组织标本库规范化的建立及其在泌尿外科的发展

随着后基因组学和蛋白质组学的发展,人类组织标本的收集及其质量的保证已成为影响人类疾病研究和推广新诊疗技术的关键.因此,收集保存和管理高质量的标本资源非常重要.世界各国先后建立起了单病种和多病种的组织标本库,在泌尿外科领域也有相应发展,并逐渐规范化标本的收集、处理和储存程序,形成了标准化的操作体系.收集标本的同时也引发一...     

肝脏肿瘤标本资源库的建立、维护及管理

目的 探讨建立以肝癌组织样本为主的肝脏外科生物样本库及相关数据信息化管理的方法和标准化操作规程,为临床与基础研究提供高质量的临床标本资源平台。方法 收集肝脏肿瘤手术患者的血液标本（血清、血浆、白细胞）、组织标本(癌、癌旁、远端正常组织),将处理好的血液标本于-80℃冰箱保存,新鲜组织置液氮保存,定期随机抽取液氮保存的肿瘤组织样本进行RNA、DNA的提取及鉴定。结果 现收集并保存有完整临床信息及随访资料的肝脏肿瘤患者血液标本22103份,组织标本3319例,其中肝脏肿瘤组织标本807例,包括肝脏恶性肿瘤762例,良性肿瘤23例,肝硬化组织22例。随机抽取组织RNA、DNA鉴定均符合标本质量标准,能够满足后续实验要求。结论 初步建立标准化、规范化的肝脏肿瘤标本库,制定了标准化的标本库维护和管理规程,为肝脏肿瘤基础和临床研究提供了宝贵的实验材料。     

应用RNA保护分析法观察原发性肝内胆管结石患者肝细胞内葡萄糖醛酸转移酶基因的表达

本实验旨在观察肝细胞内影响胆红素代谢的酶———葡萄糖醛酸转移酶(ＵＤＰ ＧＴ1)活性和基因表达的变化在原发性肝内胆管结石 (ＰＩＳ)中的作用 ,现将结果报道如下。一、对象与方法1.病例选择和标本收集 :以术中肝内胆管有褐色易碎结石定为ＰＩＳ ,收集我院 1995年 1月～ 1997年 12月此类病人 3 6例为患者组 ,其中男 2 0例 ,女 16例。术中取病变肝叶肝组织液氮保存。收集其他手术患者肝活检标本 7例作为正常对照组 ,其中胆囊息肉患者 4例 ,胃癌 3例 ,肝功能化验均正常 ,术中取肝活检组织液氮保存 ,胆汁送细菌培养。2 .肝组织ＵＤＰ ＧＴ1活…     

人脑胶质瘤组织库的建立及初步应用

我们通过收集脑胶质瘤组织建立肿瘤组织库,为胶质瘤的研究提供了资料来源. 一、资料与方法 1.胶质瘤组织库保存方法:新鲜肿瘤组织铝箔纸包裹液氮罐内长期保存.Trizol法进行总RNA提取后合成cDNA冻存.组织固定制成石蜡块常温保存.     

建立乳腺癌组织标本库标准化程序的初步研究

目的:探讨建立乳腺癌标本库的标准化程序,为建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系奠定基础.方法:收集乳腺癌患者术中的肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织标本,并收集部分患者血标本提取血清、血浆及淋巴细胞,所有组织标本均深低温保存.采用一套信息管理体系对于标本进行管理.结果:共收集22例乳腺癌患者新鲜组织及血样标本共520份,其中导管内癌2例,小叶原位癌3例,浸润性导管癌10例,浸润性小叶癌7例;全套标本者19例;标本留取时间平均为(19.38±10.16) min;随机抽取20份肿瘤组织提取DNA和RNA作质量监测,合格率达到90％.结论:建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系,将为乳腺癌的基础与临床研究提供物质与信息资源.     

