HMGB1与原因不明复发性流产的关系

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平,及其对Th17/Treg平衡的影响。方法选取42例早孕期原因不明复发性流产患者为研究对象(URSA早孕组),并以32例正常早孕孕妇为正常早孕组(NP组)。采用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th17和Treg细胞的比例;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测外周血中HMGB1、RAGE、IL-17、IL-6、TGF-β及IL-10表达水平。结果 URSA早孕组外周血中Treg细胞比例低于正常早孕组(P0.05),而Th17细胞比例和Th17/Treg比值均高于正常早孕组(P0.05);URSA早孕组外周血HMGB1和RAGE表达高于正常早孕组(P0.05);与正常早孕组相比,URSA早孕组外周血IL-17、IL-6表达水平均增高(P0.05),而TGF-β、IL-10的表达水平均下降(P0.05);在相关性分析比较中,URSA早孕组外周血HMGB1表达水平与RAGE、IL-17、IL-6均呈正相关,而HMGB1表达水平与TGF-β、IL-10均呈负相关。结论 URSA外周血中HMGB1表达水平增高,HMGB1可能通过直接或间接的方式调节Th17/Treg平衡模式参与URSA的发病机制。     

高迁移率族蛋白B1与原因不明复发性流产患者Th1/Th2平衡的相关性

目的 探讨HMGB1和Th1/Th2型细胞因子在原因不明复发性流产（URSA）患者外周血中的表达及相关性研究。方法 纳入2019年6月至2020年6月期间在深圳市妇幼保健院妇科就诊的100例URSA患者为URSA组,分别于免疫治疗前、后采集患者外周血。以同期100例体检健康妇女为对照组。比较两组外周血中Th1、Th2细胞比例、Th1/Th2比值、IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10和HMGB1的表达。比较治疗后不同妊娠结局URSA患者细胞因子和HMGB1表达水平。采用Pearson相关分析法分析细胞因子和HMGB1的相关性。结果 URSA治疗前与治疗后和对照组相比、妊娠成功组与失败组相比,IL-2、IFN-γ和HMGB1均升高,IL-4和IL-10均降低（P<0.05）;URSA治疗前与对照组比,Th1细胞比例、Th1/Th2值升高,Th2细胞比例降低（P<0.05）。HMGB1与IL-2和IFN-γ呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关（均P<0.01）。结论 URSA的发病与Th1/Th2细胞平衡向Th1方向偏移有关,HMGB1可能参与了Th1/Th2失衡...     

Tim-3/Gal-9途径参与不明原因复发性流产的分子机制研究

目的探讨不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)Tim-3/Gal-9通路的表达变化以及淋巴细胞免疫治疗(lymphocyte immunotherapy,LIT)的分子机制。方法各采集20例正常早孕及URSA患者外周血,对URSA患者进行疗程LIT治疗后采集其外周血,利用ELISA法定量检测三组外周血中Tim-3及Gal-9的表达情况。结果 URSA患者血清中Tim-3与Gal-9的表达水平高于正常早孕组(P0.05)。LIT治疗后,URSA患者血清中Tim-3与Gal-9的含量较治疗前明显下降(P0.05)。结论 Tim-3/Gal-9通路参与了URSA,经过LIT治疗上调了Gal-9的表达,加强了Tim-3/Gal-9通路对Th1免疫细胞的负性刺激作用,使URSA患者转向以Th2型免疫细胞为主的状态,从而改善妊娠结局。     

泡球蚴感染小鼠中Tim-3 对Th1 / Th2 细胞因子平衡的影响作用研究

目的:研究泡球蚴感染小鼠Tim-3、Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、Th2细胞因子白细胞介素4(IL-4)的变化。方法:建立泡球蚴感染小鼠模型和对照组,取小鼠脾脏,分离脾淋巴细胞,流式细胞技术检测脾淋巴细胞Th1和Th2细胞水平以及Tim-3在Th1和Th2上的表达水平,用流式微珠阵列技术(CBA)法检测小鼠外周血清中IFN-γ、IL-4水平。结果:与正常对照组相比,泡球蚴感染小鼠脾淋巴细胞Tim-3在Th1中表达增高,Tim-3+Th1细胞与IFN-γ水平呈负相关。结论:泡球蚴诱导小鼠Tim-3在Th1细胞高表达,下调Th1免疫应答介导了Th1/Th2失衡。     

