阿尔茨海默病转基因果蝇模型β淀粉样蛋白对胆碱能突触的毒性影响

目的研究β淀粉样蛋白（Aβ）多肽对阿尔茨海默病（AD）转基因果蝇大脑中胆碱神能经元突触的影响。方法分别建立转Aβ40,Aβ42基因果蝇AD两个模型组,以野生果蝇（canton-s）作为对照组。采用生物素染色和激光共聚焦成像记录投射神经元的形态;通过全细胞膜片钳方法记录各组投射神经元胆碱能的自发突触后电流和微兴奋性突触后电流;检测各组果蝇的嗅觉短期记忆能力。结果与对照组相比较,Aβ42组的自发突触后电流的频率和振幅均有明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;Aβ42组微兴奋性突触后电流的频率明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。在巴甫洛夫的嗅觉相关的短期学习记忆测试中,与对照组相比较,Aβ40,Aβ42两组果蝇学习记忆指数均明显降低,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论 Aβ肽对胆碱能突触传递的影响提示,其可能是由Aβ肽引起胆碱能神经元变性和记忆不断下降的可能机制之一。     

小檗碱对阿尔茨海默病转基因鼠空间记忆力的影响

目的 探讨小檗碱对AD转基因鼠空间记忆力的影响.方法 24只6月龄AD转基因鼠按随机数字表法分为模型组、小檗碱小剂量组、小檗碱中剂量组和小檗碱大剂量组,后三组小鼠分别每天灌胃给予小檗碱10 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)和200 mg/(kg·d)至10月龄.通过Morris水迷宫试验和ELISA法检测不同剂量小檗碱对AD转基因鼠空间记忆力和脑组织β淀粉样蛋白40、42(Aβ40、Aβ42)水平的影响.结果 与模型组相比,各小檗碱组小鼠逃避潜伏期在测试第6天时均明显缩短,穿越平台的次数均明显增加,脑组织Aβ40、Aβ42水平均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05) 结论 小檗碱可能抑制小鼠脑组织Aβ40、Aβ42的产生从而改善AD转基因鼠的空间记忆力.     

咪唑对转基因果蝇阿尔茨海默病模型的治疗作用

目的:研究咪唑对于阿尔茨海默病(AD)果蝇模型学习记忆能力的影响,及其对c-Jun N-Terminal kinas(JNK)的调控。方法:采用Gal4/UAS系统建立Aβ42果蝇模型;连续给药后利用巴甫洛夫嗅觉学习实验观察咪唑对AD果蝇行为的影响;免疫印迹实验检测咪唑干预JNK信号通路中JNK蛋白的磷酸化水平。结果:1 mmol.L-1,100μmol.L-1,10μmol.L-1,1μmol.L-1,0.1μmol.L-1的咪唑可显著改善Aβ42果蝇的学习能力,同时1 mmol.L-1、100μmol.L-1和10μmol.L-1的咪唑显著降低JNK蛋白的磷酸化水平,两者的有效工作浓度近似。结论:咪唑显著改善了Aβ42引起的AD果蝇学习缺陷,且对JNK神经元凋亡信号通路也有明显的调控作用;同时说明Aβ与细胞膜作用形成的通道侧的H13-H14组氨酸侧基,是探索Aβ毒性作用机制和寻找药物治疗的新靶点。     

阿尔茨海默病患者血浆脂联素与Aβ水平的变化

目的 探讨AD患者血浆脂联素、Aβ水平的变化及其与MMSE评分的关系。方法 对20例AD患者(AD组)、20例正常认知老年组的血浆脂联素、Aβ40和Aβ42水平进行检测,比较2组血浆脂联素和Aβ水平的差异,并分析血浆脂联素、Aβ与MMSE评分的关系。结果 AD组MMSE评分、血浆脂联素(APN)、Aβ42和Aβ42/Aβ40均低于对照组(P<0.05)。Aβ40水平与Aβ42水平呈显著正相关、与Aβ42/Aβ40呈显著负相关(P<0.01),Aβ42水平与APN水平呈显著正相关(P<0.05),MMSE评分与Aβ42、APN、Aβ42/Aβ40呈显著正相关(P<0.01)。结论 AD组血浆APN、Aβ42水平和Aβ42/Aβ40明显降低,其改变与认知功能评分存在一定的正相关性。     

