Ca MKⅡ、CREB和钙调蛋白(Ca M)的蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损和脑梗死面积评分显著升高,海马神经元超微结构改变明显,细胞高度水肿、细胞核和细胞质收缩,p-CREB蛋白表达降低,Ca M蛋白表达升高;与模型组比较,中药组大鼠神经功能评分和脑梗死面积显著降低,缺血区神经元超微结构改善,细胞损伤减少,p-CREB和p-CaMKⅡ蛋白表达升高,Ca M蛋白表达降低。结论栝楼桂枝颗粒能改善模型大鼠神经功能,抑制神经细胞凋亡,其作用机制可能与促进CREB、Ca MKⅡ的磷酸化,抑制Ca M的表达有关。     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的:研究头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA的影响,探讨针刺对脑梗死大鼠神经可塑性影响的机制。方法:将健康雄性W istar大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头穴透刺组(C组)、头穴丛刺组(D组)。通过建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,测定以上各组在7天、14天、28天不同时间点GAP-43mRNA变化情况。结果:头穴丛刺组脑组织GAP-43的表达与假手术组、模型组相比差异有统计学意义(P0.05);而在不同时间窗内头穴丛刺组、模型组与假手术组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:头穴丛刺能够提高脑缺血后神经功能,促进肢体功能恢复,增加GAP-43的表达,发挥对脑组织神经细胞可塑性的调节作用。