Tim-3、PD-1和CD28表达与慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能的关系

目的研究慢性乙肝患者肝脏中恒定自然杀伤T(invariant nature killer T,iNKT)细胞的功能与其表面Tim-3、PD-1、CD28表达的关系。方法无菌分离人体肝脏单个核细胞,建立α-半乳糖神经酰胺(α-GalCer)诱导慢性HBV感染后的iNKT细胞体外诱导扩增模型,以流式细胞术检测体外培养基线水平0 h和72 h的iNKT细胞的表面Tim-3、PD-1、CD28的表达以及IL-4、IFN-γ的分泌情况;用ELISA法检测培养上清中IL-4、IFN-γ的水平;阻断PD-1、Tim-3及活化CD28信号通路,以流式和ELISA法检测IL-4+iNKT与IFN-γ+iNKT。结果慢性乙肝患者(实验组)肝脏中的iNKT细胞的比例明显低于正常人(对照组)(P0.05);iNKT表面Tim-3、PD-1的表达明显增多(P0.05),而CD28的表达则明显减少(P0.05);iNKT细胞分泌IL-4、IFN-γ的功能明显降低(P0.05);单一α-GalCer刺激培养72 h后,实验组IL-4+iNKT、IFN-γ+iNKT的表达没有明显变化(P0.05),而阻断PD/PDL1、Tim-3/Tim-3L和(或)活化CD28/CD80信号通路后,IL-4+iNKT、IFN-γ+iNKT细胞的表达明显提高(P0.05)。结论慢性乙肝患者肝脏iNKT细胞功能存在明显的缺陷,并提示负向调控因子Tim-3、PD-1表达的增加和正向调控因子CD28表达的降低可能与iNKT细胞功能的下调密切相关。     

Tim-3/galectin-9调控脂多糖诱导的人淋巴细胞中Th1/Th2细胞平衡

目的 探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)/半乳糖凝集素-9(galectin-9)在脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞炎性过程中对辅助性T细胞(Th)Th1/Th2细胞失衡中的作用。方法 收集脓毒症患者的外周血。分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-qPCR检测Tim-3、galectin-9、T-bet和GATA3的表达；ELISA检测血清sTim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的水平；分离的外周血单个核细胞体外培养，LPS刺激建立体外炎性模型；ELISA法检测细胞培养上清中Th1和Th2细胞相关细胞因子的水平；Western blot检测JAK2/STAT3相关因子的表达；Pearson相关系数分析Tim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的相关性。结果 脓毒症患者外周血中Tim-3和galectin-9的mRNA表达增多，sTim-3、galectin-9、IL-4和GATA-3升高，IFN-γ和T-bet水平下降，磷酸化JAK2和STAT3升高(P<0.05)。阻断Tim-3表达后，IFN-γ水平升高，而IL-4的水平明显下降，磷酸化...     

sPD-1/sPD-L1与Th1/Th2及Th17/Treg相关细胞因子在原发免疫性血小板减少症中的研究

目的:探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)中s PD-1/s PD-L1的表达情况及其与Th1/Th2、Th17/Treg的平衡关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测35例初诊ITP患者和20例健康体检者外周血血清中s PD-1、s PD-L1、IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的水平。结果:①与正常对照组相比,ITP患者s PD-1、IFN-γ、IL-17水平升高(P=0. 008、P=0. 031、P=0. 005),IL-4、TGF-β水平降低(P=0. 028、P=0. 042),s PD-L1水平无明显变化(P=0. 107)。②Pearson相关性分析显示:s PD-1与IFN-γ呈正相关(r=0. 516,P=0. 006),与血小板计数呈负相关(r=-0. 562,P=0. 002);血小板计数与IFN-γ呈负相关(r=-0. 531,P=0. 004); s PD-1与IL-4、IL-17、TGF-β无相关性(P均0. 05)。结论:s PD-1可能通过抑制PD-1/PD-L1负性调节通路,导致T亚群失衡,在ITP疾病中发挥一定的作用。     