阿尔茨海默病患者血清miR-320a AQP4水平变化及临床意义

目的 探究阿尔茨海默病(AD)患者血清微小RNA-320a(miR-320a)、水通道蛋白4(AQP4)水平变化及临床意义。方法 选取2016年1月-2022年4月濮阳市油田总医院收治的80例AD患者为AD组,另选取同期34名体检健康者为对照组,采用qPCR检测血清miR-320a水平,ELISA检测血清β-淀粉样蛋白(Aβ)42、Aβ40、Aβ42/Aβ40、AQP4水平,简易精神状态检查表(MMSE)评估认知功能。分析AD患者血清miR-320a、AQP4水平与Aβ42、Aβ40、Aβ42/Aβ40水平和MMSE评分的关系,及对AD的诊断价值。结果 与对照组比较,AD组血清Aβ42、Aβ42/Aβ40、miR-320a、AQP4水平和MMSE评分降低,血清Aβ40水平升高(P<0.05)。Pearson/Spearman相关性分析显示,AD患者血清miR-320a、AQP4水平与Aβ42、Aβ42/Aβ40和MMSE评分呈正相关,与Aβ40水平呈负相关(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,血清miR-320a、AQP4水平单独与联合诊断AD的AUC分别为0.80...     

规律性运动对APP／PS1小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨有规律的适宜运动对AD模型小鼠的学习记忆能力的影响。方法雌性C57BL／c野生型小鼠及APP／PSl转基因小鼠，经过6个月规律性运动后，测定小鼠α-分泌酶／ADAMl0活性，A8及学习记忆行为学变化。结果规律性运动6个月不仅大大提高了在野生型小鼠的学习记忆行为，而且还改善AD转基因小鼠在学习和记忆障碍，提高了在野生型小鼠及AD转基因小鼠的α-分泌酶活性，抑制Aβ40和Aβ42的产生。结论提示规律性运动可能通过增加α-分泌酶活性，抑制脑内Aβ的生成量，参与了运动对学习记忆的作用。     

Amyloid-β depresses excitatory cholinergic synaptic transmission in Drosophila

Objective Decline, disruption, or alterations of nicotinic cholinergic mechanisms contribute to cognitive dysfunctions like Alzheimer’s disease (AD). Although amyloid-β (Aβ) aggregation is a pathological hallmark of AD, the mechanisms by which Aβ peptides modulate cholinergic synaptic transmission and memory loss remain obscure. This study was aimed to investigate the potential synaptic modulation by Aβ of the cholinergic synapses between olfactory receptor neurons and projection neurons (PNs) in the olfactory lobe of the fruit fly. Methods Cholinergic spontaneous and miniature excitatory postsynaptic current (mEPSC) were recorded with whole-cell patch clamp from PNs in Drosophila AD models expressing Aβ40, Aβ42, or Aβ42Arc peptides in neural tissue. Results In fly pupae (2 days before eclosion), overexpression of Aβ42 or Aβ42Arc, but not Aβ40, led to a significant decrease of mEPSC frequency, while overexpression of Aβ40, Aβ42, or Aβ42Arc had no significant effect on mEPSC amplitude. In contrast, Pavlovian olfactory associative learning and lifespan assays showed that both short-term memory and lifespan were decreased in the Drosophila models expressing Aβ40, Aβ42, or Aβ42Arc. Conclusion Both electrophysiological and behavioral results showed an effect of Aβ peptide on cholinergic synaptic transmission and suggest a possible mechanism by which Aβ peptides cause cholinergic neuron degeneration and the consequent memory loss.     

Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠的治疗效果研究

目的探讨Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠的治疗效果。方法 18只雄性10月龄AD转基因鼠,随机分为3组,分别以Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G、空腺病毒载体及Aβ1-42免疫,ELISA法检测血清抗Aβ抗体滴度及亚型,Morris水迷宫检测转基因鼠的学习记忆能力,免疫组化法检测转基因鼠脑内Aβ沉积;ELISA法检测转基因鼠脑组织匀浆和血清中可溶性Aβ42水平。结果 Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组和Aβ1-42组抗体水平随着免疫次数逐渐增加,第7次免疫后Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组和Aβ1-42组血清中抗Aβ抗体水平分别为(67.42±13.68)μg/ml和(94.41±14.01)μg/ml,而空载体组一直在基线水平。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组Ig G1/Ig G2a比值明显高于Aβ1-42组(P0.05)。在Morris水迷宫实验中Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组的逃避潜伏期明显小于空载体组(P0.01);Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组在靶象限的停留时间明显长于空载体组(P0.01);Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组穿越平台所在位置的次数明显多于空载体组(P0.05)。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组脑组织Aβ沉积所占面积百分比与空载体组比较明显减少(P0.01)。Ad-Aβ_((3-10)10)-Cp G组脑组织匀浆和血清中可溶性Aβ42水平明显高于空载体组(P0.01)。结论 Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗鼻粘膜免疫AD转基因鼠,主要引起Th2型免疫应答,可以改善AD转基因鼠学习和记忆能力,促进转基因鼠脑内Aβ清除,可以减少由细胞免疫应答引起的炎症反应。Aβ_(3-10)多价腺病毒疫苗是AD免疫治疗的安全有效的候选疫苗。     