乳腺癌癌肿组织与癌旁乳腺组织游离氨基酸差异性分析

目的 对乳腺癌癌肿组织、癌旁乳腺组织游离氨基酸的含量测定,比较两者游离氨基酸含量,探讨乳腺癌不平衡氨基酸治疗依据.方法 收集标本并保存,通过剪碎、研磨、匀浆、去蛋白质、分离出游离氨基酸、离心,检测癌肿组织与相应癌旁乳腺组织17种游离氨基酸的含量.结果 乳腺癌癌肿组织大部分游离氨基酸浓度高于癌旁乳腺组织游离氨基酸浓度.结论 乳腺癌癌肿组织氨基酸代谢与相应的癌旁乳腺组织氨基酸代谢存在明显的差异性,为乳腺癌不平衡氨基酸治疗提供参考依据.     

结直肠肿瘤生物样本库质量控制体系建立的经验与体会

目的通过创建结直肠肿瘤组织样本库质量控制体系,充分保护和合理利用结直肠肿瘤标本资源,为临床和科学研究者提供质量合格的结直肠肿瘤标本,促进结直肠肿瘤的研究。方法建立严格的结直肠肿瘤组织生物样本库质量控制体系,规范收集手术切除后的肿瘤组织,包括肿瘤、瘤旁和切缘远端正常组织以及术前、术后的外周血血清/血浆标本。建立一套完整的结直肠肿瘤组织提取、储存操作流程,制定质量控制方案,建立符合国际规范的结直肠肿瘤组织生物样本库及信息管理系统,提供临床样本资源。结果标本库现保存有完整临床资料及随访资料的结直肠肿瘤组织标本1600例。其中恶性肿瘤1225例,良性肿瘤275例。包括肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织标本以及术前、术后血液标本。完成了标本库信息数据管理软件的开发工作,对所收集标本的流行病学及临床资料信息录入计算机归档管理。结论初步建立了具有一定规模的肿瘤标本资源库,完善了结直肠肿瘤生物样本库质量控制体系,形成了一整套肿瘤组织标本库的建设及管理方法,为相关的结直肠肿瘤研究提供了服务平台。     

2微米激光对人前列腺组织汽化比率的体外实验研究

目的 体外观察2μm激光对良性增生前列腺组织的汽化、清除比率,探讨估量经尿道2μm激光前列腺汽化切除术中前列腺组织清除最的方法.方法 经开放手术获取新鲜前列腺组织标本共9个,立即称量质量,模拟经尿道2μm激光前列腺汽化切除术条件下进行体外前列腺汽化切除术,每个腺体均被完全切割至直径小于1.0 cm的碎块.术后立即称量收集到的全部前列腺组织碎块质量,计算出丢失的前列腺组织质量,进一步分别计算出收集到的前列腺组织质量及丢失前列腺组织质量在前列腺腺体标本质量中所占的比例,并对收集到的前列腺组织质鼍与整个腺体质量间的相关性进行分析.结果 相对于前列腺腺体标本质量,收集到的前列腺组织质量所占比例为(34.5±1.5)%,丢失前列腺组织质量所占比例为(65.6±1.5)%.收集到的前列腺组织质量与前列腺腺体标本质量成线性关系.结论 体外模拟经尿道2 μm激光前列腺汽化切除术的条件下.根据所收集到前列腺组织质量可以计算出前列腺组织的汽化、切除比率,并可进一步推知相应的前列腺组织 清除量.     

标本放置时间与保存温度对血糖血钾结果的影响

目的 探讨血液标本在收集过程中标本放置时间与保存温度对检验结果的影响.方法 抽取34例患者静脉血液于A、B、C、D、E、F、G、H、I试管中各1.5 ml,按不同保存时间(2.5 h、4.0 h和6.0 h)及温度(室温4℃)分别进行处理,用全自动生化分析仪检测血糖和血钾.结果 血液离体后室温放置6 h较即刻离心后放置...     