负性协同刺激分子PD-1和Tim-3及细胞因子在布鲁氏菌病中的变化

目的检测布鲁氏菌病患者程序性死亡蛋白1(PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)及细胞因子IL-17A和IL-6的变化。方法 72例布鲁氏菌患者组与50例正常对照组采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中PD-1和Tim-3的表达,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中PD-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达,流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测血清中IL-17A和IL-6的水平,Pearson法分析布鲁氏菌病患者外周血中PD-1~+Tim-3~+CD4~+T的表达与IL-17A和IL-6的相关性,分析布鲁氏菌病患者外周血中PD-1~+Tim-3~+CD4~+T的表达及临床特点。结果与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组PD-1~+Tim-3~+CD4~+T细胞、PD-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达、IL-17A和IL-6的水平均明显增加(P0.01),布鲁氏菌病患者外周血中PD-1~+Tim-3~+CD4~+T的表达与IL-17A(r=0.71,P0.01)和IL-6(r=0.83,P0.01)的水平均呈明显的正相关,并且布鲁氏菌病患者出现发热、骨关节痛、多器官受累时外周血中PD-1~+Tim-3~+CD4~+T的表达明显增高(P0.01)。结论 PD-1与Tim-3在布鲁氏菌病患者中表达增加,可能共同参与了布鲁氏菌对免疫应答的负性调控,不利于机体对布鲁氏菌的有效清除。     

孕酮调节复发性流产患者淋巴细胞产生Th1、Th2因子及机制

目的探讨孕酮（P）对不明原因复发性自然流产（URSA）患者淋巴细胞产生Th1、Th2因子的调节作用及其机制。方法提取URSA患者的外周血单个核细胞（PBMC）,在植物血凝素（PHA）刺激下,分孕酮组和对照组培养后,采用ELISA法检测细胞培养上清中IL-12、IL-4的浓度,提取细胞全蛋白,用Western Blotting法检测过氧化物酶体增值物激活受体γ（PPAR-γ）的表达。结果孕酮组IL-12水平显著低于对照组（P〈0.01）,IL-4显著高于对照组（P〈0.05）。孕酮组PPAR-γ的表达显著高于对照组（P〈0.05）。结论孕酮能调节URSA妇女PBMC产生的Th1、Th2细胞因子,PPAR-γ可能参与了细胞因子表达的调控,PPAR-γ是重要的免疫调节因子。     

Tim-3和PD-1在慢性丙型肝炎患者不同单核细胞亚群的表达水平分析

目的分析慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血单核细胞亚群分布,同时观察负性调节分子T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白3(Tim-3)和程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)在各亚群表达的变化及意义。方法利用流式细胞术检测CHC患者外周血单核细胞亚群比例和各亚群Tim-3、PD-1表达,并与临床指标如丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)采用Spearman方法进行相关性分析。结果与健康对照组比较,CHC患者外周血CD14~+CD16~+单核细胞比例增高,以CD14CD16~+单核细胞比例增高显著。Tim-3在CD14CD16-单核细胞和CD14~+CD16单核细胞上表达水平升高;PD-1在CD14CD16-单核细胞和CD14CD16~+单核细胞上表达水平升高。CHC患者单核细胞亚群以及各亚群Tim-3、PD-1和临床指标ALT及AST无明显相关性。结论 Tim-3和PD-1在不同单核细胞亚群表达水平不同。     

布鲁氏菌病患者血清中可溶性Tim-3/Galectin-9与相关细胞因子的变化

目的研究布鲁氏菌病患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(s Tim-3)与其配体半乳糖凝集素-9(Galectin-9)以及相关细胞因子IFN-γ和IL-4的变化。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测布鲁氏菌病患者血清中s Tim-3和Galectin-9的表达,流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测IFN-γ和IL-4的变化,Pearson法分析布鲁氏菌病患者血清中s Tim-3、IFN-γ及IL-4的相关性。结果与正常对照组相比,布鲁氏菌病患者组血清中的s Tim-3和Galectin-9及IL-4的表达均增加(P0.05),IFN-γ表达减少(P0.01),并且布鲁氏菌病患者血清中s Tim-3的表达与IL-4呈正相关(r=0.87,P0.01),与IFN-γ呈负相关(r=-0.76,P0.01)。结论 s Tim-3和Galectin-9在布鲁氏菌病患者体内高表达,参与了布鲁氏菌病的发生发展。     

肝癌患者外周血CD3~+T细胞和CD19~+B细胞中程序性死亡蛋白1(PD-1)及其配体表达水平增加

目的 观察肝细胞肝癌(HCC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中程序性死亡蛋白1(PD-1)和配体以及γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。方法 采集15例早期HCC患者、13例进展期HCC患者和12例健康人(对照组)的外周血并分离PBMC。流式细胞术检测PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达,ELISA检测血清中IFN-γ的水平,利用Pearson相关系数法和One-way ANOVA分析PD-1与IFN-γ的相关性。结果 进展期HCC患者外周血CD3+T细胞和CD19+B细胞中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达水平和血清IFN-γ水平显著高于健康人群和早期HCC患者,HCC患者外周血CD3+T细胞和CD19+B细胞PD-1、PD-L1表达水平与IFN-γ呈正相关。结论 肝癌患者PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2分子表达增加,且PD-1、PD-L1与IFN-γ水平有关联。     