阿尔茨海默病患者脑脊液中葡萄糖、真胰岛素、Aβ_(40)和Aβ_(42)测定

目的检测阿尔茨海默病(AD)患者脑脊液中葡萄糖、真胰岛素、Aβ40和Aβ42水平,探讨AD患者脑内胰岛素及β淀粉样蛋白(Aβ)相关性。方法随机选取35例对照组、48例AD患者,检验其脑脊液中葡萄糖、真胰岛素、Aβ40和Aβ42水平,将AD按轻、中重度分组后与对照组进行比较。结果AD患者各组脑脊液中葡萄糖与相应对照组比较,无显著性差异(P>0.05);AD各组Aβ40与对照组相比,无显著性差异(P>0.05);轻度AD组脑脊液真胰岛素与对照组比较,无显著性差异(P>0.05),中重度AD组真胰岛素较对照组降低,有显著性差异(P<0.05);AD组、轻度AD组Aβ42较对照组降低,有显著性差异(P<0.01);中重度AD组Aβ42较对照组降低,有极显著性差异(P<0.001)。结论AD患者脑脊液中胰岛素和Aβ42异常情况,与疾病的严重程度相关。     

Humanin对Aβ_(1-42)所致阿尔茨海默病大鼠空间记忆的影响及其作用机制

目的 探讨Humanin(HN)对Aβ_(1-42)所致阿尔茨海默病(AD)大鼠空间记忆的影响及其作用机制.方法 36只Wistar大鼠按照随机数字表法分为生理盐水组(海马注射生理盐水)、AD模型组(海马注射Aβ_(1-42))和HN治疗组(海马注射Aβ_(1-42)制成AD模型后在同一部位注入2 μL HN),每组各12只.对各组大鼠进行Morris水迷宫空间记忆能力测试.免疫组织化学方法检测各组大鼠微管相关蛋白2(MAP2)的表达.利用Western blot方法检测各组大鼠synapsin 1蛋白水平.结果 与生理盐水组相比,AD模型组Morris水迷宫测试的潜伏期明显延长,MAP2表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),HN组则无统计学意义(P>0.05).Synapsin 1蛋白在HN治疗组中表达明显高于生理盐水组和AD模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),而生理盐水组和AD模型组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 HN可以显著改善由Aβ_(1-42)所致AD大鼠的空间记忆能力,推测与HN提高MAP2与synapsin 1蛋白表达有关.     

量子点和量子点-Aβ-Ab探针对活体动物的毒性研究

目的 通过组织形态学和动物行为学观察、肝肾功能测定系统考察量子点及制备的量子点.Aβ-Ab探针的生物毒性作用,以此评价量子点及探针的生物相容性.方法 将正常C57BL小鼠30只随机分为量子点(QDs)组、量子点.Aβ-Ab(QDs-Aβ-Ab)组和对照组,每组10只,分别行量子点、量子点-Aβ-Ab探针、PBS侧脑室注射后,行HE染色、尼氏体染色、动物行为学观察及肝肾功能测定.结果 HE染色和尼氏染色示QDs组、QDs-Aβ-Ab组海马CA1区神经元形态正常,尼氏体清晰可见,与对照组无差异.行为学观察7 d,3组小鼠进食进水正常,二便正常,无举尾、无皮肤毛发颜色改变,无步态异常、无兴奋抑制反应,无死亡.QDs组和QDs-Aβ-Ab组血清ALT、AST、BUN和CRE水平与对照组尤明显差异(P>0.05).结论 量子点及量子点-Aβ-Ab探针对小鼠整体毒性作用小,生物相容性好.     

白桦脂醇对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠认知及海马突触功能相关蛋白表达的影响

目的 探讨白桦脂醇对阿尔茨海默病（AD）小鼠的学习记忆功能的干预作用及海马突触功能相关蛋白表达的影响，为探索治疗AD提供新的可能。方法 采用白桦脂醇干预APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠，将小鼠随机分为模型组、药物高剂量组和低剂量组，C57BL/6J健康小鼠为对照组。通过行为学观察学习记忆能力、在体电生理记录海马神经元的生物电、TUNEL法检测神经元凋亡、Realtime PCR法检测PSD-95和Synapsin-I水平。结果 水迷宫检测结果发现白桦脂醇能改善模型小鼠认知功能障碍；电生理检测AD模型组长时程增强（LTP）幅值低于对照组，经过白桦脂醇干预治疗后，白桦脂醇各组LTP幅值较AD模型组升高；AD模型组神经元凋亡率显著高于对照组，经过白桦脂醇干预治疗后凋亡率下降；AD小鼠模型海马区PSD-95和Synapsin-I表达下降，但经白桦脂醇干预后其表达上升。结论 白桦脂醇通过使海马PSD-95和Synapsin-I的表达增加，发挥对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠认知功能的保护，使海马长时程增强。     