E钙粘蛋白、血管内皮生长因子表达与胆囊癌生物学特性的相关性研究

我们通过检测慢性胆囊炎、胆囊腺瘤、胆囊癌中Ｅ钙粘蛋白 (Ｅ ｃａｄ)和血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)的表达 ,分析两者表达与胆囊癌生物学特性的相关性。一、材料与方法1.一般资料 :收集浙江湖州市第一医院和浙江大学医学院附属第二医院病理科保存的近年胆囊癌石蜡标本 41例 ,年龄 3 0～ 85岁 ,平均 (61.88± 12 .40 )岁 ,男 11例 ,女 3 0例 ,其中 11例有淋巴结转移 ,胆囊腺瘤标本 14例 ,慢性胆囊炎 10例作为对照组。2 .方法 :所有病例石蜡标本作以下处理 ,将石蜡组织块切片 ,组织脱蜡、水化 ,抗原修复 ,加过氧化物酶 ,加羊血清 ,加第一抗体…     

Collection under paraffin is not necessary for stability of urine pH over 24 h

Collection of urine under paraffin is routinely used in clinical practice for urine pH evaluation. To examine whether the accuracy of pH measurement is adversely influenced by the method of collection and storage, we divided each urine specimen and sent one aliquot to the laboratory under paraffin and another in a sealed 5-ml plastic syringe. In another experiment we evaluated the stability of urine pH measurement in a clinical setting. Urine collected under paraffin was tested immediately for pH; an aliquot from the same specimen was stored in a capped 5-ml syringe at 4°C and tested after 24 h. We found no appreciable difference in measured pH between samples sent to the laboratory under paraffin or in a capped plastic syringe.     

不同HBVDNA水平乙型病毒性肝炎肝硬化患者的临床特征及HBeAg状态比较

目的研究乙型病毒性肝炎（乙肝）肝硬化活动期患者HBVDNA水平与HBeAg状态的分布和临床特点及意义。方法调查337例乙肝肝硬化住院患者,采用荧光定量PCR方法检测HBVDNA载量,MEIA法检测HBV血清标志物,常规方法检测肝功能,同时行超声检查。比较不同HBVDNA水平患者中HBeAg阳性和阴性、不同Child—Push分级和肝癌患者的比例,以及不同年龄患者中不同HBVDNA水平和HBeAg状态患者的比例。结果80．4％（271／337）患者HBVDNA阳性,31．5％（106／337）患者HBeAg阳性,68．5％（231／337）患者HBeAg阴性。HBVDNA水平越高者中HBeAg阳性者比例越高,HBeAg阴性者比例越低;不同HBVDNA水平患者中不同Child-Pugh分级患者比例差异无统计学意义,但HBVDNA3～41g拷贝／ml患者中肝癌的比例高于HBVDNA〈31g拷贝／ml患者（P=0．014）和≥71g拷贝／ml患者（P=0．009）;HBeAg阴性患者比例随年龄增大而增加,但HBeAg阳性患者与阴性患者的临床特征差异无统计学意义。结论绝大多数乙肝肝硬化患者HBVDNA阳性,且2／3患者HBeAg阴性。长期抗病毒治疗可能有助于改善乙肝肝硬化患者的病情和预后。     

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目的通过建立肝癌组织标本库,保护并合理利用肝癌组织标本资源,为分子生物学及临床研究提供组织标本。方法查阅相关文献总结标本库建立规范化流程资料,提供理论依据。同时结合西安交通大学附属第一医院肝胆外科门诊病人量、手术例数及实验室条件拟定该院标本库建立流程。结果建立了肝癌标本库组织及血液标本收集的规范化流程及对应的信息管理系统,已完成了标本库建立的前期工作,开始初步规范化收集肝癌标本并完善相关临床病例资料。结论建立资料完整的规范化肝癌标本库对保护肝癌组织资源及今后肝癌研究都十分重要。     