Tim-3分子表达异常与原因不明复发性流产的关系

目的探究T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子3（Tim-3）表达异常与不明原因复发性流产（URSA）的关系。方法选择31例URSA患者作为研究组,并以同期30例正常孕妇作为对照组。采用流式细胞术检测两组外周血单个核细胞（PBMC）中CD4＋Tim-3＋细胞/CD4＋细胞的比例,Western Blot技术检测蜕膜中Tim-3蛋白的相对含量,并以免疫磁珠法分选CD4＋Tim-3＋细胞,荧光定量RT-PCR检测两组外周血PBMC、CD4＋Tim-3＋细胞及蜕膜组织中Tim-3 mRNA的表达。结果 URSA组中,PBMC中CD4＋Tim-3＋细胞/CD4＋细胞为5.23±0.96%,蜕膜中Tim-3蛋白的相对表达量为0.64±0.09,PBMC及蜕膜中Tim-3 mRNA的相对表达量为0.65±0.09及0.50±0.07,均显著高于正常对照组（P〈0.01）。但是,URSA组CD4＋Tim-3＋细胞（Th1细胞）Tim-3 mRNA的表达量低于正常对照组,差异具有显著性（P〈0.01）。结论 Th1细胞Tim-3表达降低,Th1细胞过度活化可能参与了URSA的发生发展过程。     

早期自然流产患者外周血中Tim-3的表达及与Th17/Treg细胞的关系

目的检测Tim-3在早期自然流产患者外周血中的表达及其与Th17/Treg的关系,探讨其在早期自然流产中的作用。方法选取正常早孕自愿人工流产患者36例为观察组,早期自然流产患者41例为研究组,利用流式细胞检测技术检测2组患者外周血中Tim-3、Th17、Treg的表达,其中流式细胞仪检测CD4细胞中IL-17(CD4+IL-17+)比例反映Th17水平,CD4细胞中CD4+CD25+Treg反映Treg细胞水平,并探讨Tim-3的表达及与Th17/Treg的关系。结果 Tim-3、Th17及Th17/Treg在研究组升高,观察组降低;Treg在研究组降低,观察组升高,2组比较有显著性差异。结论 Tim-3的异常表达可能预示着自然流产的发生,与Th17/Treg失衡有关。     

老年哮喘患者外周血淋巴细胞内IFNγ与IL4的变化

目的了解老年哮喘患者在不同病期外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-4的变化.方法应用流式细胞仪,测定哮喘急性发作期、缓解期和健康老年人外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-4的百分率.结果 CD3+CD8+淋巴细胞IFN-γ表达率,急性发作期组(10.5±4.6%)低于缓解期组(17.5±3.8%,p<0.05)和对照组(18.4±5.9%,p<0.05);IL-4表达率急性发作期组(2.6±2.2%)高于缓解期组(1.3±0.9%,p<0.05)和对照组(1.5±0.8%,p<0.05);CD3+、CD8+淋巴细胞IFN-γ表达率,急性发作期组(31.4±10.3%)显著高于缓解期组(20.2±12.3%,p<0.05)和对照组(21.3±10.4%,p<0.05).结论向Th2偏移的Th1/Th2失衡,可能与老年哮喘患者病情发展有关.     

CD4~+效应T细胞在自身免疫性溶血性贫血患者外周血的变化研究

目的研究自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者外周血中效应T细胞亚群Th1和Th17数量和比例的变化,探讨其在AIHA发病中的作用。方法选择30例AIHA患者,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测Th1和Th17细胞频率,用ELISA测定培养上清中IFN-γ和IL-17水平,并与健康对照组比较。结果 AIHA患者PBMC中IFN-γ+Th1和IL-17+Th17细胞频率均显著高于健康对照组(P<0.01);而且,AIHA患者外周血IL-17水平明显高于健康对照组(P<0.05),但IFN-γ水平在患者和正常人之间差异不显著。结论Th17与Th1细胞亚群可能参与AIHA患者的免疫学发病机制。     