原发性失眠患者神经心理及认知功能研究

目的探讨原发性失眠(PI)患者神经心理、认知功能的改变及其与失眠严重程度的相关性。方法采用病例-对照研究,符合ICD-10诊断标准的原发性失眠患者40名,对照组为正常睡眠者(NS)50名。两组均行匹兹堡睡眠指数(PSQI)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、WHO-UCLA词语学习、划销实验量表测定,并对结果进行统计学分析。结果 PI组PSQI、HAMA、HAMD评分均高于对照组,词语学习能力、数字划销工作效率下降(P0.05)。PI组患者睡眠质量下降与焦虑情绪有明显正相关性(r=0.350),学历、病程及HAMD评分与睡眠质量存在线性关系(α=0.1,F=13.44,P0.05)。对影响认知功能相关因素进行回归分析,睡眠质量及HAMA评分与认知功能有显著相关性(α=0.1,F=12.943,P0.05)。结论 PI患者睡眠质量、认知功能下降,焦虑、抑郁情绪明显。睡眠质量与焦虑情绪显著相关,睡眠质量的下降可引起认知功能下降。     

An Aqueous Orally Active Vaccine Targeted Against a RAGE/AB Complex as a Novel Therapeutic for Alzheimer’s Disease

Alzheimer’s disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder that gradually destroys a person’s memory. Substantial evidence suggests that amyloid beta (Aβ) and the receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) play an important and often deleterious role in the pathogenesis of AD. RAGE facilitates the translocation of Aβ from the periphery into the brain, mediates the Aβ-induced neurotoxicity, and enhances the release of pro-inflammatory cytokines increasing the inflammatory response. In addition, soluble forms of RAGE (sRAGE) and Aβ bind together in the periphery forming high molecular weight complexes that are more highly immunogenic and less neurotoxic than Aβ1-42 alone. We show here that there are elevated anti-RAGE and anti-Aβ titers (in a near 1:1 relationship) in samples analyzed from human AD patients, aged non-human primates, and AD transgenic mice (APPSWE-PS1). We show that an in vitro prepared RAGE/Aβ complex induces a greater immunogenic response (increased anti-Aβ1-42 and anti-RAGE antibody titers) in both human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and immunized Balb-C mice than does either Aβ1-42 or RAGE alone. Further, pretreatment with endogenous anti-RAGE antibodies isolated from our transgenic APPSWE-PS1 mice can prevent Aβ1-42-induced neurotoxicity in cultured primary rat cortical neurons. Finally, we examine the effectiveness of an orally administered vaccine of either RAGE/Aβ complex or Aβ1-42 alone in improving cognitive function in our AD transgenic mice. Our results to date support the hypothesis that a protein complex vaccine that targets both RAGE and Aβ1-42 will provide a more effective treatment for AD than vaccination with Aβ1-42 alone.     

事件相关电位P300对农村轻度认知功能障碍 患者认知功能的评价效果

目的 分析农村轻度认知功能障碍(MCI)患者P300改变的特点,为提高农村轻度认知功能障碍的早期诊断水平提供方法.方法 2010年12月至2012年5月从潍坊市多个农村地区筛选MCI患者35例和无明显认知功能障碍的健康老人32例为研究对象,应用简易精神状态量表(MMSE)测评受试者认知功能状态,同时应用美国Neuroscan公司生产的ESI-64导脑电信号采集记录仪采用被动听觉oddball范式记录两组事件相关电位P300的情况评估受试者认知功能状况.结果 两组MMSE测验总分在控制性别、年龄、教育水平等影响因素后差异有统计学意义(P＜0.01).MCI组P300潜伏期为比对照组(338.03±43.03)明显延长(P＜0.01);波幅下降,但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 听觉事件相关电位P300潜伏期测定不受语言、文字限制,尤其适合对农村老年人的认知功能进行定量评价.在无损害的诊断与评定农村老年人轻度认知功能障碍方面有重要价值.     