实时定量PCR与COBAS Amplicor定量检测血清HBV DNA的方法比较

目的 比较实时定量PCR法与COBAS Amplicor法定量检测血清HBV DNA.方法 自国家药品生物制品鉴定所与国家临检中心随机选取158例临床血清标本,比较了两种检测方法 的线性范围、准确度、重复性、实验时间及成本.结果 实时定量PCR的批内差和批间差分别为0.3%～3.8% 和 1.4%～8.1%.实时定量PCR法与COBAS AMPLICOR 法具有良好的相关性(r=0.948),实时定量PCR法成本低且检测范围更宽.结论 实时定量PCR是监测慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平的有效方法 .     

Influence of the delay in urinary NMP22 preanalytical processing

ObjectivesTo evaluate the influence of the delay in urinary nmp22 preanalytical processing.Material and methodsTwenty-eight voided urine samples were taken: bladder cancer (14), urine tract infections (4), lithiasis (4), healthy volunteers (1), and with other no malignant bladder diseases (5). All samples, were maintained at environment temperature, and were processed according to the stabilization of parts of urine collected at 0, 30, 90 and 150 minutes. Samples were stored at 4 °C until its determination. nmp22 was determined with the IMMULITE One analyzer.ResultsThere were no significant differences for nmp22 levels between each different point of time studied.ConclusionsDelay up to 2 hours and a half when we add stabilization solution to urine samples no affects nmp22 results. That thing, might provide more confidence and flexibility on quantitative immunoassays that required urine stabilization.     

Detection of African Swine Fever Virus DNA in Blood Samples Stored on FTA Cards from Asymptomatic Pigs in Mbeya Region,Tanzania

The aim of the study was to assess whether blood samples collected onto FTA^® cards could be used in combination with real‐time PCR for the detection of African swine fever virus (ASFV) DNA in samples from resource‐poor settings under the assumption that asymptomatically (sub‐clinically) infected pigs may be present. Blood samples were collected from clinically healthy pigs from Mbeya Region, Tanzania. The blood samples were stored on FTA^® cards and analysed by real‐time PCR assays in duplicate; three pigs had high levels of viral DNA (Ct values of 27–29), and three pigs had a low level of viral DNA (Ct 36–45). Four pigs were positive in one of the duplicate samples only, but clear products of the expected size were obtained when the reactions were analysed by gel electrophoresis. For comparison, blood samples from pigs experimentally infected with either a pathogenic (OURT T88/1) or a non‐pathogenic (OURT T88/3) isolate of ASFV were collected, stored on FTA^® cards and analysed in the same way. The blood from pigs infected with the OURT T88/1 isolate showed high levels of viral DNA (Ct 22‐33), whereas infection with non‐pathogenic OURT T88/3 isolate resulted in only low levels of viral DNA (Ct 39) in samples collected at 10–14 days after inoculation.     

Hepatitis B surface antigen in urine of hemodialysis patients

As part of an extensive epidemiological survey of chronic hemodialysis patients in Michigan, hepatitis B surface antigen (HBsAg) was identified in the sera of 79 of 701 (11%) patients. Of these patients, 59 were carriers of HBsAg for three or more months. Urine samples were collected from 36 of 39 HBsAg carriers having urinary output. Of these samples, 19 (52%) were positive for HBsAg by radioimmunoassay; this was confirmed by specific antibody neutralization. The HBsAg was not identified in the urine of seven hemodialysis patients who were lacking serum HBsAg or in urine samples from three HBsAg sero-carriers who had normal renal function. Patients undergoing maintenance hemodialysis appear to constitute a large reservoir of HBsAg chronic carriers. This study indicates that a minimum of 50% of persistent HBsAg carriers who are producing urine have detectable HBsAg in single, randomly timed, unconcentrated urine specimen. These data suggest that urine may represent a potential vehicle for transmission in nonparenterally acquired hepatitis B.