溃疡性结肠炎相关性结直肠癌大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度的关系

为探讨溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(ulcerative colitis-associated colorectal cancer,UC-CRC)大鼠Th1/Th2漂移与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,建立UC-CRC大鼠模型,于第14、16、18周分批处死,观察各组结肠组织病理学变化情况,并比较血清、结肠组织中Th2细胞因子IL-4、Th1细胞因子IFN-γ水平及结肠组织中CD4~+IL-4~+占比、CD4~+IFN-γ~+占比、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+、MVD,分析MVD与IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的相关性。结果显示,模型组大鼠建模后状态逐渐变差,持续2周后好转;模型组结肠细胞有明显的病理学变化;与对照组比较,模型组各时刻血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD较高,IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+较低(P0.05);模型组血清和组织中IL-4水平、CD4~+IL-4~+占比、MVD均随时间的延长呈升高趋势(P0.05),IFN-γ水平、CD4~+IFN-γ~+占比、IFN-γ/IL-4、CD4~+IFN-γ~+/CD4~+IL-4~+均随时间的延长呈下降趋势(P0.05),而对照组上述指标变化均不显著(P 0.05);不同时刻MVD与血清及组织中IL-4水平呈正相关(P0.05),与IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4均呈负相关(P0.05)。提示UC-CRC大鼠Th1/Th2平衡向Th2漂移,MVD与Th2细胞因子呈正相关,与Th1细胞因子呈负相关,MVD与Th1/Th2漂移关系密切。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Tim-3表达的检测及意义

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)的表达及对其炎症因子生成的影响.方法 利用多色流式技术和荧光实时定量PCR(qRT-PCR),分别检测不同状态的CHB患者外周血单核细胞亚群表面Tim-3分子和Tim-3 mRNA表达水平.给予重组人galectin-9和脂多糖(LPS)共刺激CHB活动期患者外周血单核细胞,用ELISA检测培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平.结果 慢乙肝免疫耐受期患者(IT)外周血单核细胞表面Tim-3表达水平显著高于健康对照组(HC)和免疫活动期患者(IA)(P＜0.01),其中IT患者CD14+ CD16-和CD14+ CD16+单核细胞亚群中Tim-3的表达均高于IA患者,差异均有统计学意义.qRT-PCR结果进一步证实IA患者外周血单核细胞中Tim-3 mRNA的表达高于HC (P =0.040).IA患者CD14+单核细胞上Tim-3的表达与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈正相关(r=0.362,P=0.028).重组人galectin-9和LPS共刺激IA患者外周血单核细胞比单独使用LPS刺激分泌更高水平的TNF-α,IL-1,IL-6.结论 CHB患者外周血单核细胞Tim-3表达上调,与血清ALT水平呈正相关,Tim-3/galeetin-9通路能够促进LPS诱导的单核细胞的炎症因子的分泌.     

不同级别胶质瘤患者术前外周血Th1/Th2细胞因子的表达

目的:分析不同级别脑胶质瘤患者手术前外周血Th1/Th2细胞因子表达变化。方法:选择近期住院的脑胶质瘤患者63例,在治疗前采用ELISA方法进行外周血IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10浓度检测。结果:胶质瘤组外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于对照组,而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者(P<0.05或P<0.01)。高级别组(Ⅲ~Ⅳ级)外周血IL-4和IL-10浓度均明显高于低级别组(Ⅰ~Ⅱ级),而前者外周血IFN-γ、IL-2浓度及IFN-γ/IL-4比值则显著低于后者(P<0.05或P<0.01)。结论:脑胶质瘤患者可能有Th2优势表达,与恶性程度有一定关系。     

Tim-3中和抗体对哮喘小鼠T淋巴细胞功能的影响

目的 探讨Tim-3中和抗体对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠外周血及支气管肺泡灌洗液(BALF)中T淋巴细胞体外增殖功能和细胞因子合成功能的影响.方法 分别采集实验组和对照组外周血和BALF,并分离出T淋巴细胞进行体外分组培养,各组分别以不同浓度的Tim-3中和抗体进行干预,并在不同的时间进行检测.用MTT法分别测定各组细胞的增殖情况,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定T淋巴细胞白细胞介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)的水平.结果 与对照组比较,Tim-3中和抗体对体外培养的实验组小鼠外周血和BALFT淋巴细胞的增殖均有抑制作用,其作用强度(在一定范围内)随剂量的增加和时间的延长而加强(均P<0.05);而且对实验组小鼠的抑制作用明显强于对照组小鼠(P<0.05);同时实验组小鼠外周血和BALFT淋巴细胞经抗体干预后,IL-4的表达水平较正常组明显下降,IFN-γ明显增加(P<0.05).结论 Tim-3中和抗体能抑制实验组小鼠T淋巴细胞的增殖和IL-4的合成,增加IFN-γ的分泌.Tim-3可能作为哮喘治疗新的分子靶点.