常德市城区脑卒中患者预后因素分析

目的调查分析影响常德市城区40岁以上脑卒中患者预后的因素。方法制定统一调查表,由专门培训人员对常德城区40岁以上人群6095人进行脑卒中流行病学调查,并采用改良Rankin量表(mRS)对脑卒中患者的预后进行评定,分为预后良好组和预后不良两组。利用χ2/t检验进行单因素分析,Logistic回归进行多因素分析。结果社区调查发现628例脑卒中患者,其中预后良好者332例(52.87%),预后不良者296例(47.13%)。单因素分析显示,两组在年龄、文化水平、既往脑卒中史、吸烟史、血糖、卒中类型、脑出血按出血部位分型和血肿大小分型,缺血性脑卒中各亚型比较差异具有统计学意义(P0.05)。多因素分析显示预后不良与高龄、低文化程度、既往有脑卒中病史相关(P0.05)。结论年龄、文化水平、脑卒中病史、卒中类型是脑卒中患者预后不良的主要因素,因此要积极采取有效措施改善脑卒中患者预后。     

失眠模型大鼠脑干γ-氨基丁酸转运体-1表达的变化

目的 检测失眠模型大鼠脑干组织中γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1) mRNA及GAT-1蛋白的表达变化.方法 36只SD大鼠随机分为失眠模型组、生理盐水对照组和地西泮干预组.腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)制作大鼠失眠模型.采用RT-PCR法和Western blot法分别检测大鼠脑干组织中GAT-1 mRNA和GAT-1蛋白的表达变化.结果 与对照组相比,模型组和干预组GAT-1 mRNA及GAT-1蛋白的表达均降低(P＜0.01),干预组较模型组表达更低(P＜0.01).结论脑干GAT-1表达下调可能与失眠后机体的保护性机制有关;地西泮下调GAT-1可能是其发挥催眠作用的机制之一.     

Amyloid‐β protein and MicroRNA‐384 in NCAM‐Labeled exosomes from peripheral blood are potential diagnostic markers for Alzheimer's disease

ObjectiveWe aimed to establish a method to determine whether amyloid‐β (Aβ) protein and miR‐384 in peripheral blood neural cell adhesion molecule (NCAM)/ATP‐binding cassette transporter A1 (ABCA1) dual‐labeled exosomes may serve as diagnostic markers for the diagnosis of Alzheimer''s disease (AD).MethodsThis was a multicenter study using a two‐stage design. The subjects included 45 subjective cognitive decline (SCD) patients, 50 amnesic mild cognitive impairment (aMCI) patients, 40 AD patients, and 30 controls in the discovery stage. The results were validated in the verification stage in 47 SCD patients, 45 aMCI patients, 45 AD patients, and 30 controls. NCAM single‐labeled and NCAM/ABCA1 double‐labeled exosomes in the peripheral blood were captured and detected by immunoassay.ResultsThe Aβ42, Aβ_42/40, Tau, P‐T181‐tau, and miR‐384 levels in NCAM single‐labeled and NCAM/ABCA1 double‐labeled exosomes of the aMCI and AD groups were significantly higher than those of the SCD, control, and vascular dementia (VaD) groups (all p < 0.05). The Aβ42 and miR‐384 levels in NCAM/ABCA1 dual‐labeled exosomes of the aMCI and AD groups were higher than those of the control and VaD groups (all p < 0.05). The exosomal Aβ42, Aβ_42/40, Tau, P‐T181‐tau, and miR‐384 levels in peripheral blood were correlated with those in cerebrospinal fluid (all p < 0.05).ConclusionThis study, for the first time, established a method that sorts specific surface marker exosomes using a two‐step immune capture technology. The plasma NCAM/ABCA1 dual‐labeled exosomal Aβ_42/40 and miR‐384 had potential advantages in the diagnosis of SCD.     

普拉克索治疗帕金森病运动并发症的临床疗效观察

目的 评估普拉克索治疗帕金森病运动并发症的临床疗效及安全性.方法 收集92例晚期帕金森病患者并随机分为治疗组和对照组,每组46例.对照组给予多巴丝肼治疗,治疗组在对照组的基础上给予普拉克索,疗程均为12周.两组患者于治疗前后分时间点进行统一帕金森病评定量表修正(UPDRSⅣ-)的评分、不良反应的记录,疗程结束后评估疗效.结果 治疗后对照组和治疗组UPDRSⅣ-评分与基线比较均有下降,治疗组下降更显著,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).治疗组第12周剂末现象(93.75％vs 70.59％)、开关现象(91.67％ vs 63.64％)以及异动症(84.62％ vs48.00％)的总有效率优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).两组不良反应发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 普拉克索治疗帕金森病运动并发症有效,安全